ESCUELA SUPERIOR POLITÉCNICA DE CHIMBORAZO

VICERRECTORADO ACADÉMICO
DIRECCIÓN DE DESARROLLO ACADÉMICO

Segunda sesión ( 13/07/2022 Jueves)

 Primera observación del microcultivo y resultados.

1. En el laboratorio, revisamos los las siembras realizadas en las 4 cajas Petri del día
anterior (miércoles sembrados a las 9 am).
2. En la incubadora ya pasado 24 horas sacamos las cajas Petri identificadas para poder
observarlas.
3. Observamos en 2 de las 4 cajas Petri que se sembraron existió crecimiento.
4. En la caja Petri número 1 hubo como resultado muy poca presencia de la bacteria (casi
nada) y en la caja Petri número 2 un poco más que la primera.

1 3

4
2

5. En base a los resultados desfavorables se volvió a realizar un nuevo microcultivo en se

mismo instante, ahora solo en se usaron dos cajas Petri.

Dilución UFC/g de muestra

 50 g ------ 1000 ml 1,5 g de agar MacConkey en 25

X ------- 30 ml ml de agua destilada.
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6. Aplicamos entonces ahora 1,50 g de agar MacConkey en 25 ml de agua destilada, lo

mezclamos agitando en el frasco termorresistente y lo pasamos a la placa calefactora por
15 minutos hasta que el agar presente burbujas.
7. Luego aplicamos en la autoclave al agar y las dos cajas Petri dentro de la bolsa térmica
para esterilizarla durante 45 minutos.
8. Utilizamos la cámara de flujo laminar encendida y dentro aplicamos el agar a las cajas
Petri, dejamos solidificar por 5 minutos y realizamos una siembra ahora por dilución con
una muestra de mayonesa.
9. La dilución se la realizó aplicando 5 tubos de ensayo con agua destilada 9−5 y aplicando
la muestra de mayonesa con la pipeta por los tubos de ensayo.
10. En la caja Petri solidificada para detectar E.coli se aplica con un hisopo la muestra y se
dejó en la incubadora a 28 °C durante 24 horas.

Tercera sesión (14/07/2022 viernes)

 Segunda observación del microcultivo.

1.  Sacamos las cajas Petri de la incubadora el día viernes a las 9 am y se observó en las dos
cajas Petri crecimiento del cultivo y presencia de E.coli.
2.  Posteriormente pasamos a la aplicación de discos, llevamos las dos cajas Petri a la
cámara de flujo laminar y aplicamos cuatro tipos de discos o antibióticos en 1 sola caja
Petri con ayuda de una pinza y la distribuimos en diferentes partes del cultivo para ver si
la bacteria resiste o no a los antibióticos.
3. La otra caja Petri no se le añadió antibióticos para ver que diferencia existe entre ellas.

Cuarta sesión (18/07/2022 lunes)

1. Se acudió al laboratorio a las 11 de la mañana para poder realizar la revisión del cultivo
con antibióticos (discos) y poder comparar con la otra caja Petri que no contenía
antibióticos e identificar que antibióticos inhibieron el crecimiento de la bacteria y cuales
no generaron nada de ataque al macroorganismo en base a los 4 antibióticos que se
aplicaron el día viernes.
2. Se obtuvieron muy bueno resultados.
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Resultados obtenidos

1. Imagen y tabla de resultados macroscópicos.

A B

Finalmente, como característica macroscópica se observa como resultado que la placa A con los
discos cambió de color completamente de ser un poco rosa intenso a un color amarillento de un
lado y al otro un color rosado leve a comparación de la caja B que estaba intacto su mismo color
y su cultivo.
Se observa que en la caja Petri A donde se aplicó los discos para antibióticos, la mayoría causaron
inhibición y lograron eliminar la bacteria en el cultivo.

-El disco Chloramphenicol (C30) este antibiótico satisfactoriamente logró inhibir a la bacteria y a
su alrededor se observa que la caja tiene un color amarillento pálido.

-El disco Oxacillin (OX 1) es el antibiótico que más inhibió el crecimiento de la bacteria
destruyéndola por completo y se observa a un extremo de la caja Petri que casi no presenta color
la caja con apariencia casi transparente.
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-El disco Novobiocin (NV 30) es el antibiótico que no logró combatir para nada la presencia de la
bacteria E.coli y se observa a la caja de color rosa alrededor del disco y a comparación de los
demás que si lo lograron completamente inhibir el crecimiento se ve una notable diferencia.

-El disco Gentamicina (GM 10) se lo aplico dos discos y se observó que también eliminaron por
completo e inhibir el cultivo de la bacteria E. coli que había a su alrededor.