TAREA 4 CONOCER TECNICAS FUNDAMENTALES PARA IDENTIFICAR Y

MEDIR BIOMASA MICROBIANA

POR:
ERICA YOHANA TEJADA MOLANO
LEBER OSIRIS PEREA CARABALI
NEIDER ALEXANDER CORTES GALVIS

PRESEANTADO A:

DIANA CRISTINA MEDINA VALENCIA

UNIVERSIDAD NACIONAL ABIERTA Y A DISTANCIA UNAD.

AGRONOMIA
Noviembre de 2021
 INTRODUCCION

La siguiente actividad se desarrolla con el fin de estudiar la relación entre diferentes tipos de
microorganismos en un mismo hábitat, mediante un experimento basado en la columna de
Winogradsky que permite bajo condiciones controladas el estudio de comunidades microbianas
con un montaje sencillo, simulando un macro ecosistema que refleja como los microorganismos
autótrofos y heterótrofos ocupan micro espacios altamente específicos de acuerdo con sus
necesidades vitales.
De igual manera se procedió a realizar un experimento con trapa de gasa con la
finalidad de obtener resultados probatorios de influencias de microorganismos presentes
en el suelo
Como también simular procedimiento de un laboratorio virtual se determinó la tinción de
gram su composición tipo, y medio de crecimiento, siembra en agar de organismos, técnicas de
siembra y la identificación de bacterias gram positivas y gram negativas a través de las colonias
de aislamiento.

OBJETIVO GENERAL
Distinguir desde el conocimiento teórico y el fundamento práctico, la demostración y
cuantificación de la actividad microbiana en suelos.

OBJETIVOS ESPECIFICOS

 Capturar microorganismos del suelo por intermedio de trampas de arroz como fuente de
carbohidratos
 Realizar por medio de laboratorio virtual la identificación de bacterias gram positivas y
gram negativas utilizando herramientas en agar.
 Conocer y Comprender los procedimientos y técnicas propias para el análisis
microbiológico de microorganismos del suelo.

B. ENSAYO DE LA COLUMNA DE WINOGRADSKY

MATERIALES:
 1 botella de PET de 500 mililitros (botella de plástica de agua o gaseosa) lo más clara y
lisa posible para facilitar entrada de luz
 Agua a temperatura ambiente previamente hervida  Suelo preferiblemente rico en
materia orgánica (oscuro)
 Fuente de carbono (puede ser cualquier tipo de papel finamente picado, por ejemplo:
papel periódico, papel toalla, servilletas, papel higiénico, etc.)
 Fuente de Calcio (puede ser Carbonato de Calcio, cascara de huevo molida, tiza molida)
 Fuente de azufre (puede ser sulfato de calcio, sulfato de magnesio o una yema de
huevo cocida).
 Papel film, también llamado vinilpel (para sellar la superficie de la botella a la cual se
cortará la parte superior)
 Elástico de caucho (para apretar el papel film alrededor de la parte superior de la
botella).

METODOLOGIA

Para el ensayo de la columna de Winogradsky, se procedió tomando una botella plástica,

cortando la parte superior de esta, llenamos la 1/3 parte de la botella con suelo, materia orgánica,
se adiciono una fuente de carbono 1/3 de la botella, en este caso utilice tiras de papel servilleta,
una fuente de calcio 1/3 de la botella, que en mi caso utilicé cascaras de huevo, una fuente de
azufre que fue una yema de huevo cocida, se adiciono uno por uno cada material y se compacto
uno con el otro a medida que se iban introduciendo en la botella, finalmente se agregó 1/3 de
agua, dejando espacio de aire, se selló con papel vinipel, se aseguró con un caucho y se dejó con
exposición al sol, para evidenciar y documentar la evolución hasta completar la semana 6 para
posterior análisis

Semana Imagen Observaciones

1 En la parte inferior Se sitúan los

tierra se observa en materiales por
la media sulfatos y capas por efecto de
 en la superior y en el la luz solar.
inferior aire
2 Se observa la Se observan gases y
sedimentación de algunas partes de
todos compuestos material orgánico
flotante. Y partes
negras en la parte
baja.

3 La fuente de En la superficie se
carbono flota por el observa una ligera
agua, la fuente de capa microbiana de
calcio se sedimenta, color verde
se mezclan todos los (fotosintesis) y la
materiales aparicion de
burbujas de aire.

4 el principio de En la parte superior

carbono flota y la e inferior aparece
fuente de azufre y un tono rojizo ,
calcio se asienta bacterias rojas no
del azufre
(rodospirillum,
rhodopseudomonas
)
5 En la parte superior Se observa poca
se observa una capa intensidad del rojo
verde, microbiano, violeta,. El color
agua color verde rosado nos indica
oscuro e inferior una que es un hongo
ligera capa roja fusarium un hongo
patógeno.

6 Se puede observar El color verde

una capa superior de proviene del hongo
color verde, un trichoderma, hongo
ligero color amarillo. benefico.
https://www.youtube.com/watch?v=O-Ssirt_Dig&feature=youtu.be

IMAGEN OBSERVACIONES
En la parte inferior de Bacterias sulfato
la columna se observa reductoras
un color negro Quimioheterotrofa
oscuro Anaerobias (02)

Bacterias metogeneas
Quimioheterotrofa
Anaerobias sin (02)

Verdes Bacterias verdes

sulfuraceas Atotrofas
fotosintéticas
Anoxigénicas,
anaeróbicas

C. Ensayo para el aislamiento de microorganismos del suelo

Registro fotogràfico del inicio del montaje de las trampas.

MATERIALES:
 4 Frascos de vidrio (de los usados para mermeladas, por ejemplo).
 Gasa o tela delgada (lino o muselina) que permita cubrir la boca de cada frasco.
 Bandas de caucho.
 15 gramos de arroz por cada frasco.
 Olla exprés o baño maría.
METODOLOGÍA:
Se introdujo arroz cocido sin sal ni aliños en 4 tarros de vidrio previamente lavados y secos. Se
taparon con una gasa y se sujetaron con bandas de caucho para evitar el ingreso de tierra. Se
llevaron los frascos al baño maría por 20 minutos para esterilizar. Se llevaron las 4 trampas a la
rizosfera del suelo (zona donde se encuentran la mayoría de raíces secundarias) de suelos con
diferentes coberturas. Se ubican de la siguiente manera:
2 frascos boca arriba, un frasco boca abajo y el último frasco de medio lado. Se recuperan los
frascos después de 8 días.
A continuación se muestran los resultados obtenidos de las trampas de arroz, ubicadas en la
rizósfera del suelo para aislar las comunidades de microorganismos. Esto nos permite identificar
la calidad del suelo y la presencia de hongos y microorganismos patógenos y benéficos.

FRASCO MUESTRA OBSERVACION

1 Esta es una de las trampas ubicadas
boca arriba, se observan hongos
grisáceos y rojos, llamados
Rhizoctonia y Fusarium, hongos
patógenos causantes del daño y
pudrición de la raíz de la planta.
2 A continuación se observa la
segunda trampa ubicada boca
arriba, en ella se observan hongos
de color verde y blancos, llamados
trichoderma y bacillus , hongos
benéficos capaces de combatir el
hongo patógeno fusarium, presente
también en esta muestra.
3 Se observa la muestra que se
colocó en forma horizontal, donde
se observan la presencia de hongos
Fusarium hongos patógenos, y una
muy poca cantidad de hongos
benéficos como los Bacillus.

4 en esta trampa que fue la que se

ubicó boca abajo podemos apreciar
la presencia de hongos amarillos,
característicos de Beauveria
Bassiana, hongo benéfico, así
como hongo de color blanco,
característico de los bacillus hongo
benéfico.
Montage inicial trapa
de arroz

Montaje final

Muestras
representativa
 CONCLUSIONES

 En el ensayo de la columna de winogradsky encontré coloraciones negras posiblemente

por precipitados negros por sulfuros metálicos.
 En la capa superior encontré coloraciones verdes posiblemente por foto autótrofos
aeróbicos, cianobacterias y/o algas verdes, así como bacterias purpuras del azufre.
 En el experimento de trampa de arroz, encontramos la manifestación del hongo
trichoderma, hongo benéfico.
 Se capturaron microorganismos del suelo por medio de trampas de arroz , con presencia
de hongos benéficos como basillus y Beauveria Bassiana, así como la presencia de
hongos patógenos como Fusarium y Rhizoctonia.
 Se identificaron bacterias Gram positivas y Gram negativas por medio de siembras en
agar utilizando herramienta virtual.
ANEXOS
¿A qué se deben puntualmente cada uno de los patrones de color observados en la columna de
Wionogradsky?
Durante el desarrollo del ejercicio pudimos observar una capa verde superficial que corresponde
posiblemente a algas y cianobacterias.
Bacterias rojas características del azufre tales como rhodospirillum, Rhodopseudomonas.
Bacterias negras, reductoras del sulfato, tales como desulfovibrio.
Bacterias negras fermentadoras de celulosa como Clostridium.
Bacterias rojas del azufre como Chomatium.
Bacterias verdes del azufre, Chlorobuim
El color amarillo corresponde a bacterias oxidadoras del azufre aerobias.
( Beggiatoa,thiobacillus,thiarthix.)

Bacterias negras metanogenicas y quimiolitrofos de azufre.

¿Qué microorganismos identificó en la rizósfera de las plantas donde instaló la trampa de arroz?
¿Por qué se usa arroz en la trampa?
Se identificaron Rhizoctonia, Fusarium, Trichoderma, y Basillus
El arroz se utiliza por su alto contenido de almidones del tipo amilasa y amilopectina, que
proporcionan energía de fácil digestión y disponibilidad que atrae los microorganismos para ser
capturados.
Cuando se realiza la tinción de Gram y se observan las placas en el microscopio. ¿Por qué las
bacterias Gram positivas se ven moradas y las Gram negativas se ven rosadas?
Al realizarse la tinción de Gram, se presenta el morado en las bacterias Gram, porque el color
queda atrapado en la capa gruesa de la célula, en cambio las bacterias Gram negativas poseen
una capa más delgada y no retiene lo suficiente el color motivo por el cual se ven rosadas.
 BIBLIOGRAFIA

[ CITATION htt20 \l 3082 ]

http://www.ebooks7-24.com.bibliotecavirtual.unad.edu.co/stage.aspx?il=5285&pg=&ed=
https://www.youtube.com/watch?v=WcXEH_mIYSE
http://learn.chm.msu.edu/vibl/content/streakplate/streak_plate/streak_plate.html
http://vlab.amrita.edu/index.php?pg=bindex&bsub=login_page