UNIVERSIDAD NACIONAL

‘’SIGLO XX’’

BIOQUIMICA – FARMACIA

BIOLOGÍA Y GENÉTICA

PRÁCTICA 14
GRUPOS SANGUÍNEOS SISTEMA ABO Y
FACTOR Rh EN TUBO

ELABORADO: Rocío Cruz Hurtado

DOCENTE: Miriam Molle García

CURSO PRIMERO
FECHA 24-10-23
OBJETIVOS
La finalizar la práctica el estudiante será capaz de:
 Realizar la toma de muestra de sangre adecuadamente.
 Identificar los grupos sanguíneos en placa y en tubo
 Identificar el factor Rh en placa y en tubo
MARCO TEÓRICO
MATERIALES
 Tubos de ensayos
 Marcador de vidrio
 Pipeta Pasteur desechable
 Centrifuga y gradilla
REACTIVOS
 Suero anti-A
 Suero anti-B
 Suero anti-D
 Solución salina fisiológica
MUESTRA
 Sangre total anticoagulada, para Esta técnica es preferible usar una
suspensión de los hematíes problema. Desarrollo de la clínica de los
grupos sanguíneos
DESARROLLO
La importancia clínica de los grupos sanguíneos radica en su participación
tanto en las reacciones hemolíticas pos transfusionales, como en la
enfermedad hemolítica del recién nacido. Los antígenos del grupo
sanguíneo que se localizar en la membrana celular también proporcionan
marcadores de genes que se utilizan en antropología para estudios
genéticos en poblaciones humanas y tienen importancia médico-legal en
relación con la paternidad y con los problemas criminalísticas.
El importante descubrimiento de los eritrocitos humanos pertenece a
diversos sistemas antigenicos los efectuó Landsteiner en 1990, quien
identifico el sistema de antígenos sanguíneos ABO. Este sistema incluye
cuatro tipos principales de grupos sanguíneos A, B, AB y Q
Los antígenos Ay B se hallan en los eritrocitos y las aglutininas antia y anti
B se encuentran en el suero en forma recíproca
 Una persona que pertenece al grupo sanguíneo AB tendrá antígenos
A y B en los eritrocitos y no tendrá aglutininas en el suero.
 Una persona del grupo O no poseen antígenos A ni antígeno B en
sus hematies, pero on tiene ambas aglutininas anti-A y anti B en el
suero.
 Una persona del grupo A muestra antígeno B en los hematíes y
aglutininas anti-B en el suero
 Una persona del grupo B muestra antígeno B en los hematies y
aglutininas anti-A en el suero.
Así el grupo sanguíneo puede determinar mediante la observación de las
reacciones de los hematíes sometidos a contacto con suero anti-A y anti- B
llamado tipificación sanguínea
TIPIFICACIÓN SANGUINEA
FUNDAMENTO
Se basa en la aglutinación de los hematíes o glóbulos rojos mediante
lareacción antígeno- anticuerpo.
 Si la sangre aglutina con el anti-A el grupo sanguíneo es A
 Si la sangre aglutina con el anti-B el grupo sanguíneo es B.• Si la
sangre aglutina con el anti-A y con el anti-B el grupo sanguíneo es
AB.
 Si la sangre no aglutina con el anti-A el grupo sanguíneo es O.
Está comprobada la existencia de varios subgrupos de A. Lo más
importante son A, y*A_{2} En consecuencia, se admiten grupos A_{1},
A_{2}, A_{18}, A_{25}
Alrededor del 80% de las personas del grupo sanguíneo A pertenecen
alsubgrupo A_{1} y el 209% del subgrupo A_{2}
El 60% del grupo sanguíneo AB pertenecen al subgrupo A_{1B} ) el 40%
son del subgrupoA
Los eritrocitos del subgrupo A_{1} se aglutinan más intensamente con
sueros anti-Aque los del grupo A_{2} y algunos de estos pueden ser
inadvertidos a menos quese empleen suero anti i - A que reaccione
intensamente a células A_{2}. El antisuero anti AB no se usa para la
detección del grupo sanguíneo AB si nose usa para detectar subgrupos
débiles del A y B. Por tanto una sangre que noaglutino con anti-A o con
anti-B y lo hacen con anti-AB debe considerarsecomo un subgrupo débil
de cualquier de los dos grupos, en este caso laclasificación precisa deberá
hacerse en un banco de sangre especializado. El factor Rh fue descubierto
por Landsteiner y Winer en 1940 observaron queel suero del conejo que
habías recibido inyecciones de hematíes del mono. Rhesus aglutinaba los
glóbulos rojos de 85% de las personas, sin relación con los demás grupos
sanguíneos. El nuevo sistema recibió el nombre de Sistema Ph. Las
personas que tienen el antígeno D (Rh) se denominan "Rh positivos y las
personas que carecen del antígeno D se denominan "Rh negativos".
 Si la sangre del paciente aglutina con el anti-D el paciente es Rh
Positivo.
 Si la sangre del paciente no aglutina con el anti-D el paciente es Rh
negativo
PROCEDIMIENTO
 En primer lugar, realizamos el lavado de los hematies problema.
Para ello rotulamos convenientemente un tubo centrifuga. Para ello
rotulamos convenientemente un tubo de centrifuga y añadimos I
ml. De la muestra de sangre completamos el tubo con solución
salina (10cc.) y agitamos para suspender los hematies.
Centrifugamos a 2000 rpm, durante 4 minutos, luego decantamos el
sobrenadante.
Al sedimento de los hematies le añadimos 2ml de solución salina
Rotular dos tubos de ensayo bien limpios con letras A y B
Ir a cada Añadir a cada tubo una gota de suspensión de hematíes
Añadir dos gotas de suero Anti-A en el tubo A y dos gotas de suero.

Anti-B en el tubo B. . Centrifugamos los dos tubos durante I minuto

a 1000 rpm o 30 segundos a 3.400 rpm. (centrifuga de
inmunohematologia)
LECTURA DE RESULTADOS
Después de centrifugar: Observamos un botón de hematies,
golpeamos con el dedo, suavemente el fondo de cada tubo para
desprender el sedimento y observamos la presencia o ausencia de
aglutinación, mejor si es microscópicamente.
*Resultado Positivo*
Si observa el botón de hematies permanece unido una vez
desprendido el sedimento
*Resultado Negativo*
Se observa que el botón de hematies se re suspende
homogéneamente
DETERMINACIÓN CELULAR DEL GRUPO Rh EN TUBO
Para la realización de estas técnicas (en porta o tubo) empleamos
unos sueros ant-D que pueden ser de dos tipos salino o
albuminoideo (este último son los más utilizados y se preparan en
un medio enriquecido con albumina).
Los hematies pueden revertirse in vivo de anticuerpos o proteinas
plasmáticas anormales, y en presencia de albumina producir una
agregación que daría la idea de aglutinación positiva. Por ello
empleamos un control de albúmina de manera que si aparece en
este tubo debemos repetir la prueba, pero usando un suero anti-D
en medio salino.
FUNDAMENTO
Evidenciar la presencia del antígeno D en la superficie de los
hematies mediante el enfrentamiento con el suero anti-D.
PROCEDIMIENTO
•Primeramente, debemos proceder a realizar un lavado de glóbulos
rojos con una solución salina, para ello colocamos en tubo de
centrifuga 0.5 ml de sangre problema, completamos 8 ml de
solución salina, tapamos el tubo y mezclamos por inversión del tubo
para re suspender los hematies.
•Centrifugamos durante 4 min. A 2000 rpm.
•Posteriormente retiramos el sobrenadante, repetimos este proceso
dos veces más.
•Luego de la tercera lavada Re suspendemos el sedimento hemático
con 3ml de solución salina.
•Rotulamos un tubo limpio con la letra D.
 •En el tubo D añadimos una gota de la suspensión de hematíes, y
una gota de suero anti-D, agitamos suavemente para mezclar el
contenido de tubo.
•Centrifugamos durante 1 min. A 1000 r.p.m.

CONCLUSIÓN
 No todos tenemos el mismo tipo de sangre
 Que es necesario hacer bien el trabajo para tener resultados
positivos
 Se necesita 5 ML de sangre.
BIBLIOGRAFÍA
MANUAL DE PRACTICA DE LABORATORIO