Prácticas de Fisiología del Ejercicio-I
Marta Conde y Lucas González. 2021/22
Mecanismos de transporte y permeabilidad celular
C ada célula de tu organismo está rodeada por una mem-
brana plasmática que la separa del líquido intersticial.
La función principal de la membrana plasmática es
permitir el intercambio selectivo de moléculas entre la célula
y el líquido intersticial, de modo que la célula pueda tomar
las sustancias que necesita mientras que elimina las que no
necesita. Entre estas sustancias se incluyen gases, tales como
oxígeno y dióxido de carbono, iones y moléculas más grandes
tales como glucosa, aminoácidos, ácidos grasos y vitaminas.
Las moléculas se mueven a través de la membrana plas-
mática pasiva o activamente. En el transporte activo, las mo-
léculas se mueven a través de la membrana plasmática consu-
miendo energía celular (ATP). En el transporte pasivo, las
moléculas pasan a través de la membrana plasmática sin gasto de
energía. Los ejemplos del transporte pasivo son la difusión
simple, la ósmosis y la difusión facilitada. La difusión simple
es el movimiento espontáneo de moléculas a través de la bicapa
lipídica de una membrana biológica desde un área con una
concentración más alta hasta otra con una concentración más
baja. La ósmosis es la difusión de agua a través de una
membrana semipermeable. La difusión facilitada es el mo-
vimiento de moléculas a través de una membrana selectiva-
mente permeable con la ayuda de proteínas especializadas de
transporte incrustadas dentro de la membrana.
En este ejercicio, simularemos cada uno de estos meca-
nismos de transporte celular. Comenzaremos examinando la
difusión simple.
Difusión simple
Todas las moléculas, sean de sólidos, líquidos o gases, están en
continuo movimiento o vibración. Si hay un aumento en la
temperatura, las moléculas se moverán más rápidamente. Las
moléculas que se mueven chocan entre sí, cambiando su di-
rección. Así, el movimiento de moléculas se dice que es «al
azar». Si uno vertiera una gota de colorante líquido alimenticio
en un recipiente grande de agua, las moléculas del colorante se
moverían aleatoriamente hasta que su concentración fuera igual
en todo el recipiente. Las moléculas alcanzarían el equilibrio a
través del proceso de difusión. Definimos la difusión como el
movimiento de moléculas de un lugar a otro como resultado
de su movimiento térmico al azar. La difusión simple es la
difusión a través de la bicapa lipídica de una membrana
biológica.
La velocidad a la cual una molécula se mueve a través de
una membrana depende en parte de la masa, o peso molecular,
de la molécula. Cuanto más grande es la masa, más lenta-
GCCAFD
Objetivos
1. Entender la función de permeabilidad selectiva de
la membrana plasmática.
2. Poder describir los diversos mecanismos por los
cuales las moléculas pueden cruzar pasivamente
la membrana plasmática.
3. Poder describir los diversos mecanismos por los
cuales las moléculas son transportadas activa
mente a través de la membrana plasmática.
4. Entender las diferencias entre los mecanismos de
transporte de la membrana con y sin gasto de
energía metabólica.
5. Definir transporte pasivo, transporte activo, di
fusión simple, difusión facilitada, ósmosis, bomba
de solutos, hipotónico, isotónico e hiper-
tónico.
mente difundirá la molécula. Normalmente, la velocidad a la
que una sustancia difunde a través de la membrana puede ser
determinada midiendo la velocidad a la cual su concentración
en un lado de la membrana se acerca a la concentración de la
sustancia en el otro lado de la membrana. La magnitud del
movimiento neto a través de la membrana, o flujo (F), es pro-
porcional a la diferencia de concentración entre los dos lados
de la membrana (C0 - Ci), a su área superficial (A) y a su constante
de permeabilidad (kp):
F = kpA(C0 – Ci)
Las sustancias no polares difundirán con bastante rapidez
a través de una membrana. La razón es que estas sustancias se
disolverán en las regiones no polares de la membrana —
regiones que están ocupadas por cadenas de ácidos grasos de
fosfolípidos de membrana. Los gases, tales como el oxígeno y
el dióxido de carbono, los esteroides y los ácidos grasos son las
principales moléculas no polares que difundirán rápidamente
a través de una membrana.
Por el contrario, las sustancias polares tienen una solubilidad
mucho más baja en los fosfolípidos de membrana. Ciertos
compuestos intermediarios del metabolismo, generalmente,
no son capaces de atravesar la membrana, ya que a menudo
están ionizados y contienen grupos tales como fosfato. Así, una
vez producidos en la célula no pueden abandonarla incluso si
sus concentraciones son más altas dentro que fuera de ella. De
esto podemos concluir que la porción de la bicapa lipídica de la
membrana plasmática es la responsable de su selectividad en
cuanto al paso de sustancias a través de sí.
1
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Marta Conde y Lucas González. 2021/22
Los iones, tales como Na+ y Cl-, tienden a difundir con
bastante rapidez a través de una membrana. Esto sugiere la
implicación de un componente proteico de la membrana —y, de
hecho, las proteínas forman los canales que permiten que estos
iones pasen de un lado de la membrana al otro. Recuerda que
los canales son selectivos. Los que permiten pasar al sodio
generalmente no permitirán el paso a otros iones, tales como el
calcio.
La difusión conducirá a un estado en el cual la concen-
tración de los solutos que difunden es constante en el espacio y
el tiempo. La difusión a través de una membrana tiende a un
equilibrio donde hay concentraciones iguales de soluto en
ambos lados de la membrana. La velocidad de difusión es
proporcional al área de la membrana y a la diferencia en la
concentración del soluto a ambos lados de la misma. La primera
ley de Fick de la difusión indica
J = -DA AC/AX
donde
J = velocidad neta de difusión (g o moles/unidad de
tiempo)
D = coeficiente de difusión para el soluto que difunde
A = área de la membrana
Figura 1.1 Pantalla de inicio del experimento de Difusión simple.
GCCAFD
Ac = diferencia de concentración a través de la mem-
brana
Ax = grosor de la membrana
A c t i v i d a d I:l
Simulando la difusión simple
Sigue las instrucciones de la sección «Primeros pasos» al co-
mienzo de este manual para iniciar PhysioEx 6.0. Del menú
principal selecciona el primer ejercicio: Mecanismos de
Transporte y Permeabilidad Celular (Cell Transpon Me-
chanisms and Permeability). Verás la pantalla de inicio de la
actividad de «Difusión Simple» (Simple Diffusiori), mostrada
en la Figura 1.1.
En esta actividad simularemos el proceso de la difusión a
través de la membrana plasmática. Observa los dos recipientes
de cristal en la parte superior de la pantalla. Llenarás cada re-
cipiente con líquido. Imagina que el recipiente de la derecha
representa el interior de una célula, mientras que el de la iz-
quierda representa el fluido extracelular (intersticial). Entre los
dos recipientes hay un contenedor de membranas en el cual
colocarás una de las cuatro membranas de diálisis que se
2
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encuentran en la parte derecha de la pantalla. Cada una de ellas 11. Ahora, repite los pasos 1-10 con cada una de las restantes
tiene un «MWCO» diferente que significa «límite de peso mo- membranas de diálisis. Asegúrate de guardar los datos de
lecular». Las moléculas con un peso molecular inferior a este cada uno de los experimentos. Después de cada experimento,
valor pueden atravesar la membrana, mientras que las moléculas limpia cada uno de los recipientes y devuelve la membrana de
con un peso molecular superior no pueden. Para mover una diálisis a su lugar.
membrana al contenedor, pulsa sobre ella, arrástrala al conte-
nedor de membranas y suelta el botón del ratón —la membrana Ayúdate de la Tabla Periódica de elementos de la pág. 4 de
se colocará en su lugar entre los dos recipientes. este libro.
Debajo de cada uno de los recipientes hay un dosificador ¿Cuál es el peso molecular del Na+? ________
de soluciones. Puedes seleccionar cuántos milimoles (mM) de
los diferentes solutos (Na+/ Cl-, urea, albúmina o glucosa) ¿Cuál es el peso molecular del Cl-? ________
deseas dosificar en cada recipiente pulsando los botones (+) o
(—) debajo del nombre de cada soluto. También puedes do- ¿Qué límite (MWCO) de membrana de diálisis permitió el
sificar agua desionizada en cualquier recipiente pulsando el
botón Agua Desionizada (Deionized Water) debajo del reci- paso de ambos iones? _______
piente que desees llenar. Pulsando los botones de Dosificar
12. Repite este experimento usando cada uno de los solutos
(Dispense) debajo de cada recipiente se llenarán los recipientes
restantes (urea, albúmina y glucosa) en el recipiente de la iz-
con líquido. Pulsando los botones Limpiar (Flush) debajo de
quierda y agua desionizada en el recipiente de la derecha.
cada recipiente éstos se vaciarán.
Asegúrate de pulsar Guardar Datos (Record Data), limpiar
En la parte inferior de la pantalla hay un módulo de re-
ambos recipientes y sustituir la membrana de diálisis después
gistro de datos. Después de cada experimento debes guardar
de cada experimento. Pulsa Herramientas (Tools) —> Impri-
tus datos pulsando el botón Guardar Datos (Record Data). Si
mir Datos (Print Data) para imprimir tus datos.
deseas borrar los datos de cualquier experimento, simplemente
resalta la línea de datos que deseas suprimir y pulsa Borrar 13. Completa la siguiente tabla con tus resultados.
Experimento (Delete Run). También puedes imprimir tus datos
pulsando Herramientas (Tools) (en la parte superior de la
pantalla) y después seleccionando Imprimir Datos (Print
Data).
1. Con el ratón pulsa sobre la membrana de diálisis con el
MWCO de 20 y arrástrala al contenedor de membranas. Tabla 1 ¿Se produjo difusión?
2. Ajusta la concentración de Na+/ Cl- del recipiente de la
izquierda a 9 mM pulsando el botón (+). Pulsa entonces el Membrana (MWCO)
botón de Dosificar (Dispense) debajo del recipiente de la iz- Soluto
quierda para que se llene. 20 50 100 200
3. Pulsa el botón Agua Desionizada (Deionized Water) de
bajo del recipiente de la derecha y pulsa Dosificar (Dispense) NaCI
debajo del mismo recipiente para que se llene.
4. Fija el Temporizador (Timer) a 60 minutos pulsando el Urea
botón ( + ) junto al indicador de tiempo (que estará compri-
mido en 60 segundos.) Albúmina
5. Pulsa el botón Iniciar (Start) para comenzar el experi-
mento. Observa que el contenedor de membranas desciende Glucosa
al interior del equipo. Observa también que el botón Iniciar
(Start) cambia ahora a un botón de Pausa (Pause), que pue-
des pulsar para interrumpir el experimento. ¿Qué materiales difundieron del recipiente de la izquierda al
6. Cuando el indicador de Tiempo Transcurrido (Elapsed recipiente de la derecha?
Time) llega a 60, fíjate en las lecturas de concentración de
cada uno de los recipientes en los indicadores situados junto
a cada uno de ellos.
¿Cuáles no difundieron?
7. Una vez que el indicador de Tiempo Transcurrido (Elap-
sed Time) ha llegado a 60, verás aparecer una caja de diálogo
indicando si se ha alcanzado o no el equilibrio.
8. Pulsa Guardar Datos (Record Data) para guardar los ¿Por qué?
datos de este experiemento.
9. Pulsa los botones Limpiar (Flush) de ambos lados, iz-
quierdo y derecho, para vaciar los recipientes.
10. Devuelve la membrana de diálisis a su lugar inicial pul-
sando sobre ella y arrastrándola al contenedor de membranas.

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Tabla Periódica de elementos

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A c t i v i d a d 2:
Simulando la diálisis
Ahora, vamos simular un experimento en la máquina de diálisis.
Estas máquinas se utilizan en los pacientes que han perdido la
función renal. La urea, un producto de degradación de los
aminoácidos, debe eliminarse de la sangre del paciente o
llegará a ser tóxica para el organismo causando su muerte.
Las máquinas de diálisis toman la sangre del paciente y la pasan
a través de una membrana selectivamente permeable para
eliminar la urea de la sangre. En un lado de la membrana está la
sangre del paciente; en el otro están las soluciones selec-
cionados cuidadosamente para mimetizar las concentraciones
de sustancias tales como Na+, K+, Ca++ y HCO3- que se
encuentran en el organismo. Para simular este proceso:
1. Coloca la membrana de diálisis de 200 MWCO en el
contenedor de membranas.
2. Ajusta el recipiente de la izquierda a 10 mM para cada
uno de los cuatro solutos y dosifica. Este recipiente represen-
tará la sangre del paciente sometido a diálisis.
3. Ajusta el recipiente de la derecha de la misma manera,
con excepción de la urea que se ajusta a 0 mM —es decir, el
recipiente de la derecha no contendrá urea.
4. Ajusta el Temporizador (Timer) a 60 minutos, después
pulsa Iniciar (Start) y espera a que se complete el experi-
mento.
¿Qué sucede con la concentración de urea en el recipiente de
la izquierda (el paciente)?
¿Por qué ocurre esto?
Normalmente, las máquinas de diálisis se ajustan de forma que la
sangre se somete dos veces a difusión y la urea se reduce un 75%
en vez del 50%. Además se extrae el exceso de agua del
paciente, que no tiene ninguna otra manera de eliminar el exceso
de líquido. Los pacientes sometidos a diálisis necesitan hacerse
pruebas analíticas para asegurarse de que las concentraciones de
iones se mantienen en los niveles normales.
Difusión facilitada
La difusión simple solo considera para el transporte a través de
la membrana algunos iones, pero no todos. Algunas moléculas,
que son demasiado polares para difundir, pueden conseguir
atravesar la bicapa lipídica de la membrana plasmática.
Igualmente, algunas moléculas que son demasiado grandes
para pasar a través de los canales proteicos consiguen cruzar
la membrana. ¿Cómo? El paso de tales molécu-
GCCAFD
las y el movimiento sin difusión de iones a través de una
membrana está mediado por proteínas integrales conocidas
como transportadores. Los transportadores están incrustados
dentro de la membrana plasmática y experimentan un cambio
conformacional que permite que se produzca el transporte.
Primero, se une una molécula al sitio receptor de un
transportador. Cuando está unida, el transportador cambia de
conformación de modo que el sitio de unión se mueve de un
lado de la membrana al otro. Entonces, la molécula se disocia
del transportador y se libera en el otro lado de la membrana.
Este tipo de transporte se denomina difusión facilitada. Se
considera una forma de transporte pasivo porque no se con-
sume energía celular en el proceso.
El término difusión facilitada es un poco engañoso
puesto que el proceso realmente no implica difusión (que,
como recordarás, es el movimiento de moléculas de un lugar a
otro siguiendo un gradiente de concentración, como resultado
del movimiento térmico al azar). En la difusión facilitada las
moléculas también se mueven de un lugar a otro siguiendo un
gradiente de concentración, pero son las proteínas
transportadoras las que dan lugar a este movimiento —no el
movimiento térmico al azar. Los resultados finales de la difu-
sión y de la difusión facilitada son los mismos. El flujo neto
se produce de un área de alta concentración a otra de baja
concentración hasta que estas se igualan a ambos lados de la
membrana.
Entre los sistemas de difusión facilitada más importantes
del organismo están los que mueven la glucosa a través de la
membrana. Sin los transportadores, esta molécula polar rela-
tivamente grande nunca podría pasar a la célula. Sin em-
bargo, el número de proteínas de transporte en una membrana
celular dada es finito, de forma que solo cierta cantidad de
glucosa puede transportarse por unidad de tiempo. El trans-
porte de glucosa dentro de la célula es especialmente intere-
sante, ya que es convertida a glucosa-6-fosfato tan pronto
como se incorpora a la célula, de modo que siempre hay una
baja concentración de glucosa en su interior, lo que favorece el
transporte hacia el interior celular.
Actividad 3:
Difusión facilitada
Usando el ratón, pulsa Experimento (Experiment) en la parte
superior de la pantalla. Aparecerá un menú desplegable. Se-
lecciona Difusión Facilitada (Facilited Diffusion). Apa-
recerá una nueva pantalla (Figura 1.2). Notarás dos cambios
fundamentales respecto a la primera pantalla. Primero, en lugar
de las membranas de diálisis a la derecha de la pantalla, ahora
hay un «Constructor de Membranas» (Membrane Buil-der).
Será utilizado para «fabricar» membranas que transportarán las
moléculas de un recipiente a otro. El segundo cambio es que,
en este experimento, trabajaremos solamente con glucosa, Na+
y Cl-.
1. Observa que el indicador de Transportadores de Glu
cosa (Glucose Carriers) en este momento está fijado a 500.
Pulsa Construir Membrana (Build Membrane) para crear
una membrana con 500 transportadores.
2. Pulsa y arrastra esta membrana al contenedor de mem-
branas situado entre los dos recipientes.
5
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Figura 1.2 Pantalla de inicio del experimento de Difusión facilitada.

3. En el recipiente de la izquierda fija el Na+/ Cl- a 9 mM y 10. Construye una membrana con 900 transportadores de
la glucosa a 9 mM pulsando los botones ( + ) correspondien- glucosa y repite este experimento.
tes. Entonces pulsa Dosificar (Dispense) para llenar el reci-
11. Para comparar, disminuye la concentración de glucosa
piente de la izquierda.
a 3 mM y repite los pasos 1-10 del experimento. Guarda tus
4. En el recipiente de la derecha pulsa el botón Agua De- resultados después de cada experimento pulsando Guardar
sionizada (Deionized Water) debajo del mismo y después Datos (Record Data) y completa la Tabla 2.
Dosificar (Dispense).
5. Fija el Temporizador (Timer) a 60 minutos y pulsa Ini-
ciar (Start).
6. Deja que termine experimento. Cuando el indicador de
Tiempo Transcurrido (Elapsed Time) llega a 60, pulsa Guar- Tabla 2 Resultados de Difusión facilitada
dar Datos (Record Data) para guardar tus datos. Anota tam
bién tus datos en la Tabla 2. Concentración N.° de proteínas
de glucosa transportadas de
1. Pulsa el botón Limpiar (Flush) debajo de cada recipiente glucosa
para vaciarlos y devuelve la membrana al constructor de (mM)
300 500 700 900
membranas.
8. Construye una nueva membrana con 300 transportadores 3
de glucosa y repite este experimento. Asegúrate de guardar
tus resultados, limpiar los recipientes y reemplazar la mem- 9
brana después de cada experimento.
9. Construye una membrana con 700 transportadores de
glucosa y repite este experimento.

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A una concentración dada de glucosa, ¿cómo varía el tiempo
necesario para alcanzar el equilibrio en función del número de
transportadores empleados «para construir» la membrana?
¿Varía la velocidad de difusión del Na+/ Cl- con el número de
receptores?
¿Cuál es el mecanismo de transporte del Na+/Cl-?
Si pones la misma cantidad de glucosa en el recipiente de la
derecha y en el de la izquierda, ¿se observaría difusión?
El hecho de no observar difusión, ¿significa necesariamente
que no está ocurriendo la difusión?
Ósmosis
Una membrana semipermeable es una membrana que es per-
meable al agua pero no a los solutos. La ósmosis se define
como el flujo de agua a través de una membrana semipermeable
desde un área con una mayor concentración de agua (una
concentración más baja de solutos) hasta otra con una menor
concentración de agua (una concentración más alta de solu-
tos). Cuanto mayor es la concentración de solutos, menor es la
concentración de agua. La ósmosis se define también como una
«propiedad coligativa» porque depende de la concentración del
soluto más que de sus propiedades químicas. El agua es una
pequeña molécula polar que difunde muy rápidamente a través
de las membranas celulares. Debido a su naturaleza polar, es de
esperar que el agua no penetre en las regiones li-pídicas no
polares de la membrana celular. Proteínas de membrana,
denominadas acuaporinas, forman canales a través de los
cuales puede difundir el agua. La concentración de estas
acuaporinas varía con el tipo de tejido.
Es esencial entender que el grado hasta el cual disminuye la
concentración de agua por la adición de solutos depende del
número de las partículas de soluto agregadas. Por ejemplo, 1
mol de glucosa disminuye la concentración de agua aproxima-
damente lo mismo que una solución de 1 mol de aminoácido o 1
mol de urea. Una molécula que se ioniza disminuye la con-
centración de agua en proporción al número de iones que se
forman. Por lo tanto, una solución de 1 mol de Na+/Cl- produce
una solución de Na+ de 1 mol más una solución de Cl- de 1 mol.
Por tanto, básicamente es una solución de 2 moles.
Dos recipientes separados por una membrana de diálisis
(tales como con los que hemos estado trabajando) no son in-
finitamente distensibles. La transferencia de agua desde un
GCCAFD
compartimento a otro aumentará la cantidad de agua en el se-
gundo. Si los límites del recipiente no pueden ampliarse, la
presión dentro del segundo recipiente aumentará, impidiendo
la entrada adicional de agua. La presión que necesita ser apli-
cada al segundo recipiente para impedir la entrada adicional
de agua desde el primero se denomina presión osmótica. La
presión osmótica es otra característica que depende de la con-
centración de agua de la solución.
Si las soluciones en los recipientes tienen la misma con-
centración de solutos que no atraviesan de un lado a otro de la
membrana, las dos soluciones se dice que son isotónicas (iso
= iguales). Los solutos que «atraviesan» la membrana no con-
tribuyen a la tonicidad de una solución ya que pasan de un lado a
otro de la membrana sin problemas. Cuando se comparan dos
soluciones y una tiene una concentración más baja de solutos,
esa solución se dice que es hipotónica (hipo = menos). La otra
solución, la que tiene la concentración más alta, se dice que es
hipertónica (hiper = más). Esto es importante al hablar de cé-
lulas. Si una célula es hipertónica con respecto a su medio cir-
cundante, el agua fluirá a su interior para diluir la solución hi-
pertónica. A menudo entra tanta agua que la célula estalla.
A c t i v i d a d 4:
Ósmosis
Pulsa Experimento (Experiment) en la parte superior de la
pantalla y selecciona Ósmosis. Aparecerá una nueva pantalla
(Figura 1.3). Esta es similar a la que vimos para el experi-
mento de Difusión Simple (Simple Diffusion). El principal
cambio es que en la parte superior de cada recipiente hay un
indicador de presión, que veremos durante el transcurso de
los experimentos.
1. Arrastra una membrana de 20 MWCO y colócala entre
los dos recipientes.
2. Fija la concentración de Na+/ Cl- del recipiente de la iz-
quierda a 9 mM y pulsa Dosificar (Dispense).
3. Llena el recipiente de la derecha con Agua Desionizada
(Deionized Water) y pulsa Dosificar (Dispense).
4. Fija el Temporizador (Timer) a 60 minutos.
5. Pulsa Iniciar (Start) y deja que transcurra el experi
mento. Presta atención a los indicadores de «presión» (Pres-
sure) en la parte superior de cada recipiente.
6. Una vez detenido el Tiempo Transcurrido (Elapsed
Time) pulsa Guardar Datos (Record Data). Anota también
los datos en la Tabla 3 de la pág. 8.
7. Pulsa Limpiar (Flush) debajo de ambos recipientes para
vaciarlos.
8. Devuelve la membrana a su lugar original.
9. Repite el experimento usando las tres membranas restan
tes. Asegúrate de guardar todos tus datos y limpiar los reci-
pientes entre cada experimento.
¿Observaste cambios de presión durante este experimento? Si
es así ¿en qué recipiente(s) y con qué membranas?
7
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Figura 1.3 Pantalla de inicio del experimento de Ósmosis.

¿Por qué? 10. Repite el experimento usando primero albúmina 9 mM en

el recipiente de la izquierda y después glucosa 9 mM. Pulsa
Guardar Datos (Record Data) después de cada experimento;
anota también tus datos en la Tabla 3.

Tabla 3 Resultados de Ósmosis

¿Difundieron el Na+ / Cl- desde el recipiente de la izquierda (presión en mm Hg)
al de la derecha? Si es así, ¿con qué membrana(s)?
Membr an a ( MWCO)

Soluto 20 50 100 200

Na+/CI-
¿Por qué?
Albúmina

Glucosa

8
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11. Pulsa Herramientas (Tools) -»Imprimir Datos (Print
Data) para imprimir tus datos.
Explica la relación entre la concentración de solutos y la pre-
sión osmótica.
¿La difusión permite que se genere presión osmótica?
¿Se generaría presión si las concentraciones de solutos fueran
iguales a ambos lados de la membrana?
¿Por qué o por qué no?
¿Se generaría presión si tuvieras glucosa 9 mM en un lado de la
membrana de 200 MWCO y NaCl 9 mM en el otro lado? Si
es así, ¿qué solución generaría la presión?
¿Se generaría presión si tuvieras albúmina 9 mM en un lado de
la membrana de 200 MWCO y NaCl 9 mM en el otro lado?
Si es así, ¿qué solución generaría la presión?
Filtración
A la vez que la difusión permite que las células tomen oxígeno
y alimentos mientras eliminan el dióxido de carbono y los
desechos metabólicos, también está ocurriendo otro proceso.
Este proceso se produce principalmente en los capilares del
organismo (tales como los renales) donde la presión del fluido
sanguíneo — denominada presión hidrostática — fuerza a los
materiales a atravesar la pared capilar. Tanto la sangre como
el fluido intersticial contienen solutos disueltos. Generalmente,
la presión osmótica del fluido intersticial no es tan grande como
la presión hidrostática de la sangre, por lo que hay un
movimiento neto de fluidos y/o solutos hacia fuera de los
capilares — un proceso denominado filtración. Lo que se filtra
hacia fuera depende solamente del tamaño molecular del
soluto y del tamaño de los «poros» de la membrana. La
filtración se considera un proceso pasivo, puesto que ocurre sin
gasto de energía metabólica.
Actividad 5:
Filtración
Pulsa Experimento (Experiment) en la parte superior de la
pantalla y selecciona Filtración (Filtration). Verás una pan-
talla de inicio bastante diferente a las de las actividades
GCCAFD
anteriores (Figura 1.4). Observa los dos recipientes situados
en el lado izquierdo de la pantalla, uno encima del otro. Ob-
serva también que el recipiente superior contiene un indicador
de presión. A diferencia del experimento de ósmosis, en el
cual el indicador de presión medía la presión desarrollada
debido al movimiento del agua, este indicador de presión
mide la presión hidrostática que filtrará el líquido del reci-
piente superior al recipiente inferior. Finalmente, observa el
módulo de «Análisis de Residuos de Membrana» (Membrana
Residue Análisis). Éste se utilizará para detectar si queda algún
soluto en la membrana después de cada experimento.
1. Pulsa y arrastra la membrana de 20 MWCO al contene-
dor de membranas situado entre los dos recipientes.
2. Fija el Na + /Cl - a 9 mM, la urea (Urea) y la glucosa
(Glucose) a 5 mM y el carbón vegetal en polvo (Powdered
Charcoal) a 5 mg/ml pulsando el botón (+) junto a cada so-
luto. Entonces pulsa Dosificar (Dispense) para verterlo en el
recipiente superior.
3. Deja la presión en 50 mm Hg y el Temporizador (Timer)
en 60 minutos, los ajustes por defecto. Pulsa Iniciar (Start).
Verás como el líquido es filtrado al recipiente inferior.
4. Mira el módulo Unidad de Análisis del Filtrado al lado
del recipiente inferior para cualquier actividad. Ello te indi-
cará qué solutos están pasando a través de la membrana.
5. Cuando hayan pasado los 60 minutos, arrastra la mem-
brana al módulo de Análisis de Residuos de Membrana
(Membrana Residue Analysis) y suelta el ratón. La membrana
se colocará en su lugar. Pulsa Iniciar Análisis (Start Analy-
sis). En el módulo de datos inferior, verás qué soluto(s) fue-
ron detectados en la membrana usada para la filtración.
6. Guarda tus datos pulsando Guardar Datos (Record
Data).
¿Cuáles fueron los resultados del análisis inicial de la mem-
brana?
7. Pulsa Limpiar (Flush) y devuelve la membrana a su lu
gar original.
8. Arrastra la membrana de 50 MWCO al contenedor de
membranas situado entre los dos recipientes.
9. Mantén la presión en 50 y repite el experimento. Cuando
el Temporizador (Timer) haya alcanzado los 60 minutos, rea-
liza un análisis de la membrana y pulsa Guardar Datos (Re
cord Data).
10. Pulsa Limpiar (Flush) y devuelve la membrana a su
lugar.
11. Repite los pasos 8-10 con las dos membranas restantes.
Asegúrate de guardar tus datos para cada experimento.
12. Aumenta la presión a 100 mm Hg y repite el experi-
mento completo. Una vez más, guarda todos los datos experi-
mentales.
.
9
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Figura 1.4 Pantalla de inicio del experimento de Filtración.

¿Afecta el límite de la membrana (MWCO) a la velocidad de ¿Cómo puede el organismo aumentar selectivamente la veloci-
filtración (Fíltration Rate)? dad de filtración (Filtration Rate) de un órgano o sistema dado?

¿Afecta la presión aplicada a la velocidad de filtración (Fil-

tration Rate)?
Transporte Activo
El transporte activo difiere del transporte pasivo en que se
¿Pasaron todos los solutos a través de todas las membranas? utiliza energía metabólica para mover solutos a través de la
membrana. También se diferencia en que los solutos se mueven
desde un área de menor concentración a otra de mayor
concentración —al contrario de lo que ocurre en la difusión
Si no, ¿cuál o cuáles no lo hicieron? facilitada. Como en la difusión facilitada, se requiere la unión
de una sustancia a un transportador. Puesto que la sustancia
unida se está moviendo «cuesta arriba» hasta un área de
mayor concentración, los transportadores se denominan, a
¿Por qué?

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Prácticas de Fisiología del Ejercicio-I
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menudo, bombas. El movimiento neto desde una concentración
menor a otra mayor y el mantenimiento de una concentración
elevada estable en un lado de la membrana solo puede alcanzarse
mediante la aportación continua de energía al mecanismo de
transporte activo. El aporte de energía puede alterar la afinidad
del lugar de unión del transportador de modo que haya una
afinidad más alta a un lado que al otro, o la energía puede
alterar la velocidad a la que el transportador mueve el sitio de
unión de un lado de la membrana al otro. Como en la difusión
facilitada, el número de las moléculas transportadoras por la
célula es finito.
La energía para el transporte activo deriva del metabo-
lismo celular. La inhibición del ATP bloquea el mecanismo de
transporte activo. Para que los solutos se muevan desde un área
de menor concentración a otra de mayor concentración, el
transporte debe estar acoplado con el flujo de energía desde un
nivel energético mayor hasta otro menor. Si el ATP se utiliza
directamente en el transporte, el mecanismo de transporte se
conoce como transporte activo primario.
La energía se produce mediante la hidrólisis de ATP por un
transportador que es un ATPasa que cataliza la rotura del ATP y
su autofosforilación. Esta fosforilación del transportador
Figura 1.5 Pantalla de inicio del experimento de Transporte activo.
GCCAFD
alterará la afinidad del sitio de unión o bien la velocidad del
cambio conformacional. Se han identificado cuatro proteínas
de transporte activo primario. En todas las membranas plas-
máticas hay una sodio-potasio ATPasa, responsable del flujo
hacia el exterior de sodio y del flujo hacia el interior de potasio.
El sodio es el principal ion encontrado en el fluido extra-
celular, mientras que el potasio es más abundante en el interior
de las células. Otras proteínas de transporte están implicadas
en el transporte de calcio, transporte de hidrógeno y en el
transporte de hidrógeno-potasio.
A c t i v i d a d 6:
Transporte activo
Pulsa Experimento (Experiment) en la parte superior de la
pantalla y selecciona Transporte Activo (Active Transport).
Aparecerá una nueva pantalla que se asemeja a la pantalla de la
difusión facilitada (Figura 1.5). El principal cambio es la
adición de un dosificador de ATP encima de los recipientes.
Recuerda que, puesto que el ATP es necesario para que el sis-
tema funcione, debe ser agregado en cada experimento.
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1. Asegúrate que en el Constructor de Membranas (Mem- Ahora que has realizado el experimento básico, vamos a lle-
brane Builder) el número de transportadores de glucosa está var a cabo dos variaciones.
fijado en 500 y el número de bombas Na+/K+ también está fi-
12. Repite el experimento sin incrementar la cantidad de
jado en 500.
ATP añadida al sistema.
2. Pulsa Construir Membrana (Build Membrane).
¿Varía la cantidad de NaCl/KCl transportados?
3. Arrastra la membrana «construida» al contenedor de
membranas situado entre los dos recipientes.
4. En el recipiente de la izquierda, fija a 9 mM el
Na+/ Cl- pulsando el botón ( + ) y pulsa Dosificar (Dispense).
5. En el recipiente de la derecha, pulsa Agua Desionizada 13. Repite el experimento sin cambiar el número de trans-
(Deionized Water) y después Dosificar (Dispense). portadores y bombas cuando construyas la membrana.
6. Fija el ATP a 1 mM y después pulsa Dosificar ATP (Dis- La cantidad de solutos transportada a través de la membrana
pense ATP). ¿varía con el aumento de transportadores o de bombas?
1. Asegúrate de que el Temporizador (Timer) está fijado a
60 minutos y pulsa Iniciar (Start).
Al final de este experimento, ¿se movieron el Na+/Cl- desde el
recipiente de la izquierda al recipiente de la derecha? ¿Algún soluto se ve más afectado que otro?

La membrana que has «construido», ¿permite la difusión

¿Por qué?
simple?

8. Pulsa Limpiar (Flush) debajo de ambos recipientes.

9. Añade 9 mM de Na+/ Cl- al recipiente de la izquierda y Si colocaras NaCl 9 mM en un lado de la membrana y 15 mM
9 mM de KC1 al recipiente de la derecha. Pulsa Dosificar en el otro, ¿habría movimiento del NaCl?
(Dispense).

10. Fija el ATP a 1 mM, pulsa Dosificar ATP (Dispense

ATP) y después Iniciar (Start).
11. Al final del experimento pulsa Guardar Datos (Record ¿Por qué?
Data).
A medida que el experimento progresa, las concentraciones de
los solutos cambiarán en las ventanas situadas al lado de los
recipientes. La velocidad disminuirá notablemente, para ¿Produce alguna diferencia la cantidad de ATP agregada?
pararse antes de completarse el experimento. ¿Por qué?

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