¿Qué es la espectroscopia Raman?

La espectroscopia Raman es una técnica espectroscópica molecular que usa la

interacción de la luz con la materia para obtener información sobre la composición
o las características de un material, como FTIR. La información proporcionada por
la espectroscopia Raman es el resultado de un proceso de dispersión de la luz,
mientras que la espectroscopia IR se basa en la absorción de la luz. La
espectroscopia Raman proporciona información sobre las vibraciones
intramoleculares e intermoleculares y puede proporcionar una comprensión
adicional sobre una reacción. Tanto la espectroscopia FTIR como Raman
proporcionan un espectro característico de las vibraciones específicas de una
molécula (“huella molecular”) y son valiosas para identificar una sustancia. Sin
embargo, la espectroscopia Raman puede proporcionar información adicional
sobre los modos de frecuencia más baja y las vibraciones que permiten
comprender la red cristalina y la estructura molecular de la columna vertebral. 

La espectroscopia Raman en línea se usa para monitorizar los procesos de

cristalización y revelar los mecanismos de reacción y la cinética. Estos datos
permiten, en combinación con herramientas de análisis, la comprensión y
optimización de las reacciones bien fundadas. 

El principio de la espectroscopia Raman

Cuando la luz interactúa con moléculas en un gas, líquido o sólido, la inmensa
mayoría de los fotones se dispersan con la misma energía que los fotones
incidentes. Esto se describe como dispersión elástica o dispersión de Rayleigh. Un
pequeño número de estos fotones, aproximadamente un fotón en diez millones, se
dispersará a una frecuencia diferente que el fotón incidente. Este proceso se llama
dispersión inelástica, o el efecto Raman, que debe su nombre al científico C.V.
Raman, quien lo descubrió y recibió el Premio Nobel de Física en 1930 por su
trabajo. Desde entonces, la dispersión Raman se ha usado para una amplia gama
de aplicaciones, desde diagnósticos médicos hasta ciencia de materiales y análisis
de reacciones. Raman permite al usuario recoger la firma vibratoria de una
molécula, lo que le permite comprender cómo se forma y cómo interactúa con
otras moléculas que la rodean.

Proceso de dispersión de Raman

El proceso de dispersión Raman, como lo describe la mecánica cuántica, es
cuando los fotones interactúan con una molécula y la molécula puede avanzarse a
un estado virtual de mayor energía. Como consecuencia de este estado de mayor
energía, puede haber algunos resultados diferentes. Uno de estos resultados sería
que la molécula se relaja a un nivel de energía vibratoria que es diferente al de su
estado inicial, con lo que se produce un fotón de energía diferente. La diferencia
entre la energía del fotón incidente y la energía del fotón disperso es el llamado
cambio Raman.

Cuando el cambio de energía del fotón disperso es menor que el del fotón
incidente, la dispersión se conoce como dispersión Stokes. Algunas moléculas
pueden comenzar en un estado de excitación vibratoria y cuando se avanzan al
estado virtual de mayor energía, pueden relajarse hasta un estado de energía final
que es más bajo que el del estado de excitación inicial. Esta dispersión se conoce
como dispersión anti-Stokes. 

Conceptos básicos de la espectroscopia Raman

¿Cómo funciona la espectroscopia Raman?

A diferencia de la espectroscopia FTIR que observa los cambios en los momentos

dipolares, Raman observa los cambios en la polarización de los enlaces
moleculares. La interacción de la luz con una molécula puede inducir una
deformación de su nube de electrones. Esta deformación se conoce como un
cambio en la polarización. Los enlaces moleculares tienen transiciones de energía
específicas en las que se produce un cambio de polarización, dando lugar a los
modos activos Raman.  Por ejemplo, las moléculas que contienen enlaces entre
los átomos homonucleares, tales como carbono-carbono, sulfuro-sulfuro y
nitrógeno-nitrógeno, sufren un cambio en la polarización cuando los fotones
interactúan con ellos. Estos son ejemplos de bonos que dan lugar a bandas
espectrales activas de Raman, pero que no se verían o serían difíciles de ver en
FTIR.

Debido a que Raman es un efecto inherentemente débil, los componentes ópticos

de un espectrómetro Raman deben estar bien adaptados y optimizados. Además,
dado que las moléculas orgánicas pueden tener una mayor tendencia a ser
fluorescentes cuando se utiliza radiación de longitud de onda más corta, se suelen
utilizar fuentes de excitación monocromática de longitud de onda más larga, como
los diodos láser de estado sólido que producen luz a 785 nm.  

Aplicaciones clave de la espectroscopia Raman

La espectroscopia Raman se usa en la industria para una variedad de aplicaciones
como:

 Procesos de cristalización 
 Identificación de polimorfos

 Reacciones de polimerización

 Reacciones de hidrogenación

 Síntesis química

 Biocatálisis y catálisis enzimática

 Química de flujo

 Control de bioprocesos

 Reacciones de síntesis

Espectroscopia Raman o FTIR

Una comparación

Aunque las espectroscopias FTIR y Raman ofrecen información complementaria y,

a menudo, son intercambiables, existen algunas diferencias prácticas que influyen
en cuál de ellas es la óptima para un experimento determinado. La mayor parte de
la simetría molecular permitirá tanto la actividad de Raman como la de IR. Un caso
especial es si la molécula contiene un centro de inversión. En una molécula que
contiene un centro de inversión, las bandas Raman y las bandas IR son
mutuamente excluyentes, es decir, el enlace será Raman activo o IR activo pero
no ambos. Una regla general es que los grupos funcionales que tienen grandes
cambios en los dipolos son fuertes en IR, mientras que aquellos que tienen
cambios débiles en los dipolos o un alto grado de simetría, se verán mejor en los
espectros de Raman.

Elija la espectroscopia Raman en estos casos:

 La investigación de los enlaces de carbono en anillos alifáticos y aromáticos

es de interés primario
 Enlaces que son difíciles de ver en FTIR (es decir, 0-0, S-H, C=S, N=N,
C=C, etc.)

 El examen de las partículas en solución es importante, por ejemplo,

polimorfismo
 Los modos de frecuencia más baja son importantes (por ejemplo, óxidos
inorgánicos) 

 Se investigan las reacciones en medios acuosos

 Reacciones en las que la observación a través de una ventana de reacción

es más fácil y segura (por ejemplo, reacciones catalíticas de alta presión,
polimerizaciones, etc.)

 La investigación de los modos de red de frecuencia más baja es de interés

 Investigación de la iniciación de la reacción, el punto final y la estabilidad

del producto de reacciones bifásicas y coloidales

Elija la espectroscopia FTIR en estos casos:

 Estudio de las reacciones en fase líquida

 Reacciones en las que los reactantes, reactivos, disolventes y especies de
reacción presentan fluorescencia

 Los enlaces con fuertes cambios en los dipolos son importantes, por
ejemplo, C=O, O-H, N=O

 Reacciones en las que los reactivos y reactantes se encuentran con un

nivel de concentración bajo

 Reacciones en las que las bandas de disolventes son fuertes en Raman y

pueden inundar la señal de especies clave

 Reacciones en las que los productos intermedios de esa forma son IR

activos

Ventajas de la espectroscopia Raman en línea

La espectroscopia Raman ofrece numerosas ventajas. Dado que los instrumentos
Raman usan láseres en la región visible, se pueden emplear cables flexibles de
fibra óptica de sílice para excitar la muestra y recoger la radiación dispersa.
Además, si fuera necesario, estos cables pueden ser bastante largos. Dado que se
emplea luz visible, se puede usar vidrio o cuarzo para retener las muestras. En el
estudio de las reacciones químicas, esto significa que el sensor Raman puede
insertarse en una reacción o puede recoger espectros Raman a través de una
ventana, por ejemplo, en un ciclo de muestras de reacción externa o en una celda
de flujo. Este último enfoque elimina la posibilidad de contaminación del flujo de la
muestra. La capacidad de usar cuarzo o zafiro de alta calidad como material de la
ventana significa que las células de alta presión pueden emplearse para adquirir el
espectro Raman de las reacciones catalíticas. En el estudio de los catalizadores, la
espectroscopia operando que usa el efecto Raman es muy útil para estudiar
reacciones in situ en tiempo real sobre superficies catalíticas. Otra ventaja de
Raman es que los enlaces hidroxilos no son particularmente activos, lo que hace
que la espectroscopia Raman en medios acuosos sea sencilla. La espectroscopia
Raman se considera no destructiva, aunque algunas muestras pueden verse
afectadas por la radiación láser. Una consideración que debe tenerse en cuenta al
elegir esta técnica es el grado de fluorescencia de una muestra en particular. La
dispersión Raman es un fenómeno débil y la fluorescencia puede inundar la señal,
lo que dificulta la recogida de datos de calidad. Este problema a menudo se alivia
usando una fuente de excitación de longitud de onda más larga.

Con respecto al análisis de reacción, la espectroscopia Raman es sensible a

muchos grupos funcionales, pero es excepcional a la hora de obtener información
molecular de la columna vertebral, proporcionando su propia huella molecular
única. Dado que Raman usa una polarización de enlaces y tiene el potencial de
medir frecuencias más bajas, es sensible a las vibraciones de la red cristalina,
ofreciendo al usuario información polimórfica que puede ser difícil de obtener por
parte de FTIR. Esto permite que Raman se use, de manera muy efectiva, para
estudiar la cristalización y otros procesos complejos. 

Instrumentación de la espectroscopia Raman

Un espectrómetro Raman moderno y compacto consta de varios componentes

básicos, incluido un láser que sirva como fuente de la excitación para inducir la
dispersión Raman. Normalmente, los láseres de estado sólido se utilizan en los
instrumentos modernos Raman con longitudes de onda populares de 532 nm,
785 nm, 830 nm y 1064 nm. Los láseres de longitud de onda más corta tienen
secciones transversales de dispersión Raman más altas, por lo que la señal
resultante es mayor; sin embargo, la incidencia de fluorescencia también aumenta
a una longitud de onda más corta. Por esta razón, muchos sistemas Raman
cuentan con el láser de 785 nm. La energía del láser se transmite a la muestra y se
recoge de ella mediante cables de fibra óptica. Se utiliza un filtro de hendidura o de
borde para eliminar la dispersión de Rayleigh y anti-Stokes y la luz dispersa
restante de Stokes se transmite a un elemento de dispersión, normalmente una
rejilla holográfica. Un detector CCD captura la luz, lo que da lugar al espectro
Raman. Dado que la dispersión Raman produce una señal débil, es muy
importante que en el espectrómetro Raman se usen componentes de alta calidad,
ópticamente bien adaptados. 

Software analítico de espectroscopia Raman

Cuando el espectro se recoge de forma constante durante el transcurso de un
experimento, puede revelar un “video molecular” que proporciona información
clave sobre la cinética, los mecanismos y los cambios de forma durante una
reacción. Normalmente, este análisis se ha realizado por espectroscopistas con
conocimientos expertos en la búsqueda de áreas clave de interés y en la tendencia
de estos números de onda a lo largo del tiempo. Sin embargo, los avances en
software (como la función para encontrar tendencias o “Find Trends” de iC Raman
7) han permitido automatizar esta experiencia de manera que tanto los expertos
como los no expertos puedan extraer información clave de forma rápida y fácil para
tomar decisiones con rapidez y seguridad.