TECNICA DE GOTA

GRUESA Y PROTIS PARA

IDENTIFICAR
PLASMODIUM
PRINCIPIOS GENERALES
GOTA GRUESA: es la extensin de una gota de
sangre en forma cuadrangular de un dimetro
aproximado de 1 a 1.5 cm. Con la gota gruesa se
puede detectar la presencia de plasmodium .
EL PROTIS SANGUINEO: Es la extensin de una
gota de sangre de tal manera que se puede
observar al microscopio tanto los eritrocitos como0
los parsitos en un solo plano. Y con el protis
sanguineo se puede diferenciar claramente la
especie de plasmodium.
ELABORACIN DE GOTA GRUESA
Y FROTIS.


Es la muestra de eleccin para el diagnstico de
la malaria.

La gota gruesa concentra de 6 a 20 veces ms
sangre que un frotis. Sin embargo el frotis da otros
insumos para el diagnstico.
Gota gruesa
Frotis
FROTIS Y GOTA GRUESA

Porqu son importantes las gotas
gruesas?
Por tener mayor cantidad de muestra en un espacio
menor que el frotis, el diagnstico se hace ms
rpidamente.

La distribucin parasitaria es uniforme en toda la
muestra.

Permite identificar prontamente las parasitemias
escasas.



Por qu es importante el frotis?
Permite determinar la especie de Plasmodium
presente en la muestra dadas las caracteristicas
morfolgicas del globulo rojo parasitado, ya que
para cada especie estas son diferentes.

Antes de realizar la tincin, el frotis se fija con
metanol, esto hace que el glbulo rojo no se
destruya y por lo tanto la morfologa del parsito se
mantiene intacta en su interior.


Elementos necesarios para la toma
de gota gruesa y frotis.
Alcohol
Algodn ( 2 motitas )
Lanceta (descartable)
Papelera: formulario respectivo
Lmina portaobjetos
Lpiz grafito


1) Escoger un dedo de la mano izquierda, limpiarlo con
algodn humedecido en alcohol, luego, secarlo bien
con un algodn seco .
Elaboracin de la gota gruesa y el frotis
2) Punzar el dedo con lanceta descartable y eliminar la
primera gota de sangre con algodn seco.
Elaboracin de la gota gruesa y el frotis

3) En un portaobjetos limpio colocar la muestra de
sangre a 1.0 cm del borde.
Elaboracin de la gota gruesa y el frotis
4) Con la lmina extensora hacer la gota gruesa.


Elaboracin de la gota gruesa y el frotis

5) Se coloca una gota de sangre en una esquina de la
lmina extensora y esta gota se coloca a cm de la
gota gruesa. Se deja fluir la sangre por capilaridad
sobre la superficie ancha del porta objeto extensor
teniendo el cuidado de dejar cm a ambos lados de
la lmina extensora, formando un ngulo de 45,se
esparce la sangre suavemente moviendo la lmina
extensora hacia delante.
Elaboracin de la gota gruesa y el frotis

6) Luego de que la lmina se seque, proceda a
identificarla, en la cabeza del frotis con la clave
respectiva de cada evaluador y el nmero del paciente.
Realizar esta identificacin haciendo uso de un lpiz de
grafito.
Elaboracin de la gota gruesa y el frotis



Llevar las muestras al laboratorio lo ms rpido posible
(mximo 7 das) pues el tiempo, el alcohol y el calor fijan la
hemoglobina, afectando el proceso de deshemoglobinazcin
durante la tincin.

Mantener las muestras cubiertas, para protejerlas de
derrames, de los insectos( pues se las comen) y adems
mantenerlas alejadas de la luz solar pues las fija.

Es importante anotar en la boleta, el incio de sntomas junto
con los datos del paciente, para poder construir la curva
epidmica.
Recomendacin generales
COLORACION DE LA GOTA GRUESA Y PROTIS
MATERIALES:
Probetas de 10, 50 y 100 ml.
Beaker o vaso plastico de trabajo.
Un agitador de vidrio.
Una gradilla para portaobjetos.
Un cronometro o reloj con segundero.
Un frasco gotero con metanol.
Colorante giemsa (solucion madre).
Agua amortiguada o agua de lluvia.


PROCEDIMIENTO
METODO PARA COLOREAR DE 1 A 10
LAMINAS:
1.- En una probeta de vidrio preparar colorante
de giemsa diluido al 5% con agua
amortiguaga (ph 7.2)


2.- Mesclar suavemente con la varilla de
vidrio.
3.- Si solo es una lamina (gota gruesa) para
colorear se necesita aproximadamente 1.5
ml de solucion preparada.
4.- Antes de colorear verificar si las claves
de la lamina coinciden.
5.- Colorear las laminas a travs de dos
varillas de vidrio.
6.- Dejar reposar las
laminas con el colorante
por 10 min.
7.- Lavar suavemente el
colorante de la lamina
aadiendo un chorro
suave de agua limpia.
8.- Colocar en una gradilla las laminas con
la cara de sangre teidas hacia abajo.

MORFOLOGA E IDENTIFICACIN
Por lo regular cuatro especies infectan al
ser humano:

Plasmodium vivax
Plasmodium ovale
Plasmodium falciparum
Plasmodium malarie

Trofozoitos - Plasmodium falciparum: Los trofozoitos
dentro del eritrocito siempre estn en forma de anillo, a
dems de que slo en P. falciparum se presentan
mltiples trofozoitos en una clula.
Trofozoitos - Plasmodium vivax: Los eritrocitos
infectados por P. vivax son a veces ms grandes que
los eritrocitos normales. Aproximadamente cabra
1.5 eritrocitos normales en uno infectado..
Trofozoitos - Plasmodium malariae: La caracterstica
de los trofozoitos de P. malariae muestran la forma
de anillo y una ligera tendencia de que los
eritrocitos normales sean de tamao normal o ms
pequeos.
Trofozotos

Gametocito-plasmodium
Falciparum, el gametocito tiene
Forma de pltano
Gametocito-plasmodium ovale: El
gametocito es ms grande que los
eritrocitos normales. Tiene una
apariencia granular parecidos a los
puntos de Schuffner
Gametocito, plasmodium malarie: Los
gametocitos
P. Malarie tiene una apariencia redonda
cercana a la de los eritrocitos, tiene
adems una apariencia granular

Esquizonte - Plasmodium
malariae: Un esquizonte tiene de
6 a 12 merozoitos, dndole una
apariencia granular.
Esquizonte P. vivax. Un
esquizonte muestra
El gran nmero de merozotos
tpicos
en su especie( de 16-24),
adems se puede notar el mayor
tamao en
Comparacin con los eritrocitos
normales
Esquizontes

Desarrollo del plasmodium
MUCHAS GRACIAS