RESUMEN: “optical biosensor consisting of glutathione-s-transferase for detection

of captan”

08.03.2021

UNIVERSIDAD AUTÓ NOMA DE AGUASCALIENTES

CENTRO DE CIENCIAS BÁ SICAS
DEPARTAMENTO DE INGENIERÍA BIOQUÍMICA
BIOTECNOLOGÍA AMBIENTAL
VO
8 SEMESTRE | LICENCIATURA EN BIOTECNOLOGÍA
DOCENTE: JUAN ANTONIO LOZANO Á LVAREZ

REPORTE DE LA PRÁCTICA #2

RESUMEN: “OPTICAL
BIOSENSOR CONSISTING OF
GLUTATHIONE-S-TRANSFERASE
FOR DETECTION OF CAPTAN”

EQUIPO 1.
JIMÉ NEZ HERMOSILLO, KARLA ANDREA

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of captan”

Los captanes son fungicidas no sistémicos que se utilizan para

controlar Enfermedades de muchos cultivos de frutas, ornamentales y
hortalizas, como moho y bacterias patógenos. Y los capitanes son
ampliamente utilizados en agricultura para la protección de plantas
propósitos. Sin embargo, el captan se conoce como un potencial
carcinógeno y una sustancia química dañina para un ecosistema
acuático Por lo tanto, la detección rápida y sencilla de captan en el
agua contaminada se requiere en los suministros de agua. El sustento
aplicación de capitanes y la creciente preocupación por la posible
contaminación del agua requiere el desarrollo de un método de
detección rápido y sensible. Los métodos de medición convencionales,
como la cromatografía de gases (GC) y la cromatografía líquida de alta
resolución (HPLC), son muy costosos y requieren mucho tiempo,
porque requieren equipos de laboratorio sofisticados; lo que ha llevado
a la investigación a emplear biosensores que utilizan reacción
enzimática ya que son equipos mas baratos y fáciles de manejar,
además que permiten la medición simultánea para una gran cantidad
de muestras. Sin embargo, el biosensor de enzimas ópticas para
detectar captan no ha sido estudiado. Los sistemas de sensores
ópticos tienen muchas ventajas en comparación con los otros sistemas
de sensores debido a su capacidad de detección remota y múltiple.
Los sensores Óptico no se interfieren con un campo eléctrico y son
fácil de miniaturizar, lo que puede conducir al desarrollo de sensores
muy pequeños, ligeros y flexibles.
Por lo que en este trabajo, se diseño un biosensor óptico que
consta de una película de gel inmovilizada con glutatión-S-transferasa
(GST) se desarrolló para detectar captan en agua contaminada. El
esquema de detección se basó en la disminución del producto
amarillo, s- (2,4-dinitrobenceno) glutatión, producido a partir de
sustratos, 1-cloro-2,4-dinitrobenceno (CDNB) y glutatión (GSH), debido
a la inhibición de Reacción de GST por captan. Se detectó la
absorbancia del producto como resultado de la reacción enzimática y
se guió la luz a través de las fibras ópticas. El reactor enzimático del
sistema sensor se fabricó mediante la técnica de atrapamiento de gel
para la película de GST inmovilizada.
Se demostró que la mayor diferencia de absorbancia entre los
sustratos y los productos se detectaron a 335 nm. Sin embargo, la
absorbancia significativa de la solución de captano se detectó en esta

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of captan”

longitud de onda. Además, para fabricar fibra óptica sistema de sensor

para detectar la absorbancia en una longitud de onda de 335 nm, se
debe utilizar una fibra de sílice fundida como luz pero este material era
muy caro. Por lo tanto, se reemplazo por una fibra de plástico
económica (diámetro 3 mm) con un rango de aplicación de 400 a 700
nm para fabricar el sistema de biosensor económico, y todos los
experimentos se llevaron a cabo en la longitud de onda de 400. La
diferencia de absorbancia a 400 nm representada la formación del
producto debido a la reacción enzimática. En el ausencia de
inhibidores, los sustratos fueron completamente convertido. A medida
que se introdujeron los inhibidores, la absorbancia disminuyó debido a
la inhibición de GST reacción y este cambio de absorbancia fue
proporcional a la concentración de inhibidor.
El biosensor óptico que consta de La película de gel GST-
inmovilizado fue construida para la simple y directa detección de
captan en agua contaminada. El cambio de absorbancia del producto
inducido directamente por La inhibición de captan en GS- inmovilizada
se detectó con éxito mediante un sistema sensor propuesto. los GST
inmovilizado tuvieron la máxima actividad a pH 6.5. Las
concentraciones óptimas de sustratos fueron determinado con 1 mM
tanto en CDNB como en GSH. las cantidades óptimas de enzima se
determinaron como 100 mg / ml y la estabilidad de la enzima
inmovilizada fue sostenido hasta 30 días. El biosensor propuesto
podría detectar con éxito el captan hasta 2 ppm y el el tiempo de
respuesta a la señal constante del sensor fue de aproximadamente 15
min. Se sabía que el GST utilizado en este estudio tiene resistencia a
la mayoría de otras sustancias tóxicas, especialmente insecticidas
(Perry y col., 1998). Por lo tanto, se puede utilizar un sistema de
biosensor inmovilizado GST propuesto para el análisis de captan en
muestras reales contaminadas. En conclusión, captan en agua
contaminada podría detectarse fácilmente y barato por un sistema de
sensor propuesto en comparación con método de análisis
convencional (Ingram et al., 1997; Wittmann y Schmid, 1993).

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of captan”

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