EFP MEDICINA VETERINARIA – UNIVERSIDAD

NACIONAL DE SAN CRISTOBAL DE HUAMANGA

CURSO DE BIOTECNOLOGÍA VETERINARIA – MV 540

MANIPULACIÓN DE GAMETOS.
COLECCIÓN SEMEN.
COLECCIÓN DE OVOCITOS

Dr. Arturo Rodríguez Zamora

5
 LA BIOTECNOLOGIA ES UN CONJUNTO DE

TECNICAS QUE PERMITEN MANIPULAR A

LOS SERES VIVOS PARA PRODUCIR BIENES

Y SERVICOS DE INTERES HUMANO

RESPETANDO EL MEDIO AMBIENTE Y EL

BIENESTAR ANIMAL.

«Es indiscutible que el trasplante de embriones y las

nuevas biotecnologías, abren nuevas esperanzas para
reactivar nuestra ganadería de país sub desarrollado,
que se encuentra hace varias décadas, agobiado por una
serie de problemas entre los que destacan una FALTA
DE DECISIÓN POLÍTICA»
Héctor Palomino Martorell
 Obtención y
manipulación:
gametos,
embriones y genes

Optimización de Viabilizar nuevos

Objetivos y más eficientes
la eficiencia de las
productiva y TRAs
sistemas de
reproductiva producción Animal

mejoramiento
genético
 PORQUE SURGE
LA NECESIDAD!
Desde los años 70, tanto en los
países en vías de desarrollo como
en los desarrollados, el consumo
de carne se ha triplicado en el
mundo, esto sin tener en cuenta
el consumo de la población china
que viene en ascenso
desmesurado. Esta alta demanda
regirá la revolución ganadera, en
contraposición con la revolución
verde movida por la oferta.
Esta fuerte tendencia hacia
el consumo de carne de
res, lleva a la necesidad de
aumentar de manera
drástica la población
bovina de alta calidad que
existe en los países con
potencial para la
explotación de ganado en
el mundo. La pregunta es:
¿Cómo aumentar el
número de bovinos tan
rápido como la demanda lo
exige?

Chris Harris, director de ThePoultrySite.

http://www.elsitioavicola.com/articles/1772/el-desafao-global-de-la-seguridad-
 EVOLUCIÓN DE LAS BIOTÉCNICAS
REPRODUCTIVAS (Thibier, 2005)

1era Generación
I.A. Alrededor de 130 millones de vacas inseminadas/año
en el mundo y entre 3 y 4 millones de vacas/año en
Argentina. Uso intensivo desde 1945

2da Generación
Control del ciclo estral e IATF. A partir de
la década del 70. En nuestro país, con uso explosivo a
partir del siglo XXI. Actualmente cerca de 1.5 millones
son IATF
3era Generación
Superovulación y Transferencia de embriones. Más de 600
mil transferencias/año. En uso comercial desde 1975. En
Argentina se estima aprox. 25000 colectados y 6000
transferidos/año

4ta Generación
Sexado de embriones (1990) y de semen (siglo XXI), y
producción in vitro de embriones (PIV) (1992), varios
miles por año y crecimiento explosivo en Brasil siglo XXI

5ta Generación
Clonado y transgénesis. Desarrollo y uso incrementado a
partir de Dolly (fines del siglo XX)
Técnicas para la manipulación del Ciclo
estral y de la ovulación
Inducción o Sincronización
de celos

Sincronización de
ovulación

Superovulación

Manipulación de la onda
folicular.
Colección de semen.

Dilución, Conservación,

Criopreservación

Sexaje de espermatozoides.

Inseminación Artificial.
 Técnicas para la manipulación de Ovocitos

IN VIVO IN VITRO
 Superovulación.
 Colección de ovocitos - OPU
 Fertilización de ovocitos (con o sin superovulación).
in vivo.

 Maduración -fertilización y
de Embriones
Manipulación

 Recolección embriones.
cultivo in vitro.

 Criopreservación.  Criopreservación.

 Vitrificación.  Vitrificación.
Técnicas para la manipulación de Embriones

Recolección

Transferencia

Sexaje de embriones

Bisección

Clonación

Transferencia de genes
MANIPULACION DE GAMETOS
1. COLECCIÓN DE SEMEN METODOS
1. VAGINA ARTIFICIAL
Camiseta delgada y flexible
Vaso Colector - Tubo de vidrio graduado
Temperatura agua: 50 - 55° C
Temperatura vagina: 42 ° C
2. ELECTROEYACULACIÓN
The principle is based on stimulation of the
sympathetic-parasympathetic nervous
systems.
Vacunos, Ovinos, caprinos, primates
The posterior mesenteric and pelvic plexuses control, to a large degree, the following
physiological functions:
(A) smooth muscles of the head of the epididymis, vas deferens, ampulla of the vas
deferens, ejaculatory duct system, accessory glands and that part of the urethra
from the ejaculatory duct area to the external opening;
(B) Smooth muscles of the vascular system of the accessory gland area and the shaft
of the penis;
(C) Diversion of the blood supply to the cavernous areas of the erectile tissue within
the penis;
(D) A concurrent relaxation of the retractor penis muscles;
(E) Erection of the muscle structures of the preputial sheath to accommodate
movement to the shaft of the penis within and;
(F) The instantaneous mixture of accessory gland fluids with spermatozoa and forcible
ejection of this mixture.
In conjunction with these segments of the autonomic nervous system the spinal nerves
and their ganglia control the skeletal muscles in the case of electro-stimulation
designed to produce ejaculation the lumbar and sacral spinal nerves are involved since
they are contained in close proximity to the area within the pelvic cavity which
receives the probe.
 REVISAR PDF:
standard_precision_manual
EYACULADOR
 REVISAR PDF:
3. MANUAL CanineCollectionSystem_es_121
107. minitube

Cerdos, caninos.
 Frecuencia de Colección
Toros - 2 ó 3 veces por semana
 Frecuencia de Colección

Toros - 2 ó 3 veces por semana

Carneros - Varias veces al día en temporada
de servicio.
Caballos - 2 ó 3 veces por semana
Perros - 4 ó 5 veces por semana
3. DILUCION DE SEMEN
Propiedades de dilutores:

• Buffer, ph
• Iso osmolaridad con plasma
seminal
• Fuerza iónica.
• Propiedades antibacteriales
• Isotermal.
• Aporte de energía.
DILUTORES BÁSICOS -componentes
Agua ultrapura, disolvente.
Yema de huevo
Citrato de sodio
Tris –hidroximetril aminometano
Glucosa
Fructosa
Leche descremada
4. REFRIGERACION Y
CONGELAMIENTO DE SEMEN
FACTORES EN CRIOPRESERVACIÓN
• Procesamiento inmediato del semen
• Macromoléculas que protejan al esperma contra
el shock térmico en el pre congelamiento: yema de
huevo o leche calentada
• Tasa de enfríamiento y tiempo de pre
congelamiento: Varía con la especie
•Sustancias Crioprotectoras especiales: Glicerol,
etilenglicol, etc
5. CONSERVACIÓN Y
ALMACENAMIENTO
* Refrigeración
Dependiendo de dilutor 3 a 5 días a
4° C
* Congelación
A - 196° C en Nitrógeno líquido
¡tiempo indefinido!
LABORATORIO INSEMINACIÓN
TANQUE DE NITROGENO
LIQUIDO
 INSEMINACION ARTIFICIAL

ESPECIE ESPERM./DOSIS VOL.DOSIS MOMENTO

Vacunos 12 - 20 mill. 0.25 -0.5 Al final del celo

Ovinos 120 mill. 0.1 - 0.2cc 2da mitad celo
Caprinos 100 mill. 0.1 - 0.5cc 2da mitad celo
Equinos 500m - 1 billón 15 - 50 cc Fol.preovul.pte.
Cerdos 5,000 mill 50 - 200cc 48 h. inicio celo
Perros 200 mill. + 5 cc 2-3 d. del estro
 VER VIDEOS:
• CONGELACION SEMEN
BOVINOS
• Análisis y congelamiento del
semen bovino
Y
COMENTAR
VAGINA ARTIFICIAL DE EQUINO
COLECCIÓN DE SEMEN - EQUINO
INSEMINACIÒN DE LA YEGUA
 INSEMINACIÓN ARTIFICIAL
CERDAS
Procesos asociados a una IA:
Colección de semen
Dilución de semen
Almacenamiento del semen
Conservación de Semen
 COLECCIÓN DE SEMEN

p
 DILUCIÓN DEL SEMEN
P
ALMACENAMIENTO DE SEMEN
CONSERVACIÓN DE SEMEN
Detección exitosa del celo: MOMENTO ÓPTIMO PARA LA
INSEMINACIÓN ARTIFICIAL
Catéteres: IA CERVICAL
Catéteres: IA INTRAUTERINA
Pasos para la IA

Semen conservado

Desinfección de la vulva

Apertura de la dosis de IA
… Pasos para la IA

Se conecta el catéter con la

dosis de IA.

Se coloca lubricante en la
punta del catéter.
Se introduce el catéter por
la vulva sentido antihorario

Hasta fijar la punta del

catéter en el lugar donde se
ha de depositar el semen
 LUBRICANTES
-
… Pasos para la IA

La dosis de semen es
depositada poco a poco

Ya depositada la dosis de
semen, se observa si ocurre
reflujo.
Tipos de inseminación artificial
Post IA cerdas
Cuando se ha depositado todo el semen, extraer la
pipeta haciéndola girar en el sentido de las agujas del
reloj mientras se extrae con suavidad.

En cada inseminación se debe usar una pipeta/catéter

nueva para eliminar la posibilidad de transmitir
infecciones de una hembra a otra.

Mantenga a la hembra en un sitio tranquilo por 20 a 30

minutos. Cualquier inquietud en estos momentos puede
interrumpir el transporte del semen y la fertilización.
 2. Técnicas para la manipulación de
Ovocitos

IN VIVO IN VITRO
 Superovulación.
 Colección de ovocitos - OPU
 Fertilización de ovocitos (con o sin superovulación).
in vivo.

 Maduración -fertilización y
de Embriones
Manipulación

 Recolección embriones.
cultivo in vitro.

 Criopreservación.  Criopreservación.

 Vitrificación.  Vitrificación.
Question please?

Ver
sacudite!!!