Prctica #3

Titulo de la Prctica Protena C Reactiva (PCR)

Fecha de realizacin Materia Biometra Hemtica

Nombre del alumno Johnny Enrique Mondragn Sosa

Objetivo de la practica: El alumno aplicara las tcnicas empleadas para la determinacin de la protena C reactiva.

Introduccin: La protena C-reactiva es un tipo especial de protena producida por el hgado que slo est presente durante episodios de inflamacin aguda. El aspecto ms importante de la PCR es su interaccin con el sistema del complemento, el cual es uno de los mecanismos de defensa contra elementos extraos. A pesar de que ste no es un examen especfico, s advierte de forma general sobre la presencia de un proceso inflamatorio agudo. El mdico puede utilizar este examen para evaluar una exacerbacin de artritis reumatoide o de fiebre reumtica. El examen tambin puede ser til para evaluar la respuesta a la terapia. La protena C reactiva no se eleva de forma habitual en enfermedades producidas por virus. La protena C reactiva se eleva ante un problema infeccioso o inflamatorio antes que la VSG y comienza a disminuir ante la recuperacin de la enfermedad. Si se trata la enfermedad con aspirina o antiinflamatorios desaparece su elevacin. La protena C reactiva aparece elevada en el infarto de miocardio. Tambin puede ser de ayuda tras una intervencin de ciruga, ya que aparece elevada durante 3 4 das, para luego disminuir, si persiste elevada es que hay alguna infeccin o complicacin post-quirrgica.

Material a utilizar: Laminillas con 3 reas marcadas, con fondo negro para realizar la prueba. Aplicadores de madera Jeringa, torundas con alcohol y torniquete Tubo rojo o con gel para la toma de sangre. Rotor

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Titulo de la Prctica Protena C Reactiva (PCR)

Fecha de realizacin Materia Biometra Hemtica

Nombre del alumno Johnny Enrique Mondragn Sosa

Reloj o cronmetro Centrfuga Pipeta pasteur Pipetas graduadas de 5 ml Pipetas pistn de 100 y 500 micro litros Perilla de tres vas Material biolgico: Sangre (suero) Metodologa u organizacin de la practica: TECNICA CUALITATIVA 1. Extraiga sangre sin anticoagulante, Centrifuga durante 5 minutos a 2000 rpm y separe el suero. 2. Diluya el suero a probar (1:40) con solucin salina amortiguadora: 2 gotas (0.1 ml) del suero en 3.9 ml de solucin salina amortiguadora. 3. Coloque una gota de la solucin anterior en una de las divisiones de la placa de vidrio, en las otras reas coloca una gota de suero control negativo y suero control positivo. 4. Aada una gota de ltex anti protena C reactiva a cada una de las muestras. 5. Oscile suavemente la placa durante 2 minutos y observe si se presenta aglutinacin macroscpica

Resultados: Positivo: Aglutinacin visible con formacin de grandes agregados y fondo claro comparable al control positivo. Si la prueba de suero sale positiva se deber realizar la prueba cuantitativa. Negativo: Suspensin uniforme sin aglutinacin visible, comparable al control negativo. En ocasiones se pueden apreciar finas granulaciones que no exceden a las observadas con el control negativo, por lo que este fenmeno no deber interpretarse como aglutinacin. PRUEBA CUANTITATIVA: 1. Prepare diluciones del suero problema en solucin salina de la siguiente manera: Coloque 5 tubos de ensayo en una gradilla, deposite 0.5 ml de solucin

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Titulo de la Prctica Protena C Reactiva (PCR)

Fecha de realizacin Materia Biometra Hemtica

Nombre del alumno Johnny Enrique Mondragn Sosa

salina en cada uno de los tubos. Aada0.5 ml del suero diluido1:40 (ver prueba cualitativo) al primer tubo. mezcle bien y transfiera 0.5 ml de la dilucin anterior al segundo tubo. Contine efectuando la misma operacin hasta terminar con el tubo No.5

TUBO 1 1/80 2 1/160 3 1/320 4 1/640 5 1/1280 2. Utilizando un capilar o gotero, ponga una gota de cada dilucin en las divisiones de la placa de vidrio previamente marcadas. 3. Aada una gota de ltex anti protena C reactiva a cada divisin. 4. Mezcle con un aplicador, desde la dilucin ms elevada hasta la ms baja y extienda por toda el rea del ovalo 5. Oscile suavemente la placa durante 2 minutos y observe si se presenta aglutinacin macroscpica. Resultados: La dilucin ms elevada del suero que muestre aglutinacin visible, se considera como el titulo de protena C reactiva en el suero plasma. Conclusin: Tiempos de reacciones mayores de dos minutos pueden producir reacciones falsamente positivas por defectos de secado de los reactivos. Los valores de referencia varian de acuerdo al laboratorio. Es por eso que se recomienda que cada laboratorio tenga sus valores de referencia.

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Titulo de la Prctica Protena C Reactiva (PCR)

Fecha de realizacin Materia Biometra Hemtica

Nombre del alumno Johnny Enrique Mondragn Sosa