BIOQUÍMICA

Semana 7-Sección 13
2020
Ciclo del ácido cítrico

Facultad de Ciencias de la Salud

Bioquímica – Dra. María del Pilar Navarro
mnavarron@ucientifica.edu.pe
APLIQUEMOS LO APRENDIDO

4
Logro de sesión de aprendizaje

Conocer aspectos generales y

puntos de control del ciclo de Krebs
Agenda:
-Definición de ácido cítrico
-Historia
-Glicólisis-balance de ATP
-Proceso que inicia con la oxidación completa de derivados de
la glucosa hasta co2.
-Aspectos generales del ciclo de Krebs.
-Conexión de glicolisis con el ciclo de Krebs.
-Descarboxilación oxidativa del piruvato a acetil-CoA.
-Etapas de la descarboxilación oxidativa del piruvato a acetil-
CoA.
-Reacciones del ciclo de Krebs.
-Regulación del ciclo de Krebs
-Conclusiones
 Ciclo del ácido cítrico

(ciclo del Krebs o ciclo de los ácidos

tricarboxílicos)
Es el centro bioquímico de la
célula, oxidando los compuestos
carbonados, en forma de acetil-
CoA, sirviendo también como
ATP fuente de precursores para la
biosíntesis (almacenamiento de
energía, aminoácidos, bases de
nucleótidos y porfirina).
HISTORIA

El nombre de ciclo de Krebs recibe su nombre en honor al

Hans Adolf Krebs, quien en conjunto con su grupo de
investigación propuso los componentes centrales de esta
ruta metabólica en 1937 (Premio Nobel de fisiología y
medicina en 1953 con Fritz Albert Lipmann)

8
 INTEGREMOS LO APRENDIDO

BALANCE ENERGÉTICO
• Produciéndose 4 ATP
• Gasto de 2 ATP
GLICOLISIS

• Producción neta es de 2 ATP

Ecuación de la reacción:
Glucosa+2 NAD+ + 2 ADP + 2Pi 2 piruvato + 2 ATP + 2 NADH

La mayor cantidad de ATP

proviene por oxidación aeróbica
de la glucosa.

Acta Med Per 24(3) 2007

Proceso que inicia con la oxidación completa de
derivados de la glucosa hasta CO2

Esta oxidación total se realiza a nivel mitocondrial en

unas serie de reacciones de oxidación y reducción
denominado Ciclo de Krebs (ciclo de ácido
tricarboxílico (TCA) o ciclo de ácido cítrico) que
conduce a la oxidación del acetilo hasta 2 moléculas
CO2.

10
Aspectos generales del ciclo de Krebs
Ciclo TCA: Es la vía final de
oxidación de moléculas energéticas
(carbohidratos, ácidos grasos y
aminoácidos)

Moléculas energéticas: son

compuestos carbonados susceptible
de ser oxidados por pérdida de
electrones

11
 Condiciones Aerobias

Piruvato Citoplasma

descarboxilación oxidativa

Acetil-CoA

Interior de la mitocondria
 Aspectos generales del ciclo de Krebs

• El oxaloacetato se condesa con el

Inicia el 1er paso del ciclo y se C2 acetil-CoA formando Citrato.
regenera al final de una vuelta del ciclo C6 • Un compuesto de 6 átomos de
carbono, libera dos veces CO2, en
C4 dos descarboxilaciones oxidativas
que proporcionan electrones de
alta energía (3 NADH y 1 FADH2).
• Se forma Succinato, es
transformado regenerando
Oxaloacetato.
• Dos átomos de carbono entran en
C4 el ciclo como acetilo y dos átomos
de carbono dejan el ciclo como
CO2.
Aspectos generales del ciclo de Krebs

La función específica del ciclo de Krebs es la producción

de electrones de alta energía a partir de combustibles
carbonados.

14
Aspectos generales del ciclo de Krebs
La reducción de O2 y la
síntesis de ATP
constituye la
Fosforilación oxidativa

sintetizar
Reducción

3 NADH 1 FADH2 Rinden 9 ATP al

oxidarse en la
fosforilación oxidativa
15
Conexión de glicolisis con el ciclo de Krebs

16
Descarboxilación
oxidativa

17
Conexión de glicólisis con el ciclo de Krebs
PROTEÍNA MATRIZ MITOCONDRIAL
TRANSPORTADORA
ESPECÌFICA
• Esta reacción es
irreversible.
• Es la conexión entre
glicólisis y el ciclo de
Piruvato
deshidrogenasa TCA

PIRUVATO

DESCARBOXILACIÓN OXIDATIVA

Ecuación general
Piruvato

Piruvato + CoA + NAD+ acetil-CoA +CO2 + NADH + H+

deshidrogenasa
Descarboxilación oxidativa del piruvato a acetil-CoA

Dihidrolipoilo
deshidrogenasa
Componente
grupo prostético: piruvato
FAD deshidrogenasa
grupo prostético:
Tiamin pirofosfato
(TPP)

Dihidrolipoilo
transacetilasa
grupo prostético:
Lipoamida

Complejo piruvato deshidrogenasa

19
Conversión del piruvato a acetil-CoA
Pasos de la descarboxilación oxidativa por el complejo piruvato deshidrogenasa

3. Formación de
1. Descarboxilación 2. Oxidación
acetil-CoA

1 2 3

• Tiamina pirofosfato (TPP), ácido lipoico, FAD (cofactores catalíticos)

• CoA y NAD+ (Cofactores con función de sustrato)
20
Etapas de la descarboxilación oxidativa del piruvato a acetil-CoA

1. Descarboxilación

Esta reacción esta catalizada por el componente piruvato deshidrogenasa (E1)

y su grupo prostético: Tiamin pirofosfato (TPP)

21
Etapas de la descarboxilación oxidativa del piruvato a acetil-CoA

2. Oxidación:

• El grupo OH-etil-TPP se oxida para formar un grupo acetilo, quien se transfiere a lipoamida
(derivado del ácido lipoico).
• La transferencia forma un enlace tioéster rico en energía.
• Producto de reacción: Acetil-lipoamida
• Reacción catalizada por: Componente piruvato deshidrogenasa.
22
Etapas de la descarboxilación oxidativa del piruvato a acetil-CoA

3. Formación de acetil-CoA

Reacción catalizada por Dihidrolipoilo transacetilasa (E2), grupo protético: Lipoamida

• Con esta reacción se obtiene el combustible del ciclo TCA.

• La dihidrolipoamida debe ser oxidado a lipoamida por la dihidrolipoilo
deshidrogenasa, transfiriendo electrones al FAD y luego al NAD+
23
 Etapas de la descarboxilación oxidativa del piruvato a acetil-CoA

4. Regeneración de la forma oxidada de la lipoamida

por la dihidrolipoilo deshidrogenasa

24
INTEGREMOS LO APRENDIDO

La conversión del piruvato a acetil-CoA por el complejo piruvato

deshidrogenasa es la conexión entre la glicolisis y la respiración celular, debido
a que el acetil-CoA es el combustible del ciclo de ácido cítrico.

25
Reacciones del ciclo de Krebs

26
Reacciones del ciclo de Krebs

27
1. Conversión del acetil-CoA a citrato

- El ciclo de Krebs inicia con la condensación del oxalacetato (C4),

con el grupo acetilo del acetil-CoA (C2) y H2O para formar citrato
y CoA.

oxalacetato Acetil-CoA Citril-CoA Citrato

• Tipo de reacción: Condensación aldólica+hidrólisis

• Reacción catalizada por: Citrato sintasa
• Mecanismo de catálisis: Aproximación y orientación
28
Reacciones del ciclo de Krebs

29
2. Conversión del citrato a isocitrato
- El citrato se isomeriza a isocitrato.
- El grupo OH terciario se encuentra situado inadecuadamente en el
citrato para llevar a cabo la descarboxilación.
- La isomerización se lleva a cabo por etapa de deshidratación e
hidratación.

Aconitasa Aconitasa

La Aconitasa es una ferro-sulfo-proteína con hierro no hemo

30
Reacciones del ciclo de Krebs

31
3. Oxidación y descarboxilación del isocitrato
hasta α-cetoglutarato

-La primera reacción de las cuatro reacciones de oxidación-reducción del ciclo de Krebs.
- La descarboxilación del isocitrato esta mediado por la isocitrato deshidrogenasa.

Oxida-reducción Descarboxilación

Intermediario
β-Cetoácido inestable

Ecuación de la reacción:
Isocitrato + NAD+ α-cetoglutarato+CO2 +NADH
Primer portador de
energía en el ciclo
Reacciones del ciclo de Krebs

33
4. Descarboxilación oxidativa del α-cetoglutarato a
succinil-CoA
- El α-cetoglutarato presenta una segunda reacción de descarboxilación oxidativa con la
formación del succinil-CoA.

Succinil CoA:
-Compuesto tioéster rico en
energía
-delta Gibbs de hidrólisis de
este compuesto es -33,5 Kj
mol-1

Reacción catalizada por α-cetoglutarato

deshidrogenasa
Reacciones del ciclo de Krebs

35
5. Conversión del succinil-CoA a succinato y formación de ATP

- La ruptura del enlace tioéster de succinil-CoA se acopla a la fosforilación de un nucleósido

difosfato de purina, ADP.
- La reacción es catalizada por la succinil-CoA sintetasa.

ADP ATP

Esta es la única reacción del ciclo que proporciona de manera

directa un compuesto con un alto potencial de transferencia de
fosforilo.
Reacciones del ciclo de Krebs

37
6. Regeneración del Oxaloacetato por oxidación del succinato

-Última reacción del ciclo, que esta formada por reacciones mediadas por
compuestos de 4 átomos de carbono.

Succinato deshidrogenasa Fumarasa

Oxidación Hidratación

El cambio de
energía es
insuficiente
para reducir a
NAD+ Malato deshidrogenasa
Oxidación

Succinato deshidrogenasa: Ferro-sulfo proteína.

• Presenta una parte integral a la membrana interna de la
mitocondria
• Esta enzima esta directamente a la cadena de transporte de
electrones. 38
Reacción general del ciclo de Krebs
Acetil-CoA + 3 NAD+ + FAD +ADP + Pi +2 H2O 2CO2 + 3NADH + FADH2 + ATP + 2 H+ + CoA
39
Ciclo de ácido citrico
Grupo Tipo de
Pasos Reacción Enzima prostético Rx

40
41
Regulación del ciclo de Krebs

42
1. Piruvato
deshidrogenasa

Enzimas
alostéricas
isocitrato
deshidrogenasa
2.
α-cetoglutarato
deshidrogenasa
3.

43
 Regulación del ciclo de Krebs
Regulación por
productos

Descarboxilación Acetil-CoA Altas concentraciones

oxidativa NADH
de intermediarios y de
producto final (ATP)
desactivan al complejo
PDH
INCORPORACIÓN A
OXIDACIÓN Acetil-CoA:
LÍPIDOS
Inhibe transacetilasa (E2)
ciclo de Krebs NADH:
Generación de energía Dihidrolipoilo
deshidrogenasa (E3)
Esta inhibición tiene el efecto de ahorrar glucosa. 44
Regulación covalente
Piruvato deshidrogenasa quinasa 1 (PDK1)
Piruvato deshidrogenasa
Piruvato deshidrohenasa fosfatasa

Fosforilación

Desfosforilación

45
Regulación covalente

REPOSO: NO HAY DEMANDA DE ENERGÍA

Concentraciones
elevadas de Acetil-
CoA/NADH/ATP
CON CARGA ENERGÉTICA
ELEVADA SE DESACTIVA LA
Fosforilación del PIRUVATO DESHIDROGENASA
complejo piruvato
deshidrogenasa

INACTIVA

46
Regulación covalente
ACTIVIDAD: EJERCICIOS
Concentraciones elevadas de
ADP y piruvato a medida que la
contracción muscular consume
ATP

Conversión de CON BAJA CARGA ENERGÉTICA

SE ACTIVA LA PIRUVATO
glucosa a piruvato DESHIDROGENASA
(Glicolisis)

Satisfacer las
necesidades energéticas
47
 Regulación covalente
ACTIVIDAD: EJERCICIOS

ADP Activar Inhibición

de la PDH
Piruvato a la PDH quinasa 1

Aumenta la
PDH concentración
fosfatasa Contracción muscular
de calcio
citoplasmáticos
Aumenta la
concentración de
calcio mitocondrial
Regulación hormonad de la PDH fosfatasa

Ciclo de Krebs Conversion de piruvato a

acetil-CoA

Activa a la PDH

Activación de la PDH
fosfatasa

49
Regulación hormonad de la PDH fosfatasa
Insulina

Estimula la PDH
fosfatasa

Precursor de
síntesis de ácidos
grasos

50
Regulación del ciclo de Krebs

51
 ¿Qué pasa en personas con deficiencia de
fosfatasa?
No hay formación
La glucosa se fermenta
conversión de piruvato
a ácido láctico
a acetil-CoA

52
Regulación del ciclo de Krebs

2. ISOCITRATO DESHIDROGENASA
FAVORECIDA INHIBICIÓN

Estimulada El ATP y el NADH

alostéricamente por
el ADP

Aumenta la afinidad
del E por el S

El citrato se transporta al plasma y es

inhibidor de fosfofructoquinasa,
deteniendo la glicolisis
53
Regulación del ciclo de Krebs

3. ALFA-CETOGLUTARATO DESHIDROGENASA

INHIBICIÓN
SUCCINIL-CoA, NADH y ATP

El alfa-cetoglutarato es
precursor de aminoácidos y de
bases púricas
54
55
 • El ciclo de Krebs es la ruta final común para
la oxidación aeróbica de moléculas
energéticas.

Conclusiones • El ciclo es una fuente importante de

biomoléculas precursoras para los procesos
de biosíntesis.

• Por sus función de centro metabólico de la

célula presenta diversos puntos de control.

56
 Referencias

Ferrier, D., Jameson, B. y León Jiménez, R. (Trad.) (2015). Memorama: Bioquímica. Wolters Kluwer Health.
Disponible en Biblioteca virtual: https://elibro.net/es/ereader/ucsur/125904

Murray, R, y Bender, D. (2013). Harper, Bioquimica ilustrada. 2.ª ed. México, D.F:McGrawHill. Disponible en
Biblioteca: F / 612.015 / M975 / 2013

Riveros Rosas, H. y Martínez Montes, F. (2018). Bioquímica de Laguna y Piña. 8.ª ed. México: El Manual
Moderno. Disponible en Biblioteca virtual:https://elibro.net/es/ereader/ucsur

Stryer, L., Berg, JM, Tymoczko, JL. (2003). Bioquímica. 5.ª ed. Barcelona: Reverté. Disponible en Biblioteca:
612.015 / S83

Villavicencio, M., y Ayala, G. (2010). Texto de bioquímica: bioquímica básica; bioquímica metabólica. 2.ª ed.
Lima: CONCYTEC. Disponible en Biblioteca:612.015 / V66 / 2010

57
ACTIVIDAD ASINCRÓNICA

Actividad de Aula Virtual

 Cuestionario semana 7

58
GRACIAS
Cursos Básicos Ciencias
Bioquímica – Dra. María del Pilar Navarro
mnavarron@ucientifica.edu.pe