UNIVERSIDAD DEL QUINDÍO

FACULTAD DE CIENCIAS BÁSICAS Y TECNOLOGÍAS

PROGRAMA DE QUÍMICA

Actividad: Taller
Tema: Escala McFarland
Fecha: Domingo, 14 de noviembre de 2021 Fecha de entrega: viernes, 19 de noviembre de 2021
Docente: Clara María Mejía Doria Qca UQ, M.Sc. UTP, PhD(C) UNAL

NOMBRE: Nicolás Campeón Velásquez CÓDIGO: 1007906089 NOTA: _____

NOMBRE: Manuela Ramírez Sepúlveda CÓDIGO: 1144190166

“McFarland standards are suspensions of either barium sulfate or latex particles that allow
visual comparison of bacterial density”.

1. Teniendo en cuenta el párrafo anterior, realice los cálculos matemáticos

correspondientes para preparar los estándares de la escala McFarland. Indique la
concentración de cada estándar en mg/L. Dele un nombre a la tabla 1.

Para el cálculo de la concentración del estándar es necesario tener en cuenta la

reacción:

En esta se debe hallar el reactivo límite y el reactivo en exceso, con el fin de establecer la cantidad
de moles presentes en el producto BaSO4, el cual es el estándar.

Si cada uno de los reactivos tienen un porcentaje del 1% entonces se puede interpretar como:

• Para el BaCl2 (PM= 208,33 g/mol):

1𝑔 1𝑚𝑜𝑙
→ 1𝑔 ∗ = 4,8 ∗ 10−3 𝑚𝑜𝑙 𝐵𝑎𝐶𝑙2
100𝑔 208,33𝑔

• Para el H2SO4 (PM= 98 g/mol):

1𝑔 1𝑚𝑜𝑙
→ 1𝑔 ∗ = 0,0102 𝑚𝑜𝑙 𝐻2 𝑆𝑂4
100𝑔 98 𝑔
Debido a que la reacción está en una proporción 1:1 entre el cloruro y el ácido se toma como
reactivo límite la sustancia con menos cantidad de moles, es decir, el BaCl2.

Sin embargo, el cloruro no puede ser establecido como reactivo límite dentro del ejercicio, ya que
maneja cantidades específicas, por lo tanto, los valores anteriores deben ser tomados en cuenta
con las proporciones que se dan en la tabla. Se pueden utilizar los valores de las moles en cada
uno de los reactivos como un factor y utilizarlo para el cálculo con proporciones diferentes.
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Al tomar los primeros valores se tiene entonces:

• Para el BaCl2:

4,8 ∗ 10−3 𝑚𝑜𝑙 𝐵𝑎𝐶𝑙2 𝑥 𝑚𝑜𝑙 𝐵𝑎𝐶𝑙2

=
25,9 𝑚𝐿 9,95 𝑚𝐿
Despejando x:

(4,8 ∗ 10−3 𝑚𝑜𝑙 𝐵𝑎𝐶𝑙2 ) ∗ 9,95 𝑚𝐿

= 𝑥 𝑚𝑜𝑙 𝐵𝑎𝐶𝑙2
25,9 𝑚𝐿
Simplificando:

𝑥 𝑚𝑜𝑙 𝐵𝑎𝐶𝑙2 = 1,84 ∗ 10−3

• Para el H2SO4

0,0102 𝑚𝑜𝑙 𝐻2 𝑆𝑂4 𝑥 𝑚𝑜𝑙 𝐻2 𝑆𝑂4

=
54,64 𝑚𝐿 0,05 𝑚𝐿
Despejando x:
(0,0102𝑚𝑜𝑙 𝐻2 𝑆𝑂4 ) ∗ 0,05 𝑚𝐿
= 𝑥 𝑚𝑜𝑙 𝐻2 𝑆𝑂4
54,64 𝑚𝐿
Simplificando:

𝑥 𝑚𝑜𝑙 𝐻2 𝑆𝑂4 = 9,33 ∗ 10−6

Nota: los valores de los mL que se establecieron en la regla de tres se determinaron por medio de
la densidad de los compuestos, para permitir el cambio de los 100 gramos que se suponen al
principio:

ρ BaCl2= 3,86 g/cm3 ρ H2SO4= 1,83 g/cm3

𝑐𝑚3
𝑚𝐿 𝑑𝑒 𝐵𝑎𝐶𝑙2 = 100𝑔 ∗ = 25,9 𝑐𝑚3
3,86𝑔
𝑐𝑚3
𝑚𝐿 𝑑𝑒 𝐻2 𝑆𝑂4 = 100𝑔 ∗ = 54,64 𝑐𝑚3
1,83𝑔
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Aquí se establece entonces que el reactivo que va a definir la cantidad de moles del BaSO4
(estándar) es el ácido, ya que tiene menor cantidad de moles y no alcanza a consumir toda la
cantidad de moles de cloruro. Las moles de ácido van a ser las mismas moles de sulfato porque
con respecto al producto el ácido también se encuentra en una relación 1:1. El establecer el
reactivo límite en este caso no se da por la reacción en sí (como se estableció inicialmente), sino
por la cantidad que se usa de cada reactivo, pues el ácido tiene una cantidad mínima con respecto
al cloruro, en absolutamente todos los casos de la tabla.

Ahora, conociendo el reactivo que limita la reacción se pueden hallar todos los datos de las moles
resultantes de BaSO4 (sustancia estándar), por medio de la siguiente ecuación:

(0,0102𝑚𝑜𝑙 𝐻2 𝑆𝑂4 ) ∗ 𝑚𝐿 𝐻2 𝑆𝑂4

= 𝑥 𝑚𝑜𝑙 𝐻2 𝑆𝑂4
54,64 𝑚𝐿

Nota: Solo cambia el valor de los mL de H2SO4

Para el primer caso:

(0,0102𝑚𝑜𝑙 𝐻2 𝑆𝑂4 ) ∗ 0,05 𝑚𝐿
= 𝑥 𝑚𝑜𝑙 𝐻2 𝑆𝑂4
54,64 𝑚𝐿

𝑥 𝑚𝑜𝑙 𝐻2 𝑆𝑂4 = 9,33 ∗ 10−6

9,33 ∗ 10−6 𝑚𝑜𝑙 𝐻2 𝑆𝑂4 = 𝑚𝑜𝑙 𝐵𝑎𝑆𝑂4

Luego se pueden hallar los gramos por medio del Peso Molecular del BaSO4:
233,38𝑔
9,33 ∗ 10−6 𝑚𝑜𝑙 𝐵𝑎𝑆𝑂4 ∗ = 0,002178327 𝑔
𝑚𝑜𝑙
Luego se realiza la conversión a mg:
1000 𝑚𝑔
0,002178327 𝑔 ∗ = 2,178327233 𝑚𝑔
1𝑔
Y, por último, se establece la concentración en mg/L:
2,178327233 𝑚𝑔
= 217,8327233
0,01𝐿

Nota: el volumen total es 10mL que en L equivale a 0,01L

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Al aplicar los cálculos en cada uno de los casos de la tabla obtenemos:

Nota: Se realizaron todos los cálculos para el resto de casos en Excel

Por lo tanto:
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2. Grafique la absorbancia vs la concentración de cada estándar en Excel, indicando

la ecuación.

Ecuación de
la recta

3. Determine la concentración (en términos del número de células) de una muestra

microbiológica, cuya absorbancia fue de 0.321.

Existen dos formas de relacionar la absorbancia con el número de células: a través de una
interpolación directa entre absorbancia y UFC/mL o g, o por medio de la línea de tendencia
graficada por la concentración de BaSO4.

• Interpolando:

𝑥 − (3 ∗ 108 ) 6 ∗ 108 − 3 ∗ 108

=
(0,321 − 0,257) 0,451 − 0,257
6 ∗ 108 − 3 ∗ 108
𝑥=( ) ∗ (0,321 − 0,257) + (3 ∗ 108 )
0,451 − 0,257

𝑥 = 3,9897 ∗ 108

• Con la ecuación de la línea de tendencia:

𝑦 = 3227,2𝑥 − 308,25
Hallamos primero el valor de la concentración que corresponde a 0,321 de absorbancia:

(Ya que la absorbancia según la gráfica es la variable independiente entonces se reemplaza en x):

𝑦 = 3227,2(0,321) − 308,25
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𝑦 = 727,68

Ahora se puede interpolar con este valor para hallar la UFC:

𝑥 − (3 ∗ 108 ) 6 ∗ 108 − 3 ∗ 108

=
(727,68 − 435,66) 871,33 − 435,66
6 ∗ 108 − 3 ∗ 108
𝑥=( ) ∗ (727,68 − 435,66) + (3 ∗ 108 )
871,33 − 435,66

𝑥 = 5,01 ∗ 108
Error:

5,01 ∗ 108 − 3,9897 ∗ 108 = 1,0203 ∗ 108

Entre ambos resultados existe una diferencia de 1,0203*108. Este gran margen de error se da
debido a la gran diferencia que existe en el rango de esa región en la gráfica:

Se puede notar claramente como el tercer punto se aleja en gran medida de la línea de tendencia
(indicado con la flecha de doble sentido de color rojo). Esto provoca una incertidumbre muy
grande en los datos que se encuentran en esa región.

Así se explica entonces la gran diferencia entre el valor hallado con la ecuación de la recta y la
interpolación directa entre puntos.