Obtención de fragmentos de ADN:

➢a) Enzimas de restricción (Tijeras moleculares)

➢b) Obtención de fragmentos de ADN por retrotranscriptasas

➢c) ADN sintetizado artificialmente

a) Obtención de fragmentos de ADN por enzimas de restricción (Tijeras moleculares): Los

enzimas de restricción son endonucleasas que producen, al reconocer secuencias
específicas de nucleótidos de un ADN, un corte del ADN en fragmentos más pequeños y
manejables.

A partir de fragmentos de ADN se puede llegar a obtener genotecas o bibliotecas genómicas.

Para hacer una genoteca el ADN a estudiar se divide en fragmentos utilizando enzimas de
restricción. Los virus son a menudo utilizados como vehículo de transporte de los fragmentos
obtenidos, insertando en el genoma del virus los fragmentos del ADN del organismo de interés.

b) Obtención de fragmentos de ADN por reversotranscriptasas. Dado que en los procariontes

no hay proceso de maduración del ARNm, si se desea intercalar un gen eucariótico en una
bacteria, no se puede introducir un segmento de ADN con intrones y exones, sino que se ha
de utilizar una enzima de origen vírico, denominada transcriptasa inversa o
retrotranscriptasa, para producir ADN a partir de una hebra de ARNm ya maduro (molécula
en la que ya no hay intrones).Posteriormente se ha de duplicar para que se forme ADN de
doble hélice, llamado ADN complementario (ADNc), y finalmente introducirlo en un vector
(un virus o un plásmido) para que lo transporte al interior de la bacteria.
c) ADN sintetizado artificialmente: ADN sintetizado artificialmente según el orden deducido de
la secuencia de aminoácidos de la proteína que se desea fabricar. Esto permite introducir
mutaciones y elaborar nuevas enzimas (enzimas de diseño). Se está trabajando en
hacer enzimas capaces de catabolizar el insecticida DOT o el petróleo y así, mediante
ingeniería genética, obtener bacterias que permitan es la recuperación de ambientes
contaminados por dichas sustancias.