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PROCEDIMIENTO
EXPERIMENTAL
EXPERIMENTO A: TEST DE TOLERANCIA
A LA GLUCOSA Y GLUCOSA
POSTPRANDIAL
1. SUSTANCIAS:
Muestra de sangre en ayunas.
Muestra de sangre a los 30, despus de haber ingerido
la bebida (75gr. de azcar disuelto en 300 ml de agua
mineral con unas gotas de limn).
Muestra de sangre extrada a los 60, despus de haber
ingerido la bebida.
Muestra de sangre extrada a los 90, despus de haber
ingerido la bebida.

2. PRODUCTOS QUMICOS - REACTIVOS:

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KIT ELITECH Reactivo de Glucosa, mtodo de la
glucosa oxidasa- peroxidasa (GOD-POD).

3. MATERIALES DE LABORATORIO.

Tubos de ensayo de 5 ml.

Micropipetas.
Agujas para sacar sangre #21.
Vaso de precipitado.

4. EQUIPOS DE LABORATORIO:
Espectrofotmetro.
Bao Mara.
Centrifugado

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INTRODUCCIN
Como se sabe la diabetes Mellitus es un sndrome metablico que
se caracteriza por hiperglicemia, la cual es causada por defectos en
la secrecin o accin de la insulina. El paciente diabtico presenta
un riesgo 40 veces mayor de amputacin, 25 veces mayor de
insuficiencia renal terminal, 20 veces mayor de ceguera, 2 a 5 veces
mayor de accidentes cerebrovasculares y entre 2 a 3 veces mayor
de infarto agudo de miocardio. Asimismo, tiene mayor
predisposicin de tener hipertensin, dislipidemia y obesidad.
Por tal motivo es necesario medir los niveles de glucosa en la
sangre:

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El Test de Tolerancia aunque ya no es muy utilizada en la Diabetes
aun lo puede ser para la intolerancia disminuida de la glucosa;
requiere de un ayuno mnimo 8 horas, ah se saca una muestra de
sangre, despus se le da glucosa (agua azucarada con gotas de
limn, en nuestro caso), y se toman las muestras a las 2 horas pero
nosotros los haremos a los 30, 60y 90, respectivamente, siendo
estas las que ms importa.
La glucosa postprandial es parecido, permite detectar posibles
enfermedades cardiovasculares, se realiza despus de la ingesta
de alimentos, se usa para determinar los niveles de glucosa en la
sangre.

RESUMEN
En ese informe realizaremos el Test de Tolerancia a la glucosa (que
se tomara a nuestra compaera , extrayendo una muestra de
sangre en ayunas , se llevar a centrifuga utilizaremos el Mtodo de
la glucosa oxidasa- peroxidasa (GOD-POD), para determinar la
glucosa en sangre, se llevara al bao Mara y luego al
espectrofotmetro para determinar la Absorbancia de la muestra y
el estndar; luego se calculara mediante una frmula , la cantidad
de glucosa en sangre para as poder ver si est entre los
parmetros normales.
Para determinar la Glucosa Postprandial, se le dar a nuestra
compaera una bebida (azucarada), y se sacaran las muestras de
sangre en tres tiempos, 30, 60, 90; se realizar todo el proceso
anterior (bao Mara y espectrofotmetro), para determinar la
Absorbancia de las muestras, mediante formula se determinara si la
paciente est o no entre los parmetros normales.

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MARCO TERICO
TEST DE TOLERANCIA A LA
GLUCOSA Y GLUCOSA

POSTPRANDIAL

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La prueba ms comn de tolerancia a la glucosa es la prueba de
tolerancia a la glucosa oral (PTGO).
La glucosa postprandial se define como los niveles de glucosa en
sangre a un determinado tiempo de ingesta de un alimento. Esta
prueba se realiza para verificar la forma en que el cuerpo
descompone el azcar y descartar la Diabetes, estos conceptos se
profundizaran ms adelante pero antes

Veamos un poco de
Diabetes
LA TEMIBLE DIABETES
MELLITUS
Es un grupo de enfermedades metablicas caracterizadas por
hiperglicemia, consecuencia de defectos en la secrecin y/o en la
accin de la insulina. La hiperglicemia crnica se asocia en el largo
plazo dao, disfuncin e insuficiencia de diferentes rganos
especialmente de los ojos, riones, nervios, corazn y vasos
sanguneos.
Clasificacin
En 1997 la Asociacin Americana de Diabetes (ADA), propuso una
clasificacin que est vigente. Se incluyen 4 categoras de
pacientes y un 5 grupo de individuos que tienen glicemias
anormales con alto riesgo de desarrollar diabetes (tambin tienen
mayor riesgo cardiovascular):
Diabetes Mellitus tipo 1
Diabetes Mellitus tipo 2
Otros tipos especficos de Diabetes
Diabetes Gestacional
Intolerancia a la glucosa y glicemia de ayunas alterada

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Diabetes Mellitus tipo 1:

Se caracterizada por una destruccin de las clulas beta
pancreticas, deficiencia absoluta de insulina, tendencia a la
cetoacidosis y necesidad de tratamiento con insulina para vivir
(insulinodependientes). Se distinguen dos sub-grupos:
Diabetes autoinmune: con marcadores
positivos en un 85-95% de los casos,
anticuerpos anti islotes (ICAs),
antiGADs (decarboxilasa del acido
glutmico) y anti tirosina fosfatasas
IA2 e IA2 . Esta forma tambin se
asocia a genes HLA.
Diabetes
idioptica:
Con
igual
comportamiento metablico, pero sin
asociacin con marcadores de
autoinmunidad ni de HLA.

Diabetes Mellitus tipo 2:

Se caracterizada por insulino-resistencia y deficiencia (no absoluta)
de insulina. Es un grupo heterogneo de pacientes, la mayora
obesos y/o con distribucin de grasa predominantemente
abdominal, con fuerte predisposicin gentica no bien definida
(multignica). Con niveles de insulina plasmtica normal o elevada,

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sin tendencia a la acidosis, responden a dieta e hipoglicemiantes
orales, aunque muchos con el tiempo requieren de insulina para su
control, pero ella no es indispensable para preservar la vida
(insulino-requirentes).

Otros tipos especficos de diabetes:

Incluyen pacientes con defectos genticos en la funcin de la clula
beta como las formas llamadas MODY (maturity onset diabetes of
the young); otros con defectos genticos de la accin de la insulina;
otros con patologas pancreticas (pancreatectoma, pancreatitis
aguda,
pancreatitis
crnica,
neoplasia
del
pncreas,
hemocromatosis);
endocrinopatas
(Cushing,
acromegalia,
glucagonoma, feocromocitoma).
Tambin algunos frmacos o txicos pueden producir diabetes
secundaria (corticoides, cido nicotnico, Lasparagina, interfern
alfa, pentamidina); agentes infecciosos (rubeola congnita,
coxsachie B, citomegalovirus, parotiditis) y por ltimo, algunas otras
enfermedades como los Sndromes de Down, Kleinefelter, Turner,
enfermedad de Stiff-man y Lipoatrofias.
En estos casos se habla de diabetes secundaria, mientras los tipo 1
y 2 son primarios.

Diabetes gestacional:
Se caracteriza por hiperglicemia, que aparece en el curso del
embarazo. Se asocia a mayor riesgo en el embarazo y parto y de

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presentar diabetes clnica (60% despus de 15 aos). La diabetes
gestacional puede desaparecer al trmino del embarazo o persistir
como intolerancia a la glucosa o diabetes clnica.

Intolerancia a la glucosa y glicemia de ayuna alterada:

La Intolerancia a la glucosa se caracteriza por una respuesta
anormal a una sobrecarga de
glucosa suministrada por va oral.
Este estado se asocia a mayor
prevalencia
de
patologa
cardiovascular y a riesgo de
desarrollar diabetes clnica (5-15%
por ao).
Glicemia de ayuno alterada se
caracteriza por el hallazgo de una glicemia de ayuno entre 100 y
125 mg/dl. Su identificacin sugiere el realizar una prueba de
sobrecarga de glucosa oral, para la clasificacin definitiva.

DIAGNOSTICO DE DIABETES MELLITUS

El mdico realizar una sera de pruebas para confirmar el
diagnostico de diabetes. Estas pruebas son:
Glucosa sangunea en ayuno. Despus de un ayuno de
aproximadamente 8 horas. Este examen es utilizado para
diagnosticar diabetes o pre-diabetes.
Tolerancia oral a la glucosa. Esta prueba mide el nivel de glucosa
en sangre despus de un ayuno de 8 horas y despus de 2 horas
de haber tomado una bebida glucosa. Esta prueba puede ser
utilizada para diagnosticar diabetes o pre-diabetes.

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Glucosa
sangunea
a
cualquier hora del da. El
mdico realiza pruebas de
glucosa en sangre sin
importar a qu hora
se tom el ltimo
alimento.
Esta
prueba junto con
una
serie
de
sntomas
es
utilizada para el
diagnstico
de
diabetes, pero no de pre-diabetes.
Resultados
positivos
deben ser confirmados
por el mdico repitiendo la prueba de glucosa en ayunas o la
prueba de Tolerancia a la glucosa en un diferente da.

Prueba de glucosa sangunea en ayuno (PGA)

Debido a su fcil uso y a la aceptabilidad de los pacientes y el bajo
costo, la PGA es la ms utilizada. Ayuno se define como un periodo
de 8 horas sin haber comido o tomado algn alimento.
Si el nivel de glucosa en sangre es de 100 a 125 mg/dl se presenta
una forma de pre-diabetes llamada intolerancia a la glucosa en

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ayunas, lo que significa que existe el riesgo de desarrollar diabetes
tipo 2 pero aun no se tiene.
Un nivel de glucosa en sangre arriba de 126 mg/dl confirmado con
otra prueba de glucosa sangunea en ayuno realizada otro da,
confirma el diagnstico de diabetes.

Prueba de Tolerancia Oral a la Glucosa (PTOG)

La PTOG requiere un ayuno de cuando menos 8 horas antes de la
prueba. La glucosa en sangre en medida inmediatamente despus,
a intervalos de tempo y dos horas despus de haber bebido una
solucin glucosada con 75gr de glucosa disuelta en agua.
Si el nivel de glucosa est entre 140 y 199 mg/dl dos horas despus
de haber bebido el lquido, se tiene una forma de pre-diabetes
llamada Intolerancia a la glucosa, lo que significa que existe el
riesgo de desarrollar diabetes tipo dos pero aun no se tiene.
Una glucosa de 200 mg/dl o ms despus de dos horas de haber
tomado
la
solucin
glucosada, confirmada con
otra PTOG positiva realizada
otro
da,
confirma
el
diagnstico de diabetes.
Una prueba de glucosa en
sangre por arriba de 200
mg/dl o ms, con la
presencia de los sntomas
que
se
mencionan
a
continuacin confirma el
diagnstico de diabetes.
Sed excesivas.
Incremento en la frecuencia de orinar.
Prdida de peso sin explicacin.
Otros sntomas incluyen cansancio, visin borrosa, aumento
en el apetito y heridas que tardan en sanar.

Glucosa postprandial

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La glucosa postprandial es aquella que se hace presente en la
sangres despus de comer y de haber ingerido los alimentos. Se
denomina glucosa postprandial a la deteccin de los niveles de
azcar en sangre despus de la comida.
La hiperglucemia postprandial puede ser determinada midiendo la
concentracin de glucosa 2 horas despus de la ingesta de un
alimento. Una concentracin de Glucosa Posprandial superior a 200
mg/dl es un indicador de Diabetes Mellitus.
Adems, diversos estudios cientficos han demostrado que los
pacientes con Diabetes que presentan un nivel de glucosa normal
de ayuno pero una elevada glucosa postprandial tienen un riesgo
mayor de enfermedades cardiovasculares.
Controlar el incremento de
azcar en la sangre
despus de cada comida
es indispensable pues un
inadecuado
control
de
estos niveles incrementa la
probabilidad
de
complicaciones
de
Diabetes.

Hemoglobina
Glucosilada
La hemoglobina glucosilada es un parmetro que refleja cmo ha
sido el control de la diabetes los meses anteriores a la realizacin
del anlisis. Su determinacin permite contar con un dato objetivo
que con una sola cifra nos informa de la glucemia media de los 3
meses anteriores.
Cuando se mide la fraccin A1c y se emplea el llamado estndar
DCCT, mtodo que utilizan la mayora de los laboratorios, el rango
normal es 4-6 %. En los ltimos tiempos tiende a ofrecerse tambin
la glucemia media equivalente.
Por ejemplo, una A1c de 7 %, que muchas veces se considera el
objetivo a alcanzar, representara una glucemia media de 154 mg/dl,
mientras que 6 %, el lmite superior del rango normal, equivaldra a
126 mg/dl. Cada punto de A1c equivale a 28-29 mg/dl.

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Aunque es verdad que en
ciertos pacientes no existe la
misma correlacin y que una
cifra
determinada
de
hemoglobina glucosilada puede
equivaler a una glucemia media
ms elevada o ms baja,
incluso en estos casos sigue
siendo una medida til ya que la
monitorizacin de la evolucin
de la glucosilada nos dir si el
paciente est mejorando o
empeorando.
Junto con la determinacin de la
glucemia
capilar
tras
la
obtencin de una muestra de
una gota de sangre del pulpejo
del dedo, el clculo de la A1c
constituye
la
base
del
seguimiento
del
control
metablico de la diabetes. La
informacin que proporcionan
es complementaria, ya que la
A1c nos da una impresin global de cmo es el control metablico
de una persona con diabetes y las glucemias capilares nos dicen
qu tipo de ajustes hay que hacer.
En caso de discrepancias entre las glucemias capilares y la
hemoglobina glucosilada, habra que revisar el reflectmetro
(aparato en el que se introducen las tiras reactivas para medir la
glucosa) por si su funcionamiento fuera incorrecto. Si no es as,
habra que plantearse si el paciente est camuflando las cifras
reales de glucemia, si los das que se mide la glucosa no son
representativos del control global (por ejemplo, si se mide los das
que cumple mejor las normas de estilo de vida o los fines de
semana) o si no se est midiendo la glucosa a horas que estropean
la media. Por ejemplo, hay pacientes que slo se miden antes de
las comidas y no despus y otros a los que el mal control nocturno
les incrementa la glucemia media y, por tanto, la hemoglobina
glucosilada. Sin embargo, como se ha comentado anteriormente, es
posible que algunas discrepancias se deban a enfermedades como
hemoglobinopatas, talasemias, insuficiencia renal o heptica
avanzada, algunos cnceres.

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La importancia de la hemoglobina glucosilada la reconocen todas
las principales sociedades cientficas.La Asociacin Americana de
Diabetes recomienda medir la A1c al menos dos veces al ao en
pacientes que cumplen con los objetivos de control y que estn en
situacin estable, ascendiendo a una determinacin trimestral para
los que estn descontrolados o en los que se modifique el
tratamiento.
Algunas situaciones, como por ejemplo el embarazo, pueden
aconsejar incluso una mayor frecuencia de determinacin.
Adems de para el seguimiento del control metablico, en los
ltimos tiempos se ha considerado la posibilidad del empleo de la
hemoglobina glucosilada para el diagnstico.
Es evidente que no existe la prueba diagnstica perfecta y en parte
sta es la causa de que muchas personas desconozcan que tienen
diabetes. El test de sobrecarga de glucosa, que ahora mismo es la
prueba de oro para el diagnstico, es algo incmodo de realizar,
ya que el paciente debe tomarse 75 gramos de glucosa tras la
primera toma de muestra de sangre y esperar 2 horas hasta la toma
de la segunda muestra.

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OBJETIVOS
En la presente prctica tiene los siguientes objetivos:
Objetivo Generales
Registrar los valores de absorbancia de la prueba consistente
en la toma inicial de una muestra de sangre (en ayunas de 8 a
10 horas). Luego se ingieren 75 gramos de glucosa disueltos
en agua y se vuelve a medir la glucosa luego de 30, 60 Y 90
MINUTOS sin realizar movimiento.
Determinar la cantidad de glucosa en ayunas mediante la
Absorbancia de la muestra y la muestra estndar (esto
mediante formula).
Medir la respuesta del cuerpo
frente a una sobrecarga de
glucosa.
Sirve
para
diagnosticar
diabetes
y
cuadros
metablicos
relacionados
como
la
resistencia a la insulina
Objetivos especficos
Realizar la curva de Tolerancia a la glucosa con los datos
obtenidos mediante la prctica y el clculo de la glucosa en
sangre, es decir la cantidad de glucosa en la sangre y el
tiempo en que se tomaban las muestras.

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Con esta informacin comparar como seria la curva en caso
de una persona Diabtica, normal e intolerante a la glucosa.

CONCLUSIONES
La presente prctica de laboratorio se realiz con tanto xito
ya que los niveles de glucosa en la sangre fueron alterados
durante el test de tolerancia a la glucosa, puesto que las
concentraciones no dieron resultados fuera del rango
debido.
A travs de la experimentacin con el test de tolerancia a la
glucosa nos result de gran importancia, ya que es un
examen que determina los niveles de azcar en nuestro
cuerpo, y esta herramienta es empleada para diagnosticar la
diabetes y otras enfermedades que se pueden causar por el
aumento de la glucosa en la sangre. Sin la realizacin de
este examen, muchas personas no sabran sobre su estado
de salud, y por ende muchas de ellas podran estar
propensas a contraer ciertas enfermedades catastrficas si
no son diagnosticadas y tratadas a su debido tiempo.
Asimismo, esta prctica fue muy importantes, ya que a
travs de esta se puede diagnosticar la Diabetes Mellitus, la
cual consiste en realizarla mediante la determinacin de las
concentraciones de glucosa en ayuno, y la curva de
tolerancia a la glucosa, refirindose a esta ltima como la
mejor prueba para el correcto diagnstico de DM.
Nos ayud tambin a saber cmo funciona esta prctica en
el laboratorio profesional y cules son los procedimientos en
dichas pruebas ya que este es nuestro apoyo en las
detecciones de varias patologas, y en este caso la

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Diabetes o anomalas con respecto a las concentraciones
de glucosa ya sea hipoglucemia o hiperglucemia, e incluso

el detectar el por qu estn estos valores anormales, y

cules son las causas de estos.

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CUESTIONARIO
1. Con los datos de glicemia obtenidos en el experimento
construir en un papel milimetrado una grfica de tiempo
vs. Glicemia y apreciar la curva de tolerancia a la
glucosa. (VER HOJA MILIMETRADA).
2. Como sera esta curva en el caso de una persona
normal, un diabtico y un intolerante a la glucosa.
Persona normal
Diabtico
Intolerante a la glucosa
3. Qu importancia tiene la deteccin de
microalbuminuria en una persona?
La deteccin de microalbuminuria tiene trascendental
importancia en diversas enfermedades como la diabetes
mellitus y la hipertensin arterial, constituyendo un marcador
de riesgo para la progresin de la enfermedad renal,
enfermedad isqumica del corazn y enfermedad
cerebrovascular isqumica, producto a la descompensacin
de la enfermedad de base, dao vascular sistmico,
disfuncin endotelial; tenindose en cuenta que si los vasos

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renales estn afectados tambin el resto del rbol vascular
podr estarlo.
Las personas que presentan diabetes deben hacerse este
examen anualmente, el propsito de este examen es detectar
si el paciente tiene problemas renales
Las personas con diabetes tienen mayor riesgo de dao renal.
En las fases inciales de los problemas renales, es posible que
no se manifieste ningn otro sntoma. Incluso otros exmenes
de sangre pueden ser normales.
4. Qu son y en qu casos se hace un dosaje de pptido
C y de insulina en un paciente diabtico?
El pepetido C es una prueba ms exacta del funcionamiento
de las celulas de los
islotes .Esta se realiza
para ver si la diabetes
esta en remisin y si es
posible que el paciente
no necesite insulina
exgena, o tambin
para diagnosticar el
sndrome
de
resistencia
a
la
insulina.
Es un examen de sangre que mide la cantidad de pptido C,
un subproducto que se crea cuando se produce la hormona
insulina.
El pptido C o tambin
llamado pptido conector
conecta las cadenas Ay B
de la proinsulina y es
metablicamente inactivo ,
en
la
conversin
de
proinsulina a insulina , el
pptido C es escindido de
las
cadenas
de
la

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proinsulina formndose la molcula de insulina , el pptido C y
la insulina son secretados a la circulacin.
El pptido C se mide para establecer la diferencia entre la
insulina producida por el cuerpo y la insulina inyectada en el
organismo. Cuando el pncreas produce insulina, comienza
como una molcula grande que se divide en dos partes:
insulina y pptido C. La funcin de este ltimo no se conoce.
El nivel de pptido C se puede medir en un paciente
con diabetes tipo 2 para observar si el cuerpo an est
produciendo algo de insulina. Asimismo, se puede medir en
casos de hipoglucemia (glucemia baja) para ver si el cuerpo
de la persona est produciendo demasiada insulina.
5. Cules son las complicaciones agudas y crnicas de
la Diabetes?
Los mdicos las clasifican
como
o Complicaciones
agudas
o Complicaciones
crnicas.

Las Complicaciones
pueden ser:

agudas

La Cetoacidosis Diabtica:
Es una complicacin aguda tpica de la diabetes mellitus
Tipo 1
La cetoacidosis diabtica es una descompensacin aguda
que consiste en la elevacin de la glicemia por encima de
300mg/ml, la presencia de cuerpos cetnicos en la orina.
Se produce por abandono del tratamiento con insulina, por
alguna infeccin en el diabtico, en una ciruga, embarazo,
traumatismo, transgresiones dietticas, etc.

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Esta alteracin puede ser tan grave que el paciente puede
llegar a hacer un Coma y morir.
La Descompensacin Hiperosmolar:
Es la complicacin aguda tpica de la diabetes Tipo 2.
Generalmente la glicemia es mayor de 600mg/ml, no hay
cuerpos cetnicos en orina. Esta alteracin tambin puede
acabar en coma.
Se desencadena por el abandono del tratamiento,
infecciones, algunos frmacos ( diurticos con prdida de
potasio,
difenilhidantohna,
corticoides),
transgresiones
dietticas, etc.
La

Hipoglicemia:
Se produce cuando las concentraciones de glucosa
plasmtica son anormalmente bajas, por debajo de
50mg/ml.
Se desencadena cuando el paciente se aplica una cantidad
excesiva de insulina, o la dosis de sus hipoglicemiantes
orales es elevada. Tambin se consideran causas de
hipoglicemia en un diabtico la omisin o el retraso en
alguna comida, y el ejercicio intenso. La alteracin tambin
puede llevar al coma, y a daos cerebrales irreversibles.

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El diabtico no debe olvidar hacerse un control
estricto de su enfermedad para evitar que estas
complicaciones agudas hagan peligrar su vida

Las Complicaciones Crnicas Son:

La prdida progresiva de la visin:
Que puede llevar al paciente a la ceguera. A esto los
mdicos conocemos como RETINOPATA DIABTICA.
Las alteraciones renales:
Que en muchos casos llegan a ser graves, ya que los
riones dejan de funcionar
totalmente, y los pacientes
requieren de dilisis para
sobrevivir. A esto los mdicos
llamamos
NEFROPATA
DIABTICA.
Las
alteraciones
neurolgicas:
Que se manifiestan como prdida progresiva de la
sensibilidad, sensacin de hormigueo, y dolor en manos y
pies. A veces los pacientes hacen infartos cardiacos
silentes (sin dolor) por tener alteraciones en la sensibilidad.
A esto los mdicos conocemos como NEUROPATA
DIABTICA.
El pie diabtico
continuidad en piel.

otras

alteraciones

de

Son heridas difciles de curar, sobre todo cuando hay

infeccin es difcil su recuperacin. Es por eso que en
algunos casos de pie diabtico, el paciente sufre la
amputacin del miembro afectado.

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Las complicaciones cardiacas:
Es decir el diabtico puede desarrollar un infarto cardiaco
ms fcilmente que otras personas por la obstruccin de
las arterias coronarias que llevan sangre al corazn (por la
aterosclerosis).

BIBLIOGRAFA
Diabetes Tipo 1 y deporte. Nios Para, Adolescentes y
Adultos Jvenes " Autor :Serafn Murillo Editorial : Rea 2012
Libro de qumica experimental.
Qumica General-Octava Edicin-PettucciHarwoodHerring
Educacin Teraputica en Diabetes

LINKOGRAFA
http://www.slideshare.net/MaRimbuMaRimbu/practica-de-lab
http://www.youtube.com/watch?v=WcSPEClc0ag

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http://www.hola.com/salud/enciclopediasalud/2010032145258/viajes/malaria/niveles-de-glucosa-en-lasangre/
http://www.diabetesaldia.com/index.php/prevencion/diagnostic
o-y-pruebas/curva-de-tolerancia-glucosada-o-glicosada
http://www.idf.org/webdata/docs/Spanish_GMPG%20Final
%20110108.pdf