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1. DATOS GENERALES
2. PROYECTO EN EXTENSO
Actualmente los microorganismos presentes en hortalizas como la lechuga han sabido adaptarse y
mostrar resistencia, dando paso a encontrar nuevos agentes antimicrobianos más eficaces. El objetivo
de esta investigación es evaluar la actividad antimicrobiana in vitro de los compuestos fenólicos del
sativa). Las muestras serán obtenidas en un mercado regional y se analizarán por un ensayo in vitro
Las frutas y verduras son alimentos esenciales en nuestra dieta puesto existe evidencia considerable
de sus beneficios en nuestra salud por ello existen microorganismos patógenos unidos a estos cuando
se consumen crudos que afecta nuestra salud los cuales en su mayoría provienen del tracto intestinal
de animales de sangre caliente, incluido el hombre. Se destacan Salmonella spp, y Escherichia coli,
momento de ingerir. La flor de Jamaica (Hibiscus sabdariffa) por su actividad antimicrobiana es una
alternativa para su uso como desinfectante en la lechuga (Lactuca sativa) por sus microorganismos
patógenos.
OBJETIVO GENERAL:
flor de Jamaica (Hibiscus sabdariffa ) contra (Escherichia coli O157:H7, Salmonella spp. y
OBJETIVOS ESPECÍFICOS:
agua destilada para evaluar el efecto antimicrobiano in vitro de las cepas patógenas presentes
spp. y Listeria monocytogenes) que proliferan en las muestras de lechuga fresca obtenidos
columna.
2.4 MARCO TEÓRICO (Antecedentes del trabajo)
conocida como roselle, acedera roja o karkadé.Esta planta es procedente de África y crece en zonas
tropicales y subtropicales como Sudán y el sur del continente de Asia y América. Además mencionar
que es una planta que contiene proteínas, grasas, carbohidratos, ácidos, minerales, vitaminas, así
Los cálices frescos o secos poseen una enorme trascendencia comercial y se usan en la preparación
de bebidas refrescantes, infusiones, licores, jaleas, mermeladas o como colorante por el contenido
Los compuestos fenólicos presentan efectos beneficiosos a la salud del ser humano.Dichos
compuestos se encuentran en el cáliz y los pétalos de las flores e incluyen ácidos orgánicos y
fenólicos como el ácido cítrico, el ácido hidroxicítrico, el ácido de hibisco y el ácido protocatecuico.
Los cálices tienen una alta concentración de flavonoides, como quercetina, miricetina, luteolina,
gosipitrina, hibiscitrina, hibiscetina, sabdaritrin y sus respectivos glucósidos, así como las
antocianinas que brindan el color rojo brillante (cyanidin-3 Glucoside, cyanidin-3 -sambubiosido y
antihipertensiva, etc.
bacterias (Rias y Chopra, 2018; Da Costa et al; 2014). Los compuestos de la flor de Jamaica
2017; Thakur et al; 2014). Otros estudios plantearon la síntesis y caracterización de mezclas como
mostraron un efecto antimicrobiano significativo (Abdelgany et al. 2019). Por otro lado, los extractos
crudos de semillas de la flor de Jamaica también presentaron un efecto antimicrobiano contra tres
tipos de bacterias Gram negativas: Salmonella, Shigella y Enterobacter (Nwaiwu et al, 2012).
La lechuga (Lactuca sativa L.) es consumida a nivel mundial, pero al ser un producto fresco es
patógenos que afectan la salud humano. La E. coli enterohemorrágica y Salmonella enterica son los
principales microorganismos que se encuentran en la lechuga (Anderson et al., 2011). Por otro lado,
son pocos los datos sobre la calidad microbiana y la seguridad de los cultivos de lechuga durante la
producción primaria ya que carecen de buenas prácticas agrícolas desde los fertilizantes orgánicos
utilizados, suelo, agua de riego, proceso de cosecha y la mano de obra durante el cultivo (Ceuppens
et al, 2014).
● TÉCNICO-SOCIAL
totalidad. Actualmente estos han desarrollado resistencia o adaptarse a un medio, se espera que esta
investigación sea una de las alternativas nuevas y naturales para un avance en la microbiología, ya
que controlar los microorganismos que generan enfermedades posee un gran impacto social.
● ECONÓMICO
Se espera usar los compuestos fenólicos extraídos del (Hibiscus sabdariffa L.) como un desinfectante
menos tóxico y brindar una alternativa económicamente viable. La flor de Jamaica tiene poder
antimicrobiano lo que es ideal para su venta como desinfectante natural y alternativa económica ya
que en el momento de adquirir los alimentos frescos como las frutas y hortalizas, en este caso la
lechuga fresca, es obligatorio realizar su saneamiento correspondiente puesto que la lechuga vendida
● AMBIENTAL
Dar a conocer el efecto que tienen los compuestos de la flor de Jamaica (Hibiscus sabdariffa L.) que
pueden ser utilizados en diversas áreas de microbiología, como industrial, ambiental, etc. Al evaluar
las bacterias de las hortalizas como la lechuga, que son cultivadas bajo tierra y muy pocas veces
suelos que se usan para su cultivo y entender la importancia de su intervención, ya sea perjudicial o
● PUBLICACIÓN EN REVISTAS
Se pretende publicar un artículo científico en revistas indexadas en Scopus o Web of science, con
Material vegetal
El material vegetal: Flor de Jamaica (Hibiscus sabdariffa L.) y la lechuga (Lactuca sativa) sin
Todos los demás productos químicos y reactivos como, etanol, metanol, acetona y agar Muller
MÉTODOS
Los extractos se prepararon con 10 g de la flor de jamaica secas usando agua destilada para su
correspondiente lavado (tres veces). La extracción se realizó a una relación de 1:10 g/ml a una
temperatura constante de 60-C durante 60 min,dicho extracto se filtró en una bolsa de gasa
Se utilizará la cromatografía líquida (método hplc MS/MS) En primer lugar se distribuye el extracto
de cálices de Jamaica en matraces y adicionar metanol, o acetona en una relación 1:9. Acopiar la
mezcla molida durante 7 días a temperatura ambiente. Filtrar después con un tamiz. Posteriormente
previamente activada a 120 °C. Mezclarla con el extracto seco hasta una consuma homogeneización
La capacidad antioxidante se realizó a partir del extracto de la flor a través del método de inhibición
del radical libre 2,2-Difenil-1-Picrilhidrazilo (DPPH) propuesto por Brand et al., (1995), dichos
valores fueron leídos a 515 nm a través de un espectrofotómetro UV-Vis (GENESYS 10S, Thermo
Scientific, EUA). Los resultados fueron expresados en miligramos de equivalentes de Trolox por
Luego de la extracción de la flor de Jamaica se observó el efecto de los extractos vegetales sobre
a) Ensayo in vitro.
Los métodos para evaluar la actividad antimicrobiana están clasificados en tres grupos principales:
Métodos de difusión, métodos de dilución y bioautofrafia (Stella y Marin, 2009; Mamani, 2016). En
Dilución en caldo S, I, R Si
Métodos automatizados S, I, R Si
E-test S, I, R Si
Fuente: (Stella y Marin, 2009; Mamani, 2016)
En los métodos de cultivo se encuentra el método de difusión en agar, donde se emplea el medio
Agar Mueller Hinton (AMH), Agar Glucosa-Peptona de Caseína, para desarrollo del género
Bacillus, y Agar Cetrimide para el desarrollo del género Pseudomonas. (Boeiro et al, 2012)
Por consiguiente, la actividad antimicrobiana se realiza mediante la prueba de difusión en agar para
seleccionar los mejores tratamientos, los cuales a su vez fueron evaluados por el método estándar de
● Preparación de inóculo
Para el aislamiento se activa la cepa Staphylococcus aureus subsp. Aureus en agar sal manitol. Se
en la incubadora. Para la preparación del inóculo se toman cinco colonias bien definidas con un
hisopo estéril y se inoculan en 5 ml de caldo cerebro corazón, incubando a 37 °C por 2 h hasta que se
● Cultivo Bacteriano
lleva a siembra en agar estirándose en forma paralela y compacta abarcando toda la superficie del
agar, repitiendo el proceso rotando la placa 60° en dos oportunidades más y dejando secar durante 5
min antes de colocar los discos. Estos se ubicaron en la placa de agar. Los discos se ubican en la
placa de agar con una pinza anatómica estéril a 15 mm del borde de la placa, presionando
puede realizar por medio de una regleta de medición y se interpreta los resultados como sensible (S),
La actividad antibacteriana, ocasionada por los extractos, fue evaluada en distintos patógenos de la
lechuga. Éstos se incubaron en CST (caldo soya tripticaseina) a la respectiva temperatura de cada
procede a mezclar 100 µL del cultivo (~108 cel/mL) con 15 mL de agar pozo (agar bacteriológico
más caldo soya tripticaseina), y posterior vertido en placas de Petri mezclando cuidadosamente el
inóculo con el medio; a las placas solidificadas se les realizaron pozos de 9 mm de diámetro. A cada
uno de estos pozos se les añadió un volumen de 100 μL de cada extracto de jamaica (a las
concentraciones de 1, 5,10, 15 y 20% mezclados con agua, etanol, ácido acético, acetona) y el
refrigeración a 4°C toda la noche. Pasado este tiempo se incubaron a la temperatura de cada
Análisis estadístico
Los resultados fueron sometidos a un Análisis de Varianza (ANOVA), para contrastar las medias de
los promedios de los halos de inhibición para las cepas de(Escherichia coli O157:H7, Salmonella
etanólico de Hibiscus sabdariffa “Flor de Jamaica”. Este análisis se complementó con la Prueba de
Tukey con un nivel de significancia de 0.05. Para todo ello se usó el software estadístico: Estadística
activity of Chitosan/ Polyvinyl Alcohol blend doped with Hibiscus Sabdariffa L. extract.
https://doi.org/10.1016/j.molstruc.2019.07.089
Anderson, M., Jaykus, L. A., Beaulieu, S., Dennis, S. (2011). Pathogen-produce pair attribution
risk ranking tool to prioritize fresh produce commodity and pathogen combinations for
Brand, W. W., Cuvelier, M., & Berset, C. (1995). Use of a free radical method to evaluate
Borras,I.,Fernandez,S.,Arraez.D.,Palmeros,P.,Del Val,R.,Andrade,I.,Fernandez,A.,Gomez,J. y
https://medicina.usmp.edu.pe/medicina/horizonte/2008_1/Art4_Vol08_N1.pdf
Castro, J y Gómez, C. (2017). Uso del Ácido Hibiscus y sus derivados como antimicrobianos
https://patentimages.storage.googleapis.com/dc/71/6d/ce6fea342abb5a/WO2017105211A1.pdf
Ceuppens, S., Hessel, C. T., de Quadros Rodrigues, R., Bartz, S., Tondo, E. C., & Uyttendaele, M.
https://doi.org/10.1016/j.ijfoodmicro.2014.04.025
https://repositorio.unprg.edu.pe/bitstream/handle/20.500.12893/10129/Chapo%c3%b1an_Vid
aurre_y_Limo_Arrasco.pdf?sequence=1&isAllowed=y
http://www.fcb.uanl.mx/IDCyTA/files/volume5/5/2/13.pdf
Da Costa,I., Bonnländer, B., Sievers, H., Pischel, I y Heinrich, M. (2014) Hibiscus sabdariffa L. –
https://doi.org/10.1016/j.foodchem.2014.05.002.
García, J., Medina, L., Mercado, J. y Baez, R. (2017). Evaluación de desinfectantes para el control
Alimentos,5(2020),227-232.http://www.fcb.uanl.mx/IDCyTA/files/volume5/5/3/46.pdf
México.
Lopez, G., Sumaya, M., Jimenez, E., Balois, R., Medina, R. y Guzman, J. (2017).Propiedades
61-69.https://dialnet.unirioja.es/servlet/articulo?codigo=6265604#:~:text=Diversos%20estudi
os%20proporcionan%20evidencias%20sobre,de%20anaquel%20de%20productos%20c%C3
%A1rnicos.
reducción microbiana y calidad de verduras de hoja verde. LWT, 154 (2022), 112696.
https://doi.org/10.1016/j.lwt.2021.112696
Farm.,48(3),521-527.http://www.scielo.org.co/scielo.php?script=sci_abstract&pid=S0034-74
182019000300521
Nwaiwu, N. E., Mshelia, F., & Raufu, I. A. (2012). Antimicrobial activities of crude extract of
Moringa Oleifera, Hibiscus sabdariffa and Hibiscus esculentus seeds against some
https://doi.org/10.1016/j.biopha.2018.03.023.
http://scielo.sld.cu/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S1729-519X2017000300011
Sotelo, D., Casas, F y Camelo, M. (2010). Borojó (Borojoa patinoi): Fuente de polifenoles con
actividad antimicrobiana. Vitae, 17(3), 329-336. Retrieved June 04, 2022, from
http://www.scielo.org.co/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0121-40042010000300011&lng=en
&tlng=es.
Thakur, R., Singh, R., Saxena, P., y Mani, A. (2014). Evaluación de la actividad antibacteriana de
Vargas,E.,Diaz,L.,Gonzalez,L.,Bernardino,A.,Castro,J.,Reynoso,R. y Gomez,C.(2018).Effects of
acid hydrolysis on the free radical scavenging capacity and inhibitory activity of the
https://doi.org/10.1016/j.indcrop.2018.02.044
ACTIVIDAD
Revisiones bibliográficas 1/04/2022 1/07/2022
Determinación de la capacidad
antioxidante por el método
(DPPH) 5/10/2022 6/11/2022
Cuantificación de
microorganismos (Escherichia
coli O157:H7)en hojas de
lechuga 11/10/2022 11/10/2022
CONTRAPARTIDA
Semestre de S/.
Descripción del Rubro o Solicitado Total
Rubro o Actividad planificación Fac. Inst. IGI S/.
Actividad Unid. Cant. Fac. Inst. S/.
del gasto partic. partic.
Ejecutora partic. 3
1 2
RUBROS IMPORTE 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18
1 SUBVENCIÓN
Profesores integrantes del equipo técnico - - - - - - - - - - - - - - - - - - -
Estudiantes de pregrado - - - - - - - - - - - - - - - - - - -
Estudiantes de posgrado - - - - - - - - - - - - - - - - - - -
4 EQUIPOS Y BIENES DURADEROS
Equipo de laboratorio 12471.14 x x
Adquisición de software especializado para 50 x
desarrollo
3 MATERIALES E INSUMOS
Materiales e insumos para prototipos y lotes 171.5 x
de prueba
Insumos de laboratorio 11748.3 x
4 SERVICIOS DE TERCEROS
Contratación de servicios tecnológicos 6500 x
especializados
Conexión a redes telemáticas
Análisis de Laboratorio 52100.4 x x
5 PASAJES Y VIÁTICOS A CONFERENCIAS