Practica 3.

Fenolftaleína y fluoresceína
Objetivos
A) Sintetizar experimentalmente fenolftaleína y fluoresceína mediante la sustitución
electrofilia aromática de anhídrido ftálico con fenol y resorcinol respectivamente.
B) Proponer el mecanismo de reacción para la síntesis de la fenolftaleína y la
fluoresceína a partir de los sustratos correspondientes en medio ácido.
C) Describir el comportamiento de los dos productos como indicadores ph en medio
básico y acido.
D) Investigar y proponer las estructuras químicas de los productos en medio ácido y
básico para justificar su comportamiento como indicadores de ph.
E) Conocer un artículo científico que hable sobre fenolftaleína o fluoresceína.
Introducción
Materiales

Material de vidrio
Cantidad Nombre Capacidad Precisión
2 Tubo de ensayo 10 mL ---
1 Agitador de vidrio --- ---
2 Matraz Erlenmeyer 100 mL ---
3 Pipeta con bulbo 20 mL +- 0.1 mL
2 Vidrio de reloj --- ---
2 Probeta 10 ml +0.1

Material general
Cantidad Nombre
2 Espátula
1 Gradilla
1 Bombilla de luz
ultravioleta

Equipo
Cantidad Nombre
1 Balanza granataria
1 Parrilla calefactora

Sustancias
Cantidad Nombre Formula química
0.4 g Fenol C 6 H6 O
0.4 g Anhídrido ftálico C 8 H4 O 3
0.4 g Resorcinol C 6 H6 O 2
8 gotas Ácido sulfúrico H2SO4
concentrado
--- Ácido clorhídrico HCl
--- Agua destilada H2 O
--- Solución de hidróxido NaOH
de sodio al 5%

Procedimiento

Síntesis de fenolftaleína

1. En un matraz Erlenmeyer agregar 0.3g de fenol, 0.2g de anhídrido ftálico y añadir 3 o 4 gotas de
ácido sulfúrico concentrado.
2. Agitar la mezcla con el agitador de vidrio durante 2 o 3 minutos.
3. Colocar el matraz que contiene la mezcla sobre la parrilla e iniciar el calentamiento.
 4. Detener el calentamiento hasta que los sólidos se fundan y se integren. Cuando la mezcla se
torne de un color rojizo se podrá retirar del calor.
5. Agregar a la mezcla 3 ml de agua destilada
6. Verter en un tubo de ensayo 2 ml de la solución y agregar gota a gota solución de NaOH hasta
cambio de coloración.
7. A la disolución anterior, agregar gota a gota HCl
8. Anotar las observaciones.

Síntesis de fluoresceína

1. En un matraz Erlenmeyer agregar 0.3g de resorcinol, 0.2g de anhídrido ftálico y añadir 3 o 4

gotas de ácido sulfúrico concentrado.
2. Agitar la mezcla con agitador de vidrio durante 2 o 3 minutos.
3. Colocar el matraz que contiene la mezcla sobre la parrilla e iniciar el calentamiento.
4. Detener el calentamiento hasta que los sólidos se fundan y se integren.
5. Agregar a la mezcla 3 ml de agua destilada
6. Colocar 2mL de la solución en un tubo de ensayo y agregar gota a gota solución de hidróxido de
sodio al 5%.
7. Examinar la disolución con luz ultravioleta
8. En la solución que permanece en el matraz, agregar gota a gota HCl
9. Anotar observaciones
Diagrama de flujo
Resultados

Tabla 1.0. Propiedades y estructura química de los productos obtenidos.

Nombre Fluoresceína Fenolftaleína

Fórmula C20H12O5 C H O.
20 14 4
Imagen del
compuesto

Estructura
P
R
O
D
U
C
Estado y apariencia T Polvo color pardo Sólido blanco inodoro
física
O
Masa molecular S 332,31 g/mol 318,3106 g/mol.

Punto de fusión 315 °C (599 °F) 262 °C

Punto de ebullición --- > 450 ºC

Punto de --- 8 - 13ºC

inflamación

Solubilidad en Insoluble en agua < a 0,1%

agua

Solubilidad en Soluble en alcohol (étnico) y Soluble en etanol, acetona,

otros compuesto aguas alcalinizadas dietiléter

Incompatibilidad Agentes oxidantes fuertes Agentes oxidantes fuertes, como

percloratos, peróxidos y
permanganatos
(reacción rápida y violenta con
riesgo de incendio y explosión);
agentes reductores fuertes,
como
fosfuros, cloruro de estaño (II) e
hidruros metálicos (reacción
vigorosa o violenta); ácido
sulfúrico y
ácido nítrico, aminas alifáticas e
isocianatos
 Toxicidad En caso de incendio, puede Sustancia combustible,
emitir humos tóxicos/irritantes. carcinogénica, tóxica para la
Provoca irritación ocular grave reproducción y mutagénica.
Irritación ocular, dérmica y de
vías respiratorias.

NFPA

Pictogramas

Usos de la fenolftaleína
La fenolftaleína es usada en análisis químicos como un indicador visual en la determinación del punto de
equivalencia en las reacciones de neutralización o titulaciones ácido-base. El reactivo para estas
valoraciones ácido-base se prepara al 1% disuelta en alcohol de 90 %.

La fenolftaleína se usó como agente laxativo, pues aumenta la motilidad intestinal al estimular las
terminaciones nerviosas de la pared del intestino, aliviando el estreñimiento.

La fenolftaleína se utiliza como reactivo en la prueba de Kastle-Meyer, para detectar trazas de sangre.
Esta prueba es una prueba forense preliminar. Para ella se recolecta sangre con una torunda, se le
agrega la fenolftaleína y al pasar unos segundos se le aplica peróxido de hidrógeno a la torunda. Si esta
se vuelve rosada rápidamente se dice que esta prueba preliminar es positiva.

En el campo de la ingeniería civil se utiliza para La evaluación de estructuras de concreto reforzado, así
como en el control de calidad de suelos estabilizados.

En análisis clínicos, la fenolftaleína se utiliza como agente de diagnóstico para investigar la función renal
y en la determinación de orina residual en la vejiga

En microbiología este compuesto químico presente en la forma de difosfato de fenolftaleína es utilizado

como componente para la identificación de bacterias específicas (fosfatasa ácida positivas) en algunos
medios de cultivos selectivos.
Imagen 1.0. Fenolftaleína en medio ácido

Imagen 1.1. Fenolftaleína en medio básico

Usos de la fluoresceína

La fluoresceína tiene varias aplicaciones, en veterinaria y en medicina, se usa para el estudio de los
vasos sanguíneos en el ojo, y para detectar lesiones en la córnea. También es utilizada para detectar
alteraciones en el lacrimal.

Las técnicas de inmunofluorescencia directa o indirecta, se utilizan anticuerpos conjugados con

fluoresceína, para que puedan ser detectados al ser observados en un microscopio especial. Estos
anticuerpos marcados pueden ser específicos para un determinado antígeno, el cual se busca detectar,

Además, esta sustancia también se utiliza en técnicas ELISA (enzimo-inmuno-ensayo), donde también se
utilizan anticuerpos marcados con fluoresceína.

En geología puede aplicarse para seguir la pista a aguas que desaparecen bajo tierra y vuelven a
aparecer a una cierta distancia

Ha sido aprobado por la FDA para su uso en medicamentos y cosméticos aplicados externamente.
Además, es utilizada por los pilotos de combate en caso de caer en el mar, para producir una señal visual
al soltar dicho compuesto, y reaccionar con el agua.

En poceria se utiliza para descubrir fugas en tuberías.

Imagen 1.2. Fluoresceína en medio ácido

Imagen 1.3. Fluoresceína en medio básico

Fenolftaleína: oscila entre los 300 y 500 pesos los 25 g Fluoresceína: En tiras (100 y 200)
precios entre 1000 y 1500 y las gotas están entre 500 y 700 pesos
Análisis de resultados
Síntesis de fenolftaleína

Ecuación general de la reacción

Mecanismo de reacción

Etapa 1: En primera instancia se tiene la protonación de uno de los oxígenos del anhídrido ftálico,
adquiriendo así una carga positiva.

En esta etapa también se observa la adición del fenol (nucleófilo) siendo enlazado al carbono vecino del
oxígeno protonado; se enlaza especialmente a este carbono, ya que al estar enlazado a oxígenos, estos
le retiran densidad electrónica quedando así con una densidad de carga parcial positiva (electrófilo).

Al llevar a cabo la adición del fenol, instantáneamente se rompe el enlace pi entre el C y el O protonado
recuperando así el O su par de electrones. Así mismo, se genera un intermediario de reacción, en este
caso un carbocatión, en la molécula de fenol pues para poder enlazarse con el C del anhídrido ftálico se
produce la ruptura de un enlace pi del ciclo (quedando enlazado en posición para).

Teniendo el carbocation en el ciclo del fenol, existe resonancia por lo que se tienen diferentes
estructuras canonicas de resonancia.
Etapa 2: En esta etapa el carbocation buscará estabilizarse, de esta manera uno de los H del C vecino al
carbocatión se adicionará al grupo hidróxilo presente en el anhidrido ftalico, creando asi un ion oxonio y
estabilizando al carbocation (formación de un enlace pi).

Al ser el ión oxonio una base débil sera un buen grupo saliente, obteniendo asi su eliminación y la
consecuente formacion de un carbocatión.

Etapa 3: Con la formación de un carbocatión, una segunda molécula de fenol tendrá la oportunidad de
adicionarse de la misma manera que la primera. En este caso también se creará un carbocatión dentro
del ciclo del fenol, por lo que existirán estructuras de resonancia.
 Etapa 4: El carbocatión que se generó, buscara estabilizarse; es así como llega el agua a su auxilio,
desprotonando al carbón vecino del carbocatión, produciendo así una ruptura heterolítica a favor del C
quien utilizara ese par de electrones para la formación de un nuevo enlace pi, siendo así estabilizado el
carbocatión y obteniendo el producto final.

Fenolftaleína en medio básico

Mecanismo de reacción

Estructura 1-2: Como primera observación, tenemos la adición de una base en el carbono del anhídrido
ftálico enlazado a dos O. Es debido mencionar, que el grupo OH de la base se adiciona específicamente a
este C, ya que al poseer dos enlaces con O, estos le retiran densidad electrónica por lo que el C adquiere
una densidad de carga parcial positiva, comportándose como una especie electrófila. Simultáneo a esta
adición, ocurre la deslocalización de un par de electrones de uno de los O, convirtiéndose en un o xianión.

Estructura 2-3: El C del anhídrido ftálico al estar enlazado a 3 átomos de O adquiere una carga parcial
positiva, por lo que el oxianión presente, busca estabilizar esa deficiencia creando así un enlace pi C-O.
Como consecuencia de lo anterior, se produce una ruptura heterolítica entre uno de los O vecinos y el C,
está a favor del O, quedando este último con una carga negativa. De esta manera se logra la apertura del
ciclo.

Estructura 3-4: El oxianión que se encuentra en la molécula buscara estabilizarse, de forma que
desprotonará al grupo OH más cercano a él, provocando, al mismo tiempo, la ruptura heterolítica del O-
H a favor del O, quedando este último como un oxianión.

Estructura 4-5: Otra de las moléculas de la base adicionada (OH) llega a desprotonar al hidroxilo de uno
de los fenoles presentes en la molécula, esto con la intención de generar una molécula de agua.
Estructura 7-8: En esta última etapa, una nueva molécula de la base adicionada desprotonará al grupo OH
del fenol restante, quedando el O con una carga negativa Estructura 5-6: El O del hidroxilo formado en la
estructura 3-4, fungirá como nucleófilo al adicionar un H de la molécula de agua, antes formada, esto con
el fin de crear un buen grupo saliente (ión oxonio).

Estructura 6-7: Con la salida del ion oxonio, la molécula buscara estabilizarse por lo que ocurrirá una clase
de resonancia en cascada, partiendo del oxianión superior, que llevará a la formación de un enlace pi C-
C. y obteniendo el producto final.

Síntesis de fluoresceína

Mecanismo de reacción

Etapa 1: La reacción se inicia debido a

la protonación del oxígeno, el protón
es un hidrogeno proporcionado por el
acido sulfúrico utilizado como
catalizador, debido a la protonación
el oxígeno rompe el doble enlace con
el carbono. Como consecuencia
directa de la ruptura del doble enlace
se forma un carbocatión; sin
embargo, el nucleófilo presente en el
medio, en este caso resorcinol a este
se adiciona al carbono con carga
positiva.

Primera resonancia: Derivado del enlace entre la molécula de resorcinol y el carbocatión, se rompe un
doble enlace presente en el anillo aromático del resorcinol, formando así otro carbocatión. El carbono
que adquiere carga positiva da inicio a un fenómeno de resonancia dentro de la molécula de resorcinol.
Segunda etapa: El acido sulfúrico vuelve a actuar como donante de protones, y de nuevo dona un
hidrogeno, que en este caso, se adiciona al grupo hidroxilo Debido a esta interacción obtenemos la
formación de una molécula de agua que sale de la molécula de anhidrido, formando así otro carbocatión.
La molécula de resorcinol vuelve a actuar como nucleófilo y se adiciona al carbocatión.

Resonancia 2: La formación del enlace entre el anhidrido y la segunda molecula de resorcinol, provoca la
ruptura de un doble enlace dentro de la segunda molecula de reosrcinol. Se forma un carbocatión que es
el que da inicio a un segundo fenomeno de resonacia dentro de la reacción.

Etapa 3: Finalmente los grupos hidroxilo de las moléculas de resorcinol interactúan entre si; durante la
interacción uno de los grupos desprotona al otro, lo que termina con la salida de una molécula de agua y
la formación de un oxianión. El oxigeno con carga negativa rápidamente actúa como nucleófilo y forma
un nuevo enlace con el carbono que perdió su grupo hidroxilo; este nuevo enlace provoca que la molécula
se cierre formando un ciclo.
Síntesis de timolftaleína

Mecanismo de reacción

Etapa 1: Para la formación de timolftaleina se comienza por la protonación del oxigeno presente en la
molécula de anhidrido ftálico; la protonación ocurre gracias al acido sulfúrico que actúa como catalizador
y dona uno de sus hidrógenos. Simultanea a la protonación se rompe el doble enlace entre oxigeno y
carbono, lo que resulta en un carbocatión que interacciona con una molécula de timol. El nuevo enlace
entre el timol y el anhidrido provoca la ruptura de un doble enlace dentro del anillo aromático del timol.
Primera resonancia: En la etapa 1 se explico como se formo el carbono de carga positiva dentro de la
molécula de timol, dicho carbono es quien inicia un fenómeno de resonancia dentro del anillo aromático
del timol. Como se observa en las imágenes una vez que se forma un carbocatión en el metil del anillo
aromático, no se puede continuar la resonancia hacia la derecha, por lo que para estabilizar la molécula
la resonancia continua hacia el lado izquierdo de la molécula.

Etapa 2: Una vez que la resonancia ha finalizado observamos que el grupo hidroxi, formado por la
protonación inicial del anhidrido, interactúa con el hidrogeno del carbono del timol que mantiene el
enlace también con el anhidrido. El oxigeno que aun tiene pares de electrones sin compartir desprotona
al carbono; lo que deriva en la formación del doble enlace dentro del anillo aromático del timol y la carga
positiva del oxígeno. Debido a la deficiencia que presenta el oxígeno, este sale de la molécula, provocando
una ruptura heterolítica a favor del oxigeno y formando otro carbocatión.

Una molécula de timol vuelve a actuar como nucleófilo y se adiciona al carbono de carga positiva. El nuevo
enlace con la segunda molécula de timol, rompe un doble enlace dentro del timol y se forma otro
carbocatión.

Segunda resonancia: En la imagen se observa que el carbocatión dentro del timol inicia un segundo
fenómeno de resonancia, esta vez dentro de la nueva molécula de timol adicionada al anhidrido. El
fenómeno de resonancia es exactamente igual al primero.

Etapa 3: Durante la etapa final el carbono del segundo timol que mantiene el enlace carbono del
anhidrido, es desprotonado por una molécula de agua, lo que permite formar un doble enlace dentro de
la molécula de timol y un ion oxonio.
Artículo científico: Uso de la fluoresceína en la práctica clínica veterinaria

La fluoresceína tiene la particularidad de teñir sólo el estroma corneal, cualidad dada por su capacidad
tintórea exclusivamente hidrofilia; de tal modo que sí la córnea tiene la natural cobertura lipídica no se
adhiere y no tiñe. En conclusión si tiñe es porque se ha perdido la integridad del epitelio corneal. Y esto
ayuda mucho a los veterinarios a diagnosticar la ulceración y dar un seguimiento a la enfermedad, también
a observar sirve para evaluar cuanto epitelio corneal puede estar despegado del estroma. Un datos
interesante es que algunas veces la ulceración no se tiñe porque son "claras úlceras corneales" y esto se
debe a unas depresiones donde probablemente había ulcera y hubo una retracción. En el artículo
exponen la fluoresceína en los ojos de perros como es que se tiñe al tener una ulceración en diferentes
razas de perros y diferente tipos de ulcera para su diagnóstico preciso.

Conclusión

La síntesis de fenolftaleína y fluoresceína es un proceso de gran importancia dentro de la formación de

BQDs, pues dichas sustancias tienen diferentes aplicaciones en futuras aplicaciones dentro de la carrera
universitaria, así como en el desarrollo de técnicas de investigación y desarrollo dentro de laboratorios y
la industria. Al observar el mecanismo de reacción y el medio en el que reaccionan para dar el producto
nos ayuda en nuestra formación profesional porque adquirimos conocimientos que nos ayudan a poder
ser fabricantes de Fenolftaleína y fluoresceína ser competitivos en el área laboral. Es importante recalcar
que estos dos colorantes poseen una gran utilidad en diversas áreas lo cual nos da una idea de lo
importante que es conocer este tipo de procesos de síntesis. Con esta práctica, también nos damos cuenta
de lo necesario que es observar las condiciones en que se lleva a cabo una reacción, pues no obtendremos
el mismo efecto del producto en distintos medios, en este caso se da el cambio de coloración lo cual nos
ayuda a saber si se obtuvo el producto deseado.
Referencias

• Redacción BeScience. (s.f.). FENOLFTALEINA POLVO, RA ACS. Recuperado el 03/06/2021 de:

https://www.bescience.com/products/fenolftaleina-polvo-ra-acs
• Anónimo. (2014). Aplicaciones de la fluoresceína. Diario4v. Recuperado el 03/06/2021de
https://www.diario4v.com/salud/2014/1/16/fluorescena-agua-verde-verti-termoelctrica-
1959.html#:~:text=La%20fluoresceína%20tiene%20varias%20aplicaciones,sanguíneo%2C%20en
%20alguna%20vena%20periférica.
• Baraboglia, E. (2009, 3 marzo). Uso de la fluoresceína en la practica clínica veterinaria. Redalyc.
https://www.redalyc.org/pdf/636/63617318012.pdf

• Balderrama, C. (2012). Fenoftaleína. Slideshare. Recuperado el 03/06/2021 de:

https://es.slideshare.net/carolinabalsan/fenoftaleina

• Campos, G.X y Alvarenga, E.R. (2009). Aplicación de la fenolftaleína en algunas áreas de la

ingeniería civil. Recuperado el 03/06/2021 de: https://www.mop.gob.sv/wp-
content/uploads/2010/03/fenolftaleina.pdf
• Redacción BeScience. (s.f.). FENOLFTALEINA POLVO, RA ACS. Recuperado el 03/06/2021 de:
https://www.bescience.com/products/fenolftaleina-polvo-ra-acs

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Agradecemos primero a nuestras familias por brindarnos los recursos económicos necesarios para
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