MICROSCOPIA

Objetivos
- Aprender sobre el uso del microscopio
- Descubrir el aumento de los oculares y de cada uno de los objetivos del microscopio.

Fundamentación

La capacidad del ojo humano es limitada a la hora de estudiar “lo pequeño”. Hay una inmensa
cantidad de células y microorganismos que influyen significativamente en la vida del hombre y
que, por ello, exigen ser estudiadas en favor de un mayor conocimiento y mejora en la calidad
de vida. Gracias a los avances y el progreso en el campo de la microscopía, el hombre ha sido
capaz de ver organismos y estructuras que a simple vista serían invisibles y, con ello, efectuar
descubrimientos decisivos en el campo de la microbiología, relacionados con las
transformaciones de la materia orgánica, las causas de las enfermedades o los agentes
implicados en los cambios geoquímicos.

Procedimiento

PARTE A: Reconocimiento de las partes del microscopio

Conforman la parte mecánica: tubo o cabezal, brazo, revolver, platina, anillo o tornillo
macrométrico y micrométrico y pie.
Conforman la parte óptica: fuente de luz, condensador o diafragma, objetivos y oculares
PARTE B: Cálculo de aumento de oculares y de los objetivos

Los oculares suelen ser intercambiables y el poder de aumento

puede ir desde 5X hasta 20X. El microscopio que nosotros hemos
utilizado, tiene los oculares con un aumento de 10X.
Calcular el aumento obtenido con el uso combinado de los
oculares y cada uno de los objetivos.
Los objetivos del microscopio que nosotros estamos utilizando
son 4:

-Secos: 4X, 10X y 40X

-De inmersión: 100X, que se utiliza con aceite de
inmersión, generalmente de cedro.

Reseñar los resultados obtenidos en el cuadro que se

adjunta a continuación:

PARTE C: Observación

Se harán observaciones a microorganismos, que serán entregados por los docentes o

preparados por los alumnos, con el único fin de aprender a enfocar, seleccionar objetivos, entre
otros.
En el anexo figuran algunas recomendaciones para usar objetivos secos y de inmersión.
ANEXO A – CAUSAS DE UNA MALA IMAGEN
ANEXO B – PRÁCTICAS RECOMENDADAS

Observación de células epiteliales (uso de objetivos secos)

Materiales
- Microscopio
- Hisopo estéril
- Portaobjeto
- Cubreobjeto
- Mechero
- Vidrio de reloj
- Piceta
- Papel secante

Reactivos
- Azul de metileno
- Agua destilada

Procedimiento

-Raspamos con un hisopo la mucosa interna de la mejilla de la boca de un voluntario,

depositando el producto extraído en el centro de un portaobjetos con una gota de agua.
-Realizamos una extensión más o menos uniforme, y realizamos un frotis. Así queda fijada al
porta.
-Colocamos el portaobjetos sobre el vidrio de reloj y añadimos unas gotas de azul de metileno
sobre la extensión.
-Después de teñir durante dos minutos, lavamos con agua destilada, ayudándonos de la piceta.
-Retiramos el exceso de agua con un poco de papel secante, dejando que empape el agua, sin
arrastrar.
-Colocamos la muestra preparada en la platina del microscopio y realizar la observación usando
el objetivo 10X y 40X

Tinción Gram (uso de objetivos de inmersión)

Materiales
- Microscopio
- Mechero
- Portaobjetos
- Ansa
- Piseta
- Papel secante

Reactivos
- Muestra de yogurt
- Cristal violeta
- Solucion de Lugol
- Alcohol acetona
- Safranina
- Aceite de inmersión

Procedimiento

-Limpiar portaobjeto con papel absorbente

-Encender mechero y limpiar ansa
-Tomar una pequeña muestra de yogurt con ansa y extender el portaobjeto
-Realizar frotis en el mechero
-Cubrir la muestra con cristal violeta. Esperar 1 minuto, escurrir y enjuagar con piseta
-Cubrir la muestra con solución de Lugol y esperar 1 minuto, escurrir y enjuagar con piseta
-Colocar alcohol acetona durante 5 segundos, escurrir y enjuagar con piseta
-Agregar sagranina y esperar 1 minuto. Escurrir y enjuagar con piseta
-Dejar secar la muestra
-Agregar una gota de aceite de inmersión y observar en el microscopio a 100X