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INFORME DE RESULTADOS LABORATORIO BIOQUIMICA II

TEMA: EXTRACCIÓN DE LÍPIDOS DE CEREBRO (máximo 6 páginas).


PRESENTADO
POR:_____________________________________________________________________________________
_______________
1. Introducción al tema, el porqué de la selección de las pruebas que se hicieron y en general los
resultados obtenidos (no olvide incluir bibliografía):
Los componentes típicos del sistema nervioso (cerebro) son los lípidos, que están contenidos principalmente en
los cilindroejes de los nervios. La sustancia blanca contiene proporcionalmente más lípidos que la gris. El
contenido total alcanza del 12 al 15% del peso fresco, aproximadamente la mitad del peso seco. Para los
distintos grupos de lípidos se han obtenido los siguientes valores (tanto por ciento del peso en fresco):
Fosfátidos 6% Cerebrósidos 2%, Esteroles 4% (sustancia blanca: 9%, 4%, 1-2%, respectivamente, Sustancia
gris: 4%, 1%, 1-2%, respectivamente. El colesterol es quizá el esteroide mejor conocido debido a su relación con
la arteriosclerosis. Se encuentra ampliamente distribuido en todas las células del organismo, pero especialmente
en las del tejido nervioso. Es el constituyente de mayor importancia en las membranas celulares y de las
lipoproteínas plasmáticas. A menudo se encuentra combinado con ácidos grasos como ester de colesterico.
Existen en las grasas animales pero no es las vegetales. Los fosfolípidos son los principales constituyentes
lipidicos de la membranas. El ácido fosfatidico es muy importante como intermedio en la síntesis de
triacilgliceroles y fosfolípidos. Los lípidos son transportados en el plasma como lipoproteínas y un grupo
identificado como tal es el grupo de los fosfolípidos. Tanto los fosfolípidos como la apolipoproteina C-III se

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requieren como cofactores para la actividad de la lipoproteína lipasa. La apolipoproteina C-II contiene un sitio
específico de fijación de fosfolípido a través del cual se adhiere a la lipoproteína.

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Los resultados obtenidos en cuanto a la extracción de lípidos del cerebro evidencian un mayor contenido de

o.
glucolipidos y esfingolipidos que corresponde al extracto 3; la prueba de colesterol realizada al extracto 1 fue
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positiva , asi como tambien la prueba de lecitina que arrojó un precipitado color blanco y la prueba de fosforo
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que tambien fue positiva; por otra parte la prueba para glucolipidos y esfingolipidos realizada al extracto 3 , fue
positiva para Molish ya que se observo la formación de un anillo color rojo que separaba dos fases, la prueba
de fehling para este extracto tambien fue positiva al evidenciar la formación de un precipitado color rojo ladrillo.
o

ESTO SOLO LO PODEMOS HACER HASTA QUE HAGAMOS LOS CALCULOS


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2. Solventes de extracción
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2.1. A partir de los extractos I, II y III obtenidos indique a manera de cuadro comparativo,
columna 1- extracto, columna 2- lípidos extraídos, columna 3-solventes empleados según el extracto y
Th

columna 4-fundamentación química del por qué de los solventes empleados en cada caso.

EXTRACTO LIPIDOS EXTRAIDOS SOLVENTES FUNDAMENTO QUIMICO


EMPLEADOS POR QUE SE UTILIZAN
LOS SOLVENTES.

EXTRACTO I: Los lípidos extraidos es El solvente utilizado es Los esteroles son solubles
principalmente acetona en acetona, al contrario de
coresterol. lo que sucede con otros
lípidos complejos.

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EXTRACTO II: Los principales lípidos El solvente utilizado es Algunos glicerofosfolípidos,
obtenidos en esta éter etílico como las lecitinas, la
extracción son fosfatidiletanolamina y la
fosfolípidos, fosfatidilserina, son
acilgliceroles, algunos solubles el éter e
glucolípidos y algo de insolubles en acetona
colesterol.

EXTRACTO III: Se extrajeron El solvente utilizado es Los glucósidos de


principalmente etanol esfingosina se disuelven
glucolipidos y en alcohol caliente y son
esfingolipidos insolubles en acetona y
éter.

3. Reconocimiento

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3.1. Resultados

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co
Muestra Peso del Extracto I Peso del Extracto II Peso del Extracto III

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cerebro seco seco seco

o.
Peso Peso 0.053 0.3213 0.0487
húmedo:
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4.0552g
Peso seco:
0.4055
o

porcentaje
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Tipo de Colesterol Fosfolípidos y Glucolípidos y


lípidos acilgliceroles esfingolípidos.
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presentes
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Porcentaje (con base en el peso de la muestra de cerebro y asumiendo que ésta tiene un 90% de humedad)

3.2. Pruebas específicas


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3.2.1. Colesterol: indique el fundamento químico de la prueba realizada (incluye ecuación


química).
Th

El colesterol por acción de agentes deshidratantes como el ácido sulfúrico y anhídrido acético se
transforma en colesterileno, compuesto de dobles enlaces conjugados que presenta color.

3.2.2. Al comparar los resultados obtenidos en cerebro para identificación de colesterol, con los
realizados la semana anterior en aceites; qué diferencias cualitativas encontró?, por qué?

Al realizar la prueba de colesterol para el extracto uno se observa que es positiva con la presencia de

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un anillo verde y formándose la separación de dos capas, se utilizó el mismo procedimiento para
determinar el colesterol en la prueba realizada la semana anterior observándose la misma formación
del anillo verde. El colesterol es muy importante en nuestro organismo, ya que es el encargado de
producir los ácidos biliares en nuestro organismo. La sangre transporta el colesterol por las
lipoproteínas que se agrupan con las grasas. Tenemos dos tipos de lipoproteínas las de baja densidad
(LDL), y las de alta densidad (HDL).

3.2.3. Acilgliceroles y fosfolípidos: dibuje la estructura de la lecitina, a qué tipo de lípidos


pertenece?, por qué?

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o.
La lecitina es un fosfolípido, la estructura de la lecitina esta constituida por un alcohol primario, que en
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este caso es el glicerol. Este glicerol aparece esterificado en la posición 1 por un residuo de ácido
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graso, Mientras que la posición C-2 está esterificada por otro residuo de ácido graso, El -OH en el
carbono 3 está esterificado a fosfato: El cual a su vez se esterifica a un segundo alcohol, colina. La
porción diacilglicerilfosfato recibe el nombre de ácido fosfatídico; por lo que el conjunto: recibe el
nombre de Fosfatidil colina o Lecitina.
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3.2.4. Indique el fundamento químico de la prueba realizada (incluye ecuación química)


Th

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3.2.5. Fósforo: indique el fundamento químico de la prueba realizada (incluye ecuación química)

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La reacción se basa en que el fosfato inorgánico, en medio ácido, con el molibdato (reactivo 1) da
fosfomolibdato, color amarillo. La positividad de esta reacción indica la presencia de fósforo inorgánico.

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Las sustancias orgánicas dan la reacción positiva, siempre que se haga una hidrólisis previa. La

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reacción positiva se manifiesta por la reacción de un precipitado amarillo de fosfomolibdato de amonio

o.
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3.2.6. Cuál es el objetivo en la adición de: a). ácido nítrico, b). molibdato de amonio
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a. el ácido se utiliza para hidrolizar los fosfolípidos.

b. El molibdato de amonio reacciona con el fosforo para precipitar como fosfomolibdato de amonio color
amarillo
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Th

3.2.7. Para qué clase de lípidos es positiva esta prueba?, escriba la fórmula de su estructura
química general.

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3.2.8. Glucolípidos y esfingolípidos: indique los resultados y fundamento químico de la prueba de
Molish. Por qué se utilizó este tipo de prueba?

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La reacción de Molisch es una prueba de carácter cualitativo para cualquier carbohidrato, donde se
deshidrata (las pentosa furfural o hexosas a hidroximetilfurfural) e hidroliza (el enlace glucosidico) por

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medio de ácido sulfúrico los grupos funcionales, apareciendo un anillo morado debido a que en la

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preparación el ácido es un catalizador para la hidrólisis de los enlaces glucosídicos presentes en
loscarbohidratos, donde los polisacáridos y disacáridos los reduce a monosacáridos. La reaccion es

o.
positiva para todos los lipidos de tipos glucolidios es decir todos los lipidos que contiene una seccion
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carbohidratada ya que esta sera la hidrolizada.
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3.2.9. indique los resultados y fundamento químico de la prueba de Fehling. Por qué se utilizó
este tipo de prueba?

Se observa la formación de un precipitado rojo ladrillo es decir que hay presencia de un carbohidrato

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reductor al ser positiva, la prueba se utilizó para la identificación del carbohidrato que hace parte del
glucolipido. Este ensayo pone de manifiesto la presencia de azucares reductores(aldosas: glucosa,
ribosa, eritrosa, etc.). Se trata de una reacción redox enla que el grupo aldehído (reductor) de los
azúcares es oxidado a grupoácido po el Cu 2+ que se reduce a Cu+. Tanto los monosacáridos como los
disacáridos reductores reaccionan con el Cu2+ dando un precipitado rojo de óxido cuproso. La prueba
de Fehling no esespecífica; otras sustancias que dan reacción positiva son los fenoles,aminofenoles,
benzoína, ácido úrico, catecol, ácido fórmico,hidrazobenceno, fenilhidrazina, pirogalol y resorcinol.

DECIR PORQUE NO SE DIO

3.2.10. En la prueba de Fehling, por que es necesario acidificar y luego neutralizar previo a dicha
prueba?. Sustente.

Es necesario acidificar el glucolipido a fin de hidrolizar el enlace ester que une al lípido con el carbohidrato; este

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se rompe dejando libre el carbohidrato que puede ser identificado por la presencia de precipitado rojo ladrillo , la

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neutralización se lleva a cabo porque La reacción tiene lugar en medio básico por lo que es necesario introducir

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en la reacción tartrato sódico-potásico para evitar la precipitación del hidróxido cúprico, la reacción de fehling se

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da en mejores condiciones en estado básico.

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3.2.11. Qué prueba utilizarían para determinar la presencia de esfingolípidos en esta fracción?
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Los esfingolipidos son lípidos complejos ,Los hay con o sin fosfato: fosfoesfingolípidos y glucoesfingolípidos, Se
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utilizaría la prueba del fosforo para determinar si el tipo de esfingolipido que se encuentra en la muestra es un
fosfoesfingolipido ya que si presenta fosforo será positiva a esta prueba pero si se observa un resultado
negativo se concluye la presencia de glucoesfingolipidos y se utilizaría una prueba de molish para corroborar el
resultado
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4. Conclusiones (presentadas a partir de los objetivos planteados por cada uno, incluir los resultados
generales obtenidos. El límite inferior de conclusiones es de 5).
Th

· La presencia de esfingolipidos y glucolipidos en la muestra de cerebro tomada es mayor que la presencia


de colesterol y fosfolípidos por lo cual el porcentaje es aproximadamente el doble.
· Se realizó la extracción de los principales lípidos presentes en el cerebro y se llevaron a cabo
pruebas de reconocimiento de los mismos obteniéndose resultados positivos para todas.
· El uso de pruebas cualitativas para la identificación de lípidos en el cerebro es una herramienta útil y
confiable, es importante identificar los fosfolípidos para los cuales las diferentes pruebas dan resultados
positivos.
· La utilización de los solventes correctos para la extraccion de los lípidos que se encuentran en un
cerebro es muy importante ya que cada tipo de lipido presenta diferente solubiidad , esto influye en una
buena separación de componentes.
· Es importante hidrolizar los fosfolípidos para que al adicionar molibdato de amonio este se precipite
como fosfomolibdato de amonio.

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5. Bibliografía e Infografía (Normas Icontec o APA)
PONER EN APA

· Ledesma, M.D., M.G. Martin, and C.G. Dotti, Lipid changes in the aged brain: Effect on synaptic
function and neuronal survival. Progress in Lipid Research, 2012. 51 (1): p. 23-35.
· https://es.slideshare.net/richardordonez940/bioquimica-generalidades-de-los-lipidos-25504673
· Bioquímica - Horton, H. Robert; Moran, Laurence A; Ochs Raymond S; Rawn, J. David;
Scrimgeour K. Gray - México, D.F: Prentice-Hall Hispanoamericana, 1995
· Química - Sienko, Michell J; Plane, Robert A - Madrid: Aguilar, 1967

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