Facultad de Ciencias Naturales

Laboratorio de Biología Celular

Alumno: __________ _________________________________Código:

Alumno: __________________________________________ Código:

Laboratorio 1: Introducción al microscopio y

descubriendo la célula, una revisión histórica e
histológica

OBJETIVOS:
Conocer las normas básicas de seguridad para trabajar en el laboratorio,
especialmente en lo relacionado con: el vestuario, comportamiento,
bioseguridad. Manejo de equipos y materiales.
Familiarizarse con el uso y función de los equipos de laboratorio,
especialmente con el microscopio y el estereoscopio.
Determinar la magnificación de los oculares, los objetivos y calcular la
magnificación total del microscopio óptico.
Aprender el protocolo correcto para observar micro-preparados en el
microscopio y reconocer los tipos de muestras que generaron la teoría celular.
Identificar y describir las diferencias entre las células animales y vegetales.

LAS MEDIDAS DE SEGURIDAD EN EL LABORATORIO

Normas básicas de seguridad en el laboratorio de biología celular.

El laboratorio de biología celular es un espacio donde se pueden presentar algunos

imprevistos, tales como incendios, intoxicaciones, contaminaciones, quemaduras o heridas.
Sin embargo, estos riesgos se pueden minimizar, si se aplican las debidas normas de
seguridad y se toman las respectivas precauciones para el buen desarrollo de las prácticas.

Para trabajar en un laboratorio, es necesario saber con antelación qué se va a hacer, con
qué materiales se va a trabajar y cómo se deben usar; esto evitará inconvenientes asociados
a la falta de información.

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Entre las principales normas de seguridad que deben cumplir los estudiantes, se encuentran:
Vestuario

✔ Ingresar al laboratorio con la bata puesta y abotonada.

✔ Utilizar siempre zapatos cerrados
● NO usar vestimenta corta ni joyas y mantener el cabello recogido

Comportamiento

✔ Utilizar los elementos de Bioseguridad pertinentes (Bata, guantes, gafas,

tapabocas, etc.)
●NO fumar, comer, beber o mascar chicle.
●NO pipetear con la boca.
●NO correr, gritar, empujarse, o causar pánico.
●NO arrojarse líquidos o reactivos.
●Está PROHIBIDO el uso de teléfonos celulares y computadores portátiles
dentro del laboratorio.
✔ Utilizar los elementos del laboratorio únicamente dentro de este.
✔ Conocer la ficha técnica de un reactivo previa manipulación.
● NO utilizar los equipos del laboratorio sin conocer las instrucciones de manejo.
● En caso de embarazo NO manipular sustancias tóxicas.
✔ Informar inmediatamente de cualquier derrame ocurrido en el laboratorio.

Bioseguridad

● NO es permitido manipular las manijas de las puertas con los guantes puestos.
● Desechar los guantes usados ÚNICAMENTE en la bolsa roja.
● NO tocarse el rostro, los ojos, la nariz, la boca, el cabello o la piel en general
con los guantes puestos.
✔ Cumplir con el programa de vacunación establecido por la Universidad Icesi,
para el ingreso a los laboratorios (vacuna contra el tétano).
✔ Seguir los procedimientos establecidos por el profesor del laboratorio, para el
manejo de preparados y micro-preparados.
✔ Si sus manos han entrado en contacto con muestra de agua, animales o plantas
acuáticas, al terminar su manipulación, debe lavarse las manos con agua y jabón.
● NO introducir ningún elemento a la boca.
✔ Identificar la ubicación de la ducha lavaojos, extintores y salidas de
emergencias.
✔ En caso de emergencia, de aviso al profesor o persona encargada del laboratorio
y comuníquese a la línea #00 para obtener ayuda.

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Manejo de equipos y Materiales

✔ Cada estudiante es responsable de su área de trabajo.

● NO trabajar lejos de la mesa de laboratorio, no colocar objetos en el borde
✔ Verificar que el material de vidrio esté en buenas condiciones en el momento de
recibirlo y devolver el material astillado o quebrado a la persona responsable.
✔ Depositar el material de vidrio roto en el lugar apropiado para tal fin (tarro
blanco).
✔ Reportar al profesor el material / equipo: quebrado, extraviado o dañado.

INSTRUMENTOS DEL LABORATORIO Y SU USO CORRECTO:

ESTEREOSCOPIO Y MICROSCOPIO

● EL ESTEREOSCOPIO

El Estereoscopio (Microscopio Estereoscópico o Microscopio de disección) es un

instrumento de precisión óptica que permite una visión tridimensional de objetos y
especímenes demasiado pequeños para ser estudiados a simple vista. Su principal
diferencia con el Microscopio Compuesto es que proporciona una menor
magnificación de la imagen (2 - 10 x), lo cual permite observar objetos gruesos y
opacos, de un tamaño mayor a 1 mm, como insectos, hojas, colonias de
microorganismos, entre otros.

Las partes que componen un estereoscopio son:

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● EL MICROSCOPIO COMPUESTO

El microscopio es un instrumento óptico que amplifica la imagen de especímenes cuyo

tamaño es inferior a 1mm (células animales, vegetales, bacterias, hongos etc.); esto, gracias
a un sistema de lentes que permiten el paso de los rayos de luz a través del objeto hasta
llegar a los ojos del observador.

Las partes que componen un Microscopio son:

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Las partes del microscopio se han agrupado en tres sistemas dependiendo de la función que
cumplen:

● Sistema óptico: Comprende el juego de lentes que permiten la magnificación de los

objetos o especímenes. Forman parte de éste sistema: los oculares y los objetivos.

El sistema de oculares viene equipado con un par de lentes que magnifican la imagen
entre 10 y 20 veces (Aumento 10 – 20x). Adicionalmente permite hacer dos tipos de
ajuste: la distancia interocular y el grado de dioptría (grado de miopía o
hipermetropía), permitiendo que cada usuario obtenga la corrección óptica
correspondiente.

Los objetivos son el grupo de lentes que se encuentra más cerca del micro-preparado;
comúnmente los han clasificado en dos tipos: los Objetivos Secos y el Objetivo de
Inmersión.

● Objetivos Secos: Son los objetivos de menor aumento (4x, 10x, 40x) y se utilizan
para realizar enfoques simples. Permiten una magnificación de 4, 10, o 40 veces
el objeto observado, es decir:

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 Si un objeto mide 0.5 milímetros (500 micrómetros), al verlo con un aumento de
4x se observará de 2 mm, con 10x de 5 mm y con 40x de 20 mm.

0.5 mm x 4 = 2 mm
0.5 mm x 10 = 5 mm
0.5 mm x 40 = 20 mm

Sin embargo hay que recordar que en el microscopio, los oculares introducen otro
aumento a la imagen, si este aumento fuera de 20x lo que obtendríamos sería que
observándolo con el objetivo de 4x se vería de 40 mm, con el de 10x se vería de
100 mm y con el de 40x se vería de 400 mm.

0.5 mm x 4 x 20 = 40 mm (80 veces más grande)

0.5 mm x 10 x 20 = 100 mm (200 veces más grande)
0.5 mm x 40 x 20 = 400 mm (800 veces más grande)

Este tipo de objetivos es de gran utilidad para observar animales pequeños

(copépodos, ostrácodos, pulgas de agua), amebas, ciliados, entre otros.

● Objetivo de Inmersión: Es el objetivo de mayor aumento, magnifica la imagen

100 veces (100x). Permite la observación de organismos muy pequeños, tales
como bacterias o protozoarios diminutos. Para usar correctamente el objetivo de
inmersión, es necesario colocar una gota de aceite de inmersión entre el objetivo y
el micro-preparado.

● Sistema de iluminación: Comprende los elementos que permiten la incidencia de

la luz sobre el micro-preparado. Estos son:

● Fuente de iluminación (lámpara): Foco que dirige los rayos luminosos hacia el
condensador.
● Diafragma: Regula la cantidad de luz que entra en el condensador.
● Condensador: Lente que concentra los rayos luminosos sobre la preparación.

● Sistema Mecánico: Comprende los elementos que sostienen tanto el sistema óptico
como el sistema de iluminación del microscopio, además de permitir el transporte
del mismo y dar soporte a las muestras para observación. Conforman este sistema:

● Cabeza binocular: Contiene los sistemas de lentes oculares.

● Revólver: Es la pieza giratoria donde se encuentran los objetivos, permite cambiar
fácilmente de un objetivo a otro.
● Platina: Superficie plana en donde se coloca la preparación, se localiza debajo de
los objetivos.
● Pinza de la platina: Se localiza en la platina y se utiliza dejar la preparación fija.
● Anillo macrométrico: Se utiliza para subir y bajar la platina mediante movimientos
rápidos; es el que aproxima el enfoque.
● Anillo micrométrico: Es utilizado para hacer movimientos finos y lograr un
enfoque correcto.
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 ● Tornillos para carro de la platina: Permiten el desplazamiento de la platina hacia
los lados (eje x), hacia atrás y adelante (eje y).
● Palanca de Diafragma: Se utiliza para abrir y cerrar el diafragma.
● Soporte: Está compuesto por la base y el brazo; se utilizan para el transporte del
microscopio.

Tabla 1. Diferencias entre el estereoscopio y el microscopio

Característica Estereoscopio Microscopio

Tamaño aproximado de los ≥ 1 mm (para ≤ 1 mm (para

organismos (u organelos) a observar observar sólo
observar objetos gruesos) objetos o capas
delgadas)

Forma de desplazar los objetos Manual Sistema mecánico

Número de objetivos que enfocan 2 1

el espécimen simultáneamente (= visión (= visión plana)
estereoscópica o en
3D)

Vidriería necesaria Caja Petri Portaobjetos y

cubreobjetos

Rango de aumento en los 2x – 10 x 10x – 100x

objetivos

Iluminación La luz es reflejada por La luz atraviesa el

el objeto (luz objeto (luz transmitida)
incidente)

Precauciones en el manejo del Microscopio y Estereoscopio

● NO utilizar rímel o pestañina

● NO tocar los lentes con los dedos o algún objeto sólido
✔ La limpieza de los lentes se realiza EXCLUSIVAMENTE con papel de arroz.
● No encender y apagar repetidamente la fuente de iluminación
● No llevar la lámpara al máximo voltaje

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 ✔ Antes de apagar el equipo, disminuya la intensidad de la luz de la lámpara hasta
el mínimo
✔ Una vez apagada la lámpara dejar en reposo mínimo 15 minutos antes de
desplazar el equipo.

DESCUBRIENDO LA CÉLULA, UNA REVISIÓN HISTÓRICA E

HISTOLÓGICA

La Biología Celular estudia las propiedades, estructuras, funciones, ciclo de vida e

interacciones existentes entre las células y el medio externo. Para poder hablar de esta
ciencia, es pertinente conocer sus inicios y las observaciones que contribuyeron a descubrir
todo lo que sabemos hoy de las células.

El científico inglés Robert Hooke publicó en 1665 su libro “Micrografía”; en el que

describía sus observaciones microscópicas y telescópicas. En dicha publicación, Hooke fue
el primero en emplear el término célula para referirse a organismos vivos. Con ayuda de un
microscopio compuesto, examinó una muestra de corcho en donde la forma de las células
vegetales le recordó las celdas que habitaban los monjes, razón por la cual, les dio el
nombre de células o cells (en inglés).

A la izquierda, uno de los microscopios

de Robert Hooke que se encuentra en el
Museo Nacional de Medicina en
Washington, DC. A la derecha el dibujo
de Hooke representando lo que observó
al examinar la muestra de corcho con su
microscopio

El holandés Antonie Philips van Leeuwenhoek fue otro

científico del siglo XVII, diseñó una metodología para producir
esferas de vidrio muy pequeñas y de alta calidad, que utilizaba
como lentes biconvexos; dichos lentes eran instalados en láminas
de cobre o plata, dando lugar a microscopios capaces de
magnificar objetos hasta 275 veces.

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 En 1673 sus observaciones más tempranas, de aguijones y partes bucales de abejas, fueron
publicadas por la Royal Society of London, la primera academia científica de Inglaterra. A
pesar de su éxito inicial, en 1676 su credibilidad fue duramente cuestionada cuando envió a
la Royal Society una copia de sus primeras observaciones de organismos microscópicos
unicelulares, algas y protozoarios que observó examinando una gota de agua de un charco.

Hasta ese momento la existencia de vida microscópica era

totalmente desconocida. Eventualmente la Royal Society envió
una comisión, de la cual formó parte Robert Hooke, para
verificar las observaciones de Van Leeuwenhoek. Finalmente, en
de un
pio construido 1680 sus observaciones fueron totalmente respaldadas por la
Leeuwenhoek. Royal Society y fue nombrado como miembro de la misma.

Sin embargo fue hasta 1838 que se recoció la importancia de las células como
constituyentes de las plantas y los animales, con lo que Matthias Schleiden y Theodor
Schwann (botánico y zoólogo respectivamente) formularon los dogmas de la teoría celular:

● “La célula es la unidad estructural de la vida”

● “Todos los organismos están compuestos de una o más células”
●

SIMULACIÓN VIRTUAL: IDENTIFICACIÓN DE LAS PARTES DE

UN MICROSCOPIO Y OBSERVACIÓN DE MUESTRAS

NOTA: Las preguntas que encuentre en esta sección debe de responderlas en máximo 50
palabras cada una.

IDENTIFICACIÓN DE LAS PARTES DE UN MICROSCOPIO

1. Ingrese al siguiente link

https://www.ncbionetwork.org/educational-resources/elearning/interactive-elearning-
tools/virtual-microscope

2. Se abrirá la ventana que se muestra a continuación y debe oprimir el botón negro

que dice “Launch”. En la parte inferior también encontrará videos de apoyo!

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3. Se abrirá una nueva ventana con la simulación, espere unos minutos mientras carga
y debería observar lo que se encuentra en esta imagen

4. Inicie dando click en la opción “Guide”, ahí se abrirá una ventana con información
importante que deben de revisar antes de iniciar, asegúrese de leer y comprender las
6 secciones cortas que hay disponibles. Al finalizar de click en “Close”

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PREGUNTA 1: Indique claramente en un párrafo de 50 palabras ¿Cuál es la diferencia
entre los lentes objetivos y el lente con aceite de inmersión?

5. Ahora de click en la opción “Learn”, ingrese a cada uno de los signos de

interrogación identificando la parte que corresponde hasta que todos se hayan
convertido en íconos verdes. Al finalizar en la esquina inferior derecha se activará el
botón “Next”, dé click en él.

PREGUNTA 2: Indique según la información suministrada para qué sirve cada parte
del microscopio y anexe una imagen del microscopio con todas sus secciones revisadas
y completadas.

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6. Ahora se abrirá una nueva ventana que les permitirá conocer información sobre los
objetivos desde el 4x hasta el 100x (objetivo de inmersión)

PREGUNTA 3: ¿Cuál es la magnificación típica de los oculares? ¿Cuál otra

magnificación es posible?

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 PREGUNTA 4: Indique claramente en un cuadro comparativo (concreto!) las
diferencias que existen entre los objetivos del microscopio mecánico

Oculares Objetivos de Objetivos de Objetivos de Objetivos de

escaneo baja potencia alta potencia inmersión

Son usualmente Son lentes de Son objetivos o Son lentes de Son lentes
de 10x pero hay 4x lentes de 10x 40x conocidos como
variedades de lentes de aceite
oculares con de inmersión y
potencia son de 100x
diferente

Es la vía por la Sirven para Es útil para Sin la ayuda de Son de muy alta
que vemos el hallar rápido centrarse en algún aceite definición y
espécimen o algún área de grandes detalles especial sirven precisión con
estructura a interés del y preparar para fijarse en ayuda de un
estudiar junto espécimen estudio para el detalles finos de aceite especial
con los próximo lente la estructura, para ver con
objetivos de mayor como el detalle células
potencia musculo
esquelético

7. Una vez hayan revisado todos los elementos de los objetivos y lentes, en la parte
inferior derecha se habilitará el botón “Next”, el cual los llevará a una corta
explicación de la diferencia entre observar con el objetivo de inmersión en seco y
con aceite de inmersión, revísela y al completar esta parte aparecerá de nuevo el
botón “Next”, dé click en él

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 PREGUNTA 5: ¿Por qué se usa el aceite de inmersión en el objetivo de 100x?
Porque el aceite sirve como un puente entre el lente y la lámina y enfoca los rayos de luz en
el lente para que se vea claro y detallado, de lo contrario la imagen se ve oscura y borrosa
sin el aceite de inmersión por la refracción de la luz

8. En esta parte observará los cambios en la magnificación al observar una letra “E”.
Aquí puede variar la magnificación de los oculares (5, 10 y 15X) y la magnificación
de los objetivos (4, 10, 40 y 100X), observar la diferencia y calcular la
magnificación total. Es importante que prueben varias combinaciones. Al finalizar
dé click en “Next” y regresará al menú inicial

PREGUNTA 6: ¿Cuál es la magnificación total de una muestra con un ocular de 15x y

usando el objetivo de 40X?

R// La magnificación total es de 600x

9. Seleccione ahora la opción “Explore”. Esta opción le permitirá explorar una serie de
láminas de diferentes tipos de tejidos provenientes de diversas especies de
organismos, para esto dé click en el signo de interrogación sobre la caja de láminas

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10. Revise el catálogo de láminas. Elija primero el tipo de organismo que quiere
estudiar y luego el tipo de tejido que quiere observar

11. Recuerde que cualquier lámina debe de observarse primero en el menor de los
aumentos, en este caso 4X, y debe de enfocarse primero con el “Coarse focus”, en
este punto puede cambiar a otro objetivo de mayor aumento y mejorar el enfoque
con el “Fine focus”. Recuerde que al subir de aumento la luz que ilumina la lámina
disminuye, para esto se ajusta el diafragma de la lámpara para que deje pasar más
luz en la opción “Light adjust”

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 PREGUNTA 7: Indique a qué partes del microscopio corresponden el “Coarse
focus” y el “Fine focus”.

PREGUNTA 8: Inserte un pantallazo de la lámina que usted elija observada en 4x,

10x, 40x y 100x. Recuerde que cada imagen debe estar perfectamente enfocada e
iluminada.

OBSERVACIÓN DE LÁMINAS PREPARADAS DE CÉLULAS VEGETALES Y

ANIMALES

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 12. Continuando en la opción “Explore”, en el catálogo de láminas elija la opción
“Plant slides” y posteriormente seleccione la lámina “Plant cells”

13. Realice la observación de la muestra de planta en todos los objetivos, enfocando y

revisando la muestra como se explicó previamente

PREGUNTA 9: Inserte un pantallazo de las células vegetales en cada magnificación.

Recuerde que cada una debe estar perfectamente enfocada e iluminada

PREGUNTA 10: ¿Estaban vivas estas células al preparar la muestra? ¿Por qué?

14. Regrese al catálogo de láminas, elija la opción “Animal slides” y posteriormente

seleccione la lámina “ Whitefish interphase”

15. Realice la observación de la muestra de células animales en todos los objetivos,

enfocando y revisando la muestra como se explicó previamente

PREGUNTA 11: Inserte un pantallazo de las células animales en cada magnificación.

Recuerde que cada una debe estar perfectamente enfocada e iluminada.

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PREGUNTA 12: ¿Qué diferencia observa entre la forma de estas células animales y las
células de la planta?

PREGUNTA 13: ¿Tienen estas células pared celular?

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LECTURA PREVIA:

Capítulo 1, “Biología Celular y Molecular” de G. Karp. 5 edición.

REFERENCIAS

● Guía de estudio para el set de “La célula animal y vegetal típica” de Carolina
Biological Supply, U.S.A.
● BioNetwork’s Virtual Microscope

Elaborada por: Juliana Chaura y Sebastián Escobar

Fecha: Agosto de 2020

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