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GUATEMALA
ESCUELA REGIONAL DE INGENIERIA SANITARIA
Y RECURSOS HIDRÁULICOS
QUIMICA Y MICROBIOLOGÍA DEL AGUA
INGENIERO ZENON MUCH
Reporte de Laboratorio
No. 7
Esporas en las bacterias
Elmer Thomas Yoc Juárez
Guatemala, 28 de abril de 2014
Las endosporas son células especializadas, que no son reproductivas, las cuales son
producidas por unas pocas bacterias de la división Firmicute. La función principal es
es asegurar la supervivencia en tiempos de tensión ambiental.
Contenido
Introducción...................................................................................................................... 4
Objetivo............................................................................................................................. 5
Objetivo general: ........................................................................................................... 5
Marco teórico .................................................................................................................... 6
Endospora ..................................................................................................................... 6
Características microscópicas ....................................................................................... 6
Propiedades ................................................................................................................... 8
Procedimiento del laboratorio y práctica ......................................................................... 9
Método de Hucker ......................................................................................................... 9
Método de Schaeffer y Fulton ....................................................................................... 9
Resultados ...................................................................................................................... 10
Método de Hucker: ...................................................................................................... 10
Método de Shaeffer y Fulton: ..................................................................................... 12
Conclusiones ................................................................................................................... 13
Fuentes de consultas ...................................................................................................... 14
Anexo .............................................................................................................................. 15
Anexo 1: Resumen capítulo 18 y preguntas ............................................................... 15
Respuestas a las preguntas del capítulo 18. .............................................................. 20
Anexo 2: Resumen y preguntas del capítulo 19 ......................................................... 23
Respuestas a las preguntas del capítulo 19 ............................................................... 26
Anexo 3: Resumen y preguntas capítulo 20 ............................................................... 31
Respuestas a las preguntas del capítulo 20 ............................................................... 32
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Introducción
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Objetivo
Objetivo general:
Objetivo específico:
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Marco teórico
Endospora
En contraste con las esporas que muchos eucariontes producen para propósitos
reproductivos, las bacterias solo producen endosporas en ambientes desfavorables. La
espora posee una cubierta fina conocida como exosporio, que cubre la capa de espora.
La capa de la espora es impermeable a muchas moléculas tóxicas y puede también
contener las enzimas implicadas en la germinación. La corteza se encuentra debajo de
la capa de la espora y consiste en peptidoglicano. La pared de la base se encuentra
debajo de la corteza y rodea al protoplasto o base de la endospora. La base tiene
estructuras normales de la célula como ADN y ribosomas, pero tiene un metabolismo
inactivo.
Características microscópicas
Observadas con microscopía óptica muestran una gran refringencia. Esto es debido al
elevado índice de refracción, resultante de las proteínas deshidratadas y concentradas
en el pequeño espacio de la espora. Prácticamente toda la materia seca de la bacteria
esta en la espora que posee un volumen igual a la décima parte de la bacteria que la
origino. Se colorean en caliente con carlbolfucsina y no se decoloran cuando el frotis es
lavado con etanol.
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E: endospora que da al conjunto aspecto de clava o masa
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Propiedades
• no presentan actividad metabólica
• gran resistencia al efecto del calor
• gran resistencia al efecto de las radiaciones
• gran resistencia al efecto de los productos químicos
La resistencia a los efectos del calor se atribuye al bajo contenido de agua (aprox. 15%)
y al contenido de ácido dipicolínico.
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Procedimiento del laboratorio y práctica
Método de Hucker
1. Prepare un frote de bacillus subtilis de 72 horas de incubación.
2. Seque el frote colocando la lámina a una distancia prudencial arriba de la llama
del mechero y fíjelo por el calor.
3. Cubra el frote con la solución de cristal de violeta y oxalato de amonio durante un
(1)minuto.
4. Lave la preparación con agua de grifo y séquela al aire.
5. Examine por medio del objetivo de inmersión.
6. Las células vegetativas aparecen púrpuras y las esporas no se colorean.
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Resultados
Método de Hucker:
Se observa las bacterias tipo Bacilo, por el tamaño del lente es un poco difícil
visualizar las esporas, sin embargo si se visualizaron en el laboratorio.
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Se visualiza la batería E. Coli en la cual se observan algunas esporas.
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Método de Shaeffer y Fulton:
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Conclusiones
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Fuentes de consultas
• Pelczar, Michael/ Reid Roger. Microbiología, McGraw Hill, 3ra. Edición 1980,
México.
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Anexo
Los protozoos son protistas eucarióticos que se presentan como células aisladas o en
colonias. Por su tamaño son predominantemente microscópicos. Su nombre deriva de
las palabras griegas protos y zoon, que significan “primero” y “animal”.
Los estadios vegetativos (tróficos) de estas especies de vida libre existen en cualquier
clase de aguas, y en la arena, tierra, o materia orgánica en descomposición. También
en las regiones polares y a grandes altitudes. Los factores que influyen en su
distribución geográfica y número en un hábitat determinado son la humedad,
temperatura, luz, alimentos disponibles y otras condiciones físicas y químicas.
Estructuras celulares
Citoplasma
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Contienen fibrillas proteínicas submicroscópicas que crean contracciones en los
protozoos. En varias formas de éstos los pigmentos están difundidos en el citoplasma y
tienen muchos matices de café, azul, morado o rosado.
Núcleo
En varias especies, cada individuo tiene dos núcleos similares. En los ciliados existen
dos núcleos; uno grande (macronúcleo), que controla las actividades metabólicas y otro
pequeño (micronúcleo), corresponde a la actividad reproductora.
Las estructuras esenciales elementales del núcleo son los cromosomas, la sustancia
nucleolar, la membrana nuclear y el carioplasma. Cubierta celular
El citoplasma con todas sus estructuras está separado del medio que lo rodea por una
cubierta celular.
Cubierta celular
El citoplasma con todas sus estructuras está separado del medio que lo rodea por una
cubierta celular.
Organelos de locomoción
Los protozoos se desplazan por tres tipos de organelos: seudópodos, flagelos y cilios.
Seudópodos
Son proyecciones temporales de una parte del citoplasma de los protozoos que no
poseen cutícula rígida. Los seudópodos son característicos de las amebas (Sarcodina).
Flagelos y cilios
El flagelo es una extensión del citoplasma muy fina. El flagelo se compone de dos
partes: un filamento elástico llamado axonema y la cubierta citoplásmica contráctil
que rodea a éste.
Reproducción asexual
La reproducción asexual se efectúa por división celular simple, que puede ser igual o
desigual, dando como resultado células hijas de igual o desigual tamaño. Si se
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reproducen dos células hijas, la fisión es binaria; si se forman muchas células hijas, la
fisión es múltiple. La gemación es una variante de división celular desigual.
Fisión binaria
En las amebas se presenta el tipo más elemental de fisión binaria. En los flagelados, la
división suele ser longitudinal. La fisión transversal es característica de la mayor
parte de los ciliados, aunque en algunas especies la división es longitudinal.
Fisión múltiple
En la fisión múltiple, una célula madre se divide y forma muchas células hijas. Este
tipo de división ocurre en unas cuantas especies de ciliados y flagelados. Este proceso
es frecuente en la mayor parte de los ciliados sésiles. La gemación es exógena o
endógena.
Cuando se parte un protozoo en dos, la porción que posee núcleo se regenera, pero la
que no lo tiene, degenera.
Las amebas
Las amebas reciben su nombre de la palabra griega amoibe, que significa “cambio”, ya
que su forma cambia constantemente.
Morfología
Las amebas están casi en constante movimiento. Una sola célula es capaz de emitir
varios seudópodos al mismo tiempo.
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Nutrición y excreción
Reproducción
Las amebas se reproducen por un proceso asexual simple llamado fisión binaria.
Los foraminiféridos son algunos de los protozoos ameboides de vida libre, que tienen
una concha calcárea con muchas cámaras. Estos organismos obtienen su alimento
emitiendo seudópodos a través de los poros que hay en su fina concha. Los radiolarios,
así como los foraminiféridos, son formas marinas; la mayor parte construye sus
conchas de sílice.
Su capa externa es menos flexible que la membrana externa de las amebas y interior
está compuesto por un protoplasma semilíquido que contiene el núcleo y vacuolas de
varios tipos. La parte anterior de la célula es redondeada y la posterior, ligeramente
afilada. Toda la célula está cubierta con cientos de proyecciones similares a cabellos
cortos llamados cilios, los cuales son órganos de locomoción les sirven para orientar el
alimento hacia el poro bucal.
Las partículas de alimento son orientada por los cilios hacia el poro bucal e
introducida al esófago para almacenarlas en vacuolas alimenticias dentro del
citoplasma de las células donde son digeridas por enzimas, igual que en las amebas.
Las partículas que no son digeridas, se eliminan por el poro anal.
En cada paramecio hay dos núcleos, el macronúcleo, que regula las actividades
ordinarias del metabolismo celular, y el micronúcleo, está relacionado con la
reproducción.
Los protozoos ciliados están representados por los paramecios y otras diferentes
formas. Colpoda es un género común de agua dulce. El género Didinium se alimenta
de paramecios, los cuales son atrapados por una estructura especial y tragados
enteros. El género Stentor se compone de protozoos grandes en forma de cono que se
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mueven libremente pero se fijan a algún objeto con su extremo posterior afiliado
mientras se alimentan. El cilio se enrolla en la parte externa del borde de la campana
y arrastra el alimento hacia su esófago, principalmente bacterias.
Morfología
Los esporozoos
Los Sporozoa más importantes son los agentes etiológicos del paludismo. La
enfermedad, en el hombre, está causada por cuatro especies de Plasmodium que son:
P. vivax agente etiológico del paludismo terciario benigno; P. malarie que produce el
paludismo cuartano y P. falciparum que causa el paludismo terciano maligno,
generalmente limitado a regiones tropicales.
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Respuestas a las preguntas del capítulo 18.
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En los flagelados la división suele ser longitudinal. Ya que los flagelos son
incapaces de dividirse por sí solos, se deben regenerar a partir de los cuerpos
basales. Que surge en la vecindad de los cuerpos basales viejos. La
multiplicación de los cuerpos basales generalmente precede a la división celular.
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contiene dióxido de carbono. El origen lo toman del medio a través de la
superficie de la célula.
• Los zooflagelados tienen una característica en común que son los flagelos
• Giardia lamblia que se aloja en el intestino delgado del nombre
• Trichocomas hominis agente patógeno
• Trypanosoma rhodesiense produce la enfermedad del sueño africana
• Tryoanosoma cruzi, causante de la enfermedad de Chagas
11. ¿de cuántas maneras los protozoos son o pueden ser importantes para
los hombres?
Son importantes porque todos producen enfermedades perjudiciales tanto para
el hombre como para los animales.
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Anexo 2: Resumen y preguntas del capítulo 19
CARACTERÍSTICAS
Antes de que fuera posible estudiar la morfología de los virus con las grandes
ampliaciones que da el microscopio electrónico, los investigadores ya habían observado
estructuras intracelulares relacionadas con enfermedades virales. En 1887, Buist vio
partículas pequeñas en el citoplasma de las células que rodean las lesiones producidas
por la viruela; son los llamados cuerpos elementales. Ahora se sabe que los cuerpos de
Paschen no son en realidad cuerpos de inclusión sino agregados o colonias de virus
(vibriones) que se desarrollan en el citoplasma de la célula huésped. En 1892,
Guarnieri publicó haber visto pequeñas partículas redondas en el citoplasma de
células similares. Estos cuerpos de Guarnieri son cuerpos de inclusión que se
pensó consistían en agregados de subunidades virales no ensambladas y viriones
intactos.
Se ha observado que los cuerpos de inclusión tienen relación con muchas otras
enfermedades virales. Los hay en el citoplasma en la mayor parte de los casos de
enfermedades pustulares (viruela, viruela ovina, de las gallinas), rabia, molusco
contagioso y otras. En la misma célula a veces hay inclusiones ontranucleares e
intracitoplásmicas en los casos de infección múltiple: algunas son útiles para
establecer el diagnóstico, como en el caso de la rabia.
Los cuerpos de inclusión son en el mayor parte de los casos, característicos del virus
que causan la infección y señalan alteraciones patológicas definidas en l célula. En
general, es cierto que los cuerpos de inclusión son agregados de subunidades
virales no ensambladas y de vibriones intactos en las células infectadas.
Experimentalmente es posible separarlos de las células y utilizarlos como inóculo para
infectar otras células.
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Virión (partícula viral) Estructura y composición
La cápside y la envoltura
Ácidos nucleicos
Además del ácido nucleico y la proteína, lo viriones más complejos contienen lípidos,
carbohidratos y huellas de metales; también algunos tienen sustancias vitaminoides.
Los virus contienen ADN o ARN, pero ambos no coexisten en el mismo virión, a
diferencia de las formas celulares de vida que, sin excepción, contienen ambos tipos de
ácido nucleico. Los virus se diferencian por si contenido de ADN o ARN. Un virión
contiene uno de cuatro posibles tipos de ácidos nucleicos. Se ha visto que los virus de
las plantas contienen sólo ARN de una o doble cadena; los virus bacterianos contienen
ADN de una o doble cadena o ARN de una sola cadena. Los virus de animales
contienen todos os tipos de ácidos nucleicos, excepto ADN de doble cadena. Además la
estructura del ácido nucleico en la partícula viral es lineal o circular.
Helicoidal:
Estos viriones semejan bastones largos. Su cápside es un cilindro hueco con una
estructura helicoidal.
Envueltos:
REPLICACIÓN
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Las partículas extracelulares no tienen actividad metabólica independiente y son
incapaces de reproducirse por fisión, gemación u otros procesos similares observados
en las bacterias y otros microorganismos. La multiplicación tiene lugar por replicación
en la cual sus dos partes, proteína y ácido nucleico virales, se incrementan dentro de
las células huéspedes susceptibles. Cuando las células se infectan con el ácido nucleico
viral, se sintetizan partículas virales completas.
Son varios los pasos de la infección viral al nivel celular comunes a todos los virus
animales.
Penetración y desnudamiento: Se pensaba que la penetración de los virus era sólo por
fagocitosis, recientemente se ha visto que los virus envueltos atacan la célula huésped
llevando a una fusión de la envoltura de lopopropteína viral y la membrana superficial
de la célula huésped, que resulta en el desprendimiento del material de la
nucleocápside viral y si entrada en el citoplasma de la célula huésped.
Además de la ATP celular, los virus necesitan utilizar los ribosomas celulares, el
ARN de transferencia, enzimas y algunos procesos biosintéticos para su
replicación.
Salida o liberación: El mecanismo por el cual los virus salen de la célula varían
también en el agente viral. En otros, la maduración y el proceso de liberación es
relativamente lento y los viriones salen sin la destrucción de la célula huésped.
Embriones de pollo
El primer método y uno de los más útiles para cultivos en el laboratorio y obtenerlos
en cultivo puro, fue la técnica del embrión de pollo.
Coágulos de plasma
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el virus se obtiene apartando de las células huéspedes que son demasiado grandes
para pasar por las perforaciones en colodión.
Cultivos de tejido
Las técnicas de cultivo de tejido son ahora los métodos de más amplio uso para el
aislamiento y propagación de los virus del material clínico. La difusión de esta técnica
hizo posible cultivar muchos virus en grandes cantidades para su estudio y para la
producción comercial de las vacunas.
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• JENNER: porque vacunó a un niño protegiéndolo contra la viruela. Debido a
que el virus provenía de la vaca, al proceso se le llamo vacunación.
• WATERHOUSE: fue vacunado con el virus de la viruela
• PASTEUR: se interesó por enfermedades infecciosas y los microorganismos que
las causaban. Sin embargo por accidente logro atenuar virus de rabia, que no se
supo que era virus hasta muchos años después.
• CHAMBERLAND: descubrió los virus filtrables.
• IVANOWSKI: descubrió que el agente causal de la enfermedad mosaico del
tabaco era filtrable.
• BEINJERICK: confirmo el trabajo de Ivanowski.
• LÖEFFLER Y FROSCH: filtraron el líquido de las vesículas de la boca de
bovinos enfermos de glosopeda y transmitieron el virus s animales sanos. Todos
los experimentos anteriores marcaron el principio de una nueva fase de la
microbiología de agentes infecciosos invisibles aun con los microscopios más
poderosos de ese tiempo.
• STANLEY: descubrió que el virus del mosaico del tabaco se cristalizaba.
• THEILER: encontró que el virus de la fiebre amarilla se atenúa al pasar de
manera seriada en el cultivo de tejidos de embrión de pollo.
• ENDERS, ROBBINS Y WELLER: dieron el fundamento para obtener vacunas
eficaces contra la poliomielitis al cultivar el virus en el riñón de mono.
4. Cite tres modos por los cuales se clasifican los virus ¿Cuál es el más
científico? ¿los otros tiene deficiencias? Cítelas
• Según la afinidad por los tejidos, este método es útil para médicos clínicos y
epidemiólogos.
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6. ¿Qué es un virion? Dibuje un virio y rotule sus partes.
El virión es una partícula viral completa, con todas sus partes como muestra la
siguiente imagen.
28 | P á g i n a
Estas técnicas difieren en los nutrientes necesarios para la proliferación, debido
a que son distintos nutrientes necesarios para la síntesis y replicación, en el caso de los
virus.
Descubrió que los virus del mosaico del tabaco puede ser cristalizado, y ataca de
manera exclusiva a vegetales; es utilizado como punto inicial para el estudio de virus
que afectan animales.
9. ¿Cómo se atenúan los virus? ¿Cómo son utilizados los virus atenuados
en la prevención de enfermedades?
Los virus contienen DNA o RNA, uno u otro, pero ambos no coexisten en el
mismo virión, a diferencia de las formas celulares de vida que, sin excepción, contienen
ambos tipos de ácido nucleico.
13. Describa en el orden correcto los pasos del ciclo de replicación viral
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1. Adsorción: intervienen receptores específicos en la superficie de la célula
huésped y macromoléculas del virión mismo.
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Anexo 3: Resumen y preguntas capítulo 20
CARACTERÍSTICAS GENERALES
Cuando los fagos líticos infectan las células, el huésped responde produciendo nuevos
viriones. Al final del período de incubación, la célula huésped estalla y libera los
nuevos fagos que van a infectar otros huéspedes. Esto se llama ciclo lítico. Con el tipo
temperado hay un estado de lisogenia y la infección no suele hacerse aparente.
El ADN viral no lo reproduce el huésped pero sí se transmite genéticamente de un
huésped a otros.
Los virus bacterianos se cultivan y aíslan con facilidad en cultivos jóvenes de bacterias
en desarrollo activo, en caldo o en placas de agar. En los cultivos líquidos, la lisis de
las bacterias causa desde enturbiamiento hasta aclaramiento del cultivo, mientras que
en las placas de agar, las zonas claras o placas son visibles a simple vista.
31 | P á g i n a
LISOGENIA
LAS BACTERIOCINAS
Son un grupo fisiológico de sustancias bactericidas, del tipo de los antibióticos, de gran
especificidad tanto para los organismos que las producen como para aquellos que
matan. Son producidas por determinadas cepas de bacterias y actúan solamente
contra organismos muy relacionados. La acción de las bacteriocinas sobre las bacterias
huéspedes causa la muerte por degradación del ADN celular, por inhibición del ADN o
de la síntesis del ARN o por interferir con la síntesis de proteínas.
CIANÓFAGOS
Son agentes virales que atacan a una amplia variedad de algas verdi-azuladas. Son
muy parecidos a los bacteriófagos tanto por su estructura como por su ciclo infeccioso,
lo cual no es de sorprender ya que las algas verdi-azuladas son consideradas bacterias
por la mayoría de los microbiólogos en virtud la gran afinidad de las cianoficofitas con
las bacterias.
MICÓFAGOS (MICOVIRUS)
Se reconocen como los virus que atacan a los hongos. Más concretamente se han
referido virus en más de 60 especies de unos 50 géneros de hongos.
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Es un virus bacteriano, no se diferencia mucho de los otros virus, su
principal diferencia es la elección de sus células huéspedes. Fue d’Herelle
quien denominó bacteriófago, en el Instituto Pasteur de París en 1917.
El ciclo lítico ocurre cuando el material genético del virus (virus virulento)
penetra en la célula huésped y comienza a fabricar nuevos virus. Para ello,
primero transcribe genes tempranos que estimulan la replicación del genoma
viral. Luego, genes tardíos codifican la síntesis de proteínas para empaquetar
la cápside y lisar la célula huésped. Eventualmente los nuevos virus causan
la ruptura o lisis de la célula y continúan el ciclo infeccioso y el ciclo lisogénico es
cuando el ADN del virus se integra a la célula huésped y esta lo reconoce como
parte de su información y al replicarse la célula, las células hijas también
tendrán la información del virus
• Virus lítico: también llamado virulento. Cuando los fago líticos infectan
las células, el huésped responde produciendo viriones, al final del
periodo de incubación, la célula huésped estalla y libera los nuevos fagos
que van a infectar otras huéspedes.
A: Los más complejos tienen una cabeza hexagonal, cola rígida con vaina
contráctil y fibras caudales.
B: Similares a los primeros, excepto que carecen de vaina contráctil; su
cola es flexible y tienen o no apéndices terminales.
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C: Se caracterizan por tener cabeza hexagonal y cola más corta que la cabeza; la
cola no es contráctil y pueden o no tener apéndices.
D: Hexagonales, con un capsómero grande en cada vértice del hexágono; no
tienen cola.
E: Un hexágono simple sin los grandes capsómeros que poseen los cuatro grupos
anteriores.
F: Un filamento sencillo y largo sin cabeza u otra estructura característica de la
mayor parte de los bacteriófagos.
34 | P á g i n a
Esta técnica consiste en hacer placas de agar simple que tengan una
concentración de 1.5 a 2.0 % de agar, y las sustancias nutritivas necesarias para
el desarrollo del organismos huésped. Después de solidificadas, se vierte 1 o 2
ml de agar blando (0.7 a 1.0% de agar) e igual cantidad de caldo que lleve en
suspensión los organismos huéspedes y el material de origen del fago o
suspensión de particulas fágicas, y se extiende por la superfici del agar duro.
Los cianófagos son agentes virales que atacan a una amplia variedad de algas
verdeazuladas. Son muy parecidos a los bacteriófagos tanto por su estructura
como por su ciclo infeccioso. Las algas verdeazuladas son procarióticas por su
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estructura celular, aunque su metabolismo fotoautotrófico las asemeja a las
plantas verdes eucarióticas. Así, el sistema cianófago-alga puede tomarse como
modelo para el estudio de la fotosíntesis de las plantas bajo una infección viral.
Los cianófagos se denominan según sus huéspedes conocidos; los grupos por las
iniciales del nombre genérico de los huéspedes a los que se añaden
números arábigos para señalar los subgrupos serológicos. Los asilados de tipos
similares se marcan con un subfijo que es la inicial del lugar donde se originó
el aislado. Además de la especificidad del huésped, las propiedades serológicas y
morfológicas son criterios importantes para el agrupamiento de los cianófagos.
12. ¿Cuáles pruebas hay que demuestren que los virus que atacan a los
hongos son comunes?
13. ¿Por qué se piensa que los micovirus fueron descubiertos mucho
después que los virus bacterianos?
Todos los ácidos nucleicos de los cianófagos examinados son DNA lineal de
doble cadena. Las cabezas y las colas de las partículas están hechas de
proteínas. Las proteínas principales de la cabeza de LPP-1 tiene un peso
molecular de 39,000 y de 13,000; en cambio la principal de la cola tiene un peso
molecular de 80,000. Los viriones maduros SM-1 contienen una docena de
proteínas, de las cuales dos, de 40,000 y 25,000 de peso molecular, parecen
ser los componentes principales de la envoltura de la cápside.
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