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INSTITUCIÓN EDUCATIVA COLEGIO LOYOLA

PARA LA CIENCIA Y LA INNOVACIÓN


Resolución de Creación: 00003 de Enero 05 de 2010
Cra. 65 No. 98A-75, Teléfono: 4405105
NIT: 900339251-3, DANE: 105001025984
Página web: www.iecolegioloyola.edu.co
Núcleo 920, Castilla, Medellín
HUMANISMO E INVESTIGACIÓN PARA LA VIDA
Proceso: GESTIÓN CURRICULAR
Nombre documento: PROYECTO Código: GCU-FR20 Versión: 01

Croqueta a base de Azadiractina extraída de la semilla del árbol de


Neem para combatir la garrapata canina.

Fabián Aguinaga Mira


Yong Shim Blanco Jiménez
Jesús Antonio Castaño Mesa
Juan José Gallego Montoya
Manuela Giraldo Restrepo

Doggie Faithful

Institución Educativa Colegio Loyola para la Ciencia y la Innovación


Comité de Investigación Escolar
Medellín
2021
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Croqueta a base de Azadiractina extraída de la semilla del árbol


de Neem para combatir la garrapata canina.

Doggie Faithful
Fabián Aguinaga Mira
Yong Shim Blanco Jiménez
Jesús Antonio Castaño Mesa
Juan José Gallego Montoya
Manuela Giraldo Restrepo

Asesor(es):

Elizabeth Álvarez Arango - SENA, Ciencias básicas.


Christian David Barrera Carrera - Institucional.

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AGRADECIMIENTOS
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CONTENIDO

Pág.
Resumen

1. Introducción

2. Descripción del problema y pregunta de investigación

3. Objetivo general y objetivos específicos

4. Justificación e impacto social/ambiental

5. Antecedentes y marco teórico

6. Ruta metodológica

7. Resultados y discusión

8. Conclusiones

Referencias bibliográficas

Anexos
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LISTA DE TABLAS

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Tabla 1. Título de la tabla
Tabla 2. Título de la tabla
Tabla 3. Título de la tabla

LISTA DE FIGURAS

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Figura 1. Título de la figura
Figura 2. Título de la figura
Figura 3. Título de la figura

LISTA DE ANEXOS

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Anexo 1. Título del anexo
Anexo 2. Título del anexo
Anexo 3. Título del anexo
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Resumen
Elaborar una croqueta para caninos desde un extracto de azadiractina de la semilla del
árbol Neem, este funciona para combatir las garrapatas, sin causar problemas en el
desarrollo y cotidianidad de los caninos.

Palabras clave
Neem, extraer, croqueta, caninos, garrapatas, semilla, árbol, azadiractina, insecticida,
aceite, hospedador, huésped, enfermedades, Rhipicephalus sanguineus (Rs), larvas,
plagas, control, comportamiento, alimentación.

Abstract
Prepare a kibble for canines from an extract of azadirachtin from the seed of the Neem
tree, this works to combat ticks, without causing problems in the development and
daily life of canines.

Keywords
Neem, extract, kibble, canines, ticks, seed, tree, azadirachtin, insecticide, oil, host, host,
diseases, Rhipicephalus sanguineus (Rs), larvae, pests, control, behavior, feeding.

1. Introducción

Las garrapatas son consideradas ectoparásitos pertenecientes a Phylum Arthropoda,


clase Arachnida, subclase Acari, Orden Parasitiformes y Suborden
Ixodida, la diversidad mundial conocidas es de 896 especies agrupadas en tres
familias: Argasidae (193 especies), Ixodidae (702 especies) y Nuttalliellidae
(monotípica) (Guglielmone et al., 2010). Según esto, se busca hacer algo al respecto,
elaborando una croqueta a base de un extracto de Azadiractina proveniente del árbol
de Neem, un árbol de la india, ya usado como insecticida contra las garrapatas. La
garrapata de la investigación es la Rhipicephalus Sanguineus (Rs), más conocida como
garrapata café o garrapata dura. Los patógenos ingeridos por las garrapatas también
pueden transmitirse transestadial y/o transovarial, aunado a que las garrapatas
hembras presentan una alta tasa reproductiva, aumenta la posibilidad de propagación
eficaz de los agentes infecciosos en las poblaciones de hospederos reservorios,
particularmente, en animales de compañía y de manera incidental en humanos que
interaccionan con dichos animales.
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2. Descripción del problema y pregunta de investigación

Se percibe que uno de los problemas más frecuentes en los caninos, en cualquier
etapa de su vida, es la alta probabilidad de contraer garrapatas. Estos animales son
artrópodos que pertenecen al orden de los ácaros. Existen dos familias de garrapatas:
blandas y duras, siendo estas últimas las que parasitan a nuestros animales de
compañía. Se diferencian machos y hembras, su tamaño varía entre muy pocos
milímetros hasta un centímetro de longitud, y la coloración, variable según la especie,
puede ser marrón café o grisáceo. Poseen cuatro pares de patas y un aparato bucal
especializado denominado capítulo, que les permite penetrar la piel y alimentarse de
la sangre de los animales que actúan como hospedadores.

Una garrapata puede absorber una cantidad mínima de sangre, que no afecta
gravemente a su hospedador, es decir, un perro puede soportar sin ningún problema
una cantidad mínima de dicho huésped, dado que se entiende que el tiempo máximo
de alojamiento es de 1 mes y medio. Pero si las garrapatas son numerosas, el animal
puede llegar a debilitarse y así comenzar a padecer enfermedades graves e
importantes.

La verdadera importancia epidemiológica de las garrapatas se basa en las diferentes


posibilidades de poder transmitir enfermedades graves o de carácter importante para
los perros, las más comunes son: La lyme, los síntomas pueden tardar en ser visibles
unas semanas o incluso meses. En esta enfermedad se dan síntomas muy amplios y
puede que haya perros que no muestren todos. Puede ser que se manifieste sólo un
síntoma, como la cojera que es el síntoma más común, sin embargo, estos son los
síntomas: cojera recurrente; esta se debe a la inflamación de las articulaciones caninas,
así mismo, artritis y deformación en las articulaciones, sensibilidad al tacto, dolores
musculares,y en la zona de la picadura se genera una inflamación o irritación, fiebre,
falta de apetito o depresión, y en uno de sus peores casos, carditis o inflamación en el
corazón.

Otra enfermedad canina es la anaplasmosis, la cual provoca síntomas parecidos a los


de la gripe en nuestro can. La fiebre alta es el efecto principal, y puede ir acompañada
de diarrea, vómitos e inflamación y parálisis en las articulaciones.

La babeosis, es una enfermedad que ocasiona una anemia gradual en el can; también
tiene como síntomas característicos la fiebre y una decoloración amarilla en los tejidos
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corporales del can. La coloración amarillenta es causada por la subida de la bilirrubina


en la sangre.

La especie de garrapata a tratar en esta investigación es de tipo dura y su nombre


científico es Rhipicephalus sanguineus (Rs), más conocida como la garrapata café, que
no se limita a permanecer en los perros, también se adhieren a personas y otros
animales.
En los caninos estos parásitos comúnmente se encuentran detrás de las orejas, entre
los dedos de las patas, mientras que las garrapatas jóvenes, se localizan en la parte
trasera del animal.

Las garrapatas, al adaptarse bien en ambientes urbanos, inclusive, ellas y sus larvas son
capaces de vivir hasta 8 meses sin alimento (huésped), pueden dominar las infecciones
accidentales en los humanos. Más bien, suelen trepar paredes y pasar a áreas vecinas.
¹ (Roque, 2016)

3. Objetivo general y objetivos específicos

Objetivo general:

- Desarrollar una croqueta canina que contenga Azadiractina extraída de la semilla del
árbol de Neem, que prevenga y elimine la garrapata canina Rhipicephalus sanguineus.

Objetivos específicos:

- Establecer los ingredientes y cantidades necesarios para elaborar una croqueta, tales
como excipientes, proteínas, hidratos de carbono, vitaminas y minerales y el
ingrediente activo anti garrapata de la azadiractina.

- Extraer y caracterizar químicamente la Azadiractina de la semilla del árbol de Neem,


para usarlo como ingrediente activo anti garrapata en la elaboración de una croqueta.

- Elaborar la croqueta canina con la concentración adecuada de Azadiractina que tenga


un efecto anti garrapata frente la especie Rhipicephalus sanguineus.
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4. Justificación e impacto social/ambiental

Se ha evidenciado, que uno de los problemas más frecuentes en los caninos, en


cualquier etapa de su vida, es la alta probabilidad de contraer garrapatas, las cuales
generan una gran cantidad de enfermedades en los animales. En Colombia, hay
alrededor de 2 '000.000 de familias que tienen caninos de mascota en sus casas, los
cuales suelen padecer infestaciones de garrapatas, ya que el calor y los olores que
desprenden atraen de manera inoportuna a los ectoparásitos; éste fenómeno es
debido generalmente al dióxido de carbono, que emite el perro a través de su piel, que
se convierte en una fragancia irresistible para estos arañuelos. (Mascoteros Blog, Oct.
2020). Además, en cualquier etapa de su vida pueden llegar a contraer garrapatas, y
cuando ello ocurre se despierta un miedo constante en los cuidadores, por las
diferentes enfermedades que pueden transmitir a sus mascotas.
El ciclo de vida de las garrapatas inicia cuando la hembra deposita sus huevos y estos
se desarrollan y dan lugar a larvas, las cuales pueden pasar más de 8 meses sin
alimento y así esperar al paso de un hospedador. Este arañuelo absorbe una cantidad
mínima de sangre, el canino hospedador puede soportarlo sin ninguna dificultad, pero
si hay gran cantidad de estas, el animal se puede debilitar y comenzar a padecer
enfermedades graves. (Scalibor, Blog)
Existen diferentes métodos para combatir a estos arañuelos, tanto para prevenirlos,
como para tratar las infecciones que puede llegar a contraer, estos se diferencian por
el modo de aplicación, en cómo actúan, y en cuánto tiempo protegen a tu canino. Hay
variaciones según los métodos de aplicación: collares, pipetas, pastillas, espráis,
lociones, polvo o champús antiparasitarios que pueden usarse de forma individual o
combinada. Estos métodos suelen incluir dentro de su composición como ingredientes
activos: fipronil, permetrina, o piriproxifen. Algunos de estos actúan frente a otros
parásitos que son similares, como pulgas, piojos etc. (ADVANCE, n.d.)
Algunos ejemplos de toxicidad de los componentes como ingredientes activos
mencionados anteriormente.
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Solución tópica Fipronex G5, contiene piriproxifen 45 mg. El piriproxifen además de


no ser cancerígeno, teratogénico ni mutagénico, no es tampoco irritable ni para la piel
ni para los ojos de los caninos, estos mostraron que en 4 semanas tratados con las
dosis recomendadas 3x y 9x no mostraron una reacción adversa en ellos, además
puede ser usada como elemento terapéutico en los mismos caninos. (P. Junquera,
2018)
Talco pulguicida Burnet, contiene permetrina al 1%. La permetrina es neurotóxica:
bloquea o retrasa el transporte de sodio a través de la membrana celular (tanto de los
parásitos como los hospedadores). Esto provoca sensibilidad en las células
neurosecretoras y las sensitivas. Por lo general, el ganado y los caninos toleran bien la
permetrina, pues la toxicidad de este es 1000 veces mayor contra los parásitos que
contra los mamíferos. Pero la toxicidad puede aumentar en caso de tener contacto con
una herida abierta, y por medio de la inhalación de esta. (P. Junquera, 2017)

Spray Frontline, contiene fipronil al 0,0025 g. El Fipronil actúa al alterar el sistema


nervioso central de los insectos. La revista Biomarkers in Toxicology indica:
“La administración de Fipronil por vía oral puede producir signos de
neurotoxicidad, incluyendo convulsiones, temblores, marcha anormal y
postura encorvada, en animales de laboratorio. Se pueden producir signos
similares después de la exposición por inhalación.

Los perros y gatos intoxicados suelen manifestar síntomas de temblores,


convulsiones, epilepsia y muerte. La toxicidad del Fipronil por exposición
dérmica es más pronunciada en conejos que en ratas y ratones. Los seres
humanos expuestos al Fipronil por consumo pueden mostrar síntomas de
dolor de cabeza, convulsiones tonicoclónicas, epilepsia, parestesia,
neumonía y muerte”. (Dr. Joseph Mercola., 2018)
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Se realizó una investigación, donde se evidenciaron las alteraciones morfológicas en las


glándulas salivales de la garrapata Rhipicephalus Sanguineus expuestas al aceite de la
semilla del árbol de Nemm, donde su agente activo es conocido como Azadiractina
indica. Los extractos de neem son únicos, principalmente porque son capaces de
causar alteraciones sutiles en el comportamiento y la fisiología de muchos artrópodos,
perjudicando sus procesos de reproducción y alimentación, afectando metamorfosis,
además causando efectos morfológicos reconocidos en el ovario, los ganglios y el
tegumento de las garrapatas Rs. En este estudio, es posible que las sustancias
presentes en los extractos de las semillas del árbol de neem cruzaron el tegumento de
las garrapatas Rs., llegando a la hemolinfa y a los órganos internos. (Sandra Eloisi
Denardi a , et al. 2010)
La azadiractina es el componente activo en algunos de los repelentes de insectos, a
medida que pasa el tiempo se ha destacado por su control en las plagas. No se
reportan estudios de toxicidad aguda oral, solo aparecen informes de toxicidad a largo
plazo en caninos.
La sustancia no produjo signos clínicos que demostraron toxicidad, ni alteraciones en
el peso corporal en el biomodelo animal empleado, ni muerte de ningún animal;
macroscópicamente no se comprobaron alteraciones de valor diagnóstico. (Esparza
Días, et al, 2010)

Dentro del estudio de Toxicidad aguda oral de Scielo, se mostró que después de la
administración de la decocción de la planta Azadirachta indica, y hasta los 14 días de
observación, se registró 100 % de supervivencia, con una conducta normal en los
animales con reflejo postural normal, hábitos de aseo y respuesta habitual a los
estímulos nociceptivos, así como consumo de alimentos y agua tal como corresponde a
su especie.
El peso corporal constituye uno de los parámetros más importantes dentro de un
estudio toxicológico, porque sus alteraciones son un indicador sensible de la toxicidad
causada por un compuesto químico.
Allí se demostró que el estudio demostró que la sustancia evaluada por vía oral, a dosis
única, se enmarca como sin clasificar, en el modelo animal y nivel de dosis utilizado
bajo las condiciones experimentales empleadas. (Clara Azalea Berenguer Rivas, et al.
2013)
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Se motivó originar este proyecto en base a uno de los problemas más comunes a la
hora de adquirir un canino como mascota, que es la fácil propagación de las
garrapatas, y algunos riesgos que tienen por dicha picadura de esta pequeña pero
poderosa especie. Esta es una de las tantas e importantes razones por las cuales se
dice que una mascota es una responsabilidad muy grande, porque es cierto, es un ser
viviente que necesita de atención constantemente.

5. Antecedentes y marco teórico

Antecedentes:

Control de plagas.
El tema principal es acerca de las garrapatas, su forma, su relevancia como plaga, y sus
aproximadas medidas de control.
El objetivo de esta investigación es poder conocer a fondo lo que son las garrapatas, su
clara fuente de alimentación, su ciclo de vida, y sus medidas para controlar que estas
aparezcan en nuestros perros.
La metodología que se empleó es analizar el perímetro donde se encuentra la
infestación de garrapatas, tener la ropa adecuada a la hora de combatir con estas es
bien importante, ya que además de dar infecciones y molestias a nuestros animales,
nosotros también somos una fuente de alimentación y podemos contraer diferentes
virus a raíz de esto.
La conclusión a la que se llegó, es que las garrapatas de la familia Ixodidae se controlan
mediante tratamientos dirigidos a los huéspedes, mientras que las del grupo Argasidae
se controlan generalmente tratando el hábitat, es decir, los refugios de las garrapatas.
Y esto aporta en nuestro proyecto, a pesar de que no sea un artículo científico oficial,
tiene mucha información garantizada por medio de una revista de científicos que es la
Bayer, y aquí podemos encontrar información acerca de la composición de las
garrapatas, su ciclo de vida, que consultando con tecnoacademia sirven para nuestro
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proyecto. 

Alteraciones morfológicas en las glándulas salivales de Rhipicephalus garrapatas


sanguíneas (Acari: Ixodidae) expuestas al aceite de la semilla de neem con
concentración conocida de azadiractina:
Analizar cómo afecta el extracto de las semillas de neem (las cuales se extraen del
árbol con este mismo nombre) en las Glándulas Salivales de las garrapatas
Rhipicephalus sanguineus. Estos análisis se realizan mediante técnicas morfológicas en
microscopía de luz, microscopía láser y microscopía electrónica de transmisión.
Los extractos de neem son únicos, principalmente porque son capaces de causar
alteraciones sutiles en el comportamiento y la fisiología de muchos artrópodos,
perjudicando sus procesos de reproducción y alimentación, afectando metamorfosis,
además causando efectos morfológicos reconocidos en el ovario, los ganglios y el
tegumento de las garrapatas R. sanguineus En el presente estudio, es posible que las
sustancias presentes en los extractos de semillas de neem cruzaron el tegumento de
las garrapatas R. sanguineus, llegando a la hemolinfa y a los órganos internos.

Química, bioctividades, extracción y análisis de la azadiractina: Estado del arte.


Recopilar información sobre la azadiractina y el árbol de neem 
Entre los diversos compuestos ya aislados y estudiados del árbol de Neem, se identificó
la azadiractina (AZA) como el principal compuesto bioactivo. La azadiractina se puede
encontrar en diferentes partes de la planta de Neem, pero asume su máxima
concentración a nivel de la semilla. Este compuesto presenta una estructura química
compleja, lo que justifica la dificultad de más de 20 años para identificar la vía sintética
que posteriormente le permitió realizar su síntesis artificial. La azadiractina se utiliza
ampliamente como base para la producción de los bioplaguicidas; sin embargo, se han
reconocido otras propiedades de esta sustancia, entre las que destacan la actividad
anticancerosa y antipalúdica. El Azadirachtin es un tetranortriterpenoide de la clase de
limonoides que presenta la fórmula química C35H44O16 y un peso molecular de
720,71 g mol-1.
Algunas de las plantas que surgen hoy en día como potenciales agentes terapéuticos
ya fueron reconocidas en el pasado; sin embargo, la razón detrás de su uso terapéutico
no fue completamente entendida en ese tiempo. Una de estas plantas es la
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Azadirachta indica A. Juss., comúnmente denominada árbol de Neem, que se ha


utilizado desde tiempos muy tempranos debido a su potencial insecticida y
actualmente está emergiendo como un posible agente terapéutico para diversas
enfermedades (por ejemplo, el cáncer) y de la muy baja toxicidad que maneja la
azadiractina que es nula para los mamíferos.

Determinación del Azadiractina de los aceites esenciales del árbol de Neem:

Con esta investigación se espera contribuir al conocimiento del árbol de neem y sobre
los procesos de extracción de sus aceites y que al mismo tiempo se brinde información
sobre la composición química de estos, a fin de aprovechar al máximo su potencial. 
La técnica de extracción por solvente del aceite esencial presentó los mejores
rendimientos. De las partes vegetales estudiadas, la hoja fue la que presentó la mayor
concentración de azadiractina con 2434,6 ± 0,01 ppm, seguido por las semillas con
38,00 ± 0,01 % en peso en aceite vegetal y 1127,38 ± 0,01µg de azadiractina/g de
semilla. Las propiedades fisicoquímicas del aceite vegetal lo perfilan como una
potencial materia prima disponible para la industria del jabón.
Efecto insecticida del extracto de semilla del árbol de Neem:                                  
Plantaron dicho experimento para avanzar el crecimiento de las ninfas, metieron 15
ninfas en varias cajas herméticas con alimento y todo, para que las ninfas se
reprodujeran y tuvieran lo que querías. En ese análisis murieron muchas ninfas y pocas
llegaron a la etapa adulta de todas las cajas en las que las colocaron inicialmente. Las
tres concentraciones del extracto de semillas de Neem presentaron un efecto negativo
sobre el desarrollo de las chinches. El tratamiento más concentrado (250 ppm) fue el
más eficaz mostrando así una mortalidad del 97%, menor número de exuvias y menor
número adultos al final del ensayo. Se está trabajando con la chinche de los pastos,
que es un Hemíptero de la familia Miridae, esta plaga es más potente en algunos
cultivos como el arroz, la avena, y en más específicamente en el pasto kikuyo.  Este
extracto de neem tuvo varios cambios en las chinches y ocasionó una fuerte
mortalidad con todo lo que le daban de extractos. Por cada pote colocaron 75 ninfas,
también para ver su tipo de mortalidad, con esto querían llegar a ver qué tan tóxico
eran los extractos de neem, que tan efectivo y productivo es contra los insectos o
chinches, gracias a esto lograron ver que es más la mortalidad que las chinches que
conservan su vida, ósea que es un 95% de efectividad, entonces allí se comprobó que
el árbol de neem y sus extractos son muy buenos y efectivos.
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Concentración de azadiractina, efectividad insecticida y fitoxicidad de cuatro


extractos de Azadirachta indica A. JUSS.
El árbol de neem azadirachta indica A. Juss. contiene distintos componentes con
actividad insecticida de los cuales el más importante es la azadiractina (AZA), un
tetranortriterpenoide natural, Sin embargo, la concentración de los compuestos
bioactivos del neem no es alta en las diferentes partes de la planta. La preparación de
bioinsecticidas efectivos a base de neem requiere que el proceso de extracción separe
e incremente el contenido de AZA y otros componentes relacionados con la actividad
insecticida de los extractos. Para la extracción de AZA se han propuesto varios
métodos y destacan aquellos que usan como solvente al etanol, hexano, acetona,
acetato de etilo y metanol.
El proceso de extracción en frío con metanol de la semilla molida con endocarpio de
Azadirachta indica A. Juss., concentró más azadiractina que los otros procesos.
Además, produjo el mayor efecto insecticida en Aphis gossypi Glover, sin causar
fitotoxicidad asociada en Ixora coccinea L.El extracto oleoso de A. indica, produjo una
mortalidad menor que el extracto metanólico y ocasionó un efecto fitotóxico en hojas
de I. coccinea. Tanto el extracto acuoso como el hexánico contenían menos
azadiractina que el extracto metanólico y su actividad insecticida fue menor.

6. Ruta metodológica

6.1 Establecer los ingredientes y cantidades necesarios para elaborar una croqueta:
Principalmente, se investigaron los ingredientes y los pasos de la elaboración de la
comida y las coquetas caninas.

6.2 Adquirir los ingredientes necesarios para la croqueta:


Luego de establecer qué cantidades y qué ingredientes usar, los conseguimos y
comenzamos a realizar pequeñas experimentaciones de cómo haríamos la croqueta
canina.
INSTITUCIÓN EDUCATIVA COLEGIO LOYOLA
PARA LA CIENCIA Y LA INNOVACIÓN
Resolución de Creación: 00003 de Enero 05 de 2010
Cra. 65 No. 98A-75, Teléfono: 4405105
NIT: 900339251-3, DANE: 105001025984
Página web: www.iecolegioloyola.edu.co
Núcleo 920, Castilla, Medellín
HUMANISMO E INVESTIGACIÓN PARA LA VIDA
Proceso: GESTIÓN CURRICULAR
Nombre documento: PROYECTO Código: GCU-FR20 Versión: 01

6.3 Investigar la eficacia de la Azadiractina de la semilla del árbol de Neem:


En el momento, antes de adquirir las semillas, seguimos buscando su eficacia, o su
modo de aplicación correcto, externo o interno, y de qué manera podría funcionar
mejor.

6.4 Establecer el método de extracción a usar con la semilla:


El método de extracción a usar, de momento, es el prensado en frío, se trata de un
antiguo método que consiste básicamente en presionar o apretar la semilla para
obtener el aceite que contiene. No interviene ningún otro factor, solo la fuerza que
ejerce la máquina (prensa hidráulica) sobre la semilla o fruto que trabajemos.

Con este método se conservan todas las propiedades consiguiendo un aceite de


grandes cualidades. Estamos hablando, sin lugar a dudas, de un auténtico jugo de
semillas. Aquí se obtiene menos cantidad de aceite por kilo. Sin embargo, esto hace
que se obtenga un aceite de mucha calidad.

Existen otros métodos que logran mayor producción y más rendimiento, pero con una
calidad de aceite muy inferior. Éstos son:

(1) Prensa de Tornillo: tornillo giratorio sin fin que con la ayuda de calefactores
generan calor y que pueden llegar a quemar el aceite. A esto se le suma la fricción que
genera el tornillo contra la semilla.

(2) Solventes: uso de químicos y que luego son sometidos a altas temperaturas,
conocidos como aceites refinados.

6.5 Experimentar: Integrar todos los elementos.


Aquí serán las continuaciones de las experimentaciones que se hagan, integrando
todos los elementos (ingredientes) para así finalmente poder evaluar y caracterizar su
eficacia.

6.6 Elaborar la croqueta canina con la concentración de Azadiractina y caracterizar


su eficacia:
Seguimos en el proceso de experimentación completa y adquisición de las semillas.

7. Resultados y discusión
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8. Conclusiones

Referencias bibliográficas

Anexos

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