PRUEBA A FISIOLOGIA AVANZADA-2021 NOTA: 6,8

BIOQUIMICA- X SEMESTRE
7 de mayo de 2021

Nombre: Guillermo Kaempfe Moreno

1.- Los resultados presentados en la figura se refieren a la localización de noradrenalina (NA) y de

dopamina (DA) en fracciones obtenidas al purificar la fracción vesicular en resina de intercambio
iónico.
Se incubó una preparación cruda
obtenida por centrifugación a baja
velocidad de homogenizado de corazón
incubado con Tirosina Tritiada como
marcador (Prep 1).
(ver esquema de fraccionamiento y Fig
1A)

9000xg, 10 min
P S (Prep. 1)

50000 xg, 30 min

P (Prep 3) S (Prep 2)

Posteriormente en B se muestra lo mismo, pero incubando la Prep 2 y finalmente en C, incubando

la Prep 1 además con reserpina (impide el ingreso de NA a la vesícula)

Explique y dé un significado funcional para: Figura 1A (2 ptos); Fig 1B (2 puntos) y Fig 1C (2

puntos). Un punto de base.
R: La figura 1A demuestra la presencia de ambos neurotransmisores en la preparación 1, ya que se
logra cuantificar radioactividad en algunas fracciones de esta (otorgada por el cultivo con tirosina
tritiada). Luego en la figura 1B logramos observar, a través de la medición de radioactividad,
solamente la presencia de Dopamina y la ausencia total de Noradrenalina, es necesario recordar
que luego de la segunda centrifugación todo el líquido sobrenadante corresponderá a la porción
citosólica de la célula y lo demás formará parte del precipitado. Todo esto sugiere que ambos
neurotransmisores se ubicaran en distintos sitios celulares, como podemos inferir de este
experimento la DA se encontrara en el citosol, mientras que la NA probablemente se hallara al
interior de alguna vesícula que este presente en el precipitado. Finalmente, en la figura 1C al usar
un fármaco que impedirá el ingreso de DA a la vesícula, y ver que no se encontrará presente la NA
en la preparación 1, se puede deducir que es necesaria la incorporación de dopamina a la vesícula
para permitir la hidroxilación necesaria que la transformara a noradrenalina, de esto podemos
creer que muy probablemente aquí estará la enzima encargada de esta transformación, además
sirve como confirmación para ratificar la teoría que ambos neurotransmisores se encuentran en
distintos lugares dentro de la célula.

NOTA: 1.5 + 2+ 2+1= 6,5

2.- Se realiza el siguiente protocolo experimental: Se administra estradiol (EV) a ratas y después de
60 días (EV60), se desarrolló síndrome de ovarios poliquísticos. Al estudiar el ovario de determinó
la capacidad de liberación de la Noradrenalina recién incorporada (Fig 4.) y también se estudió los
receptores B-adrenérgicos por técnica de radioligando (Fig 5)

Analice los datos y el efecto producido en estos parámetros en condiciones controles y de ovario
poliquístico) y explique la relación que se establece entre la liberación de Noradrenalina y los
receptores B-adrenérgicos en el ovario total y en dos de sus constituyentes (células de la granulosa
y ovario residual). El ovario residual corresponde a lo que queda del ovario (cel de la teca e
intersticio celular) cuando se saca selectivamente las células de la granulosa.
R: En la Figura 4 podemos observar que la fracción liberada de noradrenalina se vera muy
aumentada en los primeros minutos, luego caerá a niveles normales, pero se puede ver
claramente la diferencia entre el ovario sano y el ovario patológico, ya que la liberación de
neurotransmisor en el control es mucho menor que en el ovario poliquístico. Por otra parte,
también podemos percibir en la figura 5, al analizar los receptores B-adrenérgicos, que el EV
presenta niveles similares de estos con la fase M, pero la principal diferencia que presenta con
este es en ovario residual, si bien el ovario total y las células gránulos mantienen sus niveles
normales, el ovario residual presenta una clara disminución de estos receptores. De esto se puede
concluir que la disminución de los niveles de estos receptores, provocara que exista una mayor
descarga de noradrenalina para poder suplir los efectos de esta patología, además se ve que las
células responsables de esto son las células de la teca y el intersticio celular, lo cual producirá una
fase constante similar a la fase M.

NOTA: Fig 4: 7; Fig 5 :7,0 Nota: 7,0