UNIVERSIDAD NACIONAL MAYOR DE SAN

MARCOS

FACULTAD DE QUIMICA E INGENIERÍA QUÍMICA

DEPARTAMENTO ACADÉMICO DE QUÍMICA ORGÁNICA

CURSO: PRODUCTOS NATURALES

TRABAJO FINAL DE TEORÍA

XANTONAS

PROFESOR: Nino Castro, Mandujano

ALUMNO: Jimenez Zarate, Angelica Jasmin 16070084

2021-0
Tabla de contenido
INTRODUCCIÓN ............................................................................................................ 3
Clasificación ................................................................................................................. 4
Xantonas simples no oxigenadas .............................................................................. 4
Xantonas oxigenadas simples ................................................................................... 4
Glucósidos de xantona .............................................................................................. 5
Xantonas preniladas y relacionadas .......................................................................... 6
Xanthonolignoides .................................................................................................... 6
Bisxantonas............................................................................................................... 6
Diverso ..................................................................................................................... 6
Métodos de aislamiento y caracterización de xantonas ................................................ 7
Espectroscopía ultravioleta visible (UV) .................................................................. 7
Espectroscopía infrarroja (IR) .................................................................................. 7
Espectroscopia de resonancia magnética nuclear de protones ( 1H NMR) .............. 8
Carbon Nuclear Espectroscopía de Resonancia Magnética ( 13C RMN) ................. 8
Espectrometría de masas (MS) ................................................................................. 8
Biosíntesis de xantonas................................................................................................. 9
Actividades biológicas de las xantonas ...................................................................... 10
PARTE EXPERIMENTAL ............................................................................................ 11
Taxonomía .................................................................................................................. 11
Procedimiento experimental ....................................................................................... 11
Medida de la actividad antiproliferativa en células Hep3B. ....................................... 13
RESULTADOS Y DISCUSIÓN .................................................................................... 13
Análisis RMN 1H ........................................................................................................ 13
CONCLUSIÓN .............................................................................................................. 15
BIBLIOGRAFÍA ............................................................................................................ 15
INTRODUCCIÓN
Las xantonas son metabolitos secundarios que se encuentran comúnmente en familias de
plantas superiores, hongos y líquenes. Sus propiedades farmacológicas han despertado un
gran interés. Las estructuras de las xantonas están relacionadas con las de los flavonoides
y sus comportamientos cromatográficos también son similares. Los flavonoides se
encuentran con frecuencia en la naturaleza, mientras que las xantonas se encuentran en
un número limitado de familias. Las xantonas siempre se encuentran en las familias
Gentianaceae, Guttiferae, Moraceae, Clusiaceae y Polygalaceae. Las xantonas a veces se
encuentran como compuestos polihidroxilados originales, pero la mayoría son mono o
polimetil éteres o se encuentran como glucósidos. A diferencia de los iridoides, las
xantonas aparentemente no están presentes en todas las especies de plantas investigadas
en la familia Gentianaceae. Esto está documentado por el trabajo sistemático de
Hostettmann et al. Roberts en 1961 y Dean en 1963 revisaron la presencia natural de 12
xantonas en plantas superiores y 4 en hongos. Gottlieb mencionó el aislamiento de 60
xantonas de plantas superiores y 7 de hongos, mientras que Carpenter et al. enumeró 82
xantonas de plantas superiores. Gunasekera [8] registró 183 xantonas de 5 familias de
traqueofitas. Según Vieira y Kijjoa [ 9], de un total de 515 xantonas, 278 proceden de
fuentes naturales. Estas xantonas se han aislado de 20 familias de plantas superiores (122
especies en 44 géneros), hongos (19 especies) y líquenes (3 especies). En este período,
las xantonas de plantas superiores parecen estar asociadas principalmente con las familias
Clusiaceae (55 especies en 12 géneros) y Gentianaceae (28 especies en 8 géneros). Bo y
Liu han revisado los métodos de separación utilizados para las xantonas
farmacológicamente activas. Jose Pedraza-Chaverri et al. revisó los componentes
químicos aislados y las propiedades medicinales de C. Garcinia (mangostana). Algunas
de las especies de plantas, helechos y hongos que contienen xantonas son Artocarpus,
Anthocleista, Allanblackia, Andrographis, Aspergillus, Bersama, Blackstonia,
Calophyllum, Canscora, Centaurium, Chironia, Cratoxylum, Comastoma, Garcinia,
Cudrania, Eustoma, Emericella, Frasera, Garcinia, Gentlaiana, Gentiapsis, Gentiapsis
Ixanthus Viscosus, lomatogonium, Mesua, Morinda, Macrocarpaea, hongos mangle ,
Orphium, Peperomia, pentadesma, Polygala, Penicillium, Phoma , Phomopsis, Rheedia,
Rhus, securidaca, Symphonia, Schultesia, Swertia, Tripterospermum, Vismia, Veratrilla,
y Xylaria .
Clasificación

Las xantonas aisladas de fuentes naturales se clasifican en seis grupos principales, las
cualaes son: xantonas simples, glucósidos de xantona, xantonas preniladas,
xantonolignoides, bisxantonas y xantonas diversas.
Xantonas simples no oxigenadas
Las xantonas no oxigenadas, a saber, metilxantonas (1-, 2-, 3-, 4-metilxantona), se
encontraron en los petróleos crudos de la costa de Noruega. Esta fue la primera
descripción de xantonas en materia orgánica fósil. Estas xantonas podrían haberse
generado como productos diagenéticos, formados por oxidación de xantenos en el
depósito, o podrían haberse originado por biosíntesis a partir de precursores aromáticos.
Xantonas oxigenadas simples
Las xantonas oxigenadas simples se subdividen de acuerdo con el grado de oxigenación
en sustancias no, mono, di, tri, tetra, penta y hexaoxigenadas. En estas xantonas, los
sustituyentes son grupos hidroxi, metoxi o metilo simples. Se han informado alrededor
de 150 xantonas oxigenadas simples

Xantonas monooxigenadas
Además, se han aislado seis xantonas monooxigenadas de Swertia , 2-hidroxixantona, 4-
hidroxixantona y 2-metoxixantona de cuatro géneros, los cuales son: Calophyllum ,
Kielmeyera , Mesua y Ochrocarpus .
Xantonas dioxigenadas
Se reportaron más de quince xantonas dioxigenadas de plantas de las familias Clusiaceae
y Euphorbiaceae. La 1,5-dihidroxixantona, la 1,7-dihidroxixantona y la 2,6-
dihidroxixantona se encuentran de manera bastante extensa. Otras xantonas
desoxigenadas tales como 1-hidroxi-5-metoxixantona, 1-hidroxi-7-metoxixantona, 2-
hidroxi-1-metoxi-xantona, 3-hidroxi-2-metoxixantona, 3-hidroxi-4-metoxixantona, 5-
hidroxi Se ha informado de -1-metoxixantona y 1,2-metilendioxixantona de once géneros
de plantas.
Xantonas trioxigenadas
Se han informado cuarenta y cinco xantonas trioxigenadas; de estos quince se
describieron como nuevos. Entre estos, solo dos xantonas sulfonadas naturales, a saber,
1,3-dihidroxi-5-metoxixantona-4-sulfonato y 5-O- β -D-glucopiranosil-1,3-dihidroxi-
xantona-4-sulfonato, se informan en Hypericum sampsonii . Se encontró que estas
xantonas sulfonadas exhiben una citotoxicidad significativa contra la línea celular
cancerosa. Se han informado 1,3,5-, 1,5,6-, 1,6,7- y 2,3,4-trihidroxixantona, diecisiete
éteres metílicos y dos derivados metilendioxi de nueve géneros.
Xantonas tetraoxigenadas
Entre las 53 xantonas tetraoxigenadas identificadas hasta ahora, se encontró que 21 eran
nuevos productos naturales. Estas xantonas se encontraron principalmente en plantas de
las familias Gentianaceae, Clusiaceae y Polygalaceae. Curiosamente, la 7-cloro-1,2,3-
trihidroxi-6-metoxixantona aislada de Polygala vulgaris pareció ser la primera
cloroxantona de la familia Polygalaceae. Este compuesto exhibió actividad
antiproliferativa contra la línea celular de adenocarcinoma intestinal humano. Las
hidroxixantonas libres son 1,3,5,6-, 1,3,5,7- y 1,3,6,7-tetrahidroxixantona.
Xantonas pentaoxigenadas
Se han identificado veintisiete xantonas pentaoxigenadas. Cuatro xantonas
pentaoxigenadas parcialmente metiladas, a saber, 1,8-dihidroxi-2,3,7-trimetoxixantona,
5,6-dihidroxi-1,3,7-trimetoxixantona, 1,7-dihidroxi-2,3,8-trimetoxantona, Se han aislado
3,8-dihidroxi-1,2,6-trimetoxixantona y 3,7-dihidroxi-1,5,6-trimetoxixantona de tres
géneros de plantas.
Xantonas hexaoxigenadas
Dos xantonas hexaoxigenadas, la 8-hidroxi-1,2,3,4,6-pentametoxantona y la 1,8-
dihidroxi-2,3,4,6-tetrametoxixantona, se aíslan de dos especies de Centaurium y se aisló
3-hidroxi-1,2,5,6,7-pentametoxixantona de las raíces de Polygala japonica . Peres y
Nagem han revisado la aparición natural de xantonas pentaoxigenadas, hexaoxigenadas
y diméricas .
Glucósidos de xantona
Se ha informado de sesenta y una xantonas glicosiladas de origen natural, treinta y nueve
de las cuales son compuestos nuevos, predominantemente en las familias Gentianaceae y
Polygalaceae como C- u O-glicósidos. Se han revisado los detalles de los glucósidos de
xantona de origen natural y también se ha hecho una distinción entre los glucósidos C y
los glucósidos O. En los C-glucósidos, el enlace C-C une el resto del azúcar al núcleo de
la xantona y son resistentes a la hidrólisis ácida y enzimática, mientras que los O-
glucósidos tienen un enlace glucosídico típico.
C-glucósidos
Los glucósidos C son raros; por tanto, en la revisión de Sultanbawa sólo se mencionaron
siete glucósidos C y en la revisión de Al-Hazimi, 17 . La mangiferina y la isomangiferina
son los glucósidos C más comunes. La mangiferina (2, -C-β-D-glucopiranosil-1,3,6,7-
tetrahidroxixantona) es de aparición generalizada en angiospermas y helechos y se aisló
por primera vez de Mangifera indica. Un isómero, isomangiferina (4-C-β-D-
glucopiranosil-1,3,6,7-tetrahidroxixantona), se ha aislado de las partes aéreas de
Anemarrhena asphodeloides. Homomangiferina (2-C-β-D-glucopiranosil-3-metoxi-
1,6,7-trihidroxixantona) también se ha aislado de la corteza de Mangifera indica. En 1973,
se encontró en Canscora decussate otra glicoxantona (2-C-β-D-glucopiranosil-1,3,5,6-
tetrahidroxixantona) con un patrón de oxidación diferente al de la mangiferina. Arisawa
y Morita han aislado el glucósido de xantona tetraoxigenado 2-C- β -D-glucopiranosil-5-
metoxi-1,3,6-trihidroxixantona de Iris florentina .
O-glucósidos
Se conocen más de 20 xantona O-glucósidos. Algunos son de fuentes naturales, a saber,
gentiacauloside de Gentiana acaulis , gentioside de G. lutea y swertianolin de Swertia
japonica. Su ocurrencia natural está restringida a la familia Gentianaceae. El primer O-
glucósido de xantona, norswertianin-1-O-glucosil-3-O-glucósido, se aisló de S. perennis.
Se aisló un O-glucósido de xantona tetraoxigenado (3,7,8-trihidroxixantona-1-O-β-
laminaribiósido) de la especie de helecho. 1-hidroxi-7-metoxi-3-O-primeverosilxantona
y 1-metoxi-5-hidroxixantona-3-O-rutinósido se han aislado de especies de Gentiana y
Canscora decussata .
Xantonas preniladas y relacionadas
Entre 285 xantonas preniladas, 173 se describieron como nuevos compuestos. La
aparición de xantonas preniladas se limita a las especies vegetales de la familia Guttiferae.
La principal C 5 unidad de los sustituyentes incluido el que se encuentran comúnmente
3-metilbut-2-enilo o isoprenilo grupo como en isoemericellin y la menos frecuente 3-
hidroxi-3-metilbutil como en nigrolineaxanthone P y 1,1-dimetilprop-2-enil como en la
globuxantona, respectivamente. Se aislaron xantonas preniladas, caloxantona O y
caloxantona P de Calophyllum inophyllum y xantonas y benzofenonas polipreniladas de
Garcinia oblongifolia.
Xanthonolignoides
Los xantogonolignoides de origen natural son raros, por lo que solo se conocen cinco
compuestos. El primer xanthonolignoide fue aislado de la especie Kielmeyera por
Castelão Jr. et al. También aislaron otros dos xanthonolignoides llamados Cadensins A y
B de Caraipa densifora. Se obtuvo un xanthonolignoide Kielcorin de la especie
Hypericum. Recientemente, también se aisló kielcorin de Vismia guaramirangae,
Kielmeyera variabilis e Hypericum canariensis, mientras que se han reportado cadensina
C y cadensina D de Vismia guaramirangae e Hypericum canariensis.
Bisxantonas
Hasta la fecha se ha informado de un total de doce bisxantonas, cinco de plantas
superiores, una de líquenes y seis de hongos. Estos incluyen jacarelhyperols A y B, de las
partes aéreas de Hypericum japonicum y xantona dimérica, y globulixanthone E, de las
raíces de Symphonia globulifera . También se aíslan tres tetrahidroxixantonas diméricas
C 2 -C 2 , dicerandroles A, B y C del hongo Phomopsis longicolla.
Diverso
En este grupo se incluyen xantonas con sustituyentes distintos de los mencionados
anteriormente. Se aislaron xantofulvina y vinaxantona de especies de Penicillium. Se
aisló una sustancia policíclica (xantopterina) con la capacidad de inhibir la expresión del
gen HSP47 (proteína de choque térmico) del caldo de cultivo de una especie de
Streptomyces. La xantholiptina es un potente inhibidor de la producción de colágeno
inducida por el tratamiento con TGF-b en fibroblastos dérmicos humanos. Las xantonas
se han sintetizado por diferentes métodos. También se han revisado los elementos de los
métodos sintéticos como los bloques de construcción, la reacción de Diels-Alder y los
catalizadores heterogéneos.
Métodos de aislamiento y caracterización de xantonas

Las xantonas vegetales se aíslan comúnmente mediante cromatografía en columna sobre

gel de sílice utilizando diferentes mezclas de disolventes con polaridad creciente. Los
glucósidos de xantona normalmente se cristalizan en MeOH. También pueden separarse
e identificarse usando TLC y HPLC en comparación con muestras auténticas. La
estructura de las xantonas se ha establecido sobre la base de datos de UV, IR, MS y
NMR. La TLC preparativa en gel de sílice usando AcOEt, MeOH y H2O (21:4:3) como
fase móvil se ha usado en casos de separación difícil. Los disolventes de uso frecuente en
TLC son poliamida, MeOH-H2 O (9:1) y MeOH-H2O-AcOH (90:5:5); en celulosa,
HOAc (5-30%); sobre gel de sílice, Py-H 2 O-AcOEt-MeOH (12:10:80:5) y AcOEt-
MeOH-H2O (21:4:3) y las cromatoplacas se ven con luz UV. En algunos casos, la
pulverización con KOH al 5% en MeOH o H2SO4 acuoso al 5% ha resultado ventajosa
[ 33 ]. Las columnas de poliamida se aplican con frecuencia para la separación de
glicósidos de xantona. También se ha llevado a cabo la purificación de xantonas en una
columna Sephadex LH20. Las xantonas también se aíslan de la resina de Garcinia
hanburyi y de los productos de fermentación de un hongo endofítico.Phomopsis .
Se ha demostrado que la HPLC es la mejor técnica para la separación, identificación y
cuantificación de xantonas. Se han desarrollado varios métodos de HPLC para xantonas
naturales utilizando gel de sílice microporoso químicamente unido (columna Micropak
CN), disolvente hexano-cloroformo (13:7, v/v), isooctano-CHCl 3 (3:17, v/v), o dioxano-
diclorometano (1:9) detectado a 254 nm por detector UV. Las agliconas polares y los
glucósidos de xantonas también se resuelven en una columna de fase reversa ( y C18 )
usando acetonitrilo-agua como fase móvil. La cromatografía en contracorriente de alta
velocidad (HSCCC) y la cromatografía de partición centrífuga de alta resolución
(HPCPC) también se utilizaron para la separación y aislamiento de mangiferina y
neomangiferina de un extracto de asfodeloides de Anemarrhena y α -mangostinas
y γ- mangostinas del pericarpio del mangostán , respectivamente.
Espectroscopía ultravioleta visible (UV)
La técnica de espectroscopia visible ultravioleta es útil para localizar grupos hidroxilo
libres en xantonas. En particular, el grupo OH en la posición 3 se detecta fácilmente
mediante la adición de NaOAc, lo que da como resultado un cambio batocrómico de las
bandas de 300-330 nm con mayor intensidad. Siempre se encuentran tres o cuatro bandas
de absorción máxima en la región de 220–410 nm y es de destacar que todas las bandas
muestran una alta intensidad. La mayoría de las sustancias muestran una absorción
marcada en las regiones de 400 nm, lo que explica su color amarillo.
Espectroscopía infrarroja (IR)
El grupo carbonilo en las xantonas siempre es fácilmente detectable en los espectros de
IR como una banda fuerte (frecuencia de estiramiento) en la región de 1657 cm-1. La
presencia de un grupo hidroxilo en la posición 1 u 8 reduce la frecuencia a
aproximadamente 1650 cm-1 por enlaces de hidrógeno. Los sustituyentes en la posición
3 o 6 del núcleo de xantona pueden tener un efecto marcado sobre la frecuencia de
estiramiento del carbonilo.
Espectroscopia de resonancia magnética nuclear de protones ( 1H NMR)
Los espectros 1D y 2D-NMR ( 1 H, 13 C, DEPT, COSY, TOCSY, HROESY, HSQC,
HMBC y NOESY) se han utilizado para caracterizar las xantonas. El espectro de 1 H
NMR aparece predominantemente en el rango de 0-12 ppm campo abajo de la señal de
referencia de TMS. La integral de las señales es proporcional al número de protones
presentes. 1 H NMR proporciona información sobre el patrón de sustitución en cada
anillo. Los derivados acetilados se han utilizado en la determinación de la estructura de
los glucósidos. El número y la posición relativa de los grupos acetilo y metoxi se pueden
determinar observando el desplazamiento de la posición de absorción de los protones
aromáticos que se produce al reemplazar el grupo metoxi por un grupo acetilo. Las
señales entre δ 2,40–2,50 son indicativas de acetilación en la posición peri del grupo
carbonilo (posición 1 u 8) ya que para otras posiciones las señales de acetilo caen
entre δ 2,30 y 2,35. En las xantonas no acetiladas, la presencia de OH con enlaces de
hidrógeno en δ 12-13 también confirma la sustitución de hidroxilo en 1 u 8. Pero cuando
estas posiciones no están sustituidas, la absorción de los protones aromáticos aparece
en δ 7,70–8,05 [ 82]. Las xantonas tetraoxigenadas, a saber, 1,3,7,8- y 1,3,5,8-, mostraron
dos protones meta-acoplados y dos orto-acoplados en el espectro de 1 H RMN. También
se pueden distinguir por el hecho de que la presencia del protón ortoacoplado en el sistema
1,3,7,8- aparece en un campo más bajo [ 83 ] que la del sistema 1,3,5,8- (belidifolina).
[ 84 ]. Las señales de los protones -O-acetil metil del acetato de 8-C-glucosil flavona se
encuentran en un campo más alto que las del correspondiente acetato de 6-C-glucosil
flavona. De manera similar, se pueden distinguir glicosil xantonas isoméricas 2-C y 4-C.
Carbon Nuclear Espectroscopía de Resonancia Magnética ( 13C RMN)
El número de señales en el espectro de RMN de 13 C indica el número de diferentes tipos
de átomos de C. Proporciona información sobre el número total de átomos de C presentes
en la molécula. Es particularmente diagnóstico para determinar el enlace de azúcar en di-
o polisacáridos; la señal del carbono que lleva los alcoholes primarios aparece en δ 62 en
la glucosa. Esta señal se desplaza a 67 en disacáridos que poseen un enlace 1-6. El
desplazamiento químico del carbono carbonilo es184,5 cuando las posiciones 1 y 8 están
sustituidas por grupos hidroxilo. Pero cuando una de estas posiciones está ocupada por
un resto metoxi o azúcar, la señal del carbonilo se desplaza hacia arriba en
aproximadamente 4 ppm. Si ambas posiciones están ocupadas por un grupo metoxi o
restos de azúcar, el desplazamiento hacia arriba es de aproximadamente 10 ppm. Cuando
los grupos metoxi se encuentran en la posición 1 u 8, la absorción correspondiente aparece
en δ 60-61, mientras que aparecen en aproximadamente 56 cuando el grupo metoxi se
encuentra en las posiciones restantes del núcleo de xantona.
Espectrometría de masas (MS)
La espectrometría de masas también es una herramienta útil en la elucidación de la
estructura de los glucósidos de xantona. Prox estableció el patrón de fragmentación de
mangiferina y C-glucósidos relacionados. Aritomi y Kawasaki obtuvieron resultados
satisfactorios utilizando derivados peracetilados del mismo y compuestos análogos. En el
espectro de masas de los O-glucósidos, no se puede observar ningún pico de ión molecular
discernible, pero aparece un pico de ión de fragmento importante debido al resto aglicona,
seguido de una mayor fragmentación. Iones de fragmentos significativos relativos a la
pérdida de OH, H2O, y CHO son típicos para xantonas y compuestos relacionados con un
grupo metoxi peri sustituyentes al grupo carbonilo.
Biosíntesis de xantonas

Biosintéticamente, las xantonas son de origen mixto de shikimato y acetato

(Figura 1 ). Por tanto, la fenilalanina, que se forma a partir del shikimato, pierde dos
átomos de carbono de la cadena lateral y se oxida para formar ácido m -
hidroxibenzoico. Esto se combina con tres unidades de acetato (vía malonato) para dar el
intermedio. El intermedio de shikimato-acetato sufre un cierre de anillo para dar
benzofenona sustituida, que mediante un acoplamiento de fenol oxidativo genera el anillo
central del resto de xantona. Este acoplamiento oxidativo puede tener lugar de dos formas
dependiendo del plegamiento de la benzofenona ya sea en el orto o en el paraposición al
sustituyente hidroxilo en el anillo B potencial para dar 1,3,5-trihidroxixantona (1) o el
análogo 1,3,7-sustituido gentisina (2), respectivamente. Por tanto, dependiendo de la
orientación del intermedio, se pueden encontrar dos patrones de hidroxilación
diferentes. Se han obtenido pruebas experimentales de la vía general a partir de
experimentos realizados con Gentiana lutea.

Cuando las plantas se alimentaron con fenilalanina marcada con 14 C, la marca se

recuperó únicamente en el anillo B (Figura 1 ). Por el contrario, la alimentación de
acetato marcado con 14C dio lugar a la incorporación de la parte principal en el anillo
A. Recientemente se ha demostrado que el cierre del anillo alternativo a (1) tiene
lugar en células cultivadas de Centaurium erythraea , donde la 2,3',4,6-
tetrahidroxibenzofenona es el precursor de la 1,3,5-trihidroxixantona. Además, en
estos cultivos celulares, el compuesto (1) se oxida selectivamente por una xantona
6-hidroxilasa a 1,3,5,6-tetrahidroxixantona. Sousa y Pinto han documentado
métodos explorados para la síntesis de xantonas oxigenadas simples.
Actividades biológicas de las xantonas

Las plantas pertenecientes a la familia Gentianaceae son más conocidas por su sabor
amargo debido a la presencia de xantonas y se utilizan en remedios tradicionales contra
la pérdida del apetito y la fiebre y todavía se incluyen en muchas formulaciones "tónicas".
Se han informado algunas actividades específicas para xantonas e iridoides de
Gentianaceae. Se informa que las xantonas (especialmente la mangiferina) estimulan el
SNC y tienen actividad antiinflamatoria. Para bellidifolin y swerchirin, se ha informado
una fuerte actividad hipoglucemiante. Se ha informado que un extracto crudo de Swertia
muestra actividad repelente de insectos. Los extractos de la mayoría de las especies de
Swertia muestran actividad mutagénica. Un extracto de S. paniculata se utiliza en el
Sistema de Medicina de la India como tónico amargo y en el tratamiento de algunos
trastornos mentales. Las xantonas de origen natural han surgido como una clase
importante de compuestos orgánicos en vista de sus notables actividades farmacológicas
y biológicas. Se ha observado ahora que varios productos vegetales que se utilizan
habitualmente como agentes quimioterapéuticos contienen xantonas como componentes
activos. La mangiferina fue la primera xantona en ser investigada farmacológicamente y
se ha encontrado que exhibe un amplio espectro de actividades biológicas. Muestra
inhibición de la monoaminooxidasa, actividades cardiotónicas, convulsivas y coleréticas.
También se ha observado una actividad antiinflamatoria pronunciada para la mangiferina.
Los compuestos orales y tópicos que contienen mangiferina son útiles para el tratamiento
de enfermedades causadas por el virus del herpes. Se ha descubierto que la mangiferina
protege el hígado de las ratas de la hipoxia a gran altitud. Por otro lado, Ghosal y
Chaudhuri han observado el efecto depresor del SNC opuesto para los xantona-O-
glucósidos en ratones y ratas. El medicamento antipalúdico AYUSH-64 contiene S.
chirata como uno de los ingredientes.
Se informa que las xantonas de S. chirata producen depresión del SNC. El extracto total
de S. chirata mostró una actividad antialimentaria significativa contra el Jute semilooper.
Se ha informado que la norswertianolina, un O-glucósido, produce actividad
antituberculosa. Se sabe que los O-glucósidos de S. purpurascens producen depresión del
SNC en ratas y ratones albinos. Las xantonas de Mammea americana exhibieron
actividad inhibidora contra las células tumorales del sarcoma 180. La 1,8-dihidroxi3,5-
dimetoxixantona (swerquirina), aislada de la fracción de hexano de Swertia chirayita,
tiene un efecto reductor de azúcar en sangre muy significativo en ratas albinas en ayunas,
alimentadas, cargadas con glucosa y pretratadas con tolbutamida. También se han
investigado las especies de Swertia por la presencia de elementos esenciales. Se ha
informado que las xantonas muestran efectos hepatoprotectores, antimicrobianos,
anticancerígenos, antileprosos, antioxidantes, anticolinérgicos, mutagénicos y
radioprotectores, efectos inmunomoduladores, resorción de antibióticos y efectos
antiparasitarios, inhibidores de la neuraminidasa, antipalúdicos, anticomplementarios,
antifúngicos y algales del VIH. , y cardioprotectores. Se evaluaron las xantonas de S.
mussotii para determinar su actividad anti-virus de la hepatitis B en la línea celular HepG
2.2.15; exhibieron una actividad significativa inhibiendo la replicación del ADN del virus
de la hepatitis B con valores de CI50 de 0,01 mM a 0,13 mM.
PARTE EXPERIMENTAL

Tomado del trabajo “XANTHONES FROM Hypericum laricifolium Juss., AND

THEIR ANTIPROLIFERATIVE ACTIVITY AGAINST HEP3B CELLS”
Taxonomía

❑ Reino: Plantae
❑ Filo: Tracheophyta
❑ Clase: Magnoliopsida
❑ Orden: Malpighiales
❑ Familia: Hypericaceae
❑ Género: Hypericum
❑ Especie: Hypericum laricifolium Juss
Figura 1. Flor del romerillo – lugares donde
crecen el Hypericum laricifolium Juss.

Procedimiento experimental

Las partes aéreas se secaron a temperatura ambiente, lejos del sol, y luego se trituraron.
Luego se extrajeron 650 g de planta en polvo tres veces con 5,6 L de etanol 96o, para dar
91,5 g de extracto E. Se repartió el extracto E (55 g) en 2 L de agua y 2 L de acetato de
etilo, para dar una fase acuosa. y 21,6 g de un extracto EA. Se sometieron 1,4 g de extracto
EA a dos cromatografías líquidas de presión media (MPLC) sucesivas sobre gel de sílice
para dar 6,6 mg de hiperbrasilona 1 y 4,3 mg de 1,7-dihidroxi-xantona 2.

Luego, se repartieron 9,1 g de extracto de EA en 280 mL de éter de petróleo y 280 mL de

CH3OH-H2O 90-10, para dar 2,40 g de extracto PE y 6,70 g de extracto MW. El extracto
de PM (6,7 g) se absorbió en 70 g de gel de sílice. A continuación, este sólido se extrajo
sucesivamente con mezclas de éter de petróleo-acetato de etilo de polaridad creciente para
dar cuatro fracciones A (1,5 g), B (1,5 g), C (1,7 g), D (1,7 g). La fracción A, extraída
con una mezcla de éter de petróleo/acetato de etilo 80/20, se sometió a cromatografía en
columna sobre gel de sílice, eluida con mezclas de éter de petróleo / acetato de etilo de
polaridad creciente, de éter de petróleo/acetato de etilo 80/20 a puro acetato de etilo. Se
obtuvieron 15 fracciones, A1 a A15. A2 (97,4 mg) se sometió a cromatografía en columna
sobre gel de sílice, se eluyó con éter de petróleo y luego con éter de petróleo /
diclorometano 50/50 para dar A2-2 (8,0 mg), identificado como 3 A4 (115,0 mg) se
sometió a cromatografía en columna en gel de sílice, eluido con mezclas de
CH2Cl2/CH3OH de polaridad creciente, de diclorometano puro a diclorometano metanol
al 2%, para dar A4-1 (3,4 mg), identificado como 1,3,8-trihidroxi-2-metoxi-xantona 4,
A4-2 (5,1 mg), A4-3 (5,5 mg) y A4-4 (37,2 mg). A4-2 y A4-3 se sometieron a
cromatografía en Sephadex LH-20, eluidos con metanol para dar respectivamente A4-2-
1 (3,0 mg) identificado como 1,3-dihidroxi-2-metoxixantona 5 y A4 3-1. (1,0 mg)
identificado como 2,8-dihidroxi-1-metoxixantona 6. Se lavó A4-4 con metanol para dar
A4-4-1 como un precipitado blanco (11,5 mg) identificado como ácido 3-epi-betulínico
8. A7 (19,1 mg) se sometió a sucesivas columnas de cromatografías sobre gel de sílice y
Sephadex LH-20 para dar 3,8 dihidroxi-1,2-dimetoxixantona (0,6 mg) 7. A13 (50,0 mg)
se lavó con CH2Cl2/CH3OH 90/10 para dar 8,2 mg de un sólido amarillo identificado
como quercetina 9.
Equipo de cromatografía

Figura 2. Esquema de equipo de cromatografía en columna - Sephadex LH20

Medida de la actividad antiproliferativa en células Hep3B.

Se siguió un protocolo ya publicado1, con ligeras modificaciones. La línea celular de

cáncer humano Hep3B se ha cultivado como se describe y se ha duplicado cada 20 h en
nuestras condiciones de cultivo. En este ensayo, las células Hep3B se sembraron en placas
de 96 pocillos a una densidad de 5 x 103 células por pocillo y después de 18 h de adhesión,
se incubaron durante 72 h con compuestos siguiendo el rango de concentración: 0,1, 1,
10, 25, 50. , 100 µg / mL en DMEM suplementado con 0.1% de DMSO. Su crecimiento
se midió usando un ensayo de luminiscencia basado en ATP (ATPliteTMkit, Perkin
Elmer, Francia). 72 h después del tratamiento de las células con extractos, se leyó la
luminiscencia en un lector Trilux (Perkin Elmer). La concentración inhibidora del 50%
(CI50) de cada extracto se determinó en base a 3 experimentos independientes utilizando
el software GraphPad Prism (GraphPad Software Inc., EE. UU.).

RESULTADOS Y DISCUSIÓN

Los compuestos se han aislado tras sucesivas cromatografías sobre gel de sílice y
Sephadex LH-20 a partir de un extracto etanólico de parte aérea de Hypericum
laricifolium que presenta una buena actividad antiproliferativa sobre células Hep3B
(IC50 = 11,5 µg / ml). Sus estructuras se establecieron sobre la base de espectros de RMN
1D y 2D (1H, 13C, COSY, HSQC, HMBC) y espectrometría de masas, y se verificaron
mediante comparación con datos espectroscópicos publicados anteriormente.
Análisis RMN 1H

Figura 3. Espectro 1HRMN simulado en ChemDraw del compuesto 2 que es el 1,7-dihidroxixantona.

1
Se aisló el compuesto 2 como 1,7-dihidroxixantona que fue un sólido amarillo. H-RMN
(CDCl3 + 10% CD3 OD en el que fue corrido). Se observó que el mayor desplazamiento
se tiene para el hidrogeno del grupo hidroxilo y se debe a que está unido al oxígeno.
 Figura 4. Espectro 1HRMN simulado en ChemDraw del compuesto 4 que es el 1,7-dihidroxixantona.

Se aisló el compuesto 4 como 1,3,8-trihidroxi-2-metoxixantona también como un sólido

amarillo. 1H-RMN (CDCl3 + 10% CD3OD) los hidrógenos del grupo metoxi son los
menos desplazados.

Tabla 1. Actividad de compuestos aislados de Hypericum laricifolium contra células Hep3B, en comparación
con la actividad del extracto etanólico (extracto E) y el fármaco de referencia Sorafenib.

El ácido 3-epibetulínico 8 y la quercetina 9 son ubicuos en las plantas y ya se han aislado

de H. laricifolium 2,3. También se informó de 1-7 dihidroxixantona 2 en Hypericum
laricifolium 3. Curiosamente, todos los otros 6 compuestos se informaron en Hypericum
laricifolium por primera vez, y 1,3,8-trihidroxi-2-metoxixantona 4 y 2,8-dihidroxi-1 -
metoxixantona 6 nunca se ha informado en el género Hypericum . Curiosamente, las 4
xantonas 4-7 reportadas en el trabajo son diferentes de las xantonas reportadas en un
trabajo previo, que describe la composición química de Hypericum
laricifolium recolectado en Venezuela, lo que sugiere que los metabolitos de xantonas de
esta especie podrían variar según la ubicación o temporada de recolección, y plantea la
hipótesis de una influencia epigenética de la producción de metabolitos de xantonas en
la especie H. laricifolium .
Con respecto a la actividad antiproliferativa en células Hep3B humanas, la interesante
actividad previamente observada para un extracto etanólico de H. laricifolium nos llevó
a probar los compuestos aislados en cultivo de células Hep3B y determinar su CI . Los
compuestos más activos son xantona 3 y 1,3,8-trihidroxi-2-metoxixantona 4 con una
CI de 12 µM y 22 µM respectivamente. Estas actividades están en el mismo rango que la
actividad del medicamento de referencia Sorafenib. ( Tabla 1 ).
Hasta donde se sabe la única actividad de las xantonas o derivados de xantonas contra el
crecimiento de células Hep3B se informa para el ácido gambógico, un derivado de
xantonas aislado del árbol Garcinia hanburryi . El ácido gambógico inhibe el crecimiento
de Hep3B a través de vías apoptóticas con una CI de 1,8 µM13.
Se ha demostrado que la alaxantona C, estructuralmente cercana a 3 , induce una
prolongación de la supervivencia en un modelo murino de xenoinjerto de leucemia
linfocítica crónica humana14.

CONCLUSIÓN

En este trabajo, hemos identificado xantonas que inhiben el crecimiento de células

Hep3B. Esto resalta el interés de esta clase de compuestos, y especialmente las xantonas
estructuralmente relacionadas con el compuesto 3, en la búsqueda de compuestos activos
contra el carcinoma hepatocelular humano.

BIBLIOGRAFÍA

[1] Miguel M, Moisela M, Brel O, Bourdy G. XANTHONES FROM Hypericum

laricifolium Juss ., AND THEIR ANTIPROLIFERATIVE ACTIVITY
AGAINST HEP3B CELLS . LAS CÉLULAS HEP3B. Rev Soc Quím Perú.
2018;84(4):428–35.
[2] J. S. Negi, V. K. Bisht, P. Singh, M. S. M. Rawat, G. P. Joshi, "Naturally
Occurring Xanthones: Chemistry and Biology", Journal of Applied
Chemistry, vol. 2013, Article
ID 621459, 9 pages, 2013. https://doi.org/10.1155/2013/621459
[3] Vidari, Giovanni, VitaFinzi, Paola, Las Gentianaceae: botánica, fitoquímica y
actividad biológica. La Granja. Revista de Ciencias de la Vida [Internet]. 2010;
11 (1): 3-14. Recuperado de:
https://www.redalyc.org/articulo.oa?id=476047395002