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Este documento describe la enzima AST (aspartato aminotransferasa), que se encuentra principalmente en el hígado y el corazón. Los niveles de AST aumentan moderadamente entre 6-8 horas después de un ataque cardíaco y alcanzan su punto máximo a los 2 días antes de volver a la normalidad en 4-6 días. También proporciona instrucciones para realizar un análisis de AST en suero o plasma utilizando reactivos químicos que miden cambios en la absorbancia a 340 nm.
Este documento describe la enzima AST (aspartato aminotransferasa), que se encuentra principalmente en el hígado y el corazón. Los niveles de AST aumentan moderadamente entre 6-8 horas después de un ataque cardíaco y alcanzan su punto máximo a los 2 días antes de volver a la normalidad en 4-6 días. También proporciona instrucciones para realizar un análisis de AST en suero o plasma utilizando reactivos químicos que miden cambios en la absorbancia a 340 nm.
Este documento describe la enzima AST (aspartato aminotransferasa), que se encuentra principalmente en el hígado y el corazón. Los niveles de AST aumentan moderadamente entre 6-8 horas después de un ataque cardíaco y alcanzan su punto máximo a los 2 días antes de volver a la normalidad en 4-6 días. También proporciona instrucciones para realizar un análisis de AST en suero o plasma utilizando reactivos químicos que miden cambios en la absorbancia a 340 nm.
ENZIMA BILOCULAR (citoplasmática y mitocondrial)ampliamente
difundida ,se encuentra en mayor concentración en el hígado y el El Reactivo B puede INDICIOS DE INESTABILIDAD O DETERIORO : corazón.en IAM se observa un aumento moderado a las 6 U 8 horas presentar una coloración pardo rosada que no afecta su de ocurrido el episodio,llegaa su máximo a los 2 dias y luego retorna a Fundamento delfuncionamiento método . Reactivo único inferiores a 0,900 D.O. o la normalidad en el 4TO y 6TOdía. superiores a 1,800 D.O. (a 340 nm) son indicio de deterioro del mismo REACTIVOS PROVISTOS : MUESTRA: suero o plasma
SUERO: obtener de manera usual. ALT es
estable 3 días en refrigerador,sin agregados de conservantes,no se debe congelar(-)..
PLASMA:obtener de manera usual con
HEPARINA O EDTA
-Sustancias interferentes EN LA MUESTRA
Reactivos Provistos: son estables en - No se observan interferencias por ReactivoA: solución de buffer TRIS bilirrubina hasta 30 mg/dl, ni triglicéridos refrigerador (2- 10° C) hasta la fecha pH 7,8 conteniendo L-aspartatoListo de vencimiento indicada en la caja. hasta 500 mg/dl. para usar Una vez abiertos, no deben - La hemoglobina interfiere permanecer fuera del refrigerador significativamente aumentando los ReactivoB: solución conteniendo 2- por períodos prolongados resultados debido a la presencia de AST en oxoglutarato, nicotinamida adenina .EVITAR CONTAMINACIONES. los eritrocitos dinucleótido reducido (NADH), -Las muestras de pacientes hemodializados o con hipovitaminosis o patologías asociadas malato deshidrogenasa (MDH) y con deficiencia de piridoxal fosfato producen lactato deshidrogenasa (LDH).listos Reactivo único (premezclado): valores falsamente disminuidos. estable 2 meses en refrigerador para usar (2-10º°C) a partir de la fecha de Reactivo único: se puede preparar si su preparación.
se desea mezclando 4 partes de
reactivo A con 1 parte del reactivo B
DETERMINACIÓN DE AST EN MUESTRA DE SUERO CON REACTIVO SEPARADOS A 37°C
1. En una cubeta mantenida a 37°C colocar:
2. CONDICIONES DE REACCIÓN PARA SUERO (DATO ES EL MISMO EN PLASMA) Reactivo A 0,80 ml Longitud de onda: 340 nm MUESTRA 100ul Temperatura de reacción: 25,30 O 37°C Tiempo de reacción: 4 minutos Preincubar unos minutos.luego Volumen de muestra: 100 ul agregar: Reactivo B 0,20 ml 3. Mezclar inmediatamente y disparar simultáneamente el cronómetro. Esperar 90 segundos y leer la absorbancia inicial (esto tiene un fin de control , para ver si el ALT tiene mucha actividad o si hay una concentración elevada de cetoácidos endógenos), luego leer a los 1, 2 y 3 minutos de la primera lectura. Determinar la diferencia promedio de absorbancia/min (∆A/ min), restando cada lectura de la anterior y promediando los valores. Utilizar este promedio para los cálculos(1,2 y 3 min)
RECORDAR: UNA ABSORBANCIA INICIAL BAJA : cuando una vez
CÁLCULO DE LOS RESULTADOS : agregado el suero la primera lectura (tiempo 0) es inferior a 0,900 D.O., estando el Sustrato en condiciones, indica A ST ( UIl )=¿ una muestra con muy alta actividad de GPT (que consume el NADH aún antes de esta lectura) o con una concentración de cetoácidos endógenos particularmente donde : F=1746 elevada. En este caso, repetir la determinación con muestra diluida con solución fisiológica y multiplicar el resultado por la dilución efectuada. Linealidad: 600 UI/l