BIOSENSORES

Son dispositivos compactos de anlisis conformados por un elemento de reconocimiento biolgico (cido nucleico, enzima, anticuerpo, etc.) asociado a un sistema de transduccin que permite procesar la seal producida por la interaccin entre el elemento de reconocimiento y el analito. El principio de deteccin de un biosensor se basa en la interaccin especfica entre el compuesto o microorganismo de inters y el elemento de reconocimiento. Como resultado de esa unin se produce la variacin de una o varias propiedades fisicoqumicas (pH, transferencia de electrones, de calor, variacin de propiedades pticas, etc.) que detecta el transductor.

Ing Fredy Molina Rodrguez

Este sistema transforma la respuesta del elemento de reconocimiento en una seal electrnica indicativa de la presencia del analito sometido a estudio o proporcional a su concentracin en la muestra.. El trmino biosensor comenz a utilizarse a partir de 1,977, designando como tal la unin entre un material biolgico y un transductor fsico A partir de ese momento, el diseo y las aplicaciones de los biosensores en distintos campos de la qumica analtica y en el control de procesos on line ha continuado creciendo.
Ing Fredy Molina Rodrguez

Funcionamiento General de los Biosensores

Elementos Componentes del Sistema:
Elemento de Reconocimiento Analito Otros componentes de la muestra

Funcionamiento:

En una muestra compleja, el elemento de reconocimiento biolgico es capaz de discriminar entre los distintos componentes de la misma e interaccionar con el compuesto a analizar. Una vez producida la interaccin se dispara una seal que es conducida por el transductor. La seal as transmitida es convenientemente registrada y almacenada para su Ing Fredy Molina Rodrguez posterior tratamiento.

Caractersticas de los Biosensores

Alta Sensibilidad: para el anlisis de ciertos analitos con efectos txicos Sensibilidad:
sobre la salud humana y animal, incluso a concentraciones del orden de partes por billn.

Alta Selectividad: para que el dispositivo interaccione exclusivamente con el Selectividad:

compuesto de inters y no con otros de propiedades similares. Se consigue mediante elementos de reconocimiento muy especficos.

Alta Fiabilidad: Los sistemas de transduccin se disean de manera que no Fiabilidad:

puedan ser alterados (o sean mnimamente) por la muestra y no tengan problemas de ruidos.

Tiempo de vida largo: que no obligue a sustituciones frecuentes del largo:

dispositivo siesta integrado a la lnea de produccin de la industria. La estabilidad qumica, fsica y mecnica del elemento de reconocimiento condicionan su duracin; sin embargo, debemos considerar de que los componentes biolgicos por su propia naturaleza cuentan con una vida media limitada.
Ing Fredy Molina Rodrguez

Bajo costo de produccin: En produccin a gran escala bajan los costos produccin:
(economa de escala); sin embargo, la disponibilidad limitada de algunas enzimas y la existencia de fases crticas en su construccin dificultan la fabricacin en masa.

Tiempo de anlisis corto: que posibilite un tiempo de actuacin rpida corto:

(retiro o correcciones). Muchos biosensores consumen pocos minutos en cuantificar el compuesto de inters y no requieren de un periodo de espera largo hasta el siguiente anlisis.

Pretratamiento de la muestra innecesario: que conlleva a un ahorro de innecesario:

tiempo, materiales y reactivos; sin embargo, en ciertas determinaciones son imprescindibles las etapas de concentracin y purificacin, para asegurar la eliminacin de interferencias y la presencia de una cantidad suficiente de analito en el pequeo volumen utilizado.

Manejo sencillo: Esta tecnologa no requiere personal cualificado. sencillo: Capacidad de Anlisis en Tiempo Real: esta caracterstica es de especial Real:
importancia en Control de Procesos, ya que permite controlar los parmetros deseados de forma inmediata y automtica.
Ing Fredy Molina Rodrguez

Porttiles: Porttiles: para que sea posible realizar anlisis in situ. Automatizables: Automatizables: Prescindir del control manual de estas unidades facilita su
integracin dentro de los sistemas que monitorizan los procesos industriales.

Miniaturizables: Miniaturizables: Gracias al desarrollo de la microelectrnica y la

nanotecnologa, se ha logrado reducir las dimensiones de estos dispositivos. Es por ello que pueden ensamblarse varios dispositivos en un mismo sistema que realiza varias tareas a la vez o que el volumen de la muestra o localizacin de la medida son factores limitantes.

Pocos requerimientos operativos y de almacenamiento: que faciliten su

empleo y no supongan un coste adicional. En el caso de los componentes biolgicos pueden necesitar condiciones controladas (pH, Temperatura) para su uso y conservacin debido a su baja estabilidad

Capacidad de Multianlisis: Ciertos sensores llevan a cabo la Multianlisis:

determinacin de diferentes analitos en forma simultnea.
Ing Fredy Molina Rodrguez

Clasificacin de los Biosensores

Los Biosensores pueden clasificarse en funcin del tipo de interaccin que se establece entre el elemento de reconocimiento y el analito; el mtodo utilizado para detectar dicha interaccin; la naturaleza del elemento de reconocimiento; o el sistema de transduccin.

En la prctica, la eleccin del material biolgico depende de las caractersticas del compuesto a analizar. Por ejemplo si se trata de detectar una sustancia alrgena se utilizan anticuerpos. La eleccin del transductor esta condicionada por el tipo de elemento de reconocimiento elegido, ya que ste determina cul ser la variacin en las propiedades fsico-qumicas que ocurra como consecuencia de la interaccin.
Ing Fredy Molina Rodrguez

Tipos de Interaccin
se basan en la utilizacin de biocatalizadores, que son elementos que favorecen que ocurra una reaccin qumica en la cual a partir de uno o varios sustratos se forman uno o varios productos conocidos sin consumo del biocatalizador, que se regenera y puede ser utilizado de nuevo. Enzimas Clulas Completas (bacterianas, fngicas, protozoos, etc.) Orgnulos Subcelulares (cloroplastos completos, tilacoides o mitocondrias) Tejidos

Sensores

BIOCATALTICOS: BIOCATALTICOS:

Sensores de BIOAFINIDAD: se basan en la interaccin del analito de BIOAFINIDAD:

inters con el elemento de reconocimiento, sin que exista transformacin cataltica, sino que se produce una reaccin de equilibrio en la que se forma un complejo analito-receptor. Anticuerpos Receptores Clulas Completas Lectinas Ing Fredy Molina Rodrguez cidos Nucleicos, etc.

Ing Fredy Molina Rodrguez

Tcnicas de Inmovilizacin

Ing Fredy Molina Rodrguez

Sistemas de Transduccin
Transductor, es el elemento que convierte las variaciones de las propiedades fsicas o qumicas que se producen por la interaccin entre el elemento de reconocimiento y el analito en una seal que puede ser amplificada, almacenada y registrada.

Transductor Electroqumico:
Transforma la seal que se produce por la interaccin entre el sistema de reconocimiento y el analito a detectar, en una seal elctrica.

En un sensor electroqumico amperomtrico, la interaccin entre el elemento de reconocimiento y el analito provoca la conversin electroqumica de una especie redox que genera una corriente Ing Fredy Molina Rodrguez elctrica.

Se tiene cuatro tipos de transductores, conductimtricos, potenciomtricos amperomtricos e impedimtricos, en funcin de si se detectan cambios en la conductividad, en el potencial, en una corriente generada o en la impedancia. En general se utilizan con los elementos de reconocimiento biocatalticos ya que las reacciones enzimticas generan aparicin de sustancias electro activas, cambios en el pH o en el potencial, etc.

Ing Fredy Molina Rodrguez

Dentro de los aspectos favorables y contrarios de estos transductores tenemos:

Transductor ptico:
Los transductores pticos se basan en la medicin de las variaciones que se producen en las propiedades de la luz como consecuencia de la interaccin fsica o qumica entre el analito a detectar y el elemento de reconocimiento biolgico del biosensor. Las bases fsicas de este tipo de sensores son los cambios que ocurren en absorcin, fluorescencia, luminiscencia, dispersin o ndice de refraccin, cuando la luz se refleja en las superficies de reconocimiento. Los transductores que tiene propiedades pticas son muy variados en funcin de las propiedades, incluyendo sensores de fibra ptica (mas usados), de resonancia de plasmodes y de onda evanescente. Ing Fredy Molina Rodrguez

1. Sensor de Fibra ptica (optopodo u optropodo): Consisten en una fibra ptica, en uno de sus extremos se inmoviliza el elemento de reconocimiento (tipo biocataltico o de bioafinidad), y en el otro el elemento de deteccin. Es necesaria la utilizacin de marcadores, que pueden ser indicadores pticamente activos como colorantes sensibles al pH, a la concentracin de O2 o H2 O2, molculas fluorescentes y en menor medida, molculas bio o quimioluminiscentes. Como consecuencia entre la interaccin entre el analito y el elemento de reconocimiento se produce un cambio detectable en el marcador que se propaga por la fibra ptica hacia el detector.

Ing Fredy Molina Rodrguez

Transductor Piezoelctrico:
Los sistemas de transduccin piezoelctricos, msicos, gravimtricos o acsticos miden cambios directos de masa inducidos por la formacin del complejo antgeno-anticuerpo. Los cristales se recubren con el elemento de reconocimiento (que suele ser de bioafinidad anticuerpos, lectinas, etc.) y se pone en contacto con la muestra que contiene el analito que se desea detectar.

omo consecuencia de la interaccin entre el elemento de reconocimiento y el analito, se produce un cambio en la frecuencia de resonancia del cristal.
Ing Fredy Molina Rodrguez

Los dos tipos principales son: Bulk acoustic wave (BAW): La resonancia ocurre en toda la masa del cristal Surface acoustic wave (SAW): La resonancia ocurre solo en la superficie del cristal Dentro de los aspectos favorables y contrarios tenemos:

Ing Fredy Molina Rodrguez

Transductor Termomtrico:
Los sistemas de transduccin termomtricos se basan en la deteccin del calor generado en las reacciones enzimticas exotrmicas que se pueden relacionar con la concentracin del analito. Los cambios de temperatura mencionados normalmente se determinan por medio de termistores a la entrada y a la salida del dispositivo en el que se encuentran inmovilizadas las enzimas.

omo consecuencia de la interaccin entre el elemento de reconocimiento y el analito, se produce una reaccin exotrmica que es proporcional a la concentracin de analito. El inconveniente que presentan es las prdidas de calor por radiacin, conduccin o conveccin que puedan tener.
Ing Fredy Molina Rodrguez

Transductor Nanomecnico:
En los transductores nanomecnicos el elemento de reconocimiento biolgico se inmoviliza sobre una superficie de una micropalanca de silicio, que se sumerge en una muestra lquida. La interaccin entre el elemento de reconocimiento y el analito produce un cambio diferencial en la tensin superficial del lquido y la micropalanca sufre una respuesta de tipo nanomecnico que consiste en un cambio en la deflexin y de la frecuencia de resonancia.

El aumento de la masa, producto de la interaccin entre el analito y el elemento de reconocimiento provoca un curvamiento de la micropalanca.
Ing Fredy Molina Rodrguez

Control de Procesos
Los sistemas de monitorizacin continua en un proceso industrial permiten detectar en tiempo real los posibles errores de la cadena de produccin para subsanarlos de manera inmediata. Hasta el momento se ha utilizado en el control de parmetros como el pH, la temperatura, la presin, etc. Gracias a las tecnologas de biosensores ahora tambin pueden determinarse y cuantificarse on line diversos compuestos de gran importancia.

Compuestos monitorizados en tiempo real mediante la tecnologa de los biosensores.

Ing Fredy Molina Rodrguez

La utilizacin de biosensores para la monitorizacin en tiempo real de los analitos mencionados en la tabla anterior, conlleva a menores prdidas econmicas para el fabricante. Adicionalmente, estos dispositivos pueden integrarse en el sistema de Anlisis de Peligros y Puntos de Control Crtico (APPCC) y verificar que el proceso se ha realizado correctamente. A pesar de todo, esta tecnologa ve limitado su uso en el control de procesos por varios motivos: El corto tiempo de vida de los sensores enzimticos. La necesidad de calibrarlos con frecuencia. Falta de una respuesta fiable a diferentes concentraciones o con condiciones variables en el medio.

Bibliografa
www.madrimasd.org/informacinidi/biblioteca/publicaciones/doc/vt-1 vtbiosensores.pdf
Ing Fredy Molina Rodrguez