MATERIAL Y EQUIPO NECESARIO NO PROPORCIONADO - Cronmetro - Lmpara de luz intensa

OBTENCIN DE LA MUESTRA No se requiere de una preparacin especial del paciente antes de la toma de muestra. 1. Obtener 3.0 mL de sangre por puncin venosa.

PROTENA C REACTIVA
AGENTE DE DIAGNOSTICO

2. Centrifugar y separar el suero.

Equipo para investigar por aglutinacin de partculas de ltex.

INTRODUCCIN Tillet y Francis concluyeron en 1930 que la reaccin que se origina en el suero de pacientes que sufren de enfermedades inflamatorias precipita con un extracto de pneumococo no proteico llamado polisacrido C. La protena que causa este tipo de reaccin fue llamada Protena C Reactiva. Como un fenmeno no especfico, el incremento en la concentracin de Protena C Reactiva se puede presentar en cualquier proceso inflamatorio agudo (ya sea infeccioso o no infeccioso). La concentracin de Protena C Reactiva generalmente se encuentra por debajo de 6 mg/L en el suero de adultos sanos y en enfermedades inflamatorias estos valores frecuentemente se incrementan en un lapso de 4 a 8 horas despus de presentarse un evento agudo alcanzando niveles aproximadamente de 20 a 500 mg/L. Varios mtodos de inmunoprecipitacin se han desarrollado para la deteccin de Protena C Reactiva. El principio del procedimiento presentado involucra una reaccin inmunolgica entre la Protena C Reactiva (como antgeno) y el anticuerpo correspondiente adsorbido a las partculas de ltex (ltex sensibilizado con anti-Protena C Reactiva). PRESENTACIN Catlogo Nm. 102: Equipo para 50 pruebas REACTIVOS Y MATERIAL PROPORCIONADO - Antisuero adsorbido a partculas de ltex. (ltex antiPCR) - Suero Control Positivo - Suero Control Negativo - Diluyente Glicina Salina, concentrado, pH 8.2 - Placa de reaccin - Pipetas desechables (nicamente para presentaciones de 40 y 100 pruebas) ESTABILIDAD Y ALMACENAMIENTO DEL REACTIVO El ltex anti-PCR as como los controles y el diluyente concentrado son estables hasta la fecha de caducidad indicada en la etiqueta cuando se almacenan a 2-8C). las

Preparacin del Diluyente Glicina Salina Concentrado: El frasco de Diluyente Glicina Salina Concentrado se afora con agua destilada al volumen suficiente segn corresponda la presentacin. Ejemplo: - 50 mL (para 50 pruebas) - 100 mL (para 100 pruebas) - 40 mL (para 40 pruebas), etctera
MTODO CUALITATIVO

NOTA: El ltex Anti-PCR debe estar a temperatura ambiente antes de ser utilizado.
1. Colocar en una gradilla un tubo de 13 x 100 mm. 2. Agregar 0.95 mL del frasco No. 4 (Diluyente glicina-salina concentrado pH 8.2) diluido. 3. Aadir 0.05 mL del suero problema. 4. Despus de haber agregado el suero problema, la dilucin obtenida ser 1:20 y estar lista para su uso. 5. En un anillo de la placa depositar 0.05 mL del suero diluido. 6. En otro anillo depositar una gota del frasco No. 2 (suero control positivo). 7. En un tercer anillo depositar una gota del frasco No. 3 (suero control negativo). 8. Aadir a cada uno de los 3 anillos una gota del frasco No. 1 (Ltex anti-Protena C Reactiva) previamente resuspendido. 9. Mezclar manualmente la placa de reaccin durante 2 minutos. 10. Realizar la lectura del resultado en este momento bajo una fuente de luz directa. Interpretacin

Resultado Positivo Presencia de agregados macroscpicos (aglutinacin comparable al control positivo). Resultado Negativo Ausencia de agregados macroscpicos (sin aglutinacin, comparable al control negativo). La no aglutinacin o una ligera aparicin de granulocidad que no exceda a la observada en el control negativo indican un resultado negativo.

MTODO SEMICUANTITATIVO 1. Seleccionar los sueros positivos obtenidos en la prueba cualitativa. 2. Colocar en una gradilla 5 tubos de 12 x 75 mm y numerarlos. 3. Depositar al tubo No. 1, 0.95 mL del frasco No. 4 (Diluyente glicina-salina concentrado, pH 8.2) diluido. 4. Depositar del tubo No. 2 al 5, 0.5 mL del frasco No. 4 (Diluyente glicina-salina concentrado pH 8.2) diluido. 5. Aadir al tubo No. 1, 0.05 mL del suero problema dilucin 1:20. Mezcle. 6. Pasar 0.5 mL del tubo No. 1 al tubo No. 2. Mezcle. 7. Pasar 0.5 mL del tubo No. 2 al tubo No. 3. Mezcle. 8. Continuar esta operacin hasta el tubo No. 5. 9. Depositar 0.05 mL de cada una de las diluciones en anillos diferentes de la placa. 10. Aadir una gota del frasco No.1 (ltex Anti-Protena C Reactiva) a cada una de las diluciones. 11. Mezclar manualmente la placa de reaccin durante 2 minutos. 12. Realizar la lectura del resultado en este momento. Interpretacin El ttulo del suero problema ser la ltima dilucin que presente agregados macroscpicos (aglutinacin). Ejemplo : El ttulo del suero problema ser la ltima dilucin que presente agregados macroscpicos (aglutinacin). Ejemplo :
Tubo # Dilucin 1 1:20 + + + 2 1:40 + + 3 1:80 + 4 1:160 Positivo 1:20 Positivo 1:40 Positivo 1:80 Resultado

BIBLIOGRAFA 1. Harrison F. Wood, et. Al. , The Ocurrence During Accute Infections of a Protein not normal present in the blood. J. Exp. Medical. 2. Van Lente Frederick, Ph D. The Diagnostic Utility of C Reactive Protein, Human Patology, 1982 ; 13(12) : 106-3. 3. Tillet, W.S. and Francis, T. Serological reactions in pneumonia with a non-protein somatic fraction of pneumococcus.J. Exp. Med. 52: 561-571, (1930). 4. Fischel, E.E., In Laboratory Diagnostic Procedures in Rheumatic Diseases. Cohen AS, Ed. Little, Brown, Boston, (1967), pp 20. 5. Ziegenhagen, G., Drahovsky, D.: klinische Bedeutung des C-reaktiven Proteins. Med. Klin. 78:24-35 (1983). Rev. 22/06/02 IN-103 Protena C Reactiva. Equipo para investigar por aglutinacin de partculas de ltex. Estandarizada. Compuesto de: Suero control positivo y negativo. Placa de reaccin. Antisuero adsorbido a partculas de ltex. 2 mL. Clave: 080.414.1505 - Propiedad del Sector Salud. No Negociable.

Fabricado en Mxico por: Laboratorios Licon S.A. Viveros del Roco No. 33 Col. Viveros de la Loma C.P. 54080 Tlalnepantla, Edo. de Mxico Tel.: (55) 5362-0299 Fax: (55) 5362-1792

SENSIBILIDAD La sensibilidad de ltex de anti-PCR es de 0.05 mg/dL LIMITACIONES DEL MTODO 1. No deben utilizarse sueros turbios, hemolizados o contaminados para realizar la prueba. 2. Para evitar falsos resultados NO es recomendable realizar la lectura despus de los 2 minutos.