"AÑO DEL BICENTENARIO DEL PERÚ: 200 AÑOS DE INDEPENDENCIA"

UNIVERSIDAD PRIVADA SAN JUAN BAUTISTA FACULTAD DE MEDICINA

HUMANA

ESCUELA PROFESIONAL DE MEDICINA HUMANA

TEMA: TRANSAMINASAS TGO, TGP. METABOLISMO HEPÁTICO.

GRUPO DE PRÁCTICA N°4

CURSO : BASES MOLECULARES Y CELULARES DE LA MEDICINA III

DOCENTE : MG. CHUMBES HUAMAN, ANDREA RITA

CICLO : 03

AULA : MA
INTEGRANTES:

• CHACALTANA FLORES, RITA DE LOS ÁNGELES

• DE LA CRUZ CAHUAYME, VANYA GRATTA
• GUTIERREZ AGUILAR, RENATO ALBERTO
• PALOMINO MATIAS, DANITZA ELVIRA
• VICUÑA ESPINOZA, MARIA CELESTE

ICA, 09 de JUNIO del 2021

0
INDICE

OBJETIVOS ................................................................................................................................ 2
1. METABOLISMO HEPATICO: TRANSAMINACION ....................................................... 3
2. METABOLISMO HEPATICO: DESAMINACIÓN ............................................................. 5
a) Reacciones de desaminación en el ADN .................................................................. 6
3. TRANSAMINASAS TGO Y TGP ....................................................................................... 8
3.1. VALORES NORMALES ................................................................................................. 8
3.2. QUÉ PUEDE CAUSAR LA ALTERACIÓN DE LA TGO Y LA TGP .......................... 9
4. IMPORTANCIA DEL GLUTAMATO Y CETOGUTARATO EN SINTESIS Y
DEGRADACION DE LOS AMINOACIDOS ........................................................................... 10
5. DETERMINA LAS TRANSAMINASAS (TGO Y TGP) EN SUERO ......................... 12
5.1. Determinación de la Transaminasa Glutámico Oxaloacético en suero
sanguíneo. ............................................................................................................................ 12
5.2. Determinación de la transaminasa Glutámico Pirúvico en suero sanguíneo
(TGP) ...................................................................................................................................... 14

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OBJETIVOS

Determinar el nivel de transaminasas TGO y TGP.

Aparte de evaluar los niveles de TGO y TGP, para confirmar lesiones en el
hígado y su extensión.
Explicar la reacción bioquímica de a TGO Y TGP
Mencionar donde se encuentra cada una de ellas.
Mencionar en que enfermedades se encuentran elevadas cada una de
ellas.

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 MARCO TEORICO

1. METABOLISMO HEPATICO: TRANSAMINACION

En humanos el amonio libre es tóxico, sobre todo para el cerebro, luego el grupo
amino procedente de la degradación de los AA debe de ser transportado
convenientemente al hígado, donde se convertirá en urea. Estos grupos amino
deberán ser transportados al hígado en una forma distinta de NH4+ para que la
concentración de éste en sangre no se eleve; generalmente se transportan como
GLN o como ALA .

El hígado es el órgano más grande del cuerpo humano y uno de los más importantes
en cuanto a la actividad metabólica que desarrolla en el organismo.

En la práctica clínica diaria, las múltiples funciones hepáticas sólo son superadas
por los métodos bioquímicos diseñados para examinarlos. De forma esquemática,
las pruebas funcionales hepáticas se pueden dividir en:

 Pruebas que informan sobre posible lesión hepatocelular o citólisis;

 Pruebas relacionadas con el metabolismo de la bilirrubina (captación,
conjugación y excreción), así como del éxtasis biliar (colestasis); y
 Pruebas que analizan la síntesis hepática de sustancias necesarias para el
funcionalismo corporal.

Generalmente suelen alterarse varias de estas funciones al mismo tiempo, aunque

hay formas aisladas con afectación única. Entre las pruebas que informan de lesión
hepatocelular o citólisis destacan las transaminasas o aminotransferasas. Éstas
representan enzimas del metabolismo intermedio, que catalizan la transferencia de
grupos amino del ácido aspártico o alanina al ácido acetoglutárico, formando ácido
oxalacético y ácido pirúvico.

En el hígado se producen múltiples reacciones de transaminación, pero las únicas

transaminasas con valor clínico son dos:

 aspartato-aminotransferasa o transaminasa glutámicooxalacética (AST o

GOT) cuya vida media es de 48 horas, y
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  alaninoaminotransferasa o transaminasa glutámico-pirúvica (ALT o GPT) con
una vida media de 18 horas.

Entre las reacciones de transferencia de grupos amino, las transaminaciones son

especialmente importantes. Ellas son catalizadas por las transaminasas (que están
implicadas tanto en las rutas catabólicas y anabólicas del metabolismo de
aminoácidos). Durante la transaminación, el grupo amino de un aminoácido se
transfiere a un 2-oxoácido (a-cetoácido). Se forma un 2-oxoácido (a-cetoácido) del
aminoácido original y un aminoácido del 2-oxoácido original.

Con pocas excepciones, el primer paso de la degradación de los L-aminoácidos

consiste en la eliminación del grupo -amino para producir el correspondiente -
cetoácido. Esta modificación, conocida por transaminación, está catalizada por las
enzimas denominadas aminotransferasas o transaminasas. En estas reacciones de
transaminación el grupo -amino de un aminoácido es transferido al átomo de
carbono  del -cetoglutarato. No hay desaminación neta sino una transferencia del
grupo -amino desde un aminoácido hasta un -cetoácido. El objetivo de las
reacciones de transaminación es recoger los grupos aminos de muchos
aminoácidos diferentes en forma de uno solo, el glutamato, que los canalizará hacia
rutas biosintéticas o hacia vías que generan productos nitrogenados de excreción.

Las células contienen varias aminotransferasas, muchas de ellas específicas para

el -cetoglutarato como aceptor de grupos aminos. Sin embargo difieren en su
especificidad para el otro sustrato, el aminoácido que cede el grupo amino, y en
función del cual se denominan. Las reacciones catalizadas por las

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aminotransferasas son reversibles. Las más importantes son la aspartato
aminotransferasa y la alanina aminotransferasa.

La determinación de la actividad de ciertos enzimas en suero se utiliza

habitualmente como parámetro para el diagnóstico de determinadas patologías. La
alanina aminotransferasa (también denominada glutamato-piruvato transaminasa o
GPT) y la aspartato aminotransferasa (denominada también glutamato-oxalacetato
transaminasa o GOT) son muy abundantes en corazón e hígado por lo que después
de un infarto de miocardio o una hepatitis infecciosa (u otras lesiones de cualquier
órgano) las aminotransferasas de las células lesionadas pasan al torrente
circulatorio pudiéndose determinar su concentración en el suero (S). Los valores
de SGPT y SGOT proporcionan información sobre la gravedad y el estado de la
lesión. En el caso de infarto de miocardio, los valores del enzima creatina quinasa
(SCK) son también muy importantes ya que es específico del músculo cardíaco.

2. METABOLISMO HEPATICO: DESAMINACIÓN

La desaminación es la eliminación de un grupo amino de una molécula. Las enzimas

que catalizan esta reacción se llaman desaminasas.

En el cuerpo humano, la desaminación se lleva a cabo principalmente en el hígado,

sin embargo, el glutamato también se desamina en el riñón. En situaciones de
consumo excesivo de proteínas, la desaminación se usa para descomponer los
aminoácidos para obtener energía. El grupo amina se elimina del aminoácido y se
convierte en amoníaco. El resto del aminoácido está compuesto principalmente de
carbono e hidrógeno, y se recicla u oxida para obtener energía. El amoníaco es
tóxico para el cuerpo humano y las enzimas lo convierten en urea o ácido úrico
mediante la adición de moléculas de dióxido de carbono (que no se considera un
proceso de desaminación) en el ciclo de la urea, que también tiene lugar en el
hígado. La urea y el ácido úrico pueden difundirse de manera segura en la sangre
y luego excretarse en la orina.

El hígado interviene en la regulación del metabolismo de:

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  Metabolismo de carbohidratos
 Metabolismo de lípidos
 Biosíntesis del colesterol y su regulación
 Metabolismo de aminoácidos
 El papel del hígado durante el ayuno
 Biosíntesis del grupo hemo

a) Reacciones de desaminación en el ADN

i. Citosina

La desaminación espontánea es la reacción de hidrólisis de la citosina en uracilo,

liberando amoníaco en el proceso. Esto puede ocurrir in vitro mediante el uso de
bisulfito, que desamina la citosina, pero no la 5-metilcitosina. Esta propiedad ha
permitido a los investigadores secuenciar el ADN metilado para distinguir la citosina
no metilada (mostrada como uracilo) y la citosina metilada (sin alterar).

En el ADN, esta desaminación espontánea se corrige mediante la eliminación del

uracilo (producto de la desaminación de la citosina y no parte del ADN) por la
glicosilasa de uracilo-ADN, generando un sitio a básico (AP). El sitio a básico
resultante es reconocido por las enzimas (endonucleasas AP) que rompen un
enlace fosfodiéster en el ADN, lo que permite la reparación de la lesión resultante
mediante el reemplazo con otra citosina. Una ADN polimerasa puede realizar este
reemplazo mediante traducción de mellas, una reacción de escisión terminal por su
actividad de exonucleasa 5'ase3 ', seguida de una reacción de relleno por su
actividad de polimerasa. La ADN ligasa luego forma un enlace fosfodiéster para
sellar el producto dúplex mellado resultante, que ahora incluye una citosina nueva
y correcta (reparación por escisión de la base)

ii. metilcitosina

La desaminación espontánea de 5-metilcitosina produce timina y amoníaco. Esta es

la mutación de un solo nucleótido más común. En el ADN, esta reacción, si se
detecta antes del paso de la horquilla de replicación, puede corregirse con la enzima
timina-ADN glucosilasa, que elimina la base de timina en un desajuste G/T. Esto

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deja un sitio a básico que es reparado por las endonucleasas AP y la polimerasa,
como ocurre con el uracilo-ADN glicosilasa.

iii. Guanina

La desaminación de guanina da como resultado la formación de xantina. La xantina,

de manera análoga al enol tautómero de la guanina, se combina selectivamente con
pares de timina en lugar de citosina. Esto da como resultado una mutación de
transición post-replicativa, donde el par de bases GC original se transforma en un
par de bases AT. La corrección de esta mutación implica el uso de alquiladenina
glicosilasa durante la reparación de la escisión de la base.

iv. Adenina

La desaminación de adenina da como resultado la formación de hipoxantina. La

hipoxantina, de manera análoga al tautómero imina de adenina, se empareja
selectivamente con citosina en lugar de timina. Esto da como resultado una
mutación de transición post-replicativa, donde el par de bases AT original se
transforma en un par de bases GC.

Proteínas adicionales que realizan esta función

 APOBEC1
 APOBEC3A-H, APOBEC3G - afecta el VIH
 Citidina desaminasa inducida por activación (AICDA)
 Citidina desaminasa (CDA)
 dCMP desaminasa (DCTD)
 AMP desaminasa (AMPD1)
 Adenosina desaminasa que actúa sobre tRNA (ADAT)
 Adenosina desaminasa que actúa sobre dsRNA (ADAR)
 Adenosina desaminasa que actúa sobre mononucleótidos (ADA)
 Guanina desaminasa (GDA)

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 v. Desaminación oxidativa

La desaminación oxidativa es una reacción química que se caracteriza por la ruptura

de un grupo amino. Esta reacción es clave a nivel biológico en la degradación de
los aminoácidos. El ácido glutámico es desaminado oxidativamente en la
mitocondria por el glutamato deshidrogenasa, la única enzima conocida que, al
menos en algunos organismos, puede trabajar tanto con NAD+ o NADP+ como
coenzima redox. Se piensa que la oxidación ocurre con la transferencia de un ion
hidruro del carbono a del glutamato al NAD(P)+ formando α-iminoglutarato el cual
es hidrolizado a α-cetoglutarato y amonio.

3. TRANSAMINASAS TGO Y TGP

La TGO y la TGP son enzimas que normalmente se miden con el objetivo de evaluar
la salud del hígado, por lo que se les da el nombre de transaminasas.
La TGO o GOT, conocida como transaminasa oxalacética o AST (aspartato
aminotransferasa), es producida en varios tejidos, como corazón, músculos e
hígado, y se localiza en el interior de las células hepáticas. De esta forma, cuando
solo hay un aumento de los niveles de TGO, es común que esté relacionado con
una situación ajena al hígado; puesto que, en el caso de lesiones hepáticas, es
necesario que la lesión sea más extensa para que haya ruptura de las células del
hígado y se libere la TGO en la sangre.
Por otra parte, la TGP o GPT, conocida como transaminasa pirúvica o ALT (alanina
aminotransferasa), es producida exclusivamente en el hígado; por esta razón,
cuando hay alguna alteración en este órgano, se puede verificar un aumento de la
cantidad circulante de esta enzima en la sangre.
3.1. VALORES NORMALES

Los valores de TGO y TGP pueden variar de acuerdo con el laboratorio; sin
embargo, de forma general, los considerados normales son los siguientes:

 TGO: entre 5 y 40 U/L;

 TGP: entre 7 y 56 U/L.

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Aunque la TGO y la TGP sean consideradas marcadores hepáticos, estas enzimas
también pueden ser producidas por otros órganos, principalmente el corazón en el
caso de la TGO. Por esta razón, es importante que la evaluación de los resultados
sea realizada por el médico que solicitó el examen, pues así es posible determinar
si hubo alteración y, en caso positivo, establecer la causa.

3.2. QUÉ PUEDE CAUSAR LA ALTERACIÓN DE LA TGO Y LA TGP

Las alteraciones en los niveles de TGO y TGP normalmente son indicativas de

lesiones en el hígado, lo que puede ocurrir debido a hepatitis, cirrosis o presencia
de grasa en el hígado, siendo consideradas estas posibilidades cuando son
determinados valores muy altos de GOT y TGP.

Por otra parte, cuando solo la TGO está alterada, es posible que se trate de alguna
alteración en el corazón, pues esta también es un marcador cardíaco. De esta
forma, ante esta situación, el médico puede indicar la realización de exámenes para
evaluar la salud del corazón, como medición de troponina, mioglobina y
creatinfosfoquinasa (CPK).

De forma general, las alteraciones en los niveles de TGO y TGP pueden estar
relacionadas con las siguientes situaciones:

1. Hepatitis fulminante;
2. Hepatitis alcohólica;
3. Cirrosis por consumo excesivo de bebidas alcohólicas;
4. Abuso de drogas ilícitas;
5. Grasa en el hígado;
6. Presencia de absceso en el hígado;
7. Pancreatitis aguda;
8. Obstrucción de las vías biliares;
9. Infarto;
10. Insuficiencia cardíaca;
11. Isquemia cardíaca;

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 12. Lesión muscular;
13. Uso de medicamentos por un largo período y/o sin orientación médica.

De esta forma, la medición de los niveles de estas enzimas es solicitada por el

médico cuando existe la sospecha de alguna de estas situaciones y cuando existen
signos y síntomas sugestivos, como piel y ojos amarillentos, orina oscura, cansancio
frecuente sin razón aparente y heces blanquecinas o amarillentas.

Aparte de evaluar los niveles de TGO y TGP, para confirmar lesiones en el hígado
y su extensión, el médico puede aplicar el cociente de De Ritis, en el cual se
establece la relación entre los niveles de TGO y TGP, que cuando es superior a
1 es indicativo de lesiones más graves, por lo que el tratamiento debe ser iniciado
lo antes posible para evitar.

4. IMPORTANCIA DEL GLUTAMATO Y CETOGUTARATO EN

SINTESIS Y DEGRADACION DE LOS AMINOACIDOS

Debido a la naturaleza aminoacidica del L-glutamato y su sal sódica GMS se hace

evidente su natural función como nutriente. Su importancia radica en la participación
en procesos vitales como funciones gastrontestinales relacionadas con la nutrición
como la sensación del gusto, la maduración intestinal y como fuente energética de
las células epiteliales intestinales. Así como su papel fundamental en el
metabolismo intermediario a nivel celular y sistémico. Por lo anterior, en este aparte
se abordarán los aspectos de la utilización del GLU como nutriente a diferentes
niveles.

Se calcula que una persona adulta ingiere diariamente en la dieta aproximadamente

28 g de GLU, mientras que todas las células del organismo pueden producir de
forma endógena un valor cercano a 50 g por día, por lo cual el GLU es un
aminoácido se considera un nutriente no esencial. Sin embargo, su importancia
radica en la incorporación de los esqueletos carbonados del L-glutamato para la
síntesis de otras moléculas, el metabolismo del nitrógeno y en procesos oxidativos

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que favorecen la síntesis de ATP. A continuación la revisión se centrará en los
aspectos del metabolismo del GLU en diferentes compartimentos.

El GLU participa como una molécula clave a nivel estructural y metabólico en el

microambiente celular y sistémico. A nivel intestinal, el GLU puede ser utilizado a
través de las reacciones de transaminación para la generación de otros aminoácidos
como alanina, aspartato, prolina y aminoácidos no proteicos como ornitina y
citrulina. Las aminotransferasas específicas catalizan estas reacciones que
requieren fosfato de piridoxal.

Otra función importante del GLU es ser precursor citosólico en el enterocito para la
síntesis de glutatión reducido (GHS) junto con la cisteína y la glicina. Debido a que
el GSH juega un papel transcendental en la protección celular contra la injuria
oxidativa, ya que favorece el control de las especies reactivas de oxígeno. La
actividad del glutatión es tan importante para el mantenimiento celular que estudios
realizados en enterocitos humanos demuestran que éstos son capaces también de
captar GHS extracelular proveniente de otras fuentes por intermedio de un
transportador específico

Por otro lado tenemos al alfacetoglutarato es una sal orgánica que se produce de
la disociación del ácido-cetoglutárico. Es un compuesto que tiene utilización médica,
y que está presente además en las células eucariotas y procariotas, formando parte
del ciclo de Krebs. El alfa-cetoglutarato se administra en forma intravenosa, con el
fin de prevenir lesiones del corazón durante las cirugías cardíacas, relacionadas con
problemas de flujo sanguíneo. También se usa para evitar un deterioro muscular,
como consecuencia de una cirugía o trauma.
Se usa en la fabricación de medicamentos para enfermedades renales, trastornos
intestinales y estomacales, así como para muchas afecciones; sin embargo, las
evidencias científicas para estos usos son poco convincentes y escasas. Se forma
a partir de la acción de la enzima isocitrato deshidrogenasa sobre el isocitrato con
la generación de NADH y CO2. Además, el alfa-cetoglutarato es un sitio de
incorporación al ciclo de Krebs del ácido glutámico, un aminoácido.
El ácido glutámico es transformado en alfa-cetoglutarato, siendo esta una forma de
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evitar el agotamiento de los componentes del ciclo de Krebs. Las vías que cumplen
esta función se llaman anapleróticas. Posteriormente, el alfa-cetoglutarato se
convierte en succinil CoA. El alfa-cetoglutarato es determinante en la velocidad de
realización del ciclo de Krebs e interviene en varias vías metabólicas. Asimismo, es
una fuente energética para el funcionamiento celular, tal como ocurre con las células
intestinales.
El alfa-cetoglutarato es una fuente para la síntesis de glutamina y ácido glutámico
(glutamato); aminoácidos que estimulan la síntesis de proteínas. El glutamato, un
neutransmisor, liberado en las terminaciones nerviosas en el tejido óseo, y en el
proceso de incorporación de amina al alfa-cetoglutarato, produce la prolina.
El alfa-cetoglutarato interviene en el proceso de transporte y eliminación del
nitrógeno producido por las células. Los grupos aminos presente en los aminoácidos
son transferidos al alfa-cetoglutarato por un proceso de transaminación. Luego,
estos grupos aminos son trasladados al hígado.

El alfa-cetoglutarato actúa como un agente antioxidante, siendo capaz de

reaccionar con el peróxido de hidrógeno para formar succinato, agua y dióxido de
carbono. Además, es capaz de reaccionar con otros componentes de las especies
oxigenadas reactivas (ROS). Alivia el estrés oxidativo, actuando como fuente
energética y antioxidante en las células de mamíferos. También aumenta la
capacidad antioxidante al favorecer la síntesis de la glutamina.
Se piensa que el alfa-cetoglutarato ayuda a incrementar las síntesis de proteínas
musculares en pacientes en estado postoperatorio, además de mejorar el
metabolismo de los aminoácidos en pacientes dializados.

5. DETERMINA LAS TRANSAMINASAS (TGO Y TGP) EN SUERO

5.1. Determinación de la Transaminasa Glutámico Oxaloacético en suero

sanguíneo.

La transaminasa Oxaloacético (TGO) del suero cataliza la transferencia del grupo

amino del grupo amino del L-aspartato hacia cetoglutarato, para obtener
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axaloacetato y L-glutamato. El axaloacetato se reduce, con la oxidación simultanea
del NADH a NAD; en L-malato en la reacción catalizada por el malato
deshidrogenada (MDH). Esta reacción produce un complejo coloreado que se
absorbe a una longitud de onda de luz de 505 nm (longitud de onda), el cual es
directamente proporcional a la cantidad de transaminasa glutámico oxaloacético
(TGO) presente en el suero. Los resultados se expresan en unidades
internacionales por litro (UI/l).

La TGO cataliza la siguiente reacción:

GOT

L-aspartato + α-cetoglutarato → glutamato + oxalacetato

Procedimiento para la determinación de la Transaminasa Glutámico

Oxaloacético.

 En dos tubos de fotocolorímetro marcados con B (blanco), M (Muestra) se

colocó en cada una 0.5 mL de reactivo (A).
 Se procedió a preincubar en baño maria 37°C. Por 3 minutos.
 Luego se agregó 100 μL de suero al tubo de la muestra (M) y 100 μL de agua
destilada al tubo Blanco (B).
 De inmediatamente se procedió a mesclar e incubar a 37°C por 30
minutos.61
 Después se agregaron en cada tubo B (blanco) y M (Muestra), 0.5 mL de
reactivo (B).
 Se procedió a mesclar y dejar por 30 minutos a temperatura ambiente.
 Se procedió a agregar a los dos tubos el reactivo (C), 5 mL a cada tubo.
 De inmediatamente se homogenizó y se retiró de baño maria. Después de 2
minutos se procedió a leer en absorbancia en fotocolorímetro con filtro verde
a una longitud de onda de (505 nm).

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5.2. Determinación de la transaminasa Glutámico Pirúvico en suero sanguíneo
(TGP)

La transaminasa glutámico pirúvico (TGP) del suero cataliza la transferencia del

grupo amino del L- alanina, hacia ɑ- cetoglutarato, resultando la formación del
piruvato y L-glutamato. El piruvato se reduce, con la oxidación simultanea del
NADH a NAD, en L- lactato en la reacción catalizada por el lactato
deshidrogenasa (LDH): de acuerdo a la velocidad de la reacción se produce una
coloración amarilla intensa, esta es medida a 505nm (nanometros), el cual es
directamente proporcional a la cantidad de la transaminasa glutámico pirúvico
del suero o muestra. Los resultados se expresan en unidades internacionales
por litro (UI/l).

La TGP cataliza la siguiente reacción:

GPT

L-alanina + α-cetoglutarato → glutamato + piruvato

5.1. Procedimiento para la determinación de la Transaminasa Glutámico

Pirúvico.
 En dos tubos de fotocolorímetro marcados con B (blanco), M (Muestra) se
colocó en cada una 0.5 mL de reactivo (A).
 Se procedió a preincubar en baño maria 37°C. Por 3 minutos.
 Luego se agregó 100 μL de suero al tubo de la muestra (M) y 100 μL de agua
destilada al tubo Blanco (B).
 De inmediatamente se procedió a mesclar e incubar a 37°C por 30 minutos.
 Después se agregaron en cada tubo B (blanco) y M (Muestra), 0.5 mL de
reactivo (B).
 Se procedió a mesclar y dejar por 30 minutos a temperatura ambiente.
 Se procedió a agregar a los dos tubos el reactivo (C), 5 mL a cada tubo.
 De inmediatamente se homogenizó y se retiró de baño maria. Después de 2
minutos se procedió a leer en absorbancia en fotocolorímetro con filtro verde
a una longitud de onda de (505 nm)

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