INSTITUCIÓN EDUCATIVA COLEGIO LOYOLA

PARA LA CIENCIA Y LA INNOVACIÓN

Creada por Resolución N° 00003 de Enero 5 de
2010.
DANE: 105001025984      NIT: 900339251-3
Núcleo 920

“Humanismo e investigación para la vida”

Proyecto de Investigación

Nombres y roles de los estudiantes:

Stefania Hernández: Comunicadora
Luciana Patiño: Vigía del tiempo
Santiago Vargas: Utilero.
Tómas Carvajal: Escriba.
Jeronimo Carvajal: Lider

Nombre, correo y teléfono del estudiante

líder: Jerònimo Carvajal Echavarria ,
jeronimo.carvajale@iecolegioloyola.edu.co

Grado y grupo: 9-2

Nombre Equipo de Investigación: Biocure

Título del proyecto: Producción de un

antibiótico natural a partir de streptomyces
sps aislados de suelo para el control de
bacterias grampositivas y gramnegativas.

Línea de formación: Biotecnología

Asesor Colegio Loyola: Juan Carlos Diaz

Asesor SENA:
Dallany Urrego
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“Humanismo e investigación para la vida”

Producción de un antibiótico natural a partir de streptomyces (sp) aislados de suelo

para el control de bacterias grampositivas y gramnegativas.

Nombres y apellidos completos de los integrantes

Stefania Hernández Agudelo , Jerónimo Carvajal Echavarria, Santiago Vargas Quiroz,

Tómas Carvajal Echavarria, Luciana Patiño López.

Nombre del equipo

Biocure

Asesor(es)
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“Humanismo e investigación para la vida”

Dallany Urrego Garcia

Institución Educativa Colegio Loyola para la Ciencia y la Innovación

Área de Investigación Escolar

Medellín

2023

AGRADECIMIENTOS

(Es un espacio para reconocer el aporte de entidades, personajes de la ciencia y

colaboradores logísticos que hicieron posible el desarrollo del proyecto en cada una
de sus etapas).
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“Humanismo e investigación para la vida”

CONTENIDO

(En esta tabla de contenido sólo se escriben los números de página)

Pág.
Resumen

1. Introducción

2. Descripción del problema y pregunta de investigación

3. Objetivo general y objetivos específicos

4. Justificación e impacto social/ambiental

5. Marco conceptual

6. Ruta metodológica
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“Humanismo e investigación para la vida”

7. Protocolos y Diseño experimental

8. Resultados esperados

9. Resultados alcanzados

10. Análisis y discusión de los resultados

11. Conclusiones

12. Referencias bibliográficas

13. Anexos

14. Antecedentes

Resumen

(Es un texto corto, de uno o dos párrafos, en el que se presenta el proyecto con la
enunciación del propósito, el proceso de desarrollo y los resultados).

Utilizar los metabolitos secundarios de la streptomyces como antibiótico contra las

bacterias patógenas grampositivas y gramnegativas.

1. Introducción

(Si bien la Introducción se completa o finaliza cuando ya se termina todo el

proyecto, ésta debe irse redactando a partir de un resumen corto de cada uno de
los elementos que se van desarrollando. La introducción debe tener uno o dos
párrafos por cada uno de los elementos del proyecto. Recomendación: En la
redacción general de un proyecto es necesario una escritura objetiva, de esta
manera no es conveniente escribir desde referencias personales como: nuestro,
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haremos, tenemos; se debe escribir de manera impersonal: se pretende, el proyecto

tiene como objetivo, en el presente proyecto, y demás).

2. Descripción del problema y pregunta de investigación

(Una descripción del problema se debe desarrollar a partir de los siguientes pasos:
1) Exponer de manera amplia la situación que representa el problema. 2) Exponer
de manera detallada y específica o local el problema puntual. Esta exposición se
debe hacer teniendo en cuenta los datos generales como cifras, estadísticas o
porcentajes, puestos en contexto a nivel mundial, regional, nacional y local. 3)
Nombrar y describir cómo se puede solucionar ese problema, ya sea con
alternativas convencionales ya aplicadas o con alternativas no convencionales o
innovadoras. 4) Hacer una breve descripción de la propuesta del proyecto
inscribiéndose dentro de las alternativas convencionales o no convencionales. 5)
Esta descripción debe estar sustentada desde la información consultada, leída y
analizada sobre otros estudios o información general relacionada con la línea de
investigación o tema sobre el que se va a desarrollar el proyecto. 6) La referencia a
los estudios consultados, leídos y analizados se debe presentar a manera de
paráfrasis o cita textual. 7) Enganchar el texto con la pregunta de investigación.
Con una fórmula, como: "Con todo lo dicho y con la intención de intervenir de
manera positiva esta problemática, es posible desarrollar un proyecto de
investigación que responda a la pregunta:" Recomendación: Si bien los problemas
globales o a nivel mundial inciden en los problemas locales, es necesario que el
proyecto se enfoque en una problemática delimitada, puntual, local, abarcable,
como por ejemplo la descontaminación de una toma de agua a nivel de laboratorio,
la intervención de una toma de suelo de un cultivo específico a nivel de laboratorio,
el diseño de un prototipo mínimo viable de algo con una función específica).

¿Cómo crear un antibiótico para la E-coli, en base a la bacteria streptomyces, que sea funcional
para el ser humano?

Problema de Investigación
La E-coli es una bacteria que puede ser fácilmente contagiada, si bien algunas de las
especies de esta bacteria son inocuas, pero algunas que pueden causar graves
intoxicaciones alimentarias capaz de matar ancianos y niños totalmente saludables, lo
cual reside un peligro bastante grande debido a su alta tasa de contagios. La E-coli se
encuentra presente frecuentemente en el intestino distal de los organismos de sangre
caliente. Se puede contagiar debido a los productos de carne picada cruda o poco
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cocinada, la leche cruda y las hortalizas contaminadas por materia fecal. Estas maneras
de contagio son bastantes frecuentes en la vida cotidiana de una persona lo cual
aumenta más aún el riesgo de contagio. Estos son los efectos causados por E. coli
productora de toxina Shiga destacan los calambres abdominales y la diarrea, que
puede progresar en algunos casos a diarrea sanguinolenta (colitis hemorrágica).
También puede haber fiebre y vómitos.
Se estima que hasta un 10% de los pacientes con infección por E. coli productora de
toxina Shiga pueden desarrollar síndrome hemolítico urémico, con una tasa de
letalidad de 3%-5%. Globalmente, el SHU es la causa más común de insuficiencia renal
aguda en los niños de corta edad. Pueden aparecer también complicaciones
neurológicas (como convulsiones, accidente cerebrovascular y coma) en el 25% de los
pacientes con SHU, así como secuelas renales crónicas, generalmente leves, en
aproximadamente un 50% de los supervivientes. Por eso es tan importante crear un
antibiótico contra la E-coli, debido a sus altas tasa de herir o contraer enfermedades
aún peores que la misma, causando debilitamiento en la persona que la contrae, e
incluso la muerte en casos específicos.

Descripción del Proyecto:

Extraer de la bacteria streptomyces la estreptomicina la cual se considera un
antibiótico muy fuerte, este es producido por la streptomyces como un método de
defensa para eliminar todo tipo de patógenos. Seguido de la separación de cultivo de
las células bacterianas y la recuperación de la estreptomicina a partir del líquido
resultante. El líquido de cultivo fermentado se somete a un proceso de filtración para
separar las células bacterianas y los sólidos insolubles del líquido. Luego, se agrega una
solución de ácido clorhídrico al líquido filtrado para ajustar el pH y hacer que la
estreptomicina precipite. Una vez purificada, la estreptomicina se puede secar y
empaquetar para su almacenamiento y uso posterior. Es importante destacar que la
estreptomicina es un medicamento sensible a las condiciones de almacenamiento y
debe ser almacenado en un lugar seco y fresco, lejos de la luz y la humedad. También
debe ser almacenado en un contenedor hermético para evitar la exposición al aire y la
contaminación por microorganismos.

Trabajaremos específicamente la bacteria E-coli shu ya que esta es una gram-negativa

lo que significa que eliminarla es mucho más fácil, ya que poseen menos capas de
grasa que las gram-positivas. Tras eliminarla trataremos con las gram-positivas ya que
estas son más difíciles de eliminar y esto probará la potencia del antibiótico que vamos
a crear.
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3. Objetivo general y objetivos específicos

(Se deben redactar iniciando con un verbo en infinitivo (-ar, -er, -ir). El objetivo
general debe dar cuenta de todo lo que se pretende en el proyecto, debe referirse al
qué, al cómo y al para qué. Los objetivos específicos deben dar cuenta de cada uno
de los pasos o elementos que componen el todo, deben referirse de manera
independiente al qué, cómo, comprobación, y demás. Recomendación: Los
objetivos se deben redactar proyectando su desarrollo en la metodología. Deben
ser medibles. Deben ser lo más puntuales y claros posibles).

Producir un antibiótico natural mediante un metabolito secundario de streptomyces sp.

para el control de bacterias patógenas Grampositivas y Gramnegativas.

Objetivos específicos.

● Aislar Streptomyces (sp) a partir de una muestra de suelo (Ubicación)

empleando cultivos microbiológicos.

● Emplear la fermentación en estado líquido con streptomyces (sp) para producir

un metabolito secundario de tipo antimicrobiano..

● Purificar el antibiótico natural mediante la precipitación de proteínas.

(Opcional: buscar una nueva forma de purificación)

● Evaluar si el metabolito controla Grampositivas y Gramnegativas.

Antecedente de utilidad para los objetivos

Determinación de metabolitos secundarios a partir de Bacillus subtilis efecto

biocontrolador sobre Fusarium sp
Quieren utilizar un agente biocontrolador como método para el tratamiento de
las enfermedades en plantas contribuyendo a la disminución de pesticidas
químicos.Microorganismos del género Bacillus se han convertido en el centro de
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interés por su producción de metabolitos de tipo secundario, con propiedades

antifúngicas, supresores efectivos contra diversos Fitopatógenos como
Fusarium, Pythium,lo que hizo el estudio fue ver la presencia de metabolitos
secundarios obtenidos por fermentación en estado líquido a partir de una cepa
de Bacillus subtilis
Los métodos que usaron fueron:
Caracterización fenotípica de la cepa ,Preparación de medios de
cultivo,Fermentación líquida,Extracción de metabolitos,Identificación de
metabolitos secundarios por cromatografía en fase reversa,Determinación de la
actividad biocontroladora de los metabolitos secundarios contra fusarium sp.
Recuperación del fitopatógeno Fusarium sp,Control biológico in
vitro,Aislamiento y caracterización fenotípica del bacilo
Los resultados:El análisis por cromatografía líquida de alta resolución mostró la
presencia de Iturina A, un polipéptido con fuertes propiedades antifúngicas
Mi conclusión: siento que este proyecto es de mucha ayuda ya que la
metodología nos cuenta métodos que podríamos aplicar a nuestro propio
proyecto

http://www.scielo.org.co/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S1794-2470201200
0200002

4. Justificación e impacto social/ambiental

(La justificación para ser justificación, es decir, la razón por la cual el proyecto es
importante, debe tener: 1) Una descripción puntual de la situación o problema de
máximo un párrafo. 2) Una referencia a algún proyecto relacionado o intervención
que se ha hecho frente a esta situación, pero no ha tenido mucho impacto. 3) Qué
propuesta nueva, no convencional o no diferente aporta el proyecto para intervenir
esta situación. 4) Esta justificación debe estar sustentada desde la información
consultada, leída y analizada sobre otros estudios o información general,
relacionada con la línea de investigación o tema sobre el que se va a desarrollar el
proyecto. 5) La referencia a los estudios consultados, leídos y analizados se debe
presentar a manera de paráfrasis o cita textual.
El impacto social y ambiental debe dar cuenta de esas consecuencias inmediatas o
más cercanas a la intervención que se haga, qué aspectos ambientales y qué
aspectos del comportamiento y la calidad de vida de las personas se transforman
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para bien. Recomendación: En este caso de igual manera es necesario ser lo más
claro y específico posible, un impacto social y ambiental se puede dar en un grupo
limitado de personas o en un espacio delimitado).

Justificación
.
La E-coli es una bacteria bastante fácil de transmitir (ya que esta se transmite mediante
alimentos mal procesados o sin el tiempo de cocción requerido), se puede tener en
cuenta que algunas de sus especies son inocuas (no hacen daño físico). Pero
específicamente la E.coli-shu que es la que se trata en este proyecto puede causar
graves intoxicaciones alimenticias. Que finalmente afecta la salud de personas en
perfectas condiciones (principalmente a las poblaciones más jóvenes y a las más
ancianas). Lo cual es algo terrible debido a su alta tasa de contagios.

La E.coli-shu ha sido tratada mediante medicamentos. Únicamente que al ya poseer

estos no se ha profundizado más respecto a su tratamiento. Pero al fin y al cabo la
e.coli es eliminada totalmente por el cuerpo tras pasar por todos estos medicamentos
(básicamente lo que hacen los medicamentos es ayudar al proceso de eliminaciòn de la
bacteria) por ende las soluciones actuales únicamente ayudan a tratar los síntomas
para que el cuerpo humano se encargue de la eliminaciòn de estas.

En este proyecto la intervención que este tendrá es dar la opción de eliminar

totalmente la E.coli-shu mediante un antibiótico, para así aumentar la eficacia de la
eliminación de la E.coli y disminuir los síntomas y el tiempo que estos habitan en el
cuerpo humano.

Impacto social/ambiental
El proyecto tiene un impacto social ya que consiste en el tratamiento del ser humano
pero este también tiene su aporte ambiental ya que es un medicamento totalmente
natural ya que no vamos a tratar con compuestos químicos que afecten al medio
ambiente
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El impacto social se relaciona debido a que el proyecto consiste en el tratamiento del

ser humano y la mejoría a su salud. En cuanto a lo ambiental, los productos

5. Marco conceptual

(En el Marco conceptual se consignan las definiciones de los conceptos más

importantes del proyecto de investigación que se está desarrollando, desde las
definiciones generales del paradigma que se trabaja hasta las definiciones más
puntuales y relevantes. Recomendación: Para conformar el Marco conceptual es
conveniente plantear un orden lógico para la definición de los conceptos,
preferiblemente de mayor a menor. Las definiciones deben tener una escritura
objetiva y deben ser extraídas de la información consultada, leída y analizada
sobre otros estudios o información general relacionada con la línea de investigación
o tema sobre el que se va a desarrollar el proyecto. La referencia a los estudios
consultados, leídos y analizados se debe presentar a manera de paráfrasis o cita
textual; por tanto, no es aconsejable extraer las definiciones de los conceptos de
manera aislada de enciclopedias virtuales).

6. Ruta metodológica

Está compuesta por dos partes importantes: la metodología y el diagrama. La

metodología es la descripción paso a paso de manera secuencial y lógica del
proceso de investigación en su dimensión práctica. Es una proyección de los
procedimientos que se ejecutan teniendo en cuenta los objetivos planteados. La
metodología se expone por medio del Diseño experimental y los Protocolos de
laboratorio:

Ruta metodológica:

1 Aislar Streptomyces (sp) a partir de una muestra de suelo (Ubicación) empleando

cultivos microbiológicos.

Tomar una muestra de suelo, la cual contenga la bacteria streptomyces (Sp). Aislar la
bacteria por medio del método de siembra por estría el cual consiste en:
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1. Obtención de la muestra: Se toma una muestra que contiene una mezcla de

diferentes microorganismos. La muestra que se utilizará será de origen ambiental.

2. Preparación del medio de cultivo: Se prepara un medio de cultivo sólido, que

contenga nutrientes necesarios para el crecimiento de los microorganismos. El medio
que se utilizara será el selectivo, permitiendo solo el crecimiento de ciertos tipos de
microorganismos dentro del cultivo.

3. Siembra inicial: Con una asa de siembra o una pipeta, se toma una pequeña cantidad
de la muestra y se extiende sobre la superficie del medio de cultivo en una placa de
Petri de manera uniforme.

4. Creación de estría: Con una nueva asa de siembra estéril, se pasa por la zona donde
se sembró inicialmente y se arrastra el material hacia un lugar vacío del medio. Esto se
repite varias veces, siempre pasando por la última estría realizada, lo que disminuye el
número de microorganismos en cada paso.

5. Aislamiento: Ya con las estrías aisladas en el área del medio. Se generan colonias
aisladas, estas colonias representan cultivos puros de microorganismos individuales.

6. Incubación: Las placas de Petri con el medio y las colonias aisladas se incuban a una
temperatura y tiempo adecuados para el crecimiento de la streptomyces (Sp).

https://www.ugr.es/~pomif/pom-bac/pb-iv/pb-iv-2-introduccion.htm#:~:text=1.,en%20
una%20placa%20de%20petri.

2 Emplear la fermentación en estado líquido con streptomyces (sp) para producir un

metabolito secundario de tipo antimicrobiano..

La fermentación bacteriana en estado líquido es un proceso metabólico que involucra a

ciertos tipos de bacterias que pueden crecer y multiplicarse en un medio líquido. Estas
bacterias utilizan diferentes fuentes de nutrientes.
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1. Selección del medio: Primero, se prepara un medio de cultivo líquido

adecuado que contenga los nutrientes necesarios para el crecimiento y
metabolismo de las bacterias. Los componentes del medio pueden variar según
el tipo de bacteria y los productos deseados.

2. Inoculación: Luego, se agrega una pequeña cantidad de streptomyces (Sp) al

medio líquido. Estas bacterias se utilizan para iniciar el crecimiento bacteriano
en el cultivo.

3. Multiplicación y crecimiento: Con el suministro de nutrientes disponibles en

el medio, las bacterias comienzan a multiplicarse rápidamente mediante la
división celular. A medida que se multiplican, consumen los nutrientes y
producen los metabolitos deseados.

4. Fermentación: Las bacterias utilizan los azúcares presentes en el medio como

fuente de energía. Estos azúcares son degradados a través de vías metabólicas
específicas para producir diferentes productos finales.

5. Control de condiciones: Para obtener el mejor rendimiento y eficiencia en el

proceso de fermentación, es esencial mantener condiciones óptimas en el
medio líquido. Esto incluye la regulación de la temperatura, pH, agitación, y la
disponibilidad adecuada de nutrientes y oxígeno, todo esto teniendo en cuenta
la bacteria streptomyces (Sp).

3 Purificar el antibiótico natural mediante la precipitación de proteínas. (Opcional:

buscar una nueva forma de purificación)

4 Evaluar si el metabolito controla Grampositivas y Gramnegativas.

El Diseño experimental es la forma cómo se van a estructurar y distribuir los

experimentos a realizar, implica la manera como se va a manipular la variable
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independiente y cómo se medirán las variables dependientes, el Diseño

experimental también plantea cómo se analizan los factores internos y externos
que afectan los experimentos, la aleatoriedad de los datos, el número de
repeticiones a realizar, los controles negativos y positivos empleados. Generalmente
estos diseños son tomados de la información consultada.

Los Protocolos de laboratorio son la serie ordenada de pasos metodológicos a

realizar, incluyen cantidades, tipos de sustancias, cálculos matemáticos, materiales,
equipos y condiciones o calibraciones de estos, las normas de seguridad de trabajo
en el laboratorio, generalmente se presentan con diagramas de flujo y son tomados
de un antecedente bibliográfico específico, estos se analizan, adaptan o modifican
de acuerdo con las características del proyecto.

El diagrama es una representación gráfica general de la metodología utilizando un

diagrama de flujo. Recomendación: Es muy importante plantear la metodología
siguiendo como hilo conductor los objetivos del proyecto. Se pueden plantear dos o
tres pasos de la metodología por cada uno de los objetivos propuestos.

7. Resultados esperados

(Responde a la pregunta: ¿Cuáles pueden ser los hallazgos? Estos deben ser
concretos y estar en relación con los objetivos y la metodología planteada en el
proyecto investigativo).

8. Resultados alcanzados

(Responde a la pregunta: ¿Cuáles fueron los hallazgos? Estos deben ser concretos
y estar en relación con los objetivos y la metodología planteada en el proyecto
investigativo. La inclusión de tablas o cuadros que complementan la comprensión
de los resultados será importante a destacar en este aspecto).

9. Discusión de los resultados

(En lo que concierne a la discusión, la pregunta fundamental será ¿Qué significan

los resultados? Constituye la interpretación y análisis de los resultados obtenidos y
relacionarlos con los objetivos y la metodología de la investigación; es mirar el
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grado de trascendencia del contexto del problema y de los objetivos planteados en

el proyecto investigativo).

10. Conclusiones

(No son los resultados, son la definición o aquellas cosas que se interpretan desde
los resultados en relación con los demás elementos del proyecto, son la explicación
posible de esos resultados, también son los aprendizajes más importantes del
trabajo investigativo, justificados por los datos presentados. Es importante diseñar
las conclusiones con base en la discusión de los hallazgos y los objetivos del
proyecto).

11. Referencias bibliográficas

(Se incluyen las referencias bibliográficas citadas durante el desarrollo del

Proyecto y realmente localizables o verificables. Se citará de acuerdo a lo
planteado por las Normas APA).

12. Anexos

(Son todos los documentos escritos o visuales que hacen parte de todo el proceso
del desarrollo del proyecto, pero que por su extensión, forma o definición no se
pueden consignar en ninguno de los subtítulos anteriores. Deben llevar un título y
una numeración en el orden en que van apareciendo en el desarrollo del proyecto).

13. Antecedentes