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Practica 5 - Pruebas para Carbohidratos
Practica 5 - Pruebas para Carbohidratos
DEPARTAMENTO DE QUIMICA
BIORGÁNICA
1. INTRODUCCION
Los carbohidratos contienen en su composición química los grupos funcionales hidroxilo -OH
con propiedad de alcohol, y el carbonilo C=O que les da propiedades de aldehídos o cetonas,
por lo que se les conoce como aldosas o cetosas. Su unidad básica son los monosacáridos que
contienen distinto número de átomos de carbono en su cadena. El grupo carbonilo libre
presente en monosacáridos y algunos disacáridos, es muy reactivo. La presencia de este grupo
se emplea para diferenciar los que lo tienen libre, que tienen propiedad reductora y los que no
lo tienen libre obteniéndose carbohidratos no reductores. Existen varias pruebas para
caracterizar a los carbohidratos específicos dependiendo de las propiedades fisicoquímicas de
los mismos. Algunas de ellas permiten identificar a los que son reductores, otras a los que no
son reductores, otras a cualquier carbohidrato independiente de su poder reductor. Para tener
idea de la sensibilidad de los distintos métodos deben probarse soluciones de concentraciones
de 1-10 g/L. Se utilizan mezclas problemas comestibles tales como jugos de frutas, panela,
miel, etc.
2. OBJETIVO
3. CONSULTAS PRELIMINARES
3.1 ¿Cómo se clasifican los carbohidratos de acuerdo al número de moléculas que contengan?
3.4 Investigue las coloraciones y aspectos de las soluciones cuando dan positiva las pruebas
de Molisch, Seliwanoff, Bial, Benedict y Lugol ?
MATERIALES CANTIDAD
Pipetas graduadas de 5 mL 2
Pipeta graduada de 1 mL 1
Vasos de precipitado de 250 mL 2
Vaso de precipitado de 100 mL 1
Varilla de vidrio 1
Tubos de ensayo 20
Gradilla 1
Pinza de madera 1
Goteros 3
Propipeta 1
Termómetro 1
Frasco lavador 1
Trípode 1
Mechero 1
Malla de asbesto 1
5. REACTIVOS
SUSTANCIAS CANTIDAD
Glucosa, Galactosa, Fructosa, Ribosa, Lactosa, Sacarosa 2% 100 mL c/u
Almidón 2% 5 mL
Jugo de fruta recién preparado (de color claro) 10 mL
Agua destilada 250 mL
Reactivo de Molisch (α-naftol en alcohol + H 2 SO 4 concentrado) 10 mL
Reactivo de Bial (orcinol + HCI concentrado) 30 mL
Reactivo de Barfoed (acetato de cobre + CH 3 COOH glacial) 80 mL
Reactivo de Benedict (CuSO 4 , Na 2 CO 3 , tartrato de sodio) 100 mL
Reactivo de Seliwanoff (resorcinol + HCl) 80 mL
Solución de lugol (0.01 M de I 2 + 0.12 M de Kl) 10 mL
6. EQUIPOS
EQUIPOS CANTIDAD
Plancha de calentamiento 1
Vortex (agitador mecánico) 1
7. PROCEDIMIENTO
7.1 Prueba de Molisch: El ácido sulfúrico concentrado hidroliza el enlace glucosídico y forma
monosacáridos que pueden ser deshidratados formándose furfural e hidroximetilfurfural, ellos
se combinan después con la α-naftol originando un complejo que puede ser de color purpura,
morado, rojo violeta.
7.2 Prueba de Seliwanoff: las cetosas se deshidratan más rápidamente que las aldosas dando
furfural e hidroximetilfurfural, que se condensan con resorcinol para formar un complejo que
según la concentración puede ser rosado cereza; por lo tanto debe de evitarse un
calentamiento prolongado de la muestra que se estudia.
7.3 Prueba de Bial o de orcinol: Cuando se calientan pentosas con ácido clorhídrico
concentrado se forma furfural que se condensa con el orcinol en presencia de iones férricos y
se obtiene un complejo de color verde azulado o verde oliva. El calentamiento prolongado de
algunas hexosas forma hidroximetilfurfural que con el orcinol da un complejo de color amarillo
oscuro.
7.4 Prueba para determinar azucares reductores. Reacción de Benedict: Los carbohidratos
que son reductores reaccionan con una solución CuSO 4 , en un medio alcalino permitiendo que
se forme el óxido cuproso Cu 2 O de color amarillo rojizo. Los diferentes colores que pueden
aparecer se deben al tamaño de las partículas formadas.
En la tabla 1 coloque el signo + para prueba positiva o el signo – para prueba negativa para
cada una de los diferentes experimentos realizados en los tubos de ensayo. Cuando realice el
informe, coloree cada círculo con los colores observados en cada prueba.
Almidón ⃝ ⃝ ⃝ ⃝ ⃝
Lactosa ⃝ ⃝ ⃝ ⃝ ⃝
Sacarosa ⃝ ⃝ ⃝ ⃝ ⃝
Glucosa ⃝ ⃝ ⃝ ⃝ ⃝
Galactosa ⃝ ⃝ ⃝ ⃝ ⃝
Ribosa ⃝ ⃝ ⃝ ⃝ ⃝
Fructosa ⃝ ⃝ ⃝ ⃝ ⃝
Blanco ⃝ ⃝ ⃝ ⃝ ⃝
Muestra problema ⃝ ⃝ ⃝ ⃝ ⃝
OBSERVACIONES:
9. preguntas complementarias.
9.1 ¿Cómo reacciona el lugol (yodo) con el almidón para producir el color azul característico?
9.2 ¿Cuál es la reacción química que se da con el reactivo de Benedict para una prueba
positiva?
9.3 ¿Por qué la fructosa da positiva la prueba con el reactivo de Benedict, el cual es específico
para azucares reductores?
9.5 ¿Por qué se dice que la lactosa tiene un grupo aldehído potencial?
9.6 ¿Por qué el glucógeno y el almidón dan resultados negativos como azucares reductores?
10.1 RECUPERACIÓN.
No aplica.
10.2 DESACTIVACIÓN.
No aplica.
Los residuos generados en el procedimiento 7.1 deben depositarse en el recipiente para ácidos
y bases, los generados en 7.2 y 7.5 en el recipiente de hidrocarburos no halogenados, los del
7.3 en el recipiente para solventes orgánicos y los residuos de las pruebas 7.4 y 7.6 deben
depositarse en el recipiente de agroquímica.
11. BIBLIOGRAFIA