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All content following this page was uploaded by Diego Sebastian Cristos on 11 May 2016.
Contacto: cristos.diego@inta.gob.ar
INTRODUCCIÓN OBJETIVO
Los alcaloides pirrolizidínicos (AP) y sus N-óxidos son para la FAO Desarrollar y evaluar una metodología capaz de
probablemente las toxinas naturales de mayor distribución, que afectan a analizar AP en miel, que sirva como alternativa a
la fauna silvestre, el ganado y el ser humano. Estas toxinas son un grupo las metodologías ya existentes logrando los limites
amplio de metabolitos producido por plantas y se encuentran en una de detección impuestos por los países importadores
amplia variedad de especies en la naturaleza. Los brotes de toxicidad en de mieles.
animales de granja provocan graves pérdidas económicas para los
granjeros y comunidades rurales, y existen posibles riesgos para el ser
humano por la ingesta de alimentos de origen vegetal o animal
contaminados con AP.
Los AP no son tóxicos por sí mismos, sino a través de sus productos
metabólicos, ya que son transformados por las enzimas hepáticas en
pirroles, que son los que causan daño a nivel cromosómico. La molécula
de AP comprende un heterociclo pirrolizidínico, con un grupo metilo y un
sustituyente hidroxilo (necina). Existen 4 bases necinas: retronecina,
heliotridina, otonecina y platinecina. Dadas todas las combinaciones
químicas posibles de estas estructuras, podría haber muchísimas
moléculas diferentes de AP.
Desde que la OMS recomendó minimizar la exposición cuando fuera
posible a AP, varias agencias internacionales pusieron el tema en sus
agendas y regularon los límites de ingesta. Debido a la falta de datos, en
la mayoría de los casos no se tuvieron en cuenta alimentos como leche o
miel, pero se aconsejó realizar un examen del posible aumento de la
exposición de los consumidores a AP insaturados.
MATERIALES Y MÉTODOS
Identificar y cuantificar los AP en nuestro país son un dato clave para
poder aplicar prácticas de gestión, que permitan reducir la exposición de
la población y dar un valor agregado a la producción apícola Argentina. Entre las metodologías ensayadas (extracción-
purificación) se evaluaron: extracción líquido-líquido,
QuEChERS, distintas reducciones a n-óxidos y
purificación mediante SPE-SCX (Extracción en Fase
RESULTADOS Solida De Intercambió Catiónico Fuerte). El extracto
purificado fue analizado mediante HPLC-MS/MS
La metodología de SPE-SCX fue la que obtuvo mayor recuperación (75% - (LTQ-XL Linear Ion Trap Thermo, San Jose, CA,
83%), logró mejor reproducibilidad y límites de detección más bajos; USA), mediante el modo de ionización ESI Positivo.
eliminando mayor cantidad de interferencias de la matriz disminuyendo así
el ruido de fondo de la señal analítica. Los límites de detección obtenidos,
calculados en función de la relación señal ruido, para matrices con agregado
de estándares fueron en promedio LD 0,15 ug/kg (S/N:3) y LQ 0,50 ug/kg
(S/N: 10). Abajo se ven las figuras de los principales AP.
CONCLUSIONES
Este método se añade como alternativa a los métodos ya existentes para el análisis de AP en miel. Como perspectiva, se prevé la
utilización de este mismo para el descubrimiento, la identificación y cuantificación de otros AP que se encuentren en mieles de
nuestro país.
Además, este método sirvió como base para la puesta a punto de análisis de AP en otras matrices, como Yerba, Te y Malezas, que
permitirá obtener una visión global del los problemas de los AP en miel.
Este trabajo forma parte de los proyectos INTA PNAPI-1112043. Estrategias para agregar valor a la producción apícola argentina y
Proyecto INTA PNAIyAV-1130042. Herramientas y sistemas para la gestión de la calidad integral.
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