UNIVERSIDAD DE LAS FUERZAS ARMADAS “ESPE”

Asignatura: Enzimología Docente: Dra. Anabell Urbina

Nombre: Nathaly Mora Fecha: 23/02/2020
Tema: Método de King y Altman

King y Altman han hecho una contribución importante a la simplificación de la derivación

de ecuaciones de tasas. Su método esquemático ha simplificado enormemente la solución
del conjunto de ecuaciones simultáneas que describen las concentraciones en estado
estacionario de intermedios enzimáticos (Engel, 1981). Para aplicar su método es necesario
dibujar una serie de patrones, cada uno de los cuales contiene uno menos intermedio que el
presente para todo el mecanismo, es decir, cada patrón: consiste solo en líneas del Patrón
Maestro, conecta cada especie de enzima y no contiene ciclos cerrados y por tanto, cada
patrón contendrá una línea menos que el número de especies enzimáticas (Wolfinbarger,
2017). En definitiva, el método de King-Altman (KA) es un método gráfico/esquemático
para facilitar la derivación de ecuaciones de tasa de estado estacionario en sistemas
enzimáticos (Engel, 1981).
El método KA se puede comprender fácilmente en base a un ejemplo ilustrativo, como se
describe a continuación para el mecanismo enzimático ilustrado en la Figura 1. Este
mecanismo es el esquema catalítico de cinco estados propuesto para la fumarasa (o
fumarato hidratasa), que cataliza la hidratación del fumarato a malato. Este mecanismo
involucra 5 estados enzimáticos (n=5) y 6 enlaces entre esos estados, caracterizados por 12
constantes de velocidad (Qi et al., 2009).

Figura 1. Ilustración de un mecanismo de reacción catalizado por enzimas fumarasa, donde

Ei es la i ésima forma de enzima, A es fumarato (sustrato), B es protón, C es hidroxilo y P
es malato (producto). Extraído de (Qi et al., 2009).
El primer paso para aplicar el procedimiento KA es enumerar todos los patrones KA
válidos para el mecanismo enzimático. Estos patrones, ilustrados en la Figura 2A, son el
conjunto de todos los subconjuntos del gráfico en la Figura 1, con el número máximo de
bordes excluyendo los bucles cerrados. Hay 12 posibles patrones KA asociados con el
mecanismo de la Figura 1 (Qi et al., 2009).

Figura 2. Representación gráfica de los patrones de reacción válidos generados por el

método King-Antman (KA). Extraído de (Qi et al., 2009).
El siguiente paso es determinar todos los diagramas direccionales asociados con cada
estado en el mecanismo enzimático. Los diagramas direccionales asociados con un estado
dado se construyen a partir del conjunto de patrones KA, con direcciones indicadas en cada
borde de cada patrón KA. Las direcciones se eligen de modo que, para el estado i , las
flechas se dirijan hacia el estado i sin bordes divergentes. El conjunto de todos los
diagramas direccionales asociados con el estado 1 para el mecanismo de la Figura 1 se
ilustra en la Figura 2B. Dado que hay 5 estados y 12 patrones KA, hay 5 × 12 = 60
diagramas direccionales asociados con el mecanismo de la Figura 1. Cada diagrama
direccional está asociado con un producto de constantes de velocidad de pseudoprimer
orden para las flechas en el diagrama direccional. Por ejemplo, el término para el diagrama
direccional superior izquierdo en la Figura 2B es k-1k-3k6k5(C). La concentración relativa en
estado estable de cada estado es proporcional a la suma de 12 términos asociados con los 12
diagramas direccionales para cada estado. Específicamente, la concentración relativa del i-
ésimo estado de la enzima se puede calcular como una fracción de la concentración total de
la enzima cuyo numerador es la suma de los 12 términos asociados con los 12 diagramas
direccionales que apuntan o terminan en el i- ésimo estado (por ejemplo, como se muestra
en la Figura 2B, 12 diagramas direccionales apuntan o terminan en el estado 1), y el
denominador es la suma de los 60 términos asociados con los diagramas direccionales para
los 5 estados del sistema (5 × 12) (Qi et al., 2009). Eso se puede escribir como:

Ecuación 1.
Aquí Σ i representa la suma de los 12 términos asociados con el estado i y Σ es la suma de
los 5 conjuntos de 12 términos para todos los estados, y E o es la concentración total de
enzima.

Bibliografía
Engel, P. C. (1981). The King and Altman procedure. In Enzyme Kinetics (pp. 74–77).
Springer US. https://doi.org/10.1007/978-1-4899-3278-5_6
Qi, F., Dash, R. K., Han, Y., & Beard, D. A. (2009). Generating rate equations for complex
enzyme systems by a computer-assisted systematic method. BMC Bioinformatics, 10,
238. https://doi.org/10.1186/1471-2105-10-238
Wolfinbarger, L. (2017). Rate Equation Derivation by the King-Altman Method. In
Enzyme Regulation in Metabolic Pathways (pp. 117–139). John Wiley & Sons, Inc.
https://doi.org/10.1002/9781119155423.ch11