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Escuela de Nutrición y Dietética

Curso: Microbiología y Parasitología


Profesora: Ruth Zelada

P2: Preparación de medios de Cultivos y esterilización.

Objetivos

 Identificar materiales e instrumentos de laboratorios de microbiología y su


forma de esterilización.
 Preparar medios de cultivos.

I. Introducción

Un laboratorio de Microbiología debe cumplir con las normas básicas de bioseguridad


en relación a su infraestructura, equipamiento para el personal, vías de acceso y
señalética que guíen al personal en su conducción por el área de investigación. Así
como de materiales empleados en las actividades llevadas a cabo para ese fin. Como,
por ejemplo, la esterilización de materiales de laboratorios es de suma importancia para
eliminación de cualquier forma microscópica. Esta puede ser llevada a cabo mediante
autoclave (vapor saturado) o por calor seco (horno).
Por otro lado, el empleo de microorganismos, en muchos casos patógenos, se
requiere trabajar con seguridad, limpieza y siguiendo las pautas del protocolo del
laboratorio. Además del empleo de las técnicas asépticas que contribuyen a una
correcta manipulación de los medios de cultivos estériles y los cultivos axénicos.
Finalmente, el aislamiento y observación de microorganismos para su
identificación es de importancia para estudios posteriores. Esta actividad es apoyada
con el uso de los microscopía óptica.

II. Materiales

Agar casero
Gelatina casera
Agua destilada (agua hervida)
Placas Petri
Guantes,
Mascarilla
Vasos o frascos
Mechero
Probeta o recipiente que mida volumen.

III. Procedimiento

De manera individual seguir los procedimientos indicados líneas debajo. Tome nota de
las preguntas y responda según lo indicado.
Escuela de Nutrición y Dietética
Curso: Microbiología y Parasitología
Profesora: Ruth Zelada

1. Reconocimiento de materiales de laboratorio


- Visualizar el vídeo (enlace debajo indicado), le recomendamos leer, previamente,
las preguntas siguientes:
- Identifique los materiales de laboratorio. Detalle el uso en el laboratorio de
microbiología.

https://www.youtube.com/watch?v=yGdgDBcKx84

2. Preparación de material para su esterilización


- Visualizar el vídeo (enlace debajo indicado), le recomendamos leer,
previamente, las preguntas siguientes:
- ¿Cómo se prepara el material de vidrio para su esterilización?
- Detalle los pasos necesario de esterilización para cada tipo de material
empleado en un laboratorio de microbiología.
- ¿Por qué se emplean algodón y papel kraft en la esterilización?

https://www.youtube.com/watch?v=Nw5DkCnVEWw

3. Medio de cultivo
- Visualizar el vídeo (enlace debajo indicado), le recomendamos leer,
previamente, las preguntas siguientes:
- Comente sobre los tipos de medios de cultivos. En que se basan para la
clasificación de los medios de cultivos.

https://www.youtube.com/watch?v=TN7x5rjDhS0

4. Preparación de medio de cultivo


- Visualizar el vídeo (enlace debajo indicado), le recomendamos leer,
previamente, las preguntas siguientes:
- Vea un resumen de lo pasos que se da antes, durante y después para un
manejo adecuado de los medios de cultivos.

https://www.youtube.com/watch?v=Tfbz_nl1kdI

- Visualizar el vídeo (enlace debajo indicado) vea la preparación de medios:

https://youtu.be/9atNZSQGv1M
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Curso: Microbiología y Parasitología
Profesora: Ruth Zelada

Pasos empleados para la preparación del medio de cultivo:

- Disuelve en agua destilada los medios comerciales proporcionados, según la


indicación del envase, a los que contengan agar será necesario someterlos a la
acción del calor hasta su completa disolución.
- Enfría esté preparado hasta aproximadamente 50ºC.
- Mide el pH del medio, con la cinta indicadora.
- Si es necesario, ajusta el pH empleando NaOH 1N o HCL 1N.
- Envasa, rotula, señalando el tipo de medio y la fecha de preparación.
-Esteriliza por autoclave a 15 lb de presión por 15 a 20 minutos.
-Controla la esterilidad del medio, por incubación del mismo a 37ºC por 24 horas.

IV. Resultados

Todas las observaciones realizadas durante el procedimiento de la práctica deben ser


desarrolladas en esta sección además de las tablas generadas, dibujos y esquemas de
sus observaciones. En esta sección está prohibido colocar figuras o imágenes de la cual
no son de su autoría (internet, fotos, artículos).

V. Discusión

1. ¿Cuál es el propósito de envolver los materiales esterilizados?


2. En un cuadro comparativo explicar las diferentes formas y condiciones del
proceso de esterilización que se emplea según el material esterilizado.
3. Detalle los pasos adecuados para la preparación de un medio de cultivo sólido
(Ayúdese con fotografías o dibujos).

Elaboración de informe final


Esta experiencia será entregada a modo de un informe en la próxima semana de
laboratorio. Este debe constar las mismas secciones contenidas en la práctica de
laboratorio (Objetivos, material y metodología, resultados y discusión, conclusión y
bibliografía empleada).

Fuentes de información
Madigan M, Bencer K, Buckley D, Sattley W.M., Stahl D. (2018). Brock. Biology of
Microorganisms. 15a ed. The United States: Pearson Educación, S.A.
Madigan M, Martinko J, Parker J. (2004). Brock. Biología de los microorganismos. 10a ed.
España: Pearson Educación, S.A.
Tortora G.J, Funke B., Case C.L. (2007). Introducción a la microbiología. 9na ed. Buenos Aires:
Médica Panamericana.