Evaluación de las propiedades bioactivas de las biocerámicas α y β

de wollastonita empapadas en un fluido corporal simulado

Introducción
Un biomaterial es una sustancia diseñada para ser implantada o incorporada a un sistema vivo. Los
biomateriales se implantan con el fin de reemplazar y / o restaurar los tejidos vivos y sus
funciones. La biocompatibilidad es la capacidad de una sustancia para tener una respuesta
adecuada al hospedador en el que fue implantada para su función específica. Esta respuesta
incluye resistencia a la coagulación sanguínea, resistencia a la colonización bacteriológica y
recuperación normal sin complicaciones. Cualquier biomaterial para sustitución o reparación ósea
debe cumplir dos requisitos principales: Tener una buena resistencia mecánica y una porosidad
adecuada, que le permita cumplir su función en el lugar de la lesión y apoyar los mecanismos
biológicos de regeneración. La hidroxiapatita (Ca10 (PO4) 6 (OH) 2), es una cerámica de fosfato
cálcico de gran interés en aplicaciones biomédicas, debido a la similitud de este compuesto con el
material que forma los huesos. Sin embargo, la hidroxiapatita sintética tiene malas propiedades
mecánicas, por lo que se utiliza principalmente para revestir otros materiales con propiedades
mecánicas más resistentes. Uno de los minerales reforzantes más importantes es la wollastonita,
un silicato cálcico que se encuentra en forma natural con la fórmula molecular CaSiO3, que es un
material biocompatible con características bioactivas, similares a las de la hidroxiapatita, que se ha
utilizado con alta eficiencia como fase de refuerzo por muchos materiales compuestos. Sin
embargo, la wollastonita como fase individual, ha demostrado tener un comportamiento
mecánico eficiente, así como excelentes propiedades bioactivas, lo que la coloca a la vanguardia,
como una importante biocerámica para ser utilizada en forma de polvos o materiales densos
sinterizados, para reparar lesiones relacionadas con los tejidos duros humanos. Por otro lado, la
wollastonita presenta dos fases cristalográficas diferentes, la fase β-wollastonita y la fase α-
wollastonita; Ambos tienen propiedades y cualidades diferentes, que deben ser estudiadas para
encontrar sus aplicaciones más eficientes en el entorno de los tejidos duros. Asimismo, la
wollastonita natural representa un mineral de gran importancia regional, ya que en Hermosillo,
Sonora, México la empresa minera “Minera Roca Rodando S. de RL de CV”, realiza operaciones en
el depósito “Pilares”, produciendo wollastonita de alta pureza, la cual podría usarse directamente
como biomaterial en diversas aplicaciones clínicas. Por ello, este trabajo de investigación aborda el
estudio de la solubilidad y bioactividad de materiales sinterizados de wollastonita natural, que
fueron producidos en diferentes condiciones de sinterización, para lograr con ella productos con
diferentes propiedades, con el fin de proponer un material biocerámico alternativo, a ser utilizado
de forma eficaz como implante en lesiones del tejido óseo. 
2. Experimental
2.1. Preparación de biocerámicas sinterizadas de wollastonita

Los materiales sinterizados de wollastonita se prepararon utilizando 0.5 g de wollastonita natural

de alta pureza (CaSiO3, NYAD M200 Minera Roca Rodando S. de R.L. de C.V., Depósito Pilares,
Hermosillo, Sonora, México), con 98.25% de pureza usando una técnica de sinterización. El análisis
químico y las propiedades típicas de la wollastonita utilizadas en este estudio se pueden encontrar
en otra parte. Para el proceso de sinterización se molieron durante 30 minutos 2 g de wollastonita
en 5 mL de etanol en un molino de bolas de carburo de tungsteno Fritsch Pulverisette 6 molino
planetario (Idar-Oberstein, Alemania), a una velocidad de 200 rpm. Los materiales molidos se
secaron a 120 ° C para eliminar el etanol y obtener un polvo fino. Las tabletas cilíndricas se
produjeron mediante prensado uniaxial de polvos (0,5 g) en una matriz de 10 mm de diámetro en
una unidad hidráulica de prensa Carver 3912 (Carver, Wabash, IN) a una presión de 70 MPa, 220
MPa y 500 MPa durante 5 min. Las pruebas de sinterización se llevaron a cabo en un horno de alta
temperatura Thermolyne 46.100 (Thermolyne, Dubuque, IA) a 1200˚C y 1300˚C. El proceso
térmico se desarrolló a una velocidad de calentamiento de 2˚C / min desde la temperatura
ambiente hasta la temperatura de sinterización, con un tiempo de permanencia de 5 ha la
temperatura máxima seguido de enfriamiento a 2˚C / min.  

2.2. Evaluación de las propiedades bioactivas de las biocerámicas

sinterizadas de wollastonita
La bioactividad se evaluó examinando la nueva capa de apatita formada en la superficie de los
materiales después de la inmersión durante 1, 2 y 3 semanas en 40 ml de una solución de fluido
corporal simulado (SBF), con concentración de iones como se informa en la Tabla 1, casi igual a la
del plasma sanguíneo humano a 37 ° C. Después de cada período de evaluación, las muestras se
extrajeron de la solución, se lavaron con agua desionizada y se secaron a temperatura ambiente.
La evaluación de la morfología y composición de las capas se realizó mediante SEM / EDS y XPS.
Para la determinación de los cambios en la concentración de iones Ca, P y Si, así como los cambios
de pH de la solución SBF después del remojo para cada período de tiempo, se utilizaron las
siguientes técnicas: espectroscopía de absorción atómica (para análisis de Ca y Si), colorimetría
(para análisis de P) y medición de pH.

2.3. Técnicas de caracterización

Para detectar las transformaciones que ocurren en los materiales con la modificación de su
temperatura, se utilizaron las técnicas de análisis termogravimétrico (TGA), en combinación con
análisis térmicos diferenciales (DTA). Ambos análisis se desarrollaron en un equipo analizador DSC-
TGA simultáneo (TA Instruments SDT 2990, New Castle, DE). El intervalo de calentamiento fue de
temperatura ambiente a 1400 ° C, a una velocidad de 10 ° C / min con un flujo de aire de 23
cm^3/min. Los análisis XRD se realizaron mediante un difractómetro Phillips X'PERT XRD (Phillips
Electronics, N.V. Eindhoven, Holanda), se utilizó radiación CuKα (40 mA, 40 kV). El rango de 2Ɵ fue
de 20˚ a 80˚ a una velocidad de exploración de 1,2˚ / min. Los estudios morfológicos de las
muestras se realizaron utilizando un microscopio electrónico de barrido JEOL SEM 5300 (JEOL,
Tokio, Japón), todas las micrografías presentadas se obtuvieron sin ningún tipo de recubrimiento
de material. Para la determinación de las concentraciones de Ca y Si en las soluciones SBF, se
utilizó un espectrómetro de absorción atómica (Perkin Elmer model Analyst 400, Waltham, MA). 

Tabla 1. Concentración de iones de fluido corporal simulado (SBF) y plasma sanguíneo humano
(mM), pH = 7,4, T = 37˚C. 

Para la determinación de la concentración de P en las soluciones SBF se utilizó un

espectrofotómetro (Hach serie DR-800, Loveland CO). Para los análisis de los valores de pH en la
solución SBF se utilizó un medidor de pH (Cole-Parmer, Vernon Hills, IL).

4. Resultados y discusión
4.1. Transformación de la fase de β-wollastonita a la fase de α-
wollastonita
Para conocer la temperatura exacta a la que la fase de β-wollastonita se transforma en α-
wollastonita, se desarrolló el análisis térmico que se muestra en la Figura 1. Esta figura muestra el
efecto del tratamiento térmico sobre la wollastonita natural recibida de la empresa minera Roca
Rodando S. de RL de CV, que corresponde a la fase de β-wollastonita, como lo indica el patrón de
difracción de rayos X presentado en la Figura 2, según archivo JCPDS 84-0654. Las trazas de TGA y
DTA no muestran cambios aparentes en todo el rango de tratamiento térmico para la wollastonita;
sin embargo, el pequeño proceso térmico alrededor de 1250˚C, puede deberse al proceso de
transición de la fase de β-wollastonita a la fase de α-wollastonita. Para corroborar lo anterior, la
wollastonita natural (fase de β-wollastonita) se trató térmicamente hasta 1300 ° C durante 24
horas y luego se analizó mediante la técnica de difracción de rayos X. La Figura 3 muestra el patrón
de difracción de rayos X para wollastonita natural tratada a 1300 ° C. En esta figura se observa
cómo este patrón de difracción cambió drásticamente al contrastar este con el patrón de
difracción mostrado en la Figura 2, lo que indica que el material se transformó completamente a la
fase α-wollastonita, según archivo JCDPS 74-0874. 
Figure 1. Trazas de TGA / DTA para la wollastonita natural tal como se recibió, tratada
térmicamente desde temperatura ambiente hasta 1400˚C a una velocidad de calentamiento de
10˚C / min.
Figure 2. Patrón de difracción de rayos X para wollastonita natural tal como se recibió.
Figure 3. Patrón de difracción de rayos X para wollastonita natural tratada térmicamente hasta
1300˚C.

Figure 4. Micrografías de microscopía electrónica de barrido (SEM) de wollastonita natural

sinterizada a 1200 ° C, prensada a (a) 70 MPa, (b) 220 MPa y (c) 500 MPa, empapada en solución
SBF durante 0, 1 y 3 semanas.
Figure 5. Micrografías de microscopía electrónica de barrido (SEM) de wollastonita natural
sinterizada a 1300 ° C, prensada a (a) 70 MPa, (b) 220 MPa y (c) 500 MPa, empapada en solución
SBF durante 1 y 3 semanas.

4.2. Evaluación de las propiedades bioactivas de las biocerámicas

sinterizadas de wollastonita
La Figura 4 y la Figura 5 muestran las micrografías de microscopio electrónico de barrido (SEM) de
las superficies de los materiales sinterizados a 1200˚C y 1300˚C respectivamente, después de
sumergirlos en la solución SBF durante varios períodos. 

La Figura 4 muestra la superficie de la β-wollastonita sinterizada a 1200 ° C, prensada a 70 MPa,

220 MPa y 500 MPa empapada en solución SBF durante 0, 1 y 3 semanas. Las imágenes muestran
cómo la superficie de estos materiales sinterizados antes de la inmersión presenta una serie de
orificios y cavidades que servirán para la formación de la nueva capa de apatita. Sin embargo,
como cuando se aumentó la presión de 70 MPa a 220 MPa, se obtuvo un material sinterizado más
compacto; Asimismo, cuando se aumentó la presión de 220 MPa a 500 MPa, también se observó
una mayor compactación en el producto sinterizado. No obstante, para todos los casos se puede
ver cómo las fibras aciculares de la wollastonita se distribuyeron de tal manera que se pueden
observar agujeros (poros) en la superficie de los sinterizados, lo que indica que estas estructuras
no son completamente densas. Esta porosidad influye directamente en las propiedades bioactivas
de los materiales. Esto se debe a que un cierto grado de porosidad permite la penetración de las
soluciones fisiológicas en el interior de los materiales, posibilitando así que el crecimiento de los
cristales recién formados de la hidroxiapatita carbonatada se produzca desde el interior hacia el
interior de los materiales. superficie, lo que resulta en propiedades bioactivas más eficientes. Esta
figura también muestra la presencia de una capa superficial formada por un nuevo material de la
primera semana de inmersión. La textura de esta capa consiste en aglomerados sueltos que
presentan una alta porosidad y una superficie rugosa. A la tercera semana de inmersión, el
material sinterizado prensado a 70 MPa muestra un crecimiento significativo y aglomeraciones
locales de esta nueva capa, que se denomina "apatita recién formada", debido a su similitud con
las apatitas biológicas formadas por los materiales bioactivos cuando están en contacto con fluidos
fisiológicos. El material sinterizado prensado a 220 MPa presenta una capa más densa y gruesa con
fracturas grandes y profundas debido a la formación de nuevas partículas en la superficie de otras
partículas dando lugar a la formación de esta nueva capa. Por otro lado, el material sinterizado
prensado a 500 MPa presenta una capa muy fina, mostrando varios agujeros grandes y profundos
en su superficie. 
La Figura 5 muestra la superficie de los materiales sinterizados de α-wollastonita prensados a 70
MPa, 220 MPa y 500 MPa, después de remojar durante 1 y 3 semanas en la solución SBF. Para
todos los casos, en la primera semana se observa una fina capa de apatita recién formada, que
cambia de consistencia hasta formar racimos en forma de escamas, que consisten en pequeñas
partículas acumuladas una encima de otra a lo largo de la superficie del material. Este
comportamiento es similar al observado en materiales bioactivos poco solubles como la
hidroxiapatita. Las diferentes características en el comportamiento de la formación, así como en la
textura de las capas de apatita recién formada en los materiales sinterizados, indican que los
materiales presentan diferente bioactividad y biodegradación, la cual está directamente
relacionada con su microestructura, superficie y las diferentes fases presentes en los materiales.  

La Figura 6 y la Figura 7 muestran los patrones de difracción de rayos X de las capas de apatita
recién formadas en la superficie de la β-wollastonita y α-wollastonita sinterizadas, presionadas a
las diferentes cargas de presión de 70 MPa, 220 MPa y 500 MPa, antes y después de sumergir
durante tres semanas en la solución SBF. Los patrones XRD indican que el compuesto formado
corresponde a apatita similar al componente formado por los huesos. Estas capas de apatita
crecen en orientaciones preferenciales en los patrones XRD manifestados por picos
correspondientes a los planos de reflexión (211), (300), (002), (102) y (112). La Figura 6 muestra
que para todos los materiales sinterizados se observa un ligero aumento en la intensidad del pico
en 2-Theta = 32˚ del plano (211) (característico de la apatita), lo que confirma el crecimiento de la
capa de apatita recién formada. En la Figura 7, antes del remojo, los sinterizados de α-wollastonita
tienen un pico intenso al mismo valor de 2-Theta = 32˚, similar al presentado por la apatita; el
crecimiento se aprecia al observar que los picos tras la inmersión durante 3 semanas en la solución
SBF son más anchos que los observados antes de la inmersión. 
Figure 6. Patrones de difracción de rayos X para wollastonita natural sinterizada a 1200˚C,
prensada a (a) 70 MPa, (b) 220 MPa y (c) 500 MPa, antes y después de remojar durante 3 semanas
en solución SBF.
Figure 7. Patrones de difracción de rayos X para wollastonita natural sinterizada a 1300 ° C,
prensada a (a) 70 MPa, (b) 220 MPa y (c) 500 MPa, antes y después de remojar durante 3 semanas
en solución SBF.

4.3. Evaluación de la solubilidad de biocerámicas sinterizadas de

wollastonita
La Figura 8 muestra la variación en la concentración de Ca, Si y P, así como los cambios de pH de la
solución SBF, como resultado de la inmersión de los materiales sinterizados en esta solución
durante 1, 2 y 3 semanas. Estos cambios están correlacionados con la bioactividad de estos
materiales. 
En el caso de la β-wollastonita sinterizada prensada a 70 MPa, la figura muestra una disminución
de la concentración de P, así como un aumento de la concentración de Si, que se estabiliza en 60
ppm. En cuanto a la concentración de Ca, aumenta significativamente hasta llegar a 600 ppm;
además, los valores de pH aumentan hasta alcanzar un valor cercano a 9. Por otro lado, la α-
wollastonita sinterizada prensada a 70 MPa presenta un comportamiento similar con respecto a
las concentraciones de P y Si; sin embargo, para la concentración de Ca aumenta hasta llegar a 350
ppm y el pH no llega a tener valores superiores a 8. De este modo, se observa una mayor
solubilidad de la β-wollastonita sinterizada a 70 MPa con respecto a la α-wollastonita sinterizada
prensada a 70 MPa.
La β-wollastonita sinterizada prensada a 220 MPa muestra un aumento de la concentración de Si
y una disminución de la concentración de P durante el período de inmersión en la solución SBF.
Con respecto a la concentración de Ca, se observa un aumento en las dos primeras semanas hasta
alcanzar la estabilidad durante la tercera semana, logrando 460 ppm, el pH aumenta alcanzando
valores superiores a 8.6 para luego estabilizarse. Los valores alcanzados por la α-wollastonita
sinterizada prensada a 220 MPa para la concentración de Ca, alcanzan 300 ppm, así como valores
de pH inferiores a 8. Lo anterior refleja una mayor solubilidad en β-wollastonita en comparación
con la α-wollastonita sinterizada prensada a 220 MPa.
La β-wollastonita sinterizada prensada a 500 MPa muestra un aumento en las dos primeras
semanas de concentración de Ca, alcanzando una estabilidad en la tercera semana alrededor de
360 ppm. El pH alcanza valores de 8 y luego se estabiliza. El comportamiento de las
concentraciones de P y Si es similar al observado en los materiales sinterizados anteriores; una
disminución de la concentración de P y un aumento de la concentración de Si hasta llegar a 60
ppm. Por otro lado, la α-wollastonita sinterizada prensada a 500 MPa alcanza valores de
concentración de Ca alrededor de 280 ppm y un pH de 7,7. La β-wollastonita sinterizada prensada
a 500 MPa presenta una mayor solubilidad con respecto a la α-wollastonita sinterizada en las
mismas condiciones. 
La Figura 9 muestra los espectros EDS para β-wollastonita sinterizada prensada a 220 MPa (uno
de los materiales más solubles en este estudio), antes y después de remojar durante 3 semanas en
solución SBF. Según el espectro de EDS antes de remojar en solución SBF, los elementos
identificados fueron Ca, Si y O, que corresponden a la wollastonita. Después de 3 semanas de
remojo en solución SBF los elementos identificados fueron Ca, P, O y C, correspondientes a una
capa de apatita recién formada similar a las apatitas biológicas que componen el tejido óseo.
Estas capas también fueron analizadas por espectroscopia de fotoelectrones de rayos X,
corroborando los resultados anteriores.

4.4. Mecanismo de formación de apatita recién formada en las

superficies de materiales
La disolución de los iones Ca de los materiales en la solución SBF permite un aumento en el grado
de sobresaturación local, provocando un aumento en el pH de la solución resultante en la
precipitación de apatita a través del consumo de Ca ^ 2 +, PO4 ^ 3− y OH ^ -, que se refleja en una
disminución de la concentración de iones P de la solución SBF. Aunque los iones de Ca se
consumen para la producción de la capa de apatita recién formada, la disolución de estos iones de
los materiales es mayor que su consumo. Posteriormente, la concentración de iones de Ca y Si
continúa aumentando mientras que la concentración de iones de P continúa disminuyendo, lo que
indica que este ion también se usa para producir la capa de apatita. 
En la wollastonita, la disolución de los iones Ca es más rápida que la de los iones Si. Los iones Ca
se liberan en la solución, con la que se intercambian iones H ^ +, para formar una capa de sílice
hidratada (que contiene grupos Si-OH) en las superficies de las fibras de wollastonita. Los grupos
Si-OH han sido reconocidos como agentes catalizadores para la nucleación y crecimiento de la
capa de apatita recién formada. 
Figure 8. Variación en la concentración de Ca, P y Si y los valores de pH de la solución SBF, cuando
los materiales de wollastonita natural, sinterizados a 1200˚C y 1300˚C bajo diferentes cargas de
prensado: 70 MPa, 220 MPa y 500 MPa, se remojaron durante 1, 2 y 3 semanas en solución SBF. 
Figure 9. Espectros EDS para materiales de wollastonita natural, sinterizados a 1200˚C prensados a
220 MPa, (a) antes y (b) después de remojar durante 3 semanas en solución SBF. 
 La cinética de este proceso está directamente influenciada por las temperaturas de sinterización,
lo que resulta en un proceso más lento en materiales que se sinterizan a altas temperaturas. 
Todos los materiales sinterizados mostraron la capacidad de formar una nueva capa en sus
superficies al entrar en contacto con la solución SBF, sin embargo las diferentes variaciones en la
concentración de iones Ca, P y Si, así como el comportamiento del pH de la solución SBF muestran
que durante las pruebas de inmersión, la disolución superficial de los materiales tiene lugar con un
consumo simultáneo de iones P de la solución. 

5. Conclusion
Los materiales sinterizados de wollastonita presentan cierto grado de porosidad, lo que indica
que en las condiciones de sinterización de este estudio, los materiales producidos no son
completamente densos. Este grado de porosidad, aunque mínimo, es importante para asegurar su
eficiente integración con el tejido óseo, dando lugar a propiedades bioactivas más eficientes. Los
resultados indican la presencia de dos fases polimórficas de wollastonita, la β-wollastonita y α-
wollastonita con una temperatura de transición de la fase β a la fase α de aproximadamente
1250ºC. El análisis de la bioactividad de estos materiales a través de su interacción con un fluido
corporal simulado, durante varias semanas, reveló la formación de una capa de apatita recién
formada en su superficie. Esta capa es similar a las apatitas biológicas que componen el tejido
óseo, lo que dará lugar a la unión directa entre estos materiales y el tejido vivo, una vez
implantados en los organismos vivos. Los resultados indican que la solubilidad de la β-wollastonita
es superior a la solubilidad de la α-wollastonita, siendo la β-wollastonita sinterizada prensada a 70
MPa, el material más soluble, alcanzando 600 ppm para el ion Ca y un pH de casi 9. En Por otro
lado, la α-wollastonita sinterizada prensada a 500 MPa fue el material menos soluble, alcanzando
280 ppm para el ion Ca y un pH de 7.7.