Nombre: Daniela Merchán Rodríguez Biología General Docente: Magnolia Longo

PRELABORATORIO ENZIMAS II

1. Pregunta problema:

¿Cuáles factores afectan la actividad de la catalasa?

2. Objetivos:
- Verificar la actividad catalítica de la catecolasa.
- Evaluar factores físicos y químicos que afectan la actividad enzimática.
3. Procedimiento:
a. Efecto de la temperatura:

Realizar homogenado Calentar homogenado Agitar cada 5 min

de papa, ñame, cáscara a baño maría aprox. sin sacar del baño.
de piña o papaya (50 37°C por 25 min.
g), con 150 mL de
agua.
Comparar color
inicial y final y
referenciar.

b. Efecto del ácido cítrico:

Disolver una Disolver una Cortar un trozo de papa

pastilla de vitamina pastilla de de aprox. 1 cm de
C o zumo de ½ pancreatina espesor y dividirlo en
naranja, en ¼ de triturada en 1/5 de dos partes iguales.
vaso con agua. vaso con agua.

Cubrir ambos trozos Raspar la superficie

con la solución de
pancreatina por 5 min.
Cubrir un trozo con
de ambos trozos.
agua destilada y el
otro con ácido cítrico
por 1 min.

Observar y registrar.
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c. Efecto enzimático sobre la albumina.

Preparar una Cocinar 2 huevos Pelar y partir a la

solución enzimática. de codorniz que mitad.
queden duros.

Meter un huevo en
Después de 40 min Meter el otro huevo 100 mL de la
registrar diferencias. en 100 mL de agua. solución enzimática.

4. Fichas Técnicas:

NOMBRE FÓRMUL ASPECTO PELIGROSIDA PRIMEROS INFO

A D AUXILIOS E ADICIONAL
HIGIENE
Resorcinol No hay Líquido Inflamable, Inhalación: aire No hay
(fluido), corrosivo, fresco
violeta y con toxicidad aguda y Contacto dérmico:
olor similar específica. quitar prendas
al del alcohol contaminadas
consultar al médico.
Contacto ocular:
mantener párpados
separados y
enjuagar con agua
limpia por 10 min.
Ingestión: enjuagar
la boca si l apersona
está consciente.
Ácido C2HCl3O2 Sólido Corrosivo, Inhalación: aire
tricloeoacético (cristalinas), irritante, toxicidad, fresco.
incoloro, con peligroso para el Contacto dérmico:
olor picante. medio ambiente retirar ropa
acuático. contaminada y lavar
inmediatamente con
abundante agua.
Necesario
tratamiento médico.
Contacto ocular:
lavar con abundante
agua con los ojos
abiertos por 15 min.
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Ingestión: lavar
boca y beber agua
en abundancia.
Llamar a al médico.
Feniltiourea C7H8N2S Sólido Toxicidad aguda. Inhalación: aire
(polvo), libre.
inodoro. Contacto dérmico:
quitar prendas
contaminadas, lavar
con abundante agua
por 15 min.
Atención médica
inmediata.
Contacto ocular:
enjuagar con
abundante agua por
15 min. Atención
médica inmediata.
Ingestión: enjuagar
boca y no provocar
vómito.
Catecol C6H6O2 Sólido Toxicidad aguda, Inhalación: aire
(cristalinas), corrosivo e fresco.
blanquecino irritante, puede Contacto dérmico:
con olor provocar ducharse con
característico. mutagenicidad en abundante agua.
células germinales. Contacto ocular:
aclarar los ojos
abiertos con agua
por 15 min.
Ingestión: lavar la
boca
inmediatamente y
beber agua en
abundancia.
Fenol C6H6O Sólido Toxicidad aguda, Inhalación: aire
(cristalinas), corrosivo e libre.
incoloro y irritante, peligroso Contacto dérmico:
con olor para el medio Retirar prendas
característico ambiente acuático contaminadas y
y puede provocar lavar
mutagenicidad en inmediatamente con
células germinales. abundante agua.
Tratamiento médico
inmediato.
Contacto ocular:
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aclarar con ojos

abiertos y abundante
agua por 15 min.
Ingestión: lavar la
boca
inmediatamente y
beber agua en
abundancia.
Hidroquinona C6H6O2 Sólido, Toxicidad aguda, Inhalación: aire
blanquecino, puede provocar fresco.
inodoro. mutagenicidad en Contacto dérmico:
células germinales ducharse y consultar
y cáncer a un médico.
Contacto ocular:
aclarar
inmediatamente con
ojos abiertos y
abundante agua por
15 min.
Ingestión: enjuagar
la boca con
abundante agua si la
persona está
consciente.

5. Consulta:
a. ¿Qué es el pardeamiento enzimático?
El pardeamiento enzimático es una reacción de oxidación en la que interviene como
substrato el oxígeno molecular, catalizada por un tipo de enzimas que se puede
encontrar en prácticamente todos los seres vivos. En el hombre es la responsable de
la formación de pigmentos del pelo y de la piel. En los cefalópodos produce el
pigmento de la tinta, y en los artrópodos participa en el endurecimiento de las
cutículas del caparazón, al formar quinonas que reaccionan con las proteínas,
insolubilizándolas. En los vegetales no se conoce con precisión cuál es su papel
fisiológico.
El enzima responsable del pardeamiento enzimático recibe el nombre de
polifenoloxidasa, fenolasa o tirosinasa, en este último caso especialmente cuando se
hace referencia a animales, ya que en ellos la tirosina es el principal substrato.
También se ha utilizado el término cresolasa, aplicado a la enzima de vegetales. Se
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descubrió primero en los champiñones, en los que el efecto de pardeamiento tras un

daño mecánico, como el corte, es muy evidente.
b. ¿Qué tipo de biomolécula es la catecolasa?
Pertenece a la PPO (polifenol oxidasa), la catecolasa oxida difenoles a quinonas en
los aminoácidos o proteínas convirtiéndolas en melaninas. (Fig.1) (Guerrero C.A.,
2009)

Figura 1. Reacción generalizada de la PPO en plantas. Fuente: Gacche et al. (2003).

c. ¿Cómo se puede clasificar la catecolasa, de acuerdo con la reacción que cataliza?

La catecolasa es una oxidorreductasa.
d. Hacer una descripción sobre el efecto que tiene la temperatura y el pH en la
actividad de las enzimas.
Si se mantiene el pH y el tiempo de incubación estable, al momento en que varía la
temperatura se obtiene un punto en el que la enzima presenta una máxima actividad,
es decir, una temperatura óptima, arriba o debajo de la cual la eficiencia de la
enzima para catalizar disminuye rápidamente. Es importante tener en cuenta que la
temperatura óptima cambia de enzima a enzima.
e. Consultar el pH y temperatura óptima para que la catecolasa desarrolle su actividad
enzimática.
Para que la catecolasa desarrolle su proceso enzimático, su p de máxima actividad
estará entre 5 a 5.5 y, su temperatura entre 20 a 25 °C. (Castro J.A. et al., 2006)

f. ¿Qué efecto tienen los ácidos, como el tricloroacético sobre la polifenol oxidasa?
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Los ácidos hacen que la enzima disminuya significativamente su actividad, es decir,

se reduce el pardeamiento enzimático. (Arrázola G., et al, 2016)
g. ¿Cómo afecta la feniltiourea la actividad de la polifenol oxidasa?
La feniltiourea es un compuesto orgánico y, por lo tanto, puede impedir la actividad
de la PPO y mantener el color del alimento en el que se encuentre.
h. ¿Qué es la tripsina y qué efecto tiene sobre cualquier enzima, por ejemplo, sobre la
catecolasa?
La tripsina es una enzima que es segregada por el páncreas e interviene en la
digestión de las proteínas. (Lehninger, A., et al., 2006)
6. Bibliografía:
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- Castro J. A. (Jun. 2006). CATALASA, PEROXIDASA Y
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Ed. Omega, Barcelona, 2006, p. 190.