UNIVERSIDAD NACIONAL AUTÓNOMA DE MEXICO

FACULTAD DE ESTDUIOS SUPERIORES CUAUTITLÁN CAMPO 1

BIOQUÍMICA DIAGNÓSTICA
LABORATORIO DE QUÍMICA ORGÁNICA II

Escutia Domínguez José Francisco

García Sanabria Janet
Medina Ascencio Lorena

Cuautitlán, Estado de México, México

Jueves 1 de Julio de 2021
Palabras Clave: Azocompuesto, amina, nitrógeno, fenol, adición, nucleófilo, colorante,
cromóforo.

Los compuestos azo tienen una gran importancia industrial debido a

que son sustancias intensamente coloridas, por lo que la gran variedad de
ellas, se utilizan como colorantes artificiales. Las coloraciones pueden ser
amarillas, naranjas, rojas, azules, en incluso verdes dependiendo de la
estructura del compuesto. Para que una sustancia sea considerada colorante,
además de poseer color (o desarrollarlo a través de una reacción química)
debe poder transferirlo al medio al cual se aplica; hay así, sustancias
cromógenas específicas para diferentes sustratos.
Las moléculas orgánicas usadas como colorantes tienen entonces, un sistema
de enlaces múltiples que mediante absorción selectiva de la luz, la cual
depende de la energía asociada con tales sistemas, presentan colores
específicos. Los cromóforos y auxócromos más eficientes son aquellos que
tienen heteroátomos lo que permite las transiciones de menor energía y que
además, pueden conjugarse lo cual aumenta el número de las posibles
transiciones. Los azoderivados suele ser utilizados principalmente como
colorantes en diferentes campos de la industria como la industria
alimentaria, la textil (tinción de la mayoría de las fibras), la cosmética, la
farmacéutica, la industria de pigmentos, papel, limpieza etc.
 Los compuestos azo tienen una gran importancia industrial debido a que son
sustancias intensamente coloridas, por lo que la gran variedad de ellas, se
utilizan como colorantes artificiales. Las coloraciones pueden ser amarillas,
naranjas, rojas, azules, en incluso verdes dependiendo de la estructura del
compuesto.
Los colorantes azoicos son los más consumidos y se caracterizan por la
presencia de un grupo azo (-N=N-) en la molécula que une, al menos, dos anillos
aromáticos. El grupo azo tiene 6 electrones "móviles" (deslocalizados) que a su
vez están deslocalizados con los anillos aromáticos adyacentes. Todos los
compuestos azoicos son coloreados pero no todos son útiles como colorantes.
Para la preparación de colorantes azoicos se utiliza siempre una amina
aromática que por reacción con ácido nitroso (preparado in situ desde NaNO2 y
HCl) da lugar a un compuesto dinitrogenado llamado sal de diazonio. Esta
reacción recibe el nombre de diazotación.
Los colorantes azoicos se emplean, generalmente, para teñir las fibras textiles.
Algunos de ellos se usan para el teñido del cuero. Se emplean también en artes
gráficas y en la industria de barnices y pinturas. El colorante azoico anaranjado
de metil se usa ampliamente como indicador en química analítica. Los tintes
azoicos al contrario que otras materias colorantes, las azoicas (o colorantes de
hielo) no se preparan como los tintes, sino que tienen que producirse
directamente en la fibra por medio de combinación de sus partes esenciales.
Hay varios métodos de aplicación, pero el más sencillo consiste en tratar la tela
con una solución de naftol e imprimirla, luego con una solución diazonalizada.

Para que una sustancia sea considerada colorante, además de poseer

color (o desarrollarlo a través de una reacción química) debe poder transferirlo al
medio al cual se aplica; hay así, sustancias cromógenas específicas para diferentes
sustratos.
Las superposiciones son inevitables, un colorante con la misma fórmula
molecular puede emplearse para alimentos o para teñir fibras y en
general
se diferenciarán en la composición de la sustancia cromogénica
destinada a un uso particular, que se prepara a partir del colorante.Los
colorantes azoicos se producen por reacciones químicas a partir de los
llamados intermediarios sintéticos, incoloros o poco coloreados, los
cuales se absorben sobre la fibra, se fijan en ella a través de puentes
salinos o de enlaces covalentes y una vez que esto ocurre los
intermediarios se diazotan generando sobre la fibra, la sustancia
responsable el color (el colorante), de mayor peso molecular, que queda
adherido. Debido a la facilidad de su síntesis y a su versatilidad son los
más importantes; pertenece a este grupo casi la mitad de los colorantes
sintéticos.
 • Proponer ecuación general para la obtención de un azocompuesto.
• Analizar los dos mecanismo de reacción (diazotación y copulación)
• Observar los sustituyentes del producto y analizar qué color se obtendrá.
• Plantear el laboratorio virtual con relación a la propuesta del nuevo azocompuesto .

Material de vidrio

Cantidad Nombre Capacidad Precisión

2 Vaso de precipitados 150 mL

2 Varilla de vidrio

4 Vidrios de reloj

3 Pipetas con bulbo 20 mL +- 0.1 mL

1 Matraz Erlenmeyer 50 mL

1 Probeta 20 mL +- 0.1 mL

Material general
1 Matraz Kitasato

Cantidad Nombre
1 Embudo Buchner

1 Recipiente de metal para

baño de hielo

1 círculo Papel filtro

4 Espátula
 Sustancias

Cantidad Nombre Fórmula química

0.4 g Carbonato de sodio Na CO 2 3

--- Agua HO 2

-- Hielo picado HO 2

1g Ácido sulfanílico C H NO S
6 7 3

4 mL Solución de Nitrito de sodio al 10% NaNO 2

8 mL Ácido clorhídrico al 20% v/v HCl

g Fenol CHO6 6

--- Cloruro de sodio NaCl

8 mL Sol. hidróxido de sodio al 10% NaOH

Equipo

Cantidad Nombre

1 Parrilla calefactora

1 Balanza granataria

Material general

Cantidad Nombre

1 Recipiente de metal para

baño de hielo
 Síntesis de la sal de diazonio (Diazotación).
1. En un vaso de precipitados agregar 0.4 g de Carbonato de sodio
2. Añadir 10 mL de agua al vaso de precipitados y agitar hasta disolver el
sólido
3. Agregar a la disolución 1 g de ácido sulfanílico y agitar hasta disolver
(Nota: para aumentar la solubilidad de la mezcla llevar a calentamiento
hasta obtener una disolución total).
4. Si se llevó a calentamiento, dejar enfriar a temperatura ambiente
5. Llevar la disolución a un baño de hielo con sal
6. Agregar a la disolución, 4 ml de solución de Nitrito de sodio al 10%
7. Añadir 4 mL de HCl al 20% v/v
8. En pocos minutos se formará la sal de diazonio

Reacción de copulación
1. En un matraz Erlenmeyer, agregar --- g de fenol
2. Añadir al matraz 4 mL de HCl diluido al 20% v/v y agitar suavemente
3. Verter la disolución en el recipiente que contiene a la sal de diazonio (la
sal de diazonio se encuentra en baño de hielo para evitar su
descomposición) y agitar.
4. Añadir a la disolución 8 mL aproximadamente de solución de NaOH al
10%, lentamente y con agitación constante (Nota: agregar la cantidad
de disolución de NaOH al 10% necesaria para que el pH de la disolución
sea alcalino, esto se notara gracias al cambio de color de la disolución).
5. Agregar 4 g de NaCl a la disolución.
6. Llevar a calentamiento la mezcla y agitar constantemente
7. Retirar del calentamiento antes de que la disolución comience a ebullir.
8. Dejar enfriar la disolución hasta temperatura ambiente
9. Llevar la disolución a un baño de hielo con sal hasta la precipitación
total del producto.
10. Filtrar la mezcla a vacío

11. Lavar, secar el sólido obtenido y calcular el rendimiento de la reacción.

Sustratos utilizados: Ácido sulfanílico y fenol

Diazotación

Copulación
 Las moléculas orgánicas usadas como colorantes tienen entonces, un
sistema de enlaces múltiples que mediante absorción selectiva de la luz, la
cual depende de la energía asociada con tales sistemas, presentan colores
específicos.

Los procesos fotoquímicos citados en el párrafo anterior están basados en modelos

sencillos con pares de electrones n, σ y π conformando orbitales moleculares, en
estructuras parciales bien sea como cromóforos responsables de la transición, y por
tanto del tinte o tono principal, o como auxócromos, que son heteroátomos (átomos con
electrones no enlazantes n) o grupos de átomos, capaces de conjugarse con el
cromóforo y así intensificar o modificar el tinte

Los cromóforos y auxócromos más eficientes son aquellos que tienen heteroátomos lo que permite
las transiciones de menor energía y que además, pueden conjugarse lo cual aumenta el número
de las posibles transiciones.

Como podemos observar en la tabla de

cromóforos los grupos azo y los radicales arilo,
propician colores, rojos y anaranjados.

La presencia en la molécula de grupos con

pares de electrones no compartidos (- NH2; -
OH; -NO2; -COOR, entre otros) modifica el
color y la intensidad de la absorción
características de un grupo cromóforo. Estos
grupos, que por sí mismos no confieren color,
reciben el nombre de auxocrómicos

. Los grupos auxocrómicos cuando son donadores de electrones (-OH, -

OMe, -NH2, NHR; NR2) intensifican la absorción de luz y desplazan el
máximo del espectro a mayores longitudes de onda (fotones de menor
energía), esto es cambian el color a tonos azulados y verdes.
Gracias a los datos anteriores podríamos decir que nuestro compuesto obtenido
podría tener una coloración azul, o verdosa debido a la presencia del -OH

Los azoderivados suele ser utilizados principalmente como colorantes en diferentes

campos de la industria como la industria alimentaria, la textil (tinción de la mayoría
de las fibras), la cosmética, la farmacéutica, la industria de pigmentos, papel, limpieza
etc.
También suelen utilizarse a modo de indicadores en los laboratorios químicos para la
realización de volumetrías de tipo ácido- base, lo que permite ver el viraje de las
disoluciones en esta técnica.
Uno de los usos menos descritos es su función como iniciadores de polimerización.
Algunas sales de diazonio utilizadas para la síntesis de azoderivados, son
frecuentemente utilizadas para la fabricación de explosivos debido a su gran
inestabilidad.
 Mecanismo de la diazoacion

Etapa 1: En un primer paso, el grupo OH unido al átomo de azufre del ácido

sulfanílico será desprotonado por uno de los oxianiones presentes en el carbonato de
sodio.

Etapa 2: En esta etapa se dará la combinación del grupo amino del ácido sulfanílico
con el ion nitrosonio. El N del grupo amino posee un par de electrones sin compartir
que usará para formar un enlace con el N del ion nitrosonio. Simultáneo a la adición
del ion nitrosonio se dará una ruptura heterolítica N-O a favor del O de uno de los
enlaces pi posicionados en el ion nitrosonio, resarciendo de esta manera la deficiencia
del O.

Etapa 3: Con la adición del ion nitrosonio, el N del grupo amino del ácido sulfanílico
quedará deficiente electrónicamente y para que esa carga sea estabilizada, el agua que
se encuentra en el medio desprotonará al N.

Por otro lado, el oxianión enlazado al S será protonado nuevamente con el ácido
clorhídrico que se encuentra en el medio.

Etapa 4: El O que constituía inicialmente al ion nitrosonio, posee un par de electrones

sin compartir que usará para protonarse, esto con ayuda del ion hidronio que se
encuentra en el medio.
Etapa 5: Deslocalización de un par de electrones sin compartir del N
generando un enlace pi N-N y simultáneamente la deslocalización de enlace pi
N=O hacia O
Etapa 6: El oxígeno de una molécula del agua encontrada en el
medio, desprotona al N de manera que resarce la deficiencia electrónica que
poseía
Etapa 7: El oxígeno unido al N, se protona con un H del ion hidronio,
generando así un buen grupo saliente. Para llevar a cabo esta protonación, el
ion hidronio sufre una ruptura heterolítica O-H a favor del Oxígeno.
Etapa 8: El N al tener un par de electrones sin compartir, los deslocaliza
para formar un nuevo enlace pi N-N. Simultáneo a esto, se da la eliminación
del ión oxonio, quien se comporta como un buen grupo saliente.
Etapa 9: Se genera el producto final: Sal de diazonio

Copulacion
Etapa 1: Uno de los enlaces pi del anillo aromático se adiciona con N y simultáneamente
un enlace del triple enlace se deslocaliza hacia N +.
Etapa 2: Cl que es el nucleófilo desprotona C terciario y simultáneamente el enlace del
hidrógeno se adiciona en el enlace C-C+
Etapa 3: Azocompuesto

Para la obtención de una sal de diazonio es necesaria la combinación de una amina

primaria con ácido nitroso. La preparación de este ‘ácido se realiza in situ en el
laboratorio, pues es una especie que naturalmente se encuentra en fase gas por lo
que no es comercializado, sin embargo, su preparación es fácil mediante la
combinación del nitrito de sodio en presencia de un ácido mineral como el ácido
clorhídrico. El ácido nitroso formará un el ion importante en la reacción; hablamos
del ion nitrosonio quien se adicionará a la amina para así crear el ion diazonio.

La presencia del carbonato de sodio en la reacción es de suma importancia ya que

será quien prepare al ácido sulfanílico para entrar a la reacción principal. El ácido
sulfanílico al ser poco soluble en agua es combinado con una disolución de carbonato
de sodio, para así aumentar la solubilidad de este ácido. Es por ello que para llevar a
cabo esta disolución se recomienda el calentamiento para aumentar la solubilidad y
agilizar el proceso.

Es debido destacar que la acción de agregar el nitrito de sodio + ácido clorhídrico a la

disolución de ácido sulfanílico y carbonato de sodio debe realizarse en un baño de
hielo pues ésta mezcla de reactivos llevará a la formación de la sal de diazonio, la
cual, recordemos, es muy inestable a temperaturas mayores a los 10 ºC.

La estabilización de sales de diazonio también es posible con la colocación de un

contra ion. Mencionando los factores que ayudan a mejorar la estabilidad de estas
sales, es importante recalcar la presencia de grupos que retiren densidad electrónica
como sustituyentes en el anillo aromático. Este tipo de sustituyentes también
aumentarán la electrofilia del ion diazonio, de manera que la adición de un nucleófilo
será mucho más favorable y gracias a esto obtendremos el azocompuesto deseado.
La copulación se lleva a cabo mediante un mecanismo de sustitución
electrofílica aromática (SEA). Se utiliza este mecanismo más que el mecanismo de
adicción debido a la gran estabilidad del anillo aromático. El benceno es una fuente de
electrones (Base de lewis), subsecuentemente, el benceno reacciona con compuestos
electrónicamente deficientes (electrófilos o ácidos de lewis). y en nuestro mecanismo se
ilustra de la siguiente manera el anillo de fenol es una fuente de electrones un enlace
del doble enlace se adicionará con el electrófilo que es la sal de diazonio.

Uno de los puntos importante a recalcar es que al mezclar el fenol con la sal de
diazonio se tiene que hacer a temperatura ambiente para que se solubilize porque
sabemos que la solubilidad es mayor en altas temperaturas y si tratamos de que
solubilizar en el baño de hielo tomará más tiempo que pase este proceso. Después se
pondrá en un baño de hielo, se agregaramos NaOH que ayuda solubilizar, luego se
vierte NaCL que hace que precipite y también hace un efecto salino esto quiere decir
que acapara a la moléculas H2O se posicionan las NaCL. El resultado de esta reacción
será un azocompuesto que son sustancias intensamente coloridas. Debido a la facilidad
de su síntesis y a su versatilidad son los más importantes que pertenece a este grupo
casi la mitad de los colorantes sintéticos.
Como fundamento de la hipótesis que se tiene del color del azocompuesto propuesto
analicemos la estructura del mismo y las propiedades de la funcionalidad que
acompaña a nuestro sustrato utilizado para llevar a cabo la reacción de copulación.
Se cree que el color del azocompuesto obtenido tiene tonalidades azuladas o verdosas
ya que en este caso el grupo OH del fenol actuará como un auxocromo, es decir, un
grupo que por sí solo no confiere color, si no que modifica el color y la intensidad de la
absorción de luz de un grupo cromóforo. En este caso al ser el OH un grupo donador
de electrones, intensificará la absorción de luz y desplazará el máximo del espectro a
mayores longitudes de onda (fotones de menor energía), lo que significa el cambio de
color a tonos azulados y verdes.
 í í

Los azobencenos son una familia de colorantes orgánicos cuyas características son dos
anillos aromáticos unidos a través de un enlace N=N, por sus características positivas
como su gran variedad de colores junto su baja toxicidad por eso son muy usados en la
industria y se conocen como FD&C.
Los azobencenos poseen dos isómeros estructurales E (trans) y Z (cis), ambos presentan
diferentecias en sus aspectros de absorción de UV.
También exponen diferentes propuesta de mecanismo para obtención de azocompuestos,
hablan de otro uso que se les puede dar a los azocompuesto como candidatos para el
diseño de interruptores moleculares por su movimiento molecular y en el campo de los
materiales orgánicos se han incorporado azobencenos para la preparación de polímeros
fotoactivos.
Más adelante hablan sobre los azocompuestos inhibidores de la fluorescencia algunos de
ellos son los BHQ0, BHQ1, BHQ2, poseen espectros de absorción que abarcan distintas
partes del espectro electromagnético y estos son capaces de inhibir la luminiscencia de
un amplio rango de fluoróforos.
Después empieza a redactar un experimento que tomó en cuenta la utilidad de los
azocompuestos como eficientes inhibidores de la fluorescencia de diversos fluoróforo, su
demostrada aplicabilidad en biomedicina y plantean 4 objetivos, se evalúa la toxicidad
de los BODIPY-azo y BODIPY- amina en cultivos celulares de tipo Hela, de los
anteriores estudios se concluyó que no son toxico ni en oscuridad ni bajo la irradiación
de luz verde Los siguientes resultados nos permiten concluir el BODIPY-NH2 parece
reunir las características apropiadas para su aplicación en PDT. Los estudios de
localización realizados en el microscopio de fluorescencia indicaron que las BODIPY-
aminas aparecen como una señal roja a modo de punteado citoplasmático, semejantes a
vesículas del sistema de endomembrana.
 Como se ha visto en esta práctica y en algunas anteriores, las reacciones de SEA
son de gran importancia pues son parte de una infinita cantidad de procesos que
son útiles para la humanidad. Es interesante descubrir la existencia de diversos
tipos de reacciones que dan como productos a especies que son comunes en la vida
diaria sin siquiera darnos cuenta de ello. En este caso, hablamos de los
azocompuestos que se encuentran en la ropa que vestimos, en los alimentos, en
medicamentos y en muchas otras cosas con las que estamos interactuando
constantemente. También al leer el artículo científico observamos que como objeto
de estudio no solo es como colorante sino también como como candidatos para el
diseño de interruptores moleculares por su movimiento molecular. En la
actualidad, los interruptores moleculares sintéticos son de interés en el campo de
la nanotecnología para su aplicación en ordenadores moleculares. Los
interruptores moleculares son también importantes en biología pues muchas
funciones biológicas están basadas en ellos, por ejemplo, la regulación alostérica y
la visión.

Es sorprendente y emocionante a la vez, el observar que estas sustancias

adquieren colores distintos de acuerdo a sus sustituyentes, es un hecho que te
hace preguntar el por qué son coloridas esas sustancias o de dónde o cómo se da
la formación de un color.

Méndez A. (2013). Azoderivados. LaGuía. Recuperado el 27/06/2021 de

https://quimica.laguia2000.com/compuestos-quimicos/azoderivados

Marcano, D. 2018. Introducción a la Química de los Colorantes. UCV. Recuperado el

27/06/2021 de
http://saber.ucv.ve/bitstream/10872/19390/1/colorantes%20listo%20%2Bisbn.pdf

T. Martínez . (2009). SÍNTESIS Y CARACTERIZACIÓN DE NUEVOS RECEPTORES

CROMOGÉNICOS FUNCIONALIZADOS CON COLORANTES AZOICOS
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S. Salvador Castellanos. (1999). Química orgánica. México: McGraw Hill. 318-321 pág.

Sauvage, ed. (2001). Molecular Machines & Motors. Springer

Overton, R. (2000). «Molecular Electronics Will Change Everything». Wired 8 (7): 242
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Agradecemos primero a nuestras familias por brindarnos los recursos

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ellos sigan brindando su conocimientos y entusiasmos así nosotros. también
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de algunas materias, que nos hacen más divertido las clases en línea, nos
dan apoyo moral en momentos difíciles de la vida y por último, pero no
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