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Metabolismo del arsénico por microbios en la naturaleza y el impacto
en la remediación del arsénico
Shen-Long Tsai1,4 , Shailendra Singh1,2,3,4 y Wilfred Chen1
En la naturaleza, tanto los procariotas como los eucariotas han
desarrollado un amplio espectro de vías como oxidación/reducción,
compartimentación, exclusión e inmovilización [16] como los
principales mecanismos naturales de defensa contra el arsénico. Esta reseña [10]. Las sustituciones de fosfato y la subsiguiente inhibición de la
destaca nuestra comprensión actual de la bioquímica y la biología
molecular involucradas en estos metabolismos naturales del arsénico,
y algunos ejemplos exitosos de microbios modificados mediante el
aprovechamiento de estos mecanismos naturales para una remediación
efectiva.
direcciones
1
Departamento de Ingeniería Química y Ambiental,
Universidad de California, Riverside, CA 92521, Estados Unidos
2
Programa de Biología Celular Molecular y del Desarrollo,
Universidad de California, Riverside, CA 92521, Estados Unidos
3 [10].
Dirección actual: One MedImmune Way, Gaithersburg, MD 20878, Estados Unidos. 4
Estos autores contribuyeron igualmente a este trabajo.
Autor para correspondencia: Chen, Wilfred (wilfred@engr.ucr.edu)
Opinión actual en biotecnología 2009, 20: 659–667
Esta revisión proviene de una edición temática sobre
biotecnología química
Editado por Kazuya Watanabe y George Bennett
Disponible en línea el 31 de octubre de 2009
0958-1669/$ – consulte el asunto anterior
n.° 2009 Elsevier Ltd. Todos los derechos reservados.
DOI 10.1016/j.copbio.2009.09.013
Introducción El
arsénico (As) es un elemento natural y ubicuo que se presenta en
muchos compartimentos ambientales y se libera a través de diversos
procesos naturales o por aportes antropogénicos. Se reconoce como
cancerígeno [1] y la exposición crónica al arsénico produce una
amplia gama de efectos adversos para la salud [2,3]. Dependiendo
de las condiciones físico-químicas del medio ambiente, algunos
compuestos de arsénico pueden solubilizarse fácilmente en agua [4]
y ser absorbidos por microorganismos, lo que resulta en altos niveles
de biodisponibilidad [5]. El caso más notable se observó en India y
Bangladesh, donde más de 50 millones de personas estuvieron
expuestas a agua o alimentos altamente contaminados [6]. Ha habido
informes de hasta 2 mg/kg de arsénico acumulado en granos [7] y
hasta 92 mg/kg de arsénico en pajas [8].
El arsénico se presenta en varios estados de oxidación, incluido el
arseniato As(V), el arsenito As(III), el As(0) elemental y el arseniuro
As(III). En las aguas naturales, el arsénico se encuentra principalmente
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se encuentra en sus formas inorgánicas como arsenito trivalente
[As(III)] o arseniato pentavalente [As(V)] [9]. Entre ellos, el As(III)
generalmente se considera más móvil y más tóxico que el As(V)
fosforilación oxidativa es la principal toxicidad del As(V) pentavalente
[11]. Por otra parte, la afinidad del As(III) trivalente por los tioles
proteicos o los grupos sulfhidrilo vecinales los hace altamente
tóxicos. El As(III) también actúa como disruptor endocrino al unirse
a los receptores hormonales e interfiere con la señalización celular
normal [12].
Se sabe que la generación de especies reactivas de oxígeno
estimulada por arsenito daña las proteínas, los lípidos y el ADN y es
probablemente la causa directa de la carcinogenicidad del arsenito
Debido a su extrema toxicidad, el arsénico ocupa el puesto número
uno en la lista de prioridades de contaminantes del agua potable de
la Agencia de Protección Ambiental (EPA) y, a partir de 2006, la
Agencia de Protección Ambiental de EE. UU. redujo el nivel máximo
de arsénico en el agua potable de 50 ppb a 10 ppb. Según el
Consejo de Defensa de los Recursos Naturales, más de 56 millones
de estadounidenses en los 25 estados informados consumen agua
que contiene arsénico en niveles que presentan un riesgo potencial
de cáncer fatal. Se han aplicado varias tecnologías de tratamiento
en pruebas a escala de laboratorio y/o de campo para eliminar el
arsénico de las aguas, como la coagulación, la filtración, el
intercambio iónico, la adsorción y la ósmosis inversa [13–15]. Sin
embargo, estas tecnologías son demasiado costosas o ineficaces
para el tratamiento de bajas concentraciones de arsénico. Cumplir
con el límite reglamentario actual de 10 ppb requeriría amplios
desarrollos tecnológicos que son altamente selectivos y
económicamente competitivos.
En la naturaleza, los microbios responden al arsénico de diversas
formas. Dependiendo de las especies de diferentes microorganismos,
las respuestas podrían ser quelación, compartimentación, exclusión
e inmovilización [16].
Comprender el nivel molecular y genético del metabolismo del
arsénico será, por lo tanto, una base de conocimiento importante
para desarrollar enfoques de biorremediación de arsénico selectivos
y eficientes, que hasta ahora se ha considerado como una forma
rentable y respetuosa con el medio ambiente para la eliminación de
metales pesados. En esta revisión, destacaremos el metabolismo
natural del arsénico en diferentes microbios y su impacto en la
contaminación ambiental por arsénico. Además, se discutirá la
utilidad potencial de estos metabolismos naturales para la remediación
de arsénico.
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660 biotecnología química
Figura 1
Geo ciclado del arsénico.
Arsénico en el medio ambiente La
principal fuente de contaminación por As proviene de los minerales
que existen de forma natural; sin embargo, las actividades
antropogénicas también han contribuido ampliamente [17] (Figura
1). Como existe en varios estados de oxidación (3, 0, +3 y +5), lo
que le permite movilizarse en diversas condiciones ambientales y
dificulta que muchas tecnologías de remediación lo eliminen
eficientemente del agua. En condiciones oxidantes, el As(V) es la
forma dominante a pH más bajo, mientras que el As(III) se vuelve
dominante a pH más alto (Figura 1). Sin embargo, la forma no
cargada de As(III) [As(OH)3] se vuelve dominante en ambientes
reductores, que es más tóxico y difícil de eliminar [18]. El nitrato
puede influir en gran medida en el ciclo del As al oxidar el hierro
ferroso para producir partículas que absorben As [19]. El arsénico
elemental no es común y las arsinas orgánicas solo se encuentran
en ambientes extremadamente reductores [20]. Se ha demostrado
que varios microorganismos metilan el arsénico dando lugar a
derivados de monometilo, dimetilo y/o trimetilo [21].
Estas arsinas metiladas son volátiles y se liberan rápidamente a la
atmósfera.
La presencia generalizada de arsénico ha obligado a diferentes
microorganismos a desarrollar machi de desintoxicación de arsénico
Opinión actual en biotecnología 2009, 20: 659–667
Nerías. Los microorganismos han desarrollado varias estrategias
para contrarrestar la toxicidad del arsénico: en primer lugar, la
extrusión activa de arsénico; en segundo lugar, la quelación
intracelular (en eucariotas) por varios péptidos de unión a metales,
incluidos el glutatión (GSH), las fitoquelatinas (PC) y las
metalotioneínas (MT); en tercer lugar, la transformación del
arsénico a diversas formas orgánicas que podrían ser
potencialmente menos tóxicas (Figura 2). En las próximas
secciones discutiremos en detalle acerca de estos mecanismos en procariotas y euc
Metabolismo del arsénico por procariotas Vías de
absorción de arsénico El arsénico podría actuar
potencialmente como donante o aceptor de electrones y ser parte
de la cadena de transporte de electrones en algunas bacterias.
Sin embargo, los transportadores de captación específicos no han
evolucionado debido a la extrema toxicidad [22].
El As(III) y el As(V) normalmente se captan utilizando el
transportador de glicerol y fosfato, respectivamente, debido a sus
similitudes químicas estructurales con el As(III) y el As(V). En E.
coli, por ejemplo, se utilizan dos transportadores de fosfato (Pit y
Pst) para la captación de As(V), siendo Pst la vía de captación
dominante [23 ]. El As(III) sin carga es absorbido por el
transportador de glicerol GlpF [24], un miembro de los canales de
glicerol de la principal proteína intrínseca (MIP)
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Metabolismo del arsénico por microbios en la naturaleza Tsai, Singh y Chen 661

Figura 2

Representaciones esquemáticas de los procesos de (a) procariotas y (b) eucariotas involucrados en el metabolismo del arsénico en el medio ambiente. En ambos casos, el
arsénico ingresa a las células a través de transportadores. El arseniato se reduce a arsenito por una reductasa, que luego sale de la célula por una bomba de membrana
específica. En los eucariotas, el arsenito también se puede detoxificar mediante la formación de complejos con péptidos ricos en Cys, como las fitoquelatinas, y el almacenamiento
en la vacuola. Además, el arsenito puede servir como donante de electrones por oxidación a arseniato. El arseniato se puede utilizar como el último aceptor de electrones durante
la respiración y el arsénico inorgánico también se puede transformar en especies orgánicas en una cascada de metilación.

familia. La mutación en GlpF resultó en cepas de E. coli
tolerantes a As(III) [24]. Se han identificado homólogos de GlpF
en Leishmania major [25] o Pseudomonas putida, y es probable
que faciliten el transporte de As(III) a través de la membrana
celular en estas especies.
Mecanismos básicos de desintoxicación
Muchas bacterias Gram-negativas y Gram-positivas emplean
un mecanismo de resistencia al arsénico similar basado en el ars
operón (típicamente arsRDABC) codificado en el cromosoma o
en plásmidos [26]. En ambos casos hay dos componentes
necesarios: una enzima reductasa (ArsC) para la reducción de
As(V) a As(III), que posteriormente se extruye mediante una
bomba de expulsión de As(III) (ArsB). Recientemente se han
encontrado genes ars adicionales que sugieren una evolución
paralela y regulaciones complejas [27]. La fuente del poder
reductor varía entre los prokaryotes; mientras que E. coli
emplea GSH y glutaredoxina [28],

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662 Biotecnología química
Staphylococcus aureus utiliza tiorredoxina [29 ]. Durante el paso de
reducción, el arseniato se une a un dominio de reconocimiento que
comprende residuos de Arg, lo que da como resultado un enlace
disulfuro entre los residuos de cisteína en ArsC y los equivalentes
reductores. La reducción del enlace disulfuro a través de la
transferencia de electrones da como resultado la reducción de As(V) a As(III) [30].
ArsR y ArsD son componentes reguladores que actúan principalmente
como represores de la transcripción y regulan el límite superior de la
actividad del operón, respectivamente [31]. Estas proteínas
reguladoras tienen una afinidad extremadamente alta por el As(III) y
se unen a través de sus residuos de cisteína, lo que da como
resultado una unión alterada del ADN para la activación transcripcional
[32]. ArsA es una ATPasa que ayuda a ArsB en la salida de As(III)
proporcionando la energía necesaria a través de la hidrólisis de ATP
[33]. Curiosamente, el As(V) relativamente menos tóxico se convierte
en el As(III) más tóxico antes del eflujo; es posible que el sistema de
eflujo de As(III) haya evolucionado primero en ambientes reductores,
que posteriormente se combinó con la reducción de As(V) para
adaptarse a la toxicidad de As(V) una vez que la atmósfera terrestre
se oxidó más [31].
Oxidación/reducción de arsenito
La oxidación del As(III) puede ser importante para la eliminación del
arsénico, ya que el As(V) es menos soluble y se elimina de forma
mucho más eficaz mediante métodos fisicoquímicos [34].
En la naturaleza, los microorganismos llevan a cabo la oxidación de
As(III) utilizando la enzima As(III) oxidasa, que se clasifica como
miembro de la familia de las DMSO reductasas y se identificó y
secuenció recientemente [35]. La mayoría de las arsenito oxidasas,
como la (AoxAB) aislada de Hydrogeno phaga sp. cepa NT-14,
funcionan como un heterodímero (del gen aoxAB) y contienen Fe y
molibdeno como parte de la unidad catalítica [35]. Los linajes
filogenéticos sugirieron que la enzima tuvo un origen primitivo
principalmente como un mecanismo de resistencia que convertía el
As(III) más tóxico en el As(V) menos tóxico. Sin embargo, algunas
bacterias quimiolitotrópicas extraen energía de la oxidación del
arsenito [36].
Además de la reducción intracelular de As(V) usando la arseniato
reductasa, la reducción del arseniato también puede ser parte de la
respiración anaeróbica del arseniato en algunas bacterias (p. ej.
Shewanella sp. cepa ANA-3) [37], donde el arseniato actúa como
aceptor terminal de electrones. Esta arseniato reductasa respiratoria
(ArrA y ArrB) está unida a la membrana como otros miembros de la
cadena de transporte de electrones [38] y contiene un centro de
molibdopterina en ArrA y un centro de Fe-S en ArrB.
Una Shewanella sp. la cepa ANA-3 que contiene una mutación en el
grupo de genes arrAB no puede crecer en As(V) [39].
Metilación/desmetilación La
metilación se pensó originalmente como un paso de desintoxicación;
sin embargo, la literatura reciente sugiere que no todos los productos
de arsénico metilado son menos tóxicos [20]. El modo principal de
generación de arsinas y metilarsenicales es la reducción de As(V) y
la posterior adición oxidativa de grupos metilo [40] de diversas
fuentes, como la metil cobala
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la mía en muchos sistemas bacterianos [41]. Las formas metiladas
de arsénico son volátiles y se liberan fácilmente al medio ambiente,
donde la oxidación podría convertirlas nuevamente en la forma
oxidada As(V). Se sabe muy poco sobre las vías de desmetilación;
sin embargo, se ha demostrado la desmetilación de compuestos de
mono-metil y dimetilarsénico e incluso es posible el uso de arsenicales
metilados como fuente de carbono [42]. La comprensión de estos
mecanismos no solo arrojará luz sobre la movilización de arsénico,
sino que también puede abrir nuevos horizontes en la ingeniería de
vías metabólicas para explotar esas vías para la remediación de
arsénico.
Maquinaria de salida de
arsénico El As (III) puede extruirse mediante una proteína
transportadora de arsenito o mediante una bomba de salida de
arsenito ArsB. El primer enfoque explota el potencial de membrana
para obtener energía, mientras que el segundo utiliza la energía
proporcionada por la ATPasa ArsA a través de la hidrólisis de ATP
[43]. La mayoría de los sistemas procariotas emplean el sistema ArsA/
B, mientras que algunas bacterias solo pueden funcionar con ArsB.
La afinidad reducida por el As(III) después de las mutaciones de los
residuos de cisteína sugiere que la activación de ArsA por parte del
As(III) ocurre a través del complejo metal-tiolato formado entre tres
residuos de cisteína y As(III) [44].
Metabolismo del arsénico por eucariotas El
metabolismo del arsénico por las células vegetales ha sido
recientemente revisado detalladamente en otro lugar [45,46,47]. En
esta parte, solo destacaremos el metabolismo de levaduras, hongos
y algas cuando se exponen a compuestos de arsénico. Estos
incluirían el mecanismo de absorción, metabolismo y eflujo de
arsénico.
Captación de
arsénico La captación de arsénico por Saccharomyces cerevisiae se
produce a través de tres sistemas de transporte diferentes. El
arseniato pentavalente, debido a la similitud con el fosfato [48], es
captado a través de un transportador de fosfato, Pho87p [49].
Además, se han identificado dos sistemas transportadores para el
arsenito trivalente. De forma similar a los sistemas bacterianos, el
arsenito es captado por una acuagliceroporina Fps1p, un transportador
de glicerol [50,51]. La interrupción del gen FPS1 dio como resultado
una reducción en la captación de arsenito, lo que confirma el
importante papel del canal Fpslp en la captación de arsenito [52,53].
Sin embargo, la cepa con deleción de FPS1 seguía siendo sensible
al arsenito en ausencia de glucosa, lo que sugiere la existencia de
un mecanismo de transporte adicional relacionado con la captación
de glucosa [54]. En 2004, Liu et al. encontraron que una clase de
permeasas de hexosa (Hxt1p a Hxt1 más Gal2p) de S. cerevisiae
catalizó accidentalmente la absorción de arsenito [55]. La absorción
de arsenito se redujo en un 80 % en presencia de glucosa incluso
cuando se eliminó FPS1, lo que confirma que los transportadores de
hexosa son los principales responsables de la absorción de arsenito.
Recientemente, el mismo grupo demostró que una glucosa de
mamífero
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Metabolismo del arsénico por microbios en la naturaleza Tsai, Singh y Chen 663
La permeasa GLUT también catalizó la captación de arsenito cuando
se expresó de forma heterogénea en la levadura [56].
Metabolismo del
arsénico Una vez que el arsénico ingresa a las células, se utilizan
una serie de pasos de desintoxicación para reducir los efectos
citotóxicos agudos. El mecanismo más completo de tolerancia al
arsénico en la levadura lo proporcionan tres grupos de genes
contiguos: ARR1, ARR2 y ARR3. ARR1 codifica un factor de
transcripción que regula la transcripción de la arseniato reductasa
Arr2p y el transportador de extrusión de arsenito Arr3p [57 ]. Después
de que el arsenato es transportado dentro de las células de levadura,
el arseniato es reducido a arsenito por una arseniato reductasa
Arr2p [58]. Sin embargo, a diferencia de la arseniato reductasa
bacteriana ArsC (un monómero de 141 residuos), Arr2p es un
homodímero de dos monómeros de 130 residuos. Se ha demostrado
que el gen de levadura ARR2 puede complementar una cepa de E.
coli con una deleción del gen cromosómico arsC [58]. Además, la
interrupción de ARR2 en S. cerevisiae eliminó la resistencia al
arseniato [59]. Por lo tanto, durante mucho tiempo se ha pensado
que la resistencia de las células cultivadas a la toxicidad del arsénico
reduce la acumulación de arsenito, ya que hasta ahora no se ha
encontrado ningún transportador de salida de arseniato. Hasta la
fecha, Arr2p sigue siendo la única arseniato reductasa en eucariotas
y aún no se ha encontrado ningún gen ARR2 con la levadura de
fisión S. pombe u otros hongos.
Secuestro intracelular Se han
planteado preguntas sobre por qué las células se diseñaron para
reducir el arseniato a arsenito más reactivo, que es al menos 100
veces más tóxico [60].
La respuesta es que, al aprovechar la reactividad química, el arsenito
puede unirse a muchas proteínas o péptidos quelantes intracelulares
que contienen ligandos tiol, como GSH, PC y MT, para formar
complejos inactivos [61–63].
El GSH es un reservorio importante de tioles no proteicos [64], y la
disponibilidad de GSH es importante en la reducción del arseniato,
así como en el transporte del arsenito a las vacuolas [65]. Guo et al.
mostró que la sobreexpresión del gen GSH1 de S. cerevisiae que
codifica una g-glutamilcisteína sintetasa (g-ECS), la primera enzima
en la ruta de biosíntesis de GSH [66], elevó la tolerancia y la
acumulación de arsénico en Arabidopsis thaliana [67]. Los MT
pertenecen a una familia de proteínas ricas en cisteína con la
capacidad única de formar grupos estables de tiolato metálico con
sus dos dominios ricos en cisteína que se unen a metales [68], y son
los principales ligandos de unión a metales en animales. Aunque se
han descrito MT que se unen a As en el alga Fucus vesiculosus [69],
no se ha aislado ninguno en bacterias. Por otro lado, las PC son
pequeños péptidos ricos en cisteína sintetizados enzimáticamente
que se encuentran ampliamente en plantas y levaduras, y se ha
demostrado que se unen al arsenito de manera eficiente [70,71,72 ].
La sobreexpresión de una PC sintasa de tabaco en la levadura S.
cerevisiae resultó en una mayor tolerancia a Cd y As [73] sin ninguna
mejora en la acumulación.
Sin embargo, nuestro laboratorio informó una mayor acumulación de
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arsenito por ingeniería de S. cerevisiae que expresa la PC sintasa
de Ara bidopsis thaliana [74].
Para algunas levaduras como Candida glabrata, el sulfato
extracelular se metaboliza a sulfuro [75], que actúa como donador
de electrones para la reducción de arseniato [76]. En algunos
eucariotas, se ha demostrado la incorporación de sulfuro para formar
un complejo PC-metal-sulfuro más estable y de alto peso molecular
en la vacuola [77-79]. Además, la formación de partículas de sulfuro
metálico en Schizosacchar omyces pombe y Candida glabrata
también forma parte de su desintoxicación intracelular [80,81].
Resistente al arsénico vía intracelular y extracelular
transporte
S. cerevisiae tiene dos mecanismos diferentes para reducir la
citotoxicidad del arsenito. Uno es a través de la bomba de extrusión
de arsenito Arr3p, que transporta los complejos As(III)-GSH fuera
de la membrana. La sobreexpresión de Arr3p en levadura da como
resultado tolerancia a As(III) [82], mientras que la eliminación de
ARR3 da como resultado sensibilidad tanto a As(V) como a As(III)
[50–52 ]. Además de la bomba de salida de la membrana, un
segundo mecanismo de resistencia al arsénico es a través del
transporte de arsenito conjugado con GSH hacia la vacuola [52]. La
proteína Ycf1p asociada con la membrana vacuolar es un miembro
de la superfamilia de transportadores ABC que es responsable del
transporte dependiente de ATP de una amplia gama de sustratos
conjugados con GSH (como As(GS)3) hacia la vacuola. Ambos
mecanismos son esenciales para la supervivencia a altas
concentraciones de arsénico, ya que la eliminación del gen YCF1
produce hipersensibilidad al arsénico. Análisis genéticos adicionales
respaldan la idea de que estas dos vías funcionan de forma sinérgica
ya que la hipersensibilidad de las células de levadura al arsénico es
aditiva en un mutante que carece de ambos genes. Mientras que S.
cerevisiae transporta el complejo GSH-As a la vacuola, S. pombe
transporta complejos PC-Cd-S de alto peso molecular a la vacuola a
través del transportador Hmt1 [83].
Microbios diseñados para la remediación del arsénico El uso de
microbios diseñados como biosorbentes selectivos es una tecnología
verde atractiva para la eliminación eficiente y de bajo costo del
arsénico [74]. Aunque se han informado esfuerzos en la ingeniería
de microbios para la eliminación de cadmio o mercurio mediante la
expresión de péptidos que se unen a metales, como MT humanos
[84,85] o péptidos sintéticos [86,87], la especificidad y afinidad
relativamente bajas de estos péptidos para arsénico los hacen
ineficaces para la remediación de arsénico. El desarrollo de un
microbio acumulador de arsénico debería incluir la capacidad de, en
primer lugar, modificar los mecanismos de defensa existentes de
forma natural y, en segundo lugar, desarrollar vías nuevas o híbridas
en un microorganismo fácilmente manipulable.
Uno de los primeros ejemplos de ingeniería de acumulación de
arsénico se demostró en las plantas. Las enzimas bacterianas ArsC
(arseniato reductasa) y g-ECS (GSH
Opinión actual en biotecnología 2009, 20: 659–667
Machine Translated by Google
664 Biotecnología química
sintasa) se expresaron en A. thaliana, lo que resultó en la
acumulación de As (V) como complejos GSH-As [88]. Posteriormente
se informó un esfuerzo similar al expresar la levadura YCF1 en A.
thaliana para mejorar el almacenamiento de As en la vacuola [89].
Estos informes abren la posibilidad de diseñar metabolismos y vías
para el secuestro de arsénico. Sobre la base de estos primeros
ejemplos, se han demostrado esfuerzos similares con microbios
modificados. En un caso, la PC sintasa de A. thaliana se expresó
en E. coli [90 ]. Esta cepa diseñada produjo PC cuando se expuso
a diferentes formas de arsénico, lo que llevó a niveles moderados
de acumulación de arsénico. Sin embargo, el nivel de GSH, un
precursor clave de PC, se volvió limitante para un mayor nivel de
producción de PC y acumulación de arsénico. Nuestro laboratorio
expresó recientemente la PC sintasa de S. pombe (SpPCS) en E.
coli, lo que resultó en una mayor acumulación de As [98]. La
producción de PC se incrementó aún más al coexpresar una
glutamilcisteína sintetasa g desensibilizada por retroalimentación
(GshI *), lo que resultó en niveles más altos de PC y acumulación
de As. Los niveles significativamente mayores de PC se
aprovecharon aún más mediante la coexpresión de un transportador
de arsénico GlpF, lo que llevó a una acumulación adicional de As
1,5 veces mayor. Estos pasos de ingeniería se combinaron
finalmente en una cepa de E. coli con eliminación de flujo de salida
de arsénico para lograr la mayor acumulación de arsénico notificada
en E. coli de 16,8 mmol/g de células.
Naturalmente, las bacterias reductoras de azufre se utilizan para
la precipitación de As(V) mediante la formación de complejos de
sulfuro insolubles con H2S [91]. Se han utilizado enfoques de
ingeniería metabólica para la producción intracelular de H2S en
bacterias, lo que lleva a una mayor acumulación de cadmio [92].
Nuestro laboratorio ha diseñado recientemente una cepa de
levadura que coexpresa AtPCS y cisteína desulfhidrasa, una
aminotransferasa que convierte la cisteína en sulfuro de hidrógeno
en condiciones aeróbicas, para elevar la acumulación de arsénico
mediante la formación de complejos PC-metal-sulfuro (Tsai, 2009,
inédito). ).
También se ha explotado el uso de células en reposo como
biosorbente de alta afinidad para la eliminación de arsénico. Al
expresar AtPCS en S. cerevisiae, que naturalmente tiene un nivel
más alto de GSH, la cepa de levadura diseñada acumuló altos
niveles de arsénico y fue eficaz para eliminar el arsénico en cultivos
celulares en reposo [74]. Sin embargo, la utilidad de las células
productoras de PC para la biosorción requiere el uso de zinc para
la inducción de PC, lo que dificulta su implementación en la práctica.
Por otro lado, la acumulación específica de arsénico se logró en
células de E. coli sobreexpresando la proteína reguladora específica
de arsénico ArsR. Las células en reposo que expresan ArsR fueron
eficaces para eliminar 50 ppb de As(III) en una hora [93]. El
concepto de adsorbentes de células en reposo se ha extendido al
uso de un MT que se une al As de forma natural [94]. Singh y
colaboradores desarrollaron una cepa de E. coli diseñada que
expresa la fMT de F. vesiculosus [69] aislada de un sitio
contaminado con arsénico. Cuando el transportador específico de
arsenito
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GlpF fue co-sobreexpresado con fMT, la E. coli modificada acumuló
arsénico en niveles altos incluso en presencia de cantidades 10
veces mayores de metales pesados competidores [94]. Las celdas
en reposo pudieron eliminar por completo 35 ppb de As(III) en 20
minutos, lo que hace de esta una opción atractiva de bajo costo
para la remediación de arsénico.
Los nuevos enfoques irracionales, como la evolución dirigida, la
combinación aleatoria de genomas y los estudios metagenómicos,
se pueden utilizar para desarrollar nuevas vías resistentes al
arsénico que sean adecuadas para la remediación del arsénico
[95]. Esto se demostró mediante la modificación de un operón de
resistencia al arsénico mediante el barajado de ADN [96]. Las
células que expresan el operón optimizado crecieron en arseniato
0,5 M , un aumento de 40 veces en la resistencia. En la misma
línea, Chauhan y sus colaboradores construyeron una biblioteca
metagenómica a partir de lodos de una planta de tratamiento de
efluentes industriales e identificaron un nuevo gen de resistencia a
As(V) (arsN) que codifica una proteína similar a las acetiltransferasas.
La sobreexpresión de ArsN condujo a una mayor resistencia al
arsénico en E. coli [97]. Estos ejemplos resaltan la posibilidad de
combinar vías naturales y no naturales para la acumulación de hiperarsénico.
Conclusión La
contaminación por arsénico es un problema global importante
y los ciclos geoquímicos locales se han visto intensificados
por actividades industriales y mineras irresponsables.
Afortunadamente, muchos microorganismos ya han
desarrollado mecanismos para hacer frente a este desafío
ambiental. La comprensión fundamental de la bioquímica y
las vías metabólicas involucradas en la resistencia al arsénico
ahora se está traduciendo gradualmente en estrategias para
diseñar microbios para la remediación efectiva del arsénico.
Aunque los informes iniciales son prometedores, se necesitan
mejoras sustanciales para llevar estos enfoques de la
práctica a la práctica. En este sentido, las nuevas
herramientas de la biología sintética sin duda nos permitirán
incrementar nuestros esfuerzos en este sentido.
Agradecimientos Se
agradece el apoyo financiero de la NSF y la EPA de EE. UU.
Referencias y lecturas recomendadas
Los artículos de particular interés, publicados dentro del período de
revisión, se han destacado como:
de interés especial
de interés excepcional
1. Rosen P: Importancia teórica del arsénico como carcinógeno.
J Theor Biol 1971, 32:425.
2. Chen Y, Factor-Litvak P, Parvez F, Graziano J, Howe G, Ahsan H:
Asociación entre la exposición al arsénico en dosis más bajas del agua
potable y la presión arterial alta en Bangladesh. Am J Epidemiol 2005,
161:S30-S130.
3. Tapio S, Grosche B: Arsénico en la etiología del cáncer. Mutat Res Rev
Mutat Res 2006, 612:215-246.
4. Oremland RS, Kulp TR, Blum JS, Hoeft SE, Baesman S, Miller LG, Stolz
JF: Un ciclo de arsénico microbiano en un ambiente extremo saturado
de sal. Ciencia 2005, 308:1305-1308.
www.cienciadirecta.com
Machine Translated by Google
Metabolismo del arsénico por microbios en la naturaleza Tsai, Singh y Chen 665
5. Bryan CG, Marchal M, Battaglia-Brunet F, Kugler V, Lemaitre
Guillier C, Lievremont D, Bertin PN, Arsene-Ploetze F: Metabolismo de carbono
y arsénico en cepas de Thiomonas: las diferencias revelaron diversos procesos
de adaptación. BMC Microbiol 2009, 9:127S.
6. Hossain MF: Contaminación por arsénico en Bangladesh: una descripción
general. Agric Ecosyst Environ 2006, 113:1-16.
7. Islam FS, Gault AG, Boothman C, Polya DA, Charnock JM, Chatterjee D,
Lloyd JR: Papel de las bacterias reductoras de metales en la liberación de
arsénico de los sedimentos del delta de Bengala. Naturaleza 2004, 430:68-71.
8. Abedin MJ, Cresser MS, Meharg AA, Feldmann J, Cotter
Howells J: Acumulación y metabolismo de arsénico en arroz (Oryza sativa L.).
Environ Sci Technol 2002, 36:962-968.
9. Cullen WR, Reimer KJ: especiación de arsénico en el medio ambiente.
Chem Rev 1989, 89: 713-764.
10. Liu SX, Athar M, Lippai I, Waldren C, Hei TK: Inducción de oxirradicales
por arsénico: implicación para el mecanismo de genotoxicidad. Proc Natl
Acad Sci USA 2001, 98:1643-1648.
11. Goyer RA, Clarkson TW: Efectos tóxicos de los metales. Toxicología de
Casarett & Doull: Lo básico de los venenos. 6ª ed. Nueva York: McGrawHill;
2001.
12. Kaltreider RC, Davis AM, Lariviere JP, Hamilton JW: El arsénico altera la
función del receptor de glucocorticoides como factor de transcripción.
Perspectiva de Salud Ambiental 2001, 109:245-251.
13. Kartinen EO, Martin CJ: Una descripción general de los procesos de
eliminación de arsénico. Desalinización 1995, 103:79-88.
14. Zouboulis AI, Katsoyiannis IA: Eliminación de arsénico utilizando perlas de alginato
cargadas con óxido de hierro. Ind Eng Chem Res 2002, 41:6149-6155.
15. DeMarco MJ, SenGupta AK, Greenleaf JE: Eliminación de arsénico
utilizando un sorbente híbrido polimérico/inorgánico. Agua Res 2003, 37:
164-176.
16. Di Toppi LS, Gabbrielli R: Respuesta al cadmio en plantas superiores.
Environ Exp Bot 1999, 41:105-130.
17. Nordstrom DK: Salud pública: ocurrencias mundiales de arsénico en aguas
subterráneas. Ciencia 2002, 296:2143-2145.
18. Smedley PL, Kinniburgh DG: Una revisión de la fuente, el comportamiento y la
distribución de arsénico en aguas naturales. Appl Geochem 2002, 17:517-568.
19. Senn DB, Hemond HF: Controles de nitrato en hierro y arsénico en un
lago urbano. Ciencia 2002, 296:2373-2376.
20. Bentley R, Chasteen TG: Metilación microbiana de metaloides: arsénico,
antimonio y bismuto. Microbiol Mol Biol Rev 2002, 66:250-271.
21. Qin J, Rosen BP, Zhang Y, Wang GJ, Franke S, Rensing C: Desintoxicación de
arsénico y evolución del gas trimetilarsina por una metiltransferasa de arsenito
S-adenosilmetionina microbiana.
Proc Natl Acad Sci USA 2006, 103:2075-2080.
22. Stolz JE, Basu P, Santini JM, Oremland RS: Arsénico y selenio en el metabolismo
microbiano. Annu Rev Microbiol 2006, 60:107-130.
23. Rosen BR, Liu ZJ: Vías de transporte de arsénico y selenio: una
minirevisión. Environ International 2009, 35:512-515.
Una revisión concisa sobre los sistemas transportadores de E. coli, S. cere visiae y
mamíferos.
24. Sanders OI, Rensing C, Kuroda M, Mitra B, Rosen BP: La antimonita es acumulada
por el facilitador de glicerol GlpFin Escherichia coli. J Bacteriol 1997,
179:3365-3367.
25. Gourbal B, Sonuc N, Bhattacharjee H, Legare D, Sundar S,
Ouellette M, Rosen BP, Mukhopadhyay R: Consumo de fármacos y
modulación de la resistencia a los fármacos en Leishmania por una
acuagliceroporina. J Biol Chem 2004, 279:31010-31017.
26. Xu C, Zhou TQ, Kuroda M, Rosen BP: Mecanismos de resistencia a
metaloides en procariotas. J Biochem 1998, 123:16-23.
27. Butcher BG, Deane SM, Rawlings DE: Los genes cromosómicos de resistencia al
arsénico de Thiobacillus ferrooxidans tienen una disposición inusual y confieren
un aumento de arsénico y antimonio
www.cienciadirecta.com
resistencia a Escherichia coli. Appl Environ Microbiol 2000, 66:1826-1833.
28. Shi J, Vlamis-Gardikas V, Aslund F, Holmgren A, Rosen BP:
La reactividad de las glutaredoxinas 1, 2 y 3 de Escherichia coli muestra que
la glutaredoxina 2 es el principal donante de hidrógeno para la reducción de
arseniato catalizada por ArsC. J Biol Chem 1999, 274:36039-36042.
29. Ji GY, Silver S: Reducción de arseniato a arsenito por la proteína Arsc del operón
de resistencia al arsénico del plásmido-Pi258 de Staphylococcus aureus. Proc
Natl Acad Sci USA 1992, 89:9474-9478.
Un artículo importante que describe la arseniato reductasa y muestra su importancia
para la resistencia al arsénico.
30. Silver S, Phung LT: Genes y enzimas involucrados en la oxidación bacteriana y
reducción de arsénico inorgánico. Appl Environ Microbiol 2005, 71:599-608.
31. Rosen BP: Bioquímica de la desintoxicación de arsénico. FEBS Lett 2002,
529:86-92.
32. Rosen BP: Familias de transportadores de arsénico. Trends Microbiol 1999,
7:207-212.
33. Tisa LS, Rosen BP: Caracterización molecular de un anión
bomba: la proteína Arsb es el ancla de membrana para la proteína Arsa. J Biol
Chem 1990, 265:190-194.
34. Leist M, Casey RJ, Caridi D: La gestión de desechos de arsénico: problemas y
perspectivas. J Hazard Mater 2000, 76:125-138.
35. Ellis PJ, Conrads T, Hille R, Kuhn P: Estructura cristalina de la arsenito oxidasa
de 100 kDa de Alcaligenes faecalis en dos formas cristalinas a 1,64 angstrom
y 2,03 angstrom. Estructura 2001, 9:125-132.
36. Santini JM, Sly LI, Schnagl RD, Macy JM: Una nueva bacteria
oxidante de arsenito quimiolitoautotrófica aislada de una mina de oro: estudios
filogenéticos, fisiológicos y bioquímicos preliminares. Appl Environ Microbiol
2000, 66:92-97.
37. Krafft T, Macy JM: Purificación y caracterización de la
arseniato reductasa respiratoria de Chrysiogenes arsenatis. Eur J Biochem
1998, 255:647-653.
38. Saltikov CW, Newman DK: Identificación genética de un
arseniato reductasa respiratoria. Proc Natl Acad Sci USA 2003, 100:10983-10988.
39. Saltikov CW, Cifuentes A, Venkateswaran K, Newman DK: El sistema de
desintoxicación de ars es ventajoso pero no requerido para la respiración de
As(V) por la cepa ANA-3 de la especie Shewanella genéticamente tratable. Appl
Environ Microbiol 2003, 69:2800-2809.
40. Dombrowski PM, Long W, Farley KJ, Mahony JD, Capitani JF, Di Toro DM:
Análisis termodinámico de la metilación del arsénico.
Environ Sci Technol 2005, 39:2169-2176.
41. Gadd GM, White C: Tratamiento microbiano de la contaminación por metales: una
biotecnología en funcionamiento. Trends Biotechnol 1993, 11:353-359.
42. Maki T, Hasegawa H, Watarai H, Ueda K: Clasificación de bacterias que
descomponen dimetilarseniato mediante un análisis de polimorfismo de
longitud de fragmento restringido de genes 16S rRNA.
Anal Sci 2004, 20:61-68.
43. Dey S, Ouellette M, Lightbody J, Papadopoulou B, Rosen BP: un sistema de
transporte de glutatión As (III) dependiente de ATP en vesículas de membrana
de Leishmania tarentolae. Proc Natl Acad Sci USA 1996, 93:2192-2197.
44. Silver S, Phung LT: Resistencia bacteriana a los metales pesados: nuevas
sorpresas. Annu Rev Microbiol 1996, 50:753-789.
45. Zhao FJ, Ma JF, Meharg AA, McGrath SP: Absorción de arsénico y
Metabolismo en las plantas. New Phytol 2009, 181:777-794.
46. Zhu YG, Rosen BP: Perspectivas de la ingeniería genética para la fitorremediación
de ambientes contaminados con arsénico: ¿de la imaginación a la realidad?
Curr Opin Biotechnol 2009, 20:220-224.
Una revisión concisa sobre el metabolismo del arsénico en las plantas y cómo la
ingeniería genética puede mejorar la fitorremediación del arsénico. Esta parte no se
detalla en nuestra revisión.
Opinión actual en biotecnología 2009, 20: 659–667
Machine Translated by Google
666 Biotecnología química
47. Tripathi RD, Srivastava S, Mishra S, Singh N, Tuli R, Gupta DK, Maathuis
FJM: Peligros del arsénico: estrategias para la tolerancia y la remediación
de las plantas. Tendencias Biotecnología 2007, 25:158-165.
48. Nidhubhghaill OM, Sadler PJ: La estructura y reactividad de los compuestos
de arsénico: actividad biológica y diseño de fármacos.
Struct Bond 1991, 78:129-190.
49. Persson BL, Petersson J, Fristedt U, Weinander R, Berhe A, Pattison J:
permeasas de fosfato de Saccharomyces cerevisiae: estructura,
función y regulación. Biochim Biophys Acta Rev Biomembr 1999,
1422:255-272.
50. Wysocki R, Bobrowicz P, Ulaszewski S: El gen ACR3 de Saccharomyces
cerevisiae codifica una supuesta proteína de membrana involucrada en
el transporte de arsenito. J Biol Chem 1997, 272:30061-30066.
51. Wysocki R, Chery CC, Wawrzycka D, Van Hulle M, Cornelis R,
Thevelein JM, Tamas MJ: El canal de glicerol Fps1p media la captación de
arsenito y antimonito en Saccharomyces cerevisiae. Mol Microbiol 2001,
40:1391-1401.
52. Ghosh AS, Kar AK, Kundu M: Deterioro de la captación de imipenem
asociado con alteraciones en las proteínas de la membrana externa y
lipopolisacáridos en Shigella dysenteriae resistente a imipenem. J
Antimicrob Chemother 1999, 43:195-201.
53. Liu J, Liu YP, Powell DA, Waalkes MP, Klaassen CD: multidrogas
resistencia mdr1a/1b ratones doble knockout son más sensibles
que los ratones de tipo salvaje a la toxicidad aguda por arsénico, con una
mayor acumulación de arsénico en los tejidos. Toxicología 2002,
170:55-62.
54. Liu ZJ, Shen J, Carbrey JM, Mukhopadhyay R, Agre P, Rosen BP: Transporte
de arsenito por acuagliceroporinas de mamíferos AQP7 y AQP9. Proc Natl
Acad Sci USA 2002, 99:6053-6058.
55. Liu ZJ, Boles E, Rosen BP: captación de trióxido de arsénico por permeasas
de hexosa en Saccharomyces cerevisiae. J Biol Chem 2004,
279:17312-17318.
Este artículo demostró claramente que las permeasas de hexosa catalizan la
mayor parte del transporte de arsenito en S. cerevisiae.
56. Liu ZJ, Sanchez MA, Jiang X, Boles E, Landfear SM, Rosen BP: La
permeasa de glucosa de mamíferos GLUT1 facilita el transporte de trióxido
de arsénico y ácido metilarsenoso. Biochem Biophys Res Commun 2006,
351:424-430.
57. Ghosh M, Shen J, Rosen BP: Vías de desintoxicación de As (III) en
Saccharomyces cerevisiae. Proc Natl Acad Sci USA 1999, 96:5001-5006.
Este documento informó las dos vías principales para la desintoxicación de
arsénico en S. cerevisiae. Estos resultados demostraron claramente que Arr3p e
Ycf1p representan vías separadas para la desintoxicación de arsenito en levadura.
58. Mukhopadhyay R, Shi J, Rosen BP: Purificación y
caracterización de Acr2p, la arseniato reductasa de Saccharomyces
cerevisiae. J Biol Chem 2000, 275:21149-21157.
59. Mukhopadhyay R, Rosen BP: El gen ACR2 de Saccharomyces cerevisiae
codifica una arseniato reductasa. FEMS Microbiol Lett 1998, 168:127-136.
60. Knowles FC, Benson AA: La bioquímica del arsénico. Trends Biochem Sci
1983, 8:178-180.
61. Cobbett C, Goldsbrough P: Fitoquelatinas y
metalotioneínas: funciones en la desintoxicación y homeostasis de
metales pesados. Annu Rev Plant Biol 2002, 53:159-182.
62. Singhal RK, Anderson ME, Meister A: Glutatión, una primera línea de
defensa contra la toxicidad del cadmio. FEBRERO J 1987, 1:220-223.
63. Ngu TT, Easton A, Stillman MJ: Análisis cinético del arsénico
metalación de metalotioneína humana: significado de la estructura de dos
dominios. J Am Chem Soc 2008, 130:17016-17028.
64. Noctor G: Señalización metabólica en defensa y estrés: la
roles centrales de las parejas redox solubles. Plant Cell Environ 2006,
29:409-425.
65. Wysocki R, Clemens S, Augustyniak D, Golik P, Maciaszczyk E, Tama´ s
MJ, Dziadkowiec D: la tolerancia a metaloides basada en fitoquelatinas no
es funcionalmente equivalente al transportador de arsenito Acr3p. Biochem
Biophys Res Commun 2003, 304: 293-300.
Opinión actual en biotecnología 2009, 20: 659–667
66. Foyer CH, Noctor G: Oxidante y señalización antioxidante en
plantas: una reevaluación del concepto de estrés oxidativo en un contexto
fisiológico. Plant Cell Environ 2005, 28:1056-1071.
67. Guo JB, Dai XJ, Xu WZ, Ma M: La sobreexpresión de GSH1 y AsPCS1
aumenta simultáneamente la tolerancia y la acumulación de cadmio
y arsénico en Arabidopsis thaliana.
Chemosphere 2008, 72:1020-1026.
68. Morris CA, Nicolaus B, Sampson V, Harwood JL, Kille P:
Identificación y caracterización de una proteína metalotioneína
recombinante de un alga marina, Fucus vesiculosus. Biochem J
1999, 338:553-560.
69. Merrifield ME, Ngu T, Stillman MJ: unión de arsénico a la metalotioneína
de Fucus vesiculosus. Biochem Biophys Res Commun 2004, 324:127-132.
70. Maitani T, Kubota H, Sato K, Yamada T: La composición de
metales unidos a metalotioneína de clase III (fitoquelatina y su péptido
desglicilado) inducidos por varios metales en cultivos de raíces de Rubia
tinctorum. Plant Physiol 1996, 110:1145-1150.
71. Schmoger MEV, Oven M, Grill E: Desintoxicación de arsénico por
fitoquelatinas en plantas. Plant Physiol 2000, 122:793-801.
72. Wunschmann J, Beck A, Meyer L, Letzel T, Grill E, Lendzian KJ: Las
fitoquelatinas son sintetizadas por dos serina carboxipeptidasas vacuolares
en Saccharomyces cerevisiae. FEBS Lett 2007, 581:1681-1687.
Este estudio mostró que las serina carboxipeptidasas vacuolares CPY y CPC son
responsables de la síntesis de PC en S. cerevisiae.
73. Kim YJ, Chang KS, Lee MR, Kim JH, Lee CE, Jeon YJ, Choi JS, Shin HS,
Hwang SB: La expresión del ADNc del tabaco que codifica la fitoquelatina
sintasa promueve la tolerancia y la acumulación de Cd y As en
Saccharomyces cerevisiae. J Plant Biol 2005, 48:440-447.
74. Singh S, Lee W, DaSilva NA, Mulchandani A, Chen W: Acumulación
mejorada de arsénico por células de levadura diseñadas que expresan
fitoquelatina sintasa de Arabidopsis thaliana. Biotecnología Bioeng 2008,
99:333-340.
75. Thomas D, SurdinKerjan Y: Metabolismo de aminoácidos de azufre en
Saccharomyces cerevisiae. Microbiol Mol Biol Rev 1997, 61:503-512.
76. Rochette EA, Bostick BC, Li GC, Fendorf S: Cinética de reducción de
arseniato por sulfuro disuelto. Environ Sci Technol 2000, 34:4714-4720.
77. Kneer R, Zenk MH: La formación de complejos de Cd-fitoquelatina
en cultivos de células vegetales. Fitoquímica 1997, 44:69-74.
78. Mendoza-Cozatl DG, Moreno-Sanchez R: Cd2+ transporte y
almacenamiento en el cloroplasto de Euglena gracilis. Biochim Biophys
Acta Bioenerget 2005, 1706:88-97.
79. Mendoza-Cozatl DG, Rodriguez-Zavala JS, Rodriguez
Enriquez S, Mendoza-Hernandez G, Briones-Gallardo R, Moreno-
Sanchez R: Phytochelatin-cadmium-sulfide high molecular-mass
complexes of Euglena gracilis. FEBRERO J 2006, 273:5703-5713.
80. Dameron CT, Winge DR: Formación de semiconductores cuánticos
mediada por péptidos. Trends Biotechnol 1990, 8:3-6.
81. Krumov N, Oder S, Perner-Nochta I, Angelov A, Posten C:
Acumulación de nanopartículas de CdS por levaduras en un bioproceso
por lotes alimentados. J Biotechnol 2007, 132:481-486.
82. Bobrowicz P, Wysocki R, Owsianik G, Goffeau A, Ulaszewski S: Aislamiento
de tres genes contiguos, ACR1, ACR2 y ACR3, involucrados en la
resistencia a compuestos de arsénico en la levadura Saccharomyces
cerevisiae. Levadura 1997, 13:819-828.
83. Ortiz DF, Ruscitti T, McCue KF, Ow DW: Transporte de metal
péptido de unión por HMT1, una proteína de membrana vacuolar tipo ABC
de levadura de fisión. J Biol Chem 1995, 270:4721-4728.
84. Pazirandeh M, Chrisey LA, Mauro JM, Campbell JR, Gaber BP: Expresión
del gen de la metalotioneína Neurospora-crassa en Escherichia coli y su
efecto sobre la captación de metales pesados. Appl Microbiol Biotechnol
1995, 43:1112-1117.
www.cienciadirecta.com
Machine Translated by Google
Metabolismo del arsénico por microbios en la naturaleza Tsai, Singh y Chen 667
85. Li Y, Cockburn W, Kilpatrick J, Whitelam GC: citoplasmática
expresión de un dominio alfa de metalotioneína de mamífero sintético soluble
en Escherichia coli: mayor tolerancia y acumulación de cadmio. Mol Biotechnol
2000, 16:211-219.
86. Bae W, Chen W, Mulchandani A, Mehra RK: Mejorado
bioacumulación de metales pesados por células bacterianas que presentan
fitoquelatinas sintéticas. Biotecnología Bioeng 2000, 70:518-524.
87. Bae W, Mehra RK, Mulchandani A, Chen W: Ingeniería genética de Escherichia
coli para mejorar la absorción y la bioacumulación de mercurio. Appl Environ
Microbiol 2001, 67:5335-5338.
88. Dhankher OP, Li YJ, Rosen BP, Shi J, Salt D, Senecoff JF, Sashti NA,
Meagher RB: ingeniería de tolerancia e hiperacumulación de arsénico en
plantas al combinar la expresión de arseniato reductasa y gamma-glutamilcisteína
sintetasa. Nat Biotechnol 2002, 20:1140-1145.
Un excelente artículo que muestra cómo el mecanismo de defensa contra el arsénico en
los microbios se puede aplicar a las plantas.
89. Song WY, Sohn EJ, Martinoia E, Lee YJ, Yang YY, Jasinski M, Forestier C,
Hwang I, Lee Y: ingeniería de tolerancia y acumulación de plomo y cadmio en
plantas transgénicas. Nat Biotechnol 2003, 21:914-919.
90. Sauge-Merle S, Cuine S, Carrier P, Lecomte-Pradines C, Luu DT, Peltier G:
Acumulación mejorada de metales tóxicos en células bacterianas modificadas
que expresan fitoquelatina sintasa de Arabidopsis thaliana. Appl Environ Microbiol
2003, 69:490-494.
Este documento informó el uso de E. coli productora de fitoquelatina como un biosorbente
potencial de acumulación de arsénico.
91. Rittle KA, Drever JI, Colberg PJS: Precipitación de arsénico durante la reducción
de sulfato bacteriano. Geomicrobiol J 1995, 13:1-11.
92. Wang CL, Maratukulam PD, Lum AM, Clark DS, Keasling JD: ingeniería
metabólica de una reducción de sulfato aeróbica
www.cienciadirecta.com
vía y su aplicación a la precipitación de cadmio en la superficie celular. Appl
Environ Microbiol 2000, 66:4497-4502.
93. Kostal J, Yang R, Wu CH, Mulchandani A, Chen W: Acumulación mejorada de
arsénico en células bacterianas modificadas que expresan ArsR. Appl Environ
Microbiol 2004, 70:4582-4587.
94. Singh S, Mulchandani A, Chen W: altamente selectivo y rápido
eliminación de arsénico mediante células de Escherichia coli modificadas
metabólicamente que expresan metalotioneína de Fucus vesiculosus. Appl
Environ Microbiol 2008, 74:2924-2927.
Por primera vez, se utilizó una metalotioneína capaz de unirse al arsénico junto con un
transportador de arsénico para la eliminación selectiva de arsénico.
Las celdas de reposo se pueden usar para eliminar por completo 35 ppb de As(III) en 20
minutos, lo que hace de esta una opción de bajo costo para la eliminación de arsénico del agua.
95. Dai MH, Copley SD: La combinación aleatoria del genoma mejora la degradación
del pesticida antropogénico pentaclorofenol por Sphingobium chlorophenolicum
ATCC 39723. Appl Environ Microbiol 2004, 70:2391-2397.
96. Crameri A, Dawes G, Rodríguez E, Silver S, Stemmer WPC:
Evolución molecular de una vía de desintoxicación de arseniato Mezcla de
ADN. Nat Biotechnol 1997, 15:436-438.
Uno de los pocos informes que muestra la aplicación de enfoques irracionales para la
evolución funcional del operón de resistencia al arsénico.
97. Chauhan NS, Ranjan R, Purohit HJ, Kalia VC, Sharma R: Identificación de
genes que confieren resistencia al arsénico a Escherichia coli de una
biblioteca metagenómica de lodos de una planta de tratamiento de
efluentes. FEMS Microbiol Ecol 2009, 67:130-139.
98. Singh S, Kang SH, Lee W, Mulchandani A, Chen W: Ingeniería sistemática de la
síntesis de fitoquelatina y el transporte de arsénico para una mayor acumulación
de arsénico en E. coli. Biotecnología.
Bioing., en prensa.
Opinión actual en biotecnología 2009, 20: 659–667