MICROPIPETAS

PRESENTADO A: ALVARO DEL CASTILLO PEREIRA

PRESENTADO POR : GABRIELA HIGUITA MEZA

GERDEL CANTILLO BARRIOS
ADELA SOLIS MARCHENA

BACTERIOLOGÍA III SEMESTRE

UNIVERSIDAD METROPOLITANA
BARRANQUILLA - ATLÁNTICO
2021

1. CONCEPTO

La micropipeta es un instrumento de recolección de sustancias, siendo un tipo de pipeta y

destacando por estar diseñada especialmente para la recolección de muestras pequeñas. La
misma se suele fabricar de vidrio aunque otras partes que la componen son de plástico y
posee una graduación para controlar el volumen de las sustancias.

A micropipeta es un instrumento usado para recolectar muestras en volúmenes muy

pequeños, medidos en μL, lo que corresponde a la millonésima parte de un litro. Este
instrumento permite la manipulación de estas muestras para la experimentación y pruebas
en las diversas áreas que las emplean.

El volumen que pueden recolectar varían según el modelo pero los más comunes admiten
un máximo de 20, 200 y 1000 μL. Igualmente las puntas varían la capacidad de volumen
que pueden almacenar, distinguiéndose por su color; donde, por ejemplo, las amarillas
toman un aproximado de 10 μL, mientras las azules de 800 μL.

Los picos de plástico de las micropipetas son desechables permitiendo la higiene y facilidad
de uso del instrumento, además que estás suelen venir ya esterilizadas para resolver el
problema de higiene.

2: Uso de las micro pipetas

Las micro pipetas se usan para tomar y dispensar pequeños volúmenes de líquidos con gran
precisión, se usan en conjunto con unas pequeñas puntas desechables de plástico ajustables a
las micro pipetas que albergan efectivamente el volumen a dispensar; las hay de color azul
para mayores volúmenes y de color amarillo para menores.

Las micro pipetas consisten en

· una empuñadura que es el cuerpo principal del instrumento

· el embolo o botón pulsador que se usa para el llenado y dispensación de los líquidos,

· la rueda de ajuste para el volumen deseado

· ventana indicadora de volumen que muestra el volumen seleccionado,

· botón de eyección de la punta para desechar las puntas usadas

1. Se debe ajustar el volumen girando la rueda hasta que aparezca en la ventana

indicadora el volumen deseado.

2. Colocar una punta de plástico (adecuada) en la punta de la pipeta haciendo una leve
presión para lograr un buen ajuste.

3. Oprimir el botón pulsador con el dedo pulgar, hasta el primer tope y sin soltarlo
introducir verticalmente la pipeta, hasta que la punta se sumerja de 2 a 5 mm dentro del
líquido.
 4. Liberar lentamente la presión sobre el botón. Después de 2–3 segundos retirar,
siempre verticalmente, la pipeta del líquido deslizando la punta contra la pared del
recipiente.

5. Apoyando la punta contra la pared del recipiente donde se quiere colocar el líquido,
presionar lentamente el botón pulsador hasta el primer tope. Después de un segundo, y sin
soltar el botón pulsador, terminar de vaciar la pipeta presionando hasta el segundo tope.

6. Retirar la pipeta deslizando la punta contra la pared del recipiente

Es importante tener en cuenta que se debe mantener un ritmo, velocidad y técnica adecuada al
mover el émbolo. Una aspiración demasiado rápida e incontrolada puede llevar a la
formación de aerosoles, salpicaduras y posible contaminación del eje y del pistón, pudiéndose
producir incluso pérdida de volumen de la muestra y se estima que pipetear de forma vertical
o como máximo dentro de un ángulo menor de 20º de ésta, puede mejorar la precisión hasta
en un 2,5%.

3: CLASIFICACION DE MICROPIPETAS.

Pipeta aforada

Esta pipeta de laboratorio posee la forma de un tubo largo y ensanchado en la parte central,
poseyendo un único enrase superior. Esto hace que solo pueda medir un volumen
determinado de líquidos.

De todos los tipos de pipetas que existen, esta ofrece una mayor precisión en el cálculo de
volumen de líquidos. Además, permite que se escurra con precaución hasta enrasarlo en el
aforo inferior.

Pipeta graduada o de simple aforo

La pipeta graduada está diseñada para medir cualquier volumen de líquido siempre y cuando
no sobrepase su máxima capacidad. Este instrumento se enrasa en los 0 ml una sola vez y
luego permite vaciar hasta el volumen deseado.

Pipeta Pasteur

Se pueden hallar dos tipos de pipetas Pasteur de acuerdo a su material: las de vidrio y las de
plástico. Ambos modelos cuentan con un borde cónico en la parte superior que permite
expulsar el aire acumulado en su interior.

Generalmente se usan para sacar líquidos de una muestra sin tanta precisión.

Pipeta de Shali
Esta pipeta está hecha de vidrio y cuenta con diferentes formas. Normalmente, se utiliza
para medir la cantidad de sangre presente en pacientes con hemoglobina, pero también
sirve para trasladar la sangre a diferentes laboratorios sin riesgos de contaminación.

Pipeta de Thomas

Entre los mejores tipos de pipetas que sirven para diluir la sangre está la pipeta de
Thomas. Este artículo está hecho de vidrio y cuenta con un bulbo que facilita la
homogeneización de la sangre gracias a una perla colocada en su interior.

Pipeta de tres vías

La pipeta de tres vías es un tipo de pipeta de laboratorio que se usa para realizar
operaciones con una sola mano. Tal como su nombre indica, está compuesta por tres
vías para poder evacuar el aire durante cada toma de líquido.

Pipeta serológica

Uno de los tipos de pipetas de plástico que existen es la serológica. Esta pipeta suele
contener un filtro de algodón que la protege de cualquier líquido o humo peligroso
durante su uso y almacenamiento en el depósito.

Pipeta de transferencia

A diferencia de los demás tipos de pipetas mencionados en esta lista, este modelo está
formado por una sola pieza de plástico o polietileno irrompible. Su uso es más
frecuente en los bancos de sangre para hematología química y microbiología.

Micropipeta

Las micropipetas son un tipo de pipeta de laboratorio que permite absorber y transportar
pequeños volúmenes de líquidos. Debido a su practicidad, es muy útil para medir
partículas minúsculas.

CONTROL DE CALIDAD DE LAS MICROPIPETAS

Las calibraciones se deben realizar en una sala sin corrientes de aire y con una temperatura
comprendida entre 20ºC y 25ºC sin variar más de 0,5ºC mientras dure el ensayo. Asimismo
se necesita una humedad relativa mayor del 50%. Con anterioridad a la calibración se
deberá dejar al menos 2 horas todo el material a emplear para que alcance un equilibrio
térmico con la temperatura de la sala. Nunca deberá estar expuesto al sol directamente.
Necesitaremos disponer de un termómetro y también un barómetro si calibramos pipetas de
menos de 50l y debemos realizar ajustes por el efecto de la evaporación.

- UTILIZAR UNA BALANZA ADECUADA

Para el caso de calibraciones de pipetas de 10l o inferiores habrá de emplearse una
balanza analítica de 5 decimales. Para pipetas de volúmenes más grandes es suficiente
utilizar una balanza de 4 decimales. Se aconseja el uso de vasos de vidrio para minimizar
los efectos de las cargas electrostáticas, más importantes cuanto más pequeños son los
volúmenes que estamos midiendo.

- MINIMIZAR EL EFECTO DE LA EVAPORACIÓN

Para volúmenes pequeños (menores de 50l ) podemos usar algún recipiente específico de
vidrio con tapa o situar un vaso de precipitados pequeño con 10 ml de agua en el interior de
la balanza para inhibir la evaporación. Es más cómodo emplear el recipiente especial
porque nos simplificará los cálculos después. Existen marcas que comercializan su propio
juego de recipiente spara efectuar las calibraciones de sus distintos modelos.

PROCEDIMIENTO DE CALIBRACIÓN
Abriremos la pipeta para comprobar el estado de la junta de teflón y el anillo de goma
(Gilson). Si éstos presentan juego, los sustituiremos. También verificaremos que la caña no
esté doblada y en buenas condiciones. En caso contrario, también la cambiaremos.
Para el caso de las Eppendorf, retiraremos la grasa vieja del pistón y procederemos a
engrasarlo ligeramente de nuevo (es importante no poner demasiada).
Tras el enjuague previo de la punta al menos dos veces con agua destilada, haremos un
chequeo rápido con 3 medidas del volumen nominal que nos darán una primera
aproximación del volumen que dispensa la pipeta. Si éste se desvía bastante del esperado,
procederemos al ajuste del micrómetro con la herramienta adecuada para cada pipeta (en el
caso de Eppendorf se nos suministra al comprarla pero en Gilson tenemos que adquirirla) y
volveremos a hacer otra tanda de 3 medidas hasta que éstas ya sean más cercanas a lo
esperado. Posteriormente y después del cambio de punta y enjuagues previos de ésta al
menos dos veces, realizaremos ya la calibración propiamente dicha con tandas de 10
medidas (4 mediciones sería el número mínimo necesario para calcular la exactitud y
precisión de una pipeta) de las siguientes series de volúmenes:
+ volumen nominal (máximo admitido por la pipeta)
+ volumen inferior (mínimo o 10% del nominal – según especificaciones del fabricante)
+ volumen medio (del 50% del valor nominal)
Para cada serie de valores obtenidos pasaremos a calcular el error sistemático que nos
dará la Exactitud
(proximidad de la medida a su valor real) y el error aleatorio, que nos expresa la precisión
(grado de reproducibilidad de las medidas) de la pipeta.

Exactitud
Es posible tener datos muy consistentes aunque estén consistentemente equivocados. La
inexactitud es la diferencia numérica entre el valor medio de una serie de medidas y el valor
real. Una elevada exactitud (o pequeña inexactitud) significaría que existiera poquísima
diferencia entre el valor medio y el real. La exactitud se consigue con una cuidadosa
calibración de un instrumento preciso.

Precisión
La precisión consistiría en la existencia de un buen grado de reproducibilidad de las
medidas realizadas. La precisión no tiene un valor numérico, se cuantifica por la
imprecisión. Así una alta precisión (o pequeña imprecisión) significaría que existiese muy
poca variación entre medidas repetidas de la misma muestra. Para conseguir un
instrumento preciso se necesita una buena técnica de manejo.
Exacto