Equipo 2

Ignacio Romero Rodolfo

Mandujano Fernández Erika M.
Martinez Esquivel Leticia
Salazar Garcia Eduardo
 Fundamento
En la tecnología antisentido,
no se insertan genes no
mutados. En lugar de ello, los
genes mutados se inactivan.
La terapia antisentido se basa
en el uso de microRNA,
oligonucleótidos antisentido
son fragmentos de ADN de
cadena simple que tras la
internalización (aceptación)
celular pueden inhibir de
forma selectiva la expresión de
una determinada proteína.
Mecanismo
 Otras Estrategias
Son ácidos nucleicos de doble cadena
Aptámeros (ADN) o de cadena simple (ARN) que
pueden interaccionar directamente
con las proteínas.

Son moléculas de ARN que

Ribozimas actúan como enzimas, de tal
forma que se unen al ARNm
diana y lo destruyen. Poseen una
gran especificidad y un amplio
rango de actuación, y pueden ser
utilizados para silenciar genes.
Terapia antisentido en
enfermedades
neurológicas
Modificaciones de los ASO
 Terapias
aprobadas
por la FDA
y/o por la
EMA
 Terapia basada en
oligonucleótidos antisentido
para enfermedades
neuromusculares
 Son enfermedades genéticas
Trastornos neurodegenerativas caracterizadas
neuromusculares principalmente por debilidad y desgaste
muscular

Oligonucleótidos Una clase de moléculas sintéticas

antisentido (ASO) monocatenarias de ácidos nucleicos
 Terapia ASO en la distrofia muscular de Duchenne (DMD)

Oligonucleótidos
Enfermedad
Es un desgaste
antisentido (ASO)
muscular y debilidad Inducen la omisión de
que conduce a la exón y restaurar el marco
pérdida de de lectura de la
deambulación. transcripción.

Mutaciones DMD
Mutaciones Se agrupan entre los
exones 43 y 53.
Gen DMD que codifica
a la distrofina.

Mutación omisión Grupo más grande de

pacientes tratables
exón 53 con omisión de exón.
Mecanismos de captación celular de oligonucleótidos antisentido

Degradan ADN y ARN ASO sin modificar por

01 Nucleasas ello no pueden usarse sin modificación in
vivo

Alta especificidad y unión a su

02 ASO eficiente molécula objetivo

Los ASO atraviesan la membrana

Membrana
03 celular por métodos basados en la
celular estructura química.
Química de oligonucleótidos antisentido

Fosforotioato (PS) Mercury

● Inducen la escisión de
la ARNasa H 20%
promoviendo la
degradación de la
transcripción diana.
● Estos fármacos
aumentan la unión a 50% PS, fosforotioato; NP, N3'-P5 'fosforoamidato;
proteínas plasmáticas
prolongando la vida OMe, 2'- O- metilo; MOE, 2'- O -metoxi-etilo;
media. LNA, ácido nucleico bloqueado; PMO,
fosforoamidato morfolino; PNA, ácido
nucleico peptídico; tcDNA, triciclo DNA.
De los pacientes que
tienen mutaciones, se
producen alteraciones en
el exón 53.
En consecuencia la
proteína no está
completa.
 Enfoque clínico de los ASO en DMD

Fosforotioato
Se demostró que el
fármaco era seguro . Se observó restauración
Se administra por de distrofina a nivel
infusión intramuscular. transcripción y traducción
mediante técnicas de PCR
e inmunofluorescencia.
Eficacia de la terapia génica
antisentido utilizando
oligonucleótidos anti K-ras y
antitelomerasa en cáncer
colorrectal
 Resumen
Objetivo Material y métodos
Evaluar la eficacia de SW480, ATTC
oligonucleótidos anti k-ras ODN Telp5, AS-KRAS e ISIS
y AS-KRAS actúa en el exón 1 e ISIS
antitelomerasa para actúa a nivel de la unidad terminal
detener el crecimiento de transcripción 5’ del oncogen
tumoral en el cáncer K-ras. Telp5 se une a la subunidad
Colorrectal. hTR de la
telomerasa. Se han aplicado en
concentraciones 1, 5, 10 y 20
micromolar, midiendo la viabilidad
celular a las 48 y 72 horas de
tratamiento. El análisis estadístico
y el diseño de los gráficos se han
realizado mediante el programa
“Analyzing Data with GraphPad
Prism-1999”. GraphPad Software
Inc., San Diego CA©. Para el
tratamiento estadístico se ha
utilizado el test t de Student.
Resultados Conclusiones
La dosis mínima (1 µM) no fue Los oligonucleótidos
efectiva ni a 48 ni a 72 horas antisentido probados detienen
postratamiento. Con la dosis el crecimiento celular en el
máxima (20 µM durante 48 cáncer colorrectal, siendo la
horas) y utilizando la respuesta más eficaz la
combinación de AS-KRAS y combinación de ambos y
Telp5 obtuvimos una reducción aumentando dicha eficacia con
de la viabilidad celular del mayor dosis y tiempo de
99,67%. El resto de resultados exposición.
fueron intermedios,
dependiendo del tipo de
oligonucleótido empleado, la
dosis y el tiempo de exposición.
ISIS AS-KRAS Telp5
5’-CAG TGC 5’-AAG TTT 5’-CCC TTC
CTG CGC CGC ATA TTC AGT TCA GTT AGG
GCT CG-3’ CAT-3 GTT AG-3’
 Referencias
● Del Pozo et al., 2018, Terapia génica, Editorial Síntesis, S. A., Madrid, pp. 32-37.
● Lledó, S., Alfonso, R., & Aliño, S. F.. (2005). Antisense gene therapy using anti-k-ras and
antitelomerase oligonucleotides in colorectal cancer. Revista Española de Enfermedades
Digestivas, 97(7), 472-480. Recuperado el 04 de enero de 2022, de
http://scielo.isciii.es/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S1130-01082005000700002&ln
g=es&tlng=en.
● Serrano et al., 2012, Opciones terapéuticas actuales IIb/V: Terapia Antisentido, Centro
de Biología Molecular, CIBERER, Universidad Autónoma de Madrid, España.
https://metabolicas.sjdhospitalbarcelona.org/noticia/opciones-terapeuticas-actuales-ii
bv-terapia-antisentido-06201
● Pulst, S. 2020 Antisense Therapie Neurologischer Erkrankungen. Recuperado de:
https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC6730669/
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