Enfoque isoeléctrico capilar (CIEF).

Es una técnica utilizada para la separación de péptidos, proteínas, aminoácidos y otras substancias
anfotéricas, en base a sus puntos isocléctricos (pl)". Una solución de anfólitos que generarán un
gradiente de pH (que vendrá dado por sus pl), y las muestras, son introducidas en el capilar. El
extremo anódico del capilar está sumergido en una solución ácida, mientras que el extremo
catódico lo está en una solución básica. Al aplicar un campo eléctrico los analitos se mueven hasta
encontrar un pl en el que son neutros, y entonces cesa su migración (proceso de focalización). Una
vez se ha alcanzado un estado estacionario, los analitos pueden ser extraídos del capilar de varias
maneras, entre ellas, mediante la aplicación de una diferencia de presión, de forma que las
diferentes bandas pasen ante el detector a una velocidad constante. En CIEF es necesario eliminar
el EOF por medio del uso de un capilar recubierto internamente; ya que si no los analitos pudieran
ser arrastrados antes de ser focalizados. Los capilares recubiertos presentan además la ventaja de
reducir la adsorción de las proteínas a la pared del capilar.

https://www.tdx.cat/bitstream/handle/10803/3141/ivm04de14.pdf?sequence=4&isAllowed=y

Ventajas y desventajas

El enfoque isoeléctrico tiene varias ventajas sobre otros métodos de electroforesis.

Primero, el enfoque isoeléctrico permite un mayor número de muestras que se estudian en el

mismo gel sin disminuir la resolución de los resultados. Para tener una mejor resolución en otros
métodos, es importante tener solo una pequeña muestra. El enfoque isoeléctrico no requiere la
desnaturalización de las proteínas, por lo que para un análisis adicional de los resultados, la
desnaturalización no obstaculiza la tinción o la detección de anticuerpos.

Si se compara el enfoque isoeléctrico con métodos que tienen aplicaciones similares, por ejemplo
la reacción en cadena de la polimerasa (PCR), es más eficiente, tiene mejor expresión, es más
económico, fácil de realizar y analizar. Tiene la ventaja de contrarrestar la difusión de la molécula
fuera de su pI ya que cuando la molécula se encuentra en una zona que no es su pI, se cargará y
por tanto migrará a su zona pI gracias al campo eléctrico. Sin embargo, puede ser difícil de
reproducir, el tiempo de análisis es largo y no es una técnica fácil de automatizar.

https://es.frwiki.wiki/wiki/Focalisation_iso%C3%A9lectrique