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UNIVERSIDAD ESPECIALIZADA DE LAS AMERICAS

CARRERA : BIOTECNOLOGIA DE LOS ALIMENTOS

PRACTICA UNIVERSITARIA I

GUÍA DE LABORATORIO VIRTUAL 2

GENETICA BACTERIANA IN VITRO

NOMBRE DEL EXPERIMENTO

APLICACIÓN DE BACTERIAS EN LAS MEJORAS DE LOS ALIMENTOS

PRESENTADO POR: KEREN EVERSLEY

CÉDULA: 8-1045-2191

CODIGO DE GRUPO: 6137

PRESENTADO A:

MAGISTER

DAMARIS ALCEDO

LIC. Q.F.B-ALIMENTOS

FECHA DE ENVÍO: 14 de abril del 2021

FECHA DE ENTREGA: miércoles 21 de abril del 20

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Universidad Especializada de las Américas

ASIGNATURA:

PRÁCTICA UNIVERSITARIA

NOMBRE DEL EXPERIMENTO

LABORATORIO VIRTUAL #2

GUIA DE LABORATORIO 2

I SEMESTRE 2021

Nombre del estudiante: Keren Eversley Grupo 20812 LA Puntos 60 Totales

Fecha de aplicación: 14-04-2021 Fecha de entrega: 21-04-2021

PROFESORA: DAMARIS ALCEDO Puntos Obtenidos Calificación

………………………………………………………………………………………………………

………………….
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Instrucciones: Complete la guía vaciando los resultados. Recuerde que la guía es una nota

sumativa. La D, E, F, G, H Se resuelven en esta guía. La guía se entrega junto con el

informe de Laboratorio #1, 8 días después de asignarse, en el mismo documento Word.

A-OBJETIVO GENERAL

➢ Conocer la importancia del estudio de las bacterias y su aplicación en cultivos de

alimentos

. B-OBJETIVOS ESPECÍFICOS

➢ Observar los cuidados que se deben tener en este tipo de cultivos

➢ Identificar los materiales y equipos

➢ Describir los pasos del proceso

➢ Describir los accesorios que se utilizan para la observación y preparación de las muestras

C- INTRODUCCIÓN

Toda la información genética esencial para la vida de la bacteria está contenida en una única

molécula de ácido desoxirribonucleico (ADN) de doble cadena y circular, cerrado por enlace

covalente. Dicha molécula se denomina cromosoma bacteriano. Muchas bacterias poseen además

ADN extracromosómico, también circular y cerrado, denominado ADN plasmídico por estar

contenido en los plásmidos. Éstos, portan información génica para muchas funciones que no son

esenciales para la célula en condiciones normales de crecimiento. En términos bioquímicos la

composición y estructura de los ácidos nucleicos bacterianos, es la misma que para cualquier
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célula. Conviene recordar brevemente, que los ácidos nucleicos son macromoléculas compuestas

de nucleótidos unidos en forma covalente por medio de enlaces fosfodiester entre los carbonos de

las posiciones 3´ y 5´ de dos residuos de azúcares adyacentes. Esta estructura forma un esqueleto

de azúcares y fosfatos constante en toda la macromolécula. La variación entre los nucleótidos que

constituyen la cadena de ácido nucleico, esta dada por sus bases nitrogenadas; para el ADN son:

adenina (A), timina (T), citocina (C) y guanina (G) y para el ácido ribonucleico (ARN) son en

lugar de timina, el uracilo (U). La A y G se denominan bases púricas o purinas, mientras que T,

U, y C se 60 TEMAS DE BACTERIOLOGÍA Y VIROLOGÍA MÉDICA denominan bases

pirimidínicas o pirimidinas. Así, una cadena o hebra de ácido nucleico, tendrá una estructura

primaria determinada por la secuencia de las bases que la componen

D- MATERIALES Y EQUIPOS OBSERVADOS : Se resuelve en la guía

10 puntos

D.1 MATERIALES Se resuelve en la guía 10 puntos

Video 1

➢ No se mencionan materiales de laboratorio en el video.

Video 2

➢ Tubo de ensayos

➢ Placa de Petri

➢ Pipetas

➢ Soporte

➢ Falcon
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E- EQUIPOS Se resuelve en la guía

10 puntos

Vídeo 1

➢ No se mencionan, pero se pudo identificar Microscopios e incubadoras para ciertos

procesos hablados.

Vídeo 2

➢ Thermoblock

➢ Cámara de flujo

➢ Heiker

➢ Microondas

➢ Centrifugadora

➢ Estufa bacteriológica

F- REACTIVOS UTILIZADOS Y SU COMPOSICIÓN: Se resuelve en la guía

10 puntos

Vídeo 1

➢ Fertilizante químico

Vídeo 2

➢ Proteína recombinante
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➢ Bacteria E. Coli

➢ El Caldo de Lisogenia (abreviado LB en inglés)

➢ Cloranfenicol

➢ Ampicilina

G-PROCEDIMIENTO: Se resuelve en la guía 10 puntos

Observe los videos y vaya anotando lo siguiente

1. Procedimiento en cada video 1

➢ Tomamos la capacidad de las bacterias de las semillas de soja. Primero se

estudia el código genético del maíz que es un alimento que realiza la auto-

fertilización. Se compara el código genético con el ADN de la bacteria de la

semilla de soja y por último se combinan para crear una bacteria capaz de hacer

la auto - fertilización.

2. Procedimiento: Vídeo 2

➢ Debemos tener nuestro gen de interés en un plasma que se llamará vector. Se

introduce este vector en la bacteria y para poder expresar nuestra proteína de

interés. La cual se llamará proteína recombinante.

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➢ El gen de interés estará en una concentración de 90 nanogramos para la cual

utilizaremos 1 microlitro de gen con concentración e introducimos nuestras células

competentes en la bacteria, los dejamos 20 minutos en hielo. Las células

competentes deben estar guardadas a –80 grados y luego descongelarla por media

hora antes de iniciar la transformación. Después de los 20 minutos debemos llevar

las células competentes al thermoblock y luego realizar un shock térmico.

➢ El thermoblock debe estar a 42 grados, se le coloca al thermoblock una varilla con

un poco de agua para que se queden los 42 grados, Colocamos nuestras células por

un minuto a 42 grados, tomamos el tiempo. Se debe poner en hielo nuevamente

por un minuto y medio.

➢ Después de un minuto medio le agregamos 500 microlitro de LB en la cámara de

flujo, se homogeniza la muestra con el medio LB, se debe dejar en agitación a 37

grados por una hora.

➢ Procedemos a derretir en el microondas nuestro medio lb con agar, se destapa ( no

en su totalidad).

➢ Luego procedemos a colocar el medio Lb con algar en un Falcon estéril a 20 ml.

➢ Utilizaremos 20 microlitros de cloranfenicol por y ampicilina 5 microlitos por en

el experimento.

➢ Derramamos la muestra en la placa de petri para el plaqueo. Dejamos en la placa

por 5 minutos

➢ Rotulamos la placa con el nombre de la bacteria (Roceta) y la proteína

recombinante abreviada es gne, la fecha.

➢ Sacamos nuestras células competentes y las centrifugamos la muestra a 10,000

rpm por un minuto, obtenemos un pelé y se ha re suspendido un de medio lb,

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como sobrante re suspenderemos el pelé para luego sembrar, procederemos a

colocar lo en nuestra placa con algunas perlas en la placa y homogenizamos

➢ Colocamos la placa en la estufa de cultivos a 37 grados por 16 horas

H- RESULTADOS: Se resuelve en la guía 10 puntos

Vídeo 1

Pasos de la auto - fertilización

Forma Natural: Las plantas gracias en que sus raíces hay bacterias estas

absorben el nitrógeno que hay en el aire.

Forma manual: Se le incorpora en la tierra de la planta algún fertilizante o

compuesto que tenga nitrógeno para que pueda ocurrir el proceso de auto -

fertilización.

En el laboratorio: Introducir directamente a la planta a la semilla la

bacteria capaz de hacer la auto - fertilización

Vídeo 2

Características de las Colonias

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Las colonia crecieron y presentan resistencia a la ampicilina y

cloranfenicol.

Universidad Especializada de las Américas

INFORME DE LABORATORIO VIRTUAL 2

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PRÁCTICA UNIVERSITARIA I

GENETICA BACTERIANA IN VITRO

APLICACIÓN DE BACTERIAS EN LAS MEJORAS DE LOS ALIMENTOS

PRESENTADO POR: KEREN EVERSLEY

CÉDULA: 8-1045-2191

CODIGO DE GRUPO: 6137

PRESENTADO A:

MAGISTER

DAMARIS ALCEDO

LIC. Q.F.B-ALIMENTOS

FECHA DE ENVÍO: 14 de Abril del 2021

FECHA DE ENTREGA: Miércoles 21 de Abril del 2021

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INDICE

Introducción……………………………………………………………………………...……….12

Planteamiento del problema……………………………………………………………..……….13

Preguntas de investigación……………………………………………………..………………...13

Objetivos generales…………………………………………………………..…………………..13

Objetivos específicos…………………………………………………………..………………...13

Hipótesis………………………………………………………………………..………………..14

Resultados……………………………………………………………………..………………...14

Análisis de resultados…………………………………………………..……………………….14

Conclusión……………………………………………………………..………………………..17

Bibliografía……………………………………………………………...………………………18

Anexos………………………………………………………………...………………………...19
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INTRODUCCIÓN

Video 1.

Biotecnología es una ciencia interdisciplinada, ya que necesita el uso de otras ciencias para

logar las aplicaciones tecnológicas de las capacidades de los microorganismos. Ginko es una

empresa Biotecnológica que usa la ingeniería genética para producir bacterias con aplicaciones

industriales logrando avances impresionantes y amigables hacia el ambiente.

Video 2.

El ADN se puede transferir entre bacterias, en la naturaleza, el ADN utiliza dos métodos para

la transferencia entre bacterias: (1) transformación: Durante el proceso de transformación, las

bacterias obtienen ADN por medio de un exogenante. (2) Conjugación, la unión requiere un

contacto directo entre las dos bacterias y el fragmento de ADN. La tecnología del ADN

recombinante permite a los científicos colocar genes de diferentes orígenes en los plásmidos

bacterianos. Estos plásmidos especiales reciben el nombre de vectores. Las bacterias tienen

plásmidos que ayudan a codificar por medio del gen otras bacterias y poder otorgarles beneficios

de resistencias a ciertos antibióticos, este proceso se puede realizar gracias a las técnicas de

genética bacteriana in vitro.

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PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

Video 1.

¿Qué se puede realizar para la auto - fertilización en plantas a través de la biotecnología?

Video 2.

¿Cómo introducir un plásmido en una bacteria E. coli?

PREGUNTAS DE INVESTIGACIÓN

Video 1

¿Cuáles serían los pasos para la auto - fertilización en plantas?

Video 2.

¿Conocer las concentraciones de los antibióticos es importante?

¿La temperatura de las células competente es esencial para el éxito del experimento?

A-OBJETIVO GENERAL

➢ Conocer la importancia del estudio de las bacterias y su aplicación en cultivos de

alimentos

. B-OBJETIVOS ESPECÍFICOS

➢ Observar los cuidados que se deben tener en este tipo de cultivos

➢ Identificar los materiales y equipos

➢ Describir los pasos del proceso

➢ Describir los accesorios que se utilizan para la observación y preparación de las muestras
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HIPÓTESIS

Video 1.

Crear una bacteria que todas las plantas puedan adquirir el nitrógeno en el aire y así no

desperdiciar fertilizantes y ser amigable con el medio ambiente.

Video 2.

Las células del E coli serán transformada por una proteína recombinante este vector contiene

genes resistentes a la ampicilina y cloranfenicol. Usando los procesos de transformación

bacteriana y tecnología recombinante.

RESULTADOS

Video 1.

Se obtuvo una posible manera de realizar la auto - fertilización por medio de transferencia de

bacterias de la semilla de soja a la de maíz. Estudiando el código genético del maíz, haciendo

comparaciones y combinando las dos bacterias para ver su efectividad.

Video 2.

Las colonias de E coli crecieron en la placa de petri, teniendo como resultado la resistencia a

los antibióticos presentados que son cloranfenicol y ampicilina.

I- ANALISIS DE RESULTADOS (personal ) :

Una vez observado los videos correspondientes. A los títulos de los vídeos Biotecnología:

'hackear' bacterias para fabricar cualquier cosa y Transformación bacteriana: Introduciendo un

plásmido en E. coli. Los mismos fueron utilizados para visualizar el manejo de información para

hacer bacterias beneficiosas hacia cultivos, manejo de instrumentos de laboratorios con sus
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reactivos y como hacer transformaciones bacterianas. Los expositores presentaron las clases de

una manera clara y adecuada con respecto al tema. Por consiguiente, debemos responder a las

siguientes preguntas del cuestionario.

Vídeo 1

1. Cuál es la importancia de la utilización de las bacterias o fermentos para esta empresa

➢ Es intentar encontrar bacterias útiles para la innovación de las empresas de sus clientes

resolviendo sus problemas de alguna forma por medio de las bacterias o fermentos.

2. Cuál es la innovación de esta industria

➢ La creación de cuero o seda de araña sin necesidad de sacrificar animales.

3. Porque es importante estudiar el ADN para esta actividad

➢ El ADN al ser el código de las células, les dice a las células que hacer y así podemos diseñar

nuevos tipos de comportamientos en la célula tomando el ADN y los genes de otros organismos,

poniéndolos en la bacteria y en los fermentos que vamos a trabajar.

4. Porque utilizan bacterias que fijen nitrógeno

➢ La mitad del nitrógeno que se le echa a las plantas no llega a ellas, en realidad el agua lo arrastra

por lo que es muy perjudicial para el medio ambiente.

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5. Indique los alimentos que se mencionan en el video. Y cuál es su característica

➢ Las semillas de soja o los cacahuetes, tienen bacterias que viven en sus raíces y les permiten

adquirir el nitrógeno del aire así que no tienen por qué añadir fertilizantes químicos

➢ Maíz o Trigo, tiene bacterias que pueden trabajar con las bacterias de la semilla de soja.

Vídeo 2:

1. Como se llama el proceso en ejecución por este laboratorio

➢ Transformación bacteriana

2. Como se define un vector y cuál es la finalidad de utilizarlo

➢ Son plásmidos ,moléculas de ADN circular extra cromosómico y que se replican

independiente del DNA nuclear.

➢ Su función es llevar fragmentos de ADN, en este caso nuestro gen, que nosotros queremos

introducir.

3. Cuáles son las unidades que utiliza este experimento

➢ Microlitos, mililitros, microgramos

4. Cuál es la finalidad de utilizar células competentes

➢ Para que nuestro gen pueda ingresar a la bacteria y se lleve a cabo la transformación.

5. Cuáles son los antibióticos que se utilizaron y sus unidades

➢ Ampicilina y cloranfenicol.
 17

CONCLUSIÓN

Video 1.

Al reconocer que tipo de alimentos son los que tienen la bacteria comenzamos a realizar la

auto - fertilización en este caso la semilla de soja, realizamos un proceso de transferencia

bacteriana, y experimentando a través de ciertos pasos esenciales como el estudio del ADN de

cada bacteria de la semilla de soja y maíz comparando su genética, combinándolos y observando

su eficiencia a la hora de la aplicación en la semilla.

Video 2.

El proceso de transformación bacteriana requiere muchos equipos tecnológicos esenciales

como la thermoblock , estufa bacteriológica y centrifugadora. Al introducir nuestra proteína

recombinante a la bacteria a través de todo el proceso de transformación bacteriana y utilizando

los equipos adecuados, debimos tener cuidado con la temperatura de las células ya que estos son

parámetros que ayudan a las células competentes a realizar el proceso de recombinación genética,

teniendo en consideración las concentraciones de los antibióticos para que la equivalencias con

respecto a la bacteria sean las adecuadas y no pasarnos y arruinar las muestras , logramos que las

colonias crecieran mostrando la resistencia esperada a los antibióticos que tenía el plásmido

inducido.
 18

BIBLIOGRAFÍA

Biotecnología: “hackear” bacterias para fabricar cualquier cosa. (2018, abril 26).

Transformación bacteriana: Introduciendo un plásmido en E. coli. (2020, abril 29).

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ANEXOS

Video 1

Semilla de soja

Fertilizante de nitrógeno
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Video 2

Bacteria E coli
 21

ÍNDICE 2

INTRODUCCIÓN( 1 HOJA) 5

PLANTEAMIENTO DEL 5

PROBLEMA

PREGUNTAS DE 5

INVESTIGACIÓN(3)

OBJETIVOS GENERALES 1

OBJETIVOS ESPECÍFICOS 1

HIPÓTESIS 5

RESULTADOS 10

ANÁLISIS DE RESULTADOS 10

CONCLUSIÓN 10

Responder a las hipótesis, preguntas

de investigación, los objetivos

BIBLIOGRAFÍA 5

WEBGRAFÍA 5

ANEXO 4

Imagen con título y leyenda