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CARRERA DE MEDICINA HUMANA

Curso: MORFOFISIOLOGÍA GENERAL

GUÍA DE LABORATORIO

Integrantes: _____________________________
_____________________________
_____________________________

2021 Grupo: 2 ____


GUÍA DE LABORATORIO HISTOLOGÍA 2021

Estmados alumnos les damos la bienvenida a este nuevo ciclo lectivo.


La virtualización nos ha llevado a hacer cambios en el desarrollo de nuestras Prácticas de Laboratorio, por lo
cual es indispensable se cumplan las siguientes Directivas Generales.

DIRECTIVAS GENERALES EN HISTOLOGÍA

1. Es indispensable la puntualidad para el ingreso a la clase práctica.

2. Cada alumno deberá tener su guía de práctica, hojas bond, lápiz, lápices de colores y borrador.

3. Se tomará en cuenta la participación, tanto previo al inicio de la práctica, como en la segunda parte de la

práctica, por lo cual se recomienda al estudiante leer los temas relacionados a la práctica.

4. El estudiante debe haber leído la guía de prácticas antes del inicio de clases.

5. Durante el desarrollo de clase virtual no está permitido ingerir alimentos ni fumar.

6. El profesor abrirá una carpeta para la entrega del Folder de Prácticas, losl alumnos harán un trabajo grupal

con los dibujos de las láminas observadas durante su práctica.

7. Todos los dibujos deberán de ser nominados.

8. En cada dibujo deberán colocar el nombe de quién realizo el dibujo.

9. Los alumnos tomarán fotos de sus dibujos o escanearlos, con las indicaciones que aparecen en su Ficha de

Actividades.

10. El folder será colgado en PDF.

11. La entrega será hecha solo por un miembro del grupo

12. Apagar celulares, radios u otro artefacto que distraiga su atención o la de sus compañeros.

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PRÁCTICA N° 1

OBSERVACIÓN, CONOCIMIENTOS, MANEJO Y CUIDADOS DEL MICROSCOPIO COMPUESTO


• Identifica sin error cada una de las partes del sistema óptico del
microscopio convencional.
• Reconoce correctamente cada una de las partes del sistema
mecánico del microscopio compuesto.
• Describe correctamente el funcionamiento de cada una de las partes
del microscopio compuesto.
Logro de aprendizaje: • Enumera sin error los procedimientos establecidos para el uso del
microscopio convencional.
• Describe sin error muestras permanentes bajo visión directa al
microscopio de luz.
• Valora las recomendaciones para el uso correcto del microscopio.

MATERIALES
Materiales de laboratorio Materiales del estudiante

Detalle Cantidad Detalle Cantidad

Microscopio compuesto
1 x alumno - Hojas de papel bond Lo necesario
de luz transmitada

Láminas histológicas: - Lápiz de dibujo 1

- Frotis Sanguíneo 6 x mesa - Lápices de colores Todos los colores

- Aceite de imersión 1 x aula

- Papel lente 1 x alumno

PROCEDIMIENTO

Introducción.

El microscopio compuesto es un instrumento óptico que permite obtener imágenes


aumentadas de los objetos para hacer visibles detalles, que no lo son a simple vista.
Este instrumento es de uso rutinario en los laboratorios de investigación y docencia, en el campo
de las Ciencias Biológicas, Médicas y afines; siendo importante determinar y seleccionar el tipo
de microscopio y accesorios adecuados para diversos trabajos.
Siendo el microscopio un instrumento de precisión y de costo muy elevado es preciso asegurarle
un buen rendimiento y larga duración, dándole uso y cuidados adecuados, los que se logran
teniendo conocimientos del funcionamiento de todas y cada una de sus partes .
Procedimiento.

1. Enfoque el microscopio con el objetivo de menor aumento, abra completamente el diafragma,


de tal manera que pasen a través de él la mayor cantidad de rayos de luz, obteniéndose así
el campo del microscopio totalmente iluminado. El condensador debe estar colocado en el
punto en el cual desaparezca completamente la imagen de la fuente luminosa y se consiga
observar el campo del microscopio iluminado con uniformidad. La platina debe de estar
horizontal.
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2. Observar una lámina permanente (coloreada) con el objetivo de menor aumento, luego
cambiar al objetivo de mayor aumento e ir graduando la apertura del diafragma en cada caso
hasta observar los detalles estructurales nítidamente.
3. Antes de usar el objetivo de inmersión, debe estar seguro que el condensador debe estar
totalmente elevado y el diafragma completamente abierto el condensador está totalmente
elevado y el diafragma abierto. Debe colocar una gota de aceite de inmersión sobre la lámina
enfocada y moviendo suavemente el revólver del microscopio, sin modificar la posición del
tubo y cuidando que el microscopio no patine sobre la mesa de trabajo corrija el foco por
medio de movimientos suaves del tornillo micrométrico solamente hasta diferenciar detalles
estructurales nítidamente.
4. Terminada las observaciones al microscopio convencional, limpie con papel lente el objetivo
de inmersión hasta retirar completamente el aceite de inmersión. Deje el microscopio con el
objetivo de menor aumento en el eje óptico y con el tubo bajo.

Recomendaciones.

• Al iniciar sus observaciones al microscopio, con el objetivo de menor aumento,


ilumine el campo del microscopio con el diafragma completamente abierto.
• Al disponerse a trabajar en el microscopio es recomendable iniciar sus observaciones
en el objetivo de menor aumento, observar y analizar la lámina, y cambiar a la lente
de mayor aumento al encontrar algo que llame su atención y/o se precise visualizar
con mayor detalle.
• Limpie la parte óptica del microscopio, solamente, con papel lente frotando muy
suavemente. La parte mecánica debe de limpiarla con un lienzo suave.
• Al mover el revólver del microscopio, para trabajar con un objetivo de mayor aumento,
mire por el costado y asegúrese de que la lente frontal del objetivo no roce con la
laminilla. Tenga más cuidado, aún, si va a trabajar con el objetivo de inmersión. Es
preferible que levante un poco el tubo del microscopio con la finalidad de alejar el
objetivo de la preparación.

PRÁCTICA N° 1 (continuación)

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TEJIDO SANGUÍNEO
• Reconocer las características histológicas del tejido
sanguíneo.
Logro de aprendizaje: • Identificar cada uno de los elementos celulares y no
celulares en un frotis sanguíneo.
MATERIALES
Materiales de laboratorio Materiales del estudiante
De Cantidad Detalle Cantidad
tall
Láminas histológicas: Hojas de papel bond Lo necesario
e
- Frotis sanguíneo Lápiz de dibujo 1
Papel lente. 6 x mesa Lápices de colores Todos los colores
Alcohol isopropilico
Algodón
Aceite de inmersión
PROCEDIMIENTO

Introducción
El tejido Sanguíneo es un tejido conectivo especializado, formado por una matriz extracelular
líquida llamada plasma y una fase de elementos celulares (glóbulos rojos y glóbulos blancos)
y no celulares (plaquetas). Todos los componentes de la sangre deben tener una
concentración óptima para que los procesos biológicos puedan llevarse a cabo de manera
eficiente. Cualquier alteración manifiesta en alguno de ellos provoca diversas anomalías
como: mal funcionamiento de algún órgano o estructura corporal

La sangre utiliza el sistema cardiovascular para llegar a las partes más íntimas del organismo,
asegurando un riego permanente a los tejidos, permitiendo innumerables reacciones
bioquímicas y brindando un aporte constante de sustancias indispensables para la
supervivencia celular

Lámina: n°__: En un frotis sanguíneo coloreado con Giemsa, observe a mayor aumento y con
lente de inmersión las características de las siguientes células.

Neutrófilo abastonado
plaqueta
Eosinófilo

Eritrocitos Neutrofilo
Linfocito

Basófilo
Monocito

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Eritrocitos, glóbulos rojos o hematíes:


Son discos bicóncavos que miden de 7 a 9 micras,
anucleadas y sin ninguna organela de color rojo por
su contenido de hemoglobina.

GLÓBULOS BLANCOS GRANULOCITOS

Neutrófilo: también denominados polimorfonucleares (PMN), son


glóbulos blancos de tipo granulocito, miden de 9 a 12 micras y es el más
abundante de la sangre aproximadamente entre 60-70% . Su periodo
de vida media es corto, de unas horas o algunos días. Su función
principal es la fagocitosis de bacterias y hongos.

Se llaman neutrófilos porque sus gránulos no se tiñen con colorantes


ácidos ni básicos, por lo que su citoplasma se observa rosa suave. Se
caracterizan por presentar un núcleo con cromatina compacta
segmentada multilobulado de 2 a 5 lóbulos conectados por delgados
puentes de cromtina. En los inmaduros el núcleo se presenta sin
segmentar, como una banda fuertemente teñida.

Eosinófilos: Son células que poseen un núcleo bilóbulado,


ambos lóbulos están unidos por estructuras llamadas
puentes intercromatinícos y abundantes gránulos
específicos y azurófilos, que se tiñen de rojo en los frotis de
sangre periférica y cortes del tejido. Además, la
heterocromatina compacta está situada junto a la envoltura
nuclear, mientras que la cromatina se halla en el centro del
núcleo. Normalmente, los eosinófilos suponen menos del 4%
de los leucocitos circulantes, pues son células más tisulares que
circulantes. Su cantidad aproximada en la sangre es de 150
células/microlitro, y constituyen entre el 2% y el 4% de los
leucocitos.

Basófilos: Los gránulos de los basófilos son gruesos pero escasos.


Son células de unos 10 µm de diámetro y su núcleo tiene una forma
que recuerda a una S, y son los menos numerosos, ya que
constituyen sólo el 0,5% del total.

GLÓBULOS BLANCOS AGRANULOCITOS

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Linfocitos: Son leucocitos de menor tamaño (entre 7 y 15 µm), y


representan del 24 a l32% del total en la sangre periférica.
Presentan un gran núcleo esférico que se tiñe de violeta-azul y de
escaso citoplasma (en el que frecuentemente se observa como un anillo
periférico de color azul). Poseen un borde delgado de citoplasma que
contienen algunas organelas que no son visualizadas con el
microscopio de luz

Monocitos: Es el leucocito de mayor tamaño,


llegando a medir 18 µm, y representa del 4 al 8% de los leucocitos. Los
promonocitos de la médula ósea, al madurar salen de ella, diferenciándose
en monocitos circulantes, que al cabo de unas 8 horas emigran a distintos
tejidos, donde se convierten en macrófagos.

Como características destacables, presenta un núcleo en general


arriñonado, lobulado o cerebriforme, que se tiñe irregularmente en forma
de "rejilla" o reticular de color violeta-azulado. Usualmente el núcleo guarda una proporción de
2:1 en área con respecto al citoplasma que lo rodea, y muy frecuentemente presenta una
depresión profunda. El citoplasma es abundante y de color gris azulado pudiendo estar
acompañado de vacuolas blanquecinas.

PLAQUETAS.
Llamados también trombocitos son fragmentos citoplasmá-ticos
pequeños, irregulares y carentes de núcleo, de 2-3 µm de diámetro,
derivados de la fragmentación de sus células precursoras, los
megacariocitos.

Realice Esquemas de Todas sus Observaciones.

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2Y3

TEJIDO CONECTIVO
• Identifica los diferentes tipos de fibras que conforman el
tejido conectivo.
Logro de aprendizaje: • Relaciona la estructura de las células con su función.
• Valora la importancia de la magriz extracelular (MEC).
• Estableces las diferencias entrelas variedades de tejido
conectivo.

MATERIALES
Materiales de laboratorio Materiales del estudiante
Detalle Cantidad Detalle Cantidad
Microscopio compuesto. 1/alumno Hojas de papel bond Lo necesario
Láminas coloreadas con
H_E preparadas:
Mascarilla fetal, cordón
umbilical, piel delgada y
gruesa, aorta, tejido
adiposo unilocular y 6 de cada
Lápiz de dibujo 1
multilocular, granuloma. una/mesa
Arteria Aorta con
Resorcina Fucsina. Mesen
terio de rana con azul de
toluidina. Bazo con
Coloración argéntica.
Papel lente. 1hoja/alumno Lápices de colores Todos los colores
Alcohol isopropilico 10ml
Algodón 1/alumno

PROCEDIMIENTO

INTRODUCCIÓN

El tejido conectivo o conjuntivo se caracteriza por presentar células de morfología muy


variable, separadas entre sí por abundante material intercelular o matriz, de apariencia amorfa
y fibrosa.

El tejido conectivo se origina en el mesodermo, capa germinal media del tejido embrionario,
compuesta por células multipotenciales del embrión, que van a dar origen al tejido conectivo
y sus células como los huesos, cartílago, tendones, células sanguíneas, hematopoyéticas y
linfáticas.

Actividad N° 1: Tejido conjuntivo Embrionario


Lámina N°
Tejido Mesenquimal. Mascarilla fetal- coloración H-E. Observar a menor y mayor aumento

A menor aumento localice la zona de formación de los huesos de la cara, que derivan del
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mesénquima, enfoque el tejido periférico al hueso en formación y luego aumente la


magnificación, observe la predominancia de células mesenquimales, células fusiformes con
núcleos basófilos y vesiculosos, el citoplasma se observa como proyecciones de bordes no
netos muy tenue. La matriz está formada por material amorfo y escasas fibras delgadas de
colágeno

Lámina N°

Tejido Conectivo Mucoide Cordón umbilical, coloración H-E.


Observar a menor y mayor aumento
Sustancia fundamental (amorfa) abundante, débilmente teñida con la eosina, abundante
ácido hialurónico.
Colágeno pocas fibras y difícil de diferenciar.
Fibroblastos células de forma estrellada con prolongaciones que permite a las células
conectarse entre ellas

1. Fibroblasto 2. Fibrocito 3. Sustancia Fundamental 4. Colágeno

Lámina N°

Tejido conjuntivo laxo (Mesenterio de rana-coloración resorcina fucsina)

A menor aumento reconozca los elementos que constituyen este tejido: células, fibras y
sustancia fundamental, y luego pase a mayor aumento para ver los detalles.

Células Propias o fijas


Fibroblastos En este tejido distinguimos una estructura en forma ovoide, son los núcleos de
los fibroblastos, demás podrá observar los núcleos de los fibricitos muy alargados con
cromtina muy condensada.

Células Migratorias o libres


Cebadas ó mastocitos Son células de gran tamaño Se distinguen porque tienen el
citoplasma cargado de gránulos basófilos, que muchas veces llegan a cubrir el núcleo.
Támbién se puede apreciar varios tipos de leucositos.

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Matriz extracelular

Fibras :

Colágenas Aunque no se aprecia con claridad, se pueden ver que son largas, ondulantes a
veces rectas y gruesas. Se ven de color rosa.
Elásticas Son mucho más claras y notorias que las anteriores, son cilíndricas, delgadas y de
color púrpura con la misma coloración.
Reticulares Se observan fibras muy finas que se cruzan, se anastomosan formando una
especie de red.

Sustancia fundamental
Es el material que está rodeando a las células y fibras, toma una coloración rosa muy débil.

Lámina N°

Células migratorias que se pueden ver en otros tejidos conjuntivos.


Granuloma cutáneo, (Tejido inflamatorio, coloración H-E)
Macrófagos (Ganglio Linfático, coloración H-E)
A mayor aumento observe los macrófagos, aparecen con un citoplasma de color pardo por la
presencia de carbón fagocitado.
Linfocitos células redondas, pequeñas y basófilas donde predomina el núcleo, son las más
numerosas en esta lámina.
Células plasmáticas
Busque a mayor aumento unas células pequeñas, con citoplasma basófilo, halo perinuclear
muy característico. El núcleo es oval, excéntrico, con la cromatina dispuesta en forma
radiada.

Macrófagos Células plasmáticas(2)

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Lámina N°
Tejido conectivo reticular

(Corte de tejido esplénico, bazo coloración Wilder impregnación argéntica)


Observe a menor y mayor aumento la red de fibras que sostienen a clones de células en
proceso de reproducción y diferenciación.
Fibras reticulares o reticulina El estroma del bazo se observan fibras teñidas de color negro
que se ramifican y se anastomosan en forma de red, dando lugar a los “nidos de células”

Lámina N°

Tejido conectivo laxo

(Corte de piel humana, pulpejo de dedo, coloración H-E)


Con la ayuda del menor aumento ubique la dermis de la piel, a nivel de la papila dérmica.
situada inmediatamente debajo de epidermis.
En la dermis identifique con el objetivo de mayor aumento observe con cuidado:
Fibroblastos células numerosas de forma fusiforme.
Fibras colágenas. Delgados y de color rosa teñida por la eosina
Sustancia fundamental, abundante, teñida por la eosina
También podemos observar muchos capilares tapizados por células epiteliales planas.

Tejido conectivo denso

Debajo del tejido conjuntivo laxo, dermis, posee numerosas haces cortes de colágeno,
orientadas en diferentes direcciones, coloreados con la eosina en forma intensa, aquí
también podemos observar fibroblastos pero menos numerosas que en el tejido conectivo
laxo, los vasos sanguíneos son menos numerosos.

Tejido adiposo unilocular o grasa amarilla

En la hipodermis se observa aglomeradas numerosas células adiposas (unilocular o amarillo).


Estas células tienen forma redondeada o poliédrica, aunque la grasa ha desaparecido durante
el procesamiento se observa una gran vacuola que ocupa casi la totalidad del citoplasma, el
núcleo cuando puede verse, se observa aplanado y periférico.

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Lámina N°
Tejido adiposo multilocular o grasa parda
(Zona interescapular de feto (coloración H-E.)
Las células de este tejido son de menor tamaño que en el amarillo, la célula tiene forma
poliédrica, núcleo esférico ligeramente desplazado a la periferie, en el citoplasma se observan
numerosas gotas lipídicas de diferentes tamaños lo que le da una apariencia espumosa. Este
tejido está muy capilarizado.

Tejido conectivo elástico (corte de aorta, colación resorcina fucsina)

A mayor aumento observe en la pared de la arteria( túnica media) el tejido elástico se


observa formando membranas elásticas, que transcurren espiralmente y se anastomosan
para formar redes.

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PRÁCTICA N° 4
TEJIDO EPITELIAL DE REVESTIMIENTO O DE CUBIERTA
• Reconocer las características histológicas de los
Logro de aprendizaje: epitelios.
• Identificar cada una de las variedades morfológicas
del tejido epitelial.
• Identificar los tipos de tejido epitelial por su función.
MATERIALES
Materiales de laboratorio Materiales del estudiante
Detalle Cantidad Detalle
Láminas histológicas con colo-
ración H/E:
- Riñón, Intestino Delgado, Trá- 6 x mesa Hojas de papel bond 1
quea, Esófago, Piel gruesa y
Piel delgada, vejiga
Papel lente. 1hoja/alumno Lápiz de dibujo Lo necesario
Alcohol isopropilico 10ml Lápices de colores Todos los colores
Algodón 1/alumno
PROCEDIMIENTO
Introducción

El tejido epitelial se caracteriza por estar constituido por un conjunto de células de forma geométricas,
con escasa sustancia intercelular, ausencia de vasos sanguíneos y gran capacidad de regeneración,
atribuyéndoles función de cubierta y protección, absorción, secreción y sensorial.

Lámina n°

Epitelio Plano y Epitelio Cúbico (corte de Riñón, coloración H-E)


Ubique a menor aumento la corteza renal, en ella busque un corpúsculo renal y empiece hacer sus
observaciones.
Epitelio Plano Simple En el corpúsculo renal observe la cápsula de Bowman parietal, que se encuentra
tapizadando la cápsula de Bowman formada por epitelio plano simple (células aplanadas en una sola
capa).

Epitelio Cúbico Simple


Observe en la misma corteza renal los tubos renales que se ubican alrededor del corpúsculo renal, las
células cubicas están dispuestas en una sola capa, sus núcleos redondeados, vesiculosos y centrales.

Epitelio cúbico simple


simple
Epitelio plano simple

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Lámina N°

Epitelio Cilíndrico monoestratificado (Corte de


intestino delgado, coloración H-E)
Utilizando el objetivo de mayor aumento identifique en
las vellosidades intestinales la mucosa constituida por
una capa de células cilíndricas con núcleo basal,
ovalado y vesiculoso, abundantes gránulos de
heterocromatina. En el borde apical da las células puede
ver una condensación eosinófila, esto es la chapa
estriada correspondiente a las microvellosidades del
intestino delgado, entre las células sobresalen algunas
caliciformes que son células mucosecretoras, estas
células presentan el núcleo basal y la parte apical está
ocupada por moco que aquí se aprecia como una gran
gota clara.

Lámina N°

Epitelio seudoestratificado cilíndrico ciliado (corte de tráquea, coloración H-E)

Utilizando el mayor aumento identifique en la mucosa de la


tráquea, células de diferentes tamaños, cuyos núcleos ocupan
diferentes niveles dando la impresión de corresponder a células
que están en varias capas (estratificado); pero todas las células
están en contacto con la lámina basal.
Células cilíndricas ciliadas. En el borde apical de las células
se observan los cilios.
Células caliciformes entre las células ciliadas observamos
algunas con núcleo basal y en la parte apical cargadas de moco.
Células basales, células más pequeña, se observan algo
poligonales y con núcleos más cercanos a la lámina basal.

Lámina N°

Epitelio
plano poliestratificado queratinizado. (piel de
Pulpejo de dedo, coloración H-E)
En la epidermis identifique: Las numerosas capas de
células que caracteriza a este tipo de epitelio. La capa
basal, se encuentra adherida a la lámina basal y
presenta células pequeñas de núcleo grande,
vesiculoso, son células más pequeñas y cúbicas, a
medida que las capas se van alejando de la basal las
células se van aplanando hasta convertirse en células
muy escamosas de citoplasma acidófilo
correspondiendo a células cargadas de queratina, lo que
corresponde al sustrato córneo de la piel.

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Lámina N°

Epitelio polimorfo o de transición. (Vejiga urinaria,


coloración H-E)
Observe que este tejido también presenta numerosas
capas. Las células basales son cuboideas o cilíndricas
bajas, las capas que le siguen están formadas por
células poliédricas, las células superficiales son más
grandes y a veces son binucleadas y tienen forma de
cúpula lo que caracteriza a este tipo de epitelio.

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PRÁCTICA N° 5
EPITELIO GLANDULAR
• Reconoce las estructuras de la glándulas.
Logro de aprendizaje: • Clasifica a las glándulas exocrinas bajo diferentes
aspectos.
• Identifica algunas glándulas endocrinas.
MATERIALES
Materiales de laboratorio Materiales del estudiante
Detalle Cantidad Detalle Cantidad
Láminas histológicas
con coloración H/E:
- Intestino Delgado,
Piel delgada, Cuero 6 x mesa Hojas de papel bond 1
Cabelludo, ütero en
fase proliferative,
Tiroides.
Papel lente. Lápiz de dibujo Lo necesario
1hoja/alumno
Alcohol Lápices de colores Todos los colores
10ml
isopropilico
Algodón 1/alumno
PROCEDIMIENTO

GLÁNDULAS EXOCRINAS
Lámina N°
Glándula Unicelular. (Intestino delgado, coloración H-E)
A mayor aumento identifique entre las células con chapa estriada, células caliciformes, que se observan
como pequeños espacios claros, debido a que el moco no se colorea con la eosina, y un núcleo basal.

Lámina N°
Glándula tubular simple. (Endometrio en fase profilerativa, coloración H-E)
Observe primero a menor aumento y ubique las glándulas endometriales, de forma tubular recta que
en porciones profunda se ven ramificadas.
A mayor aumento observe las células que tapizan estas glándulas, corresponden a un epitelio
monoestratificado cilíndrico.

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Lámina N°
Glándula serosa. Glándula tubular
enrollada (corte de piel, coloración H-E).
En el corte de piel, con el objetivo de menor
aumento enfoque la capa profunda de la
dermis, identifique la porción secretora de la
glándula sudorípara. Esta parte es
glomerular y vemos que está revestida por un
epitelio cúbico simple, de citoplasma claro y el
núcleo aplastado en la porción basal.
Algunos cortes son transversales y otros son
oblicuos.

La porción secretora se inicia en la parte


glomerular y se continúa por un túbulo largo,
conducto excretor.

Lámina N°
Epitelio Glandular exocrino Túbulo- acinar
compuesta (Glándula submaxilar, coloración H-E ó
PAS).
En un corte transversal de la glándula salival
submaxilar localice:
Acinos serosos. Estos acinos son numerosos y están
tapizados por células piramidales, con núcleos
esféricos, vesiculosos y centrales. El citoplasma de
éstas células muestran una basofilia intensa sobre
todo en la parte basal si los veríamos al microscopio
electrónico aquí identificaríamos abundante retículo
endoplasmático rugoso. La luz de la glándula es muy
pequeña.
Acinos mucosos. Los podemos reconocer por que
los acinos son menos numerosos y están formados
por células de núcleo rechazado hacia el polo basal, aplanados, el citoplasma que hace presión sobre
los núcleos se ve muy claro por la presencia de moco. La luz es más amplia.
Acinos mixtos. Son acinos poco numerosos y los vamos a reconocer porque están formados por una
porción mucosa y otra serosas, esta última forma una media luna, (semiluna de Gianuzzi).
Entre los acinos glandulares y el tejido conjuntivo, que separa los lobulillos glandulares, se
encuentran cortes transversales u oblicuos de conductos excretores.

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GLÁNDULA ENDOCRINA
Lámina N°
Folículos tiroideos (Cortes transversales de Tiroides, coloración H-E). A menor aumento. Localice
los folículos tiroideos, formaciones, que son numerosas y están tapiza-dos por células epiteliales
cúbico monoestratificado, alrededor de una sustancia denomi-nada coloide, que se tiñe con la eosina,
esta sustancia es la secreción de esta glándula.

TIROIDES

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PRÁCTICA N° 6
PIEL Y ANEXOS
• Identifica los diferentes elementos que conforman la piel.
• Diferencia las características morfológicas de piel gruesa y
delgada.
Logro de aprendizaje: • Diferencia histológicamente los diferentes estratos de la piel.
• Diferencia histológicamente los anexos de la piel: folículos
pilosos, glándulas sudoríparas y sebáceas.
MATERIALES
Materiales de laboratorio Materiales del estudiante
De Cantidad Detalle Cantidad
tall
Láminas histológicas: Hojas de papel bond Lo necesario
- Piel delgadae Lápiz de dibujo 1
- Piel gruesa 6 x mesa Lápices de colores Todos los colores
- Cuero Cabelludo
- Uña
PROCEDIMIENTO

Lámina N°
Piel Gruesa (corte de piel a nivel del pulpejo de dedo H-E)

Observe a menor aumento que en un corte de piel se puede observar que esta está constituida por la
epidermis, la dermis: papilar (superficial) y profunda (reticular).

Epidermis. Podemos notar que esta capa está formada por epitelio plano poliestratificado
queratinizado. A mayor aumento puede ver que ésta a su vez presenta estratos, cada una con
características particulares.

Estrato basal formado por una capa de células cúbicas o cilíndricas bajas, basófilas, en esta capa
puede notar la presencia de melanocitos que son células de citoplasma claro y núcleo oscuro.

Estrato espinoso Las células tienen forma poliédrica y usualmente son de 3 a 8 capas de células. Las
células presentan en su citoplasma eosinófilo, muchos haces de filamentos los cuales convergen en
los desmosomas. Estos filamentos o tonofibrillas le dan a las células cierta resistencia contra la fricción.
El estrato basal más el estrato espinoso forman el Estrato de Malpighi.
El estrato granuloso observe que este estrato está formado por 3 a 5 capas de células con gránulos
lamelares, de color oscuro, que contienen queratohialina.
Estrato córneo observe que en este estrato las células son planas, acidófilas y no presentan organelos
intracitoplasmáticos. Con el microscopio de luz podemos observar una banda clara localizada entre la
capa granulosa y córnea. Esta zona se ha denominado estrato lúcido, que es una capa traslúcida,
brillante formada por células muertas sin núcleo y muy acidófilas.
En una lámina con coloración de PAS se puede observar la lámina basal entre la epidermis y la dermis.

Dermis en la dermis podemos identificar dos zonas: la dermis papilar (superficial estrecha) la dermis
reticular (es gruesa).

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La dermis papilar es más pálida que la dermis reticular y contiene menos colágeno y elastina pero
más matriz, las fibras de colágeno y elastina están organizadas al azar con una

mayor proporción de fibras perpendiculares a la superficie cutánea, tiene pequeños vasos sanguíneos,
finas ramas nerviosas y terminaciones nerviosas (corpúsculos de Meissner).

La dermis reticular constituye la mayor parte de la dermis. Observe anchas bandas de colágeno denso
con largas fibras de elastina interpuestas paralelas a la superficie cutánea, dentro de este tejido observe
vasos sanguíneos, linfáticos y los nervios de la piel.

En la dermis reticular podemos encontrar las glándulas sudoríparas ecrinas cuya estructura
corresponde a glándula tubular simple espiralada, aunque en un corte de piel no se ve completa se
puede ver las diferentes partes de la glándula por separado.

Región espiralada se encuentra en la dermis a veces muy profunda, la región secretora está tapizada
por un epitelio seudoestratificado con células claras y oscuras.

Región recta: éste conducto se origina en la dermis para conectar la parte espiralada a la epidermis.
Esta porción está tapizada por dos capas de epitelio cúbico.

Hipodermis Observe cómo cambia el tejido conectivo, aquí es laxo, con numerosas células adiposas.
(panículo adiposo).

Estrato córneo
Epidermis

Estrato granuloso
Estrato espinoso

Estrato basal
Dermis
Dermis papilar Dermis reticular

_________________________________________________

Piel delgada Corte de piel delgada. Coloración de H-E.

Lo mismo que en el corte de pulpejo de dedo identifique epidermis, dermis e hipodermis.

En la epidermis de la piel delgada se observan todos los estratos excepto el estrato lúcido que si se
observa en la piel gruesa. El estrato córneo está formado por menos capas de células muertas de 5 a 7
capas mientras que en la piel gruesa está formada entre 25 a 30 capas de células.

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Folículo piloso. son apéndices de la epidermis que dan origen a los pelos o vellos que pueden tener
diferentes longitudes de acuerdo a la zona del cuerpo.
Si el folículo se ve en corte transversal u oblicuo podemos ver que está formado por las
siguientes capas del centro a la periferia:

Médula formada por células de gran tamaño. Corteza formada por células que contienen melanina.
Cutícula del pelo las células se disponen a manera de escamas. Vaina Radicular externa, formada por
varias capas de células epiteliales. Membrana Vítrea separa el folículo del tejido conectivo que forma el
saco fibroso.
El fascículo de fibras de músculo liso que se ve muy cerca de los folículos pilosos se denomina músculo
erector del pelo

Glándula sebácea
Esta es una glándula holocrina que secreta a la superficie de la piel.
La vamos a ver asociada al folículo piloso. Observe que esta glándula tiene una estructura acinar, que
se ve con lóbulos redondos u ovoides, rodeados por tejido conectivo, en algunos cortes de piel delgada
podemos ver a esta glándula en diferentes estados de maduración desde una célula inactiva inmadura
mitóticamente activa, una células en diferenciación con gotas de lípidos y células maduras que están en
el centro de los acinos, llenos de gotas de grasa en proceso de desintegración.

A.__________________________________________
B.__________________________________________
C.__________________________________________
D.__________________________________________
E.__________________________________________

REALICE ESQUEMAS DE TODAS SUS OBSERVACIONES

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GUÍA DE LABORATORIO
MORFOFISIOLOGÍA GENERAL
FISIOLOGÍA

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NORMAS DE COMPORTAMIENTO PARA EL ESTUDIANTE DURANTE LA CLASE VIRTUAL DE PRÁCTICA

En entornos virtuales nos comunicamos como en cualquier espacio de interacción, por lo que debemos respetarnos y guardar
ciertas normas:
• Ingresar puntual al horario que le corresponda, siempre con cámara activa y audio apagado hasta que el docente
comunique alguna indicación distinta. Conectarse puntual a las prácticas es señal de respeto hacia los docentes y
compañeros.
• Respetar un código de vestimenta apropiado para la universidad.
• No comer ni beber durante el desarrollo de las clases virtuales.
• En cada sesión siempre tener consigo la “Guía de Practica” y su “Cuaderno de trabajo de Fisiología”.
• Preparar y estudiar previamente el tema de clase. LA EVALUACIÓN PRÁCTICA ES CONSTANTE, al inicio de cada
sesión de laboratorio y durante el desarrollo de los casos clínicos. Para complementar cada una de las sesiones
programadas se realizará la actividad de “Discusión Clínica”. En esta actividad se evaluará la participación de cada
alumno, así como a los representantes por tema asignado. Luego de cada discusión se realizará el feedback respectivo.
• Levantar la mano virtualmente para solicitar hacer una intervención durante la clase. Durante sus participaciones
individuales en clase, su docente solicitará que mantenga cámara y audio encendidos.
• Ayudar a mantener los debates en un ambiente sano y educativo.
• Ser siempre respetuoso y cortés al redactar mensajes en el chat de la clase virtual. Los mensajes serán visibles para
todos. Evitar escribir todo en mayúsculas porque en el contexto virtual es como gritar y, además, dificulta la lectura.
Utilizar este medio sólo para temas académicos.
• Leer todas las intervenciones de sus compañeros y del docente antes de participar. Escribir textos cortos y verificar
ortografía y claridad en la redacción antes de publicar. Si está a su alcance, colaborar ante las consultas de sus
compañeros.
• Utilizar el correo institucional y mensajería del aula virtual para cuestiones personales y consultas sobre otras
cuestiones académicas.
• Cumplir con presentar en las fechas asignadas su CUADERNO DE TRABAJO mostrando ESQUEMAS Y MAPAS de los
temas a desarrollar en la sesión (SABERES PREVIOS); así como todas las actividades de la guía resueltas. Es
importante que reconozca los temas a tratar, así como el objetivo de cada sesión a realizar.

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SISTEMA DE EVALUACIÓN

EVALUACIÓN PROCEDIMENTAL
Esta evaluación comprende a las calificaciones obtenidas en el EXAMEN FINAL PRACTICO. (Siendo los temas integrados,
NO CANCELATORIOS). Los conocimientos al ser sumativos incluyen la integración de conceptos de capítulos desarrollos
previamente en Biología Celular.
Respecto a las evaluaciones procedimentales PREVALECEN LAS PREGUNTAS DE ANÁLISIS; teniendo en cuenta el
modelo Americano “ABP” (Análisis basado en problemas), ciencias básicas aplicadas a la clínica; por lo cual se buscará que
el estudiante integre todo lo aprendido en distintas situaciones clínicas.

Coordinador del Curso:

Blga. Samanéz Urrunaga María Carolina

Profesores Responsables de Práctica:

Dr. Eduardo Villalobos Pachecho.


Lic. Jamee Guerra Valencia

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PRACTICAS Y SEMINARIOS DE MORFOFISIOLOGÍA GENERAL

Semana 1 Seminario 1

Obtención del Hematocrito, Hemoglobina, Velocidad de Sedimentación Globular. Cálculo de las Constantes Corpusculares.

Semana 2 Seminario 2

Factores Hematopoyéticos.

Semana 2 Seminario 3

Anemia: Clasificación. Anemias hemolíticas. Anemia por deficiencia de Vitamina B12, por Deficiencia de Ácido Fólico

Semana 3 Seminario 4

Metabolismo del Hierro. Grupo sanguíneo. Reacciones de Incompatibilidad

Semana 3 Seminario 5

Obtención y análisis del tiempo de coagulación, tiempo de sangría y de tiempo de recalcificación.

Semana 4 Seminario 6

Serie blanca. Principios de la Inmunidad. Leucemias agudas.

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RÚBRICA

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MORFOFISIOLOGÍA GENERAL

MÓDULO DE APRENDIZAJE I
FISIOLOGÍA SANGUÍNEA

CASO INTEGRADOR
Paciente de sexo masculino de 28 años, quien consulta médico por cuadro de contusión lumbar, con importante dolor posterior,
que se mantiene por más de una semana. Tiene el antecedente de haber recibido terapia con hierro en su consultorio de salud
desde la infancia y hasta los 16 años por la presencia de una leve anemia, aparentemente de
etiología ferropénica, luego de lo cual se pierde de control.

Examen físico
Buen estado general, conjuntivas rosadas sin cianosis ni ictericia. El examen segmentario está dentro de límites normales.

Laboratorio
Hemograma
Hematocrito : 36 % Indice ictérico : 5 U
Hemoglobina : 11,4 g/dL Leucocitos : 8.300 /μL
Glóbulos Rojos : 4.900.000 /μL Plaquetas : 160.000 /μL
CHCM : 31.7 g/dL
VCM : 73.5 Fl

Glóbulos Rojos: Anisocitosis moderada, microcitosis leve a moderada, hipocromía leve a moderada, poiquilocitosis leve,
codocitos escasos, policromatofilia leve.

Leucocitos: Normales
Plaquetas: Normales

Ferremia
Hierro sérico : 75 μg/dL (V.N: 50-150 μg/dL)
TIBC : 270 μg/dL (V.N.: 200-400 μg/dL)
Saturación de transferrina : 31% (30±15%)
Hemoglobina A2: 4,6% (V.N.: 1,5- 3,5%). Método cromatográfico.

◆ Respecto al caso presentado, realizar un análisis fisiológico respecto a problemas. Identificar “targets” y
esquematizarlo.

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PRÁCTICA N° 1

HEMOGLOBINA, HEMATOCRITO Y CONSTANTES CORPUSCULARES – PRÁCTICA SIMULADA.


DISCUSIÓN CLÍNICA
Al finalizar la práctica el estudiante conocerá los
índices de normalidad de la serie eritrocitaria
(Hematocrito – Hemoglobina), y la relación que existe

Logro de aprendizaje: entre ellos; además reconocerá los diferentes factores


que la determinan, así mismo reconocerá la
importancia de la Velocidad de Sedimentación
Globular (VSG) en la práctica clínica.

MATERIALES

• Materiales de laboratorio Por sección:

• 03 Jeringas hipodérmicas de 10cc por mesa

• 01 Ligadura por mesa

• 01 paquete de Algodón

• 01 litro de Alcohol.

• 01 Pipeta de Salhi por mesa

• 01 Pipeta Pasteur por mesa

• 02 Tubos de ensayo de 10cc por mesa


Materiales del estudiante
• 02 viales de vidrio por mesa.

• 02 tubos para hematocrito (Wintrobe) por mesa. Por estudiante:


• Cuaderno de notas
• Espectrofotómetro. • Guía de práctica
• Amoniaco QP.

• Centrífuga para hematocrito.

• 01 ampolla de heparina.

• 01 Gradilla por mesa.

• 01 papel milimetrado por grupo.

• 01 rollo de Cinta adhesiva.

• 01 Cronómetro por mesa.

• 06 pares de guantes quirúrgicos descartables por mesa.

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• 01 Litro de Agua Destilada

Detalle Cantidad Detalle Cantidad

Proyector multimedia 1 Cuaderno de notas 1

Pizarra 1 Guía de práctica 1

Plumones 4
Guantes (caja) 1

PROCEDIMIENTO

Determinación del Hematocrito


1. Obtener una muestra de 5ml. de sangre venosa con jeringa heparinizada.
2. Con la ayuda de una pipeta Pasteur llenar el tubo de Wintrobe hasta llegar a la marca de 10 ó 100.
3. Centrifugar el tubo por 30 minutos a 3000 revoluciones por minuto.
4. Leer en la escala el nivel al cual a llegado la columna roja. Esta cifra es el hematocrito expresado en porcentaje.
5. Observar las características del plasma.

Determinación de La Hemoglobina
1. Calibración del Espectrofómetro con Agua destilada.
2. Obtener una muestra de 5ml. de sangre venosa con jeringa heparinizada y colocarla en un frasco de vidrio.
3. Medir 20μl (0.02ml) de sangre en una pipeta de Salhi (pipeta volumétrica).
4. Vaciar el conteniendo de la pipeta en un tubo conteniendo 10 ml. de agua destilada.
5. Echar una gota de amoniaco para precipitar las proteínas provenientes del estroma del glóbulo rojos que enturbian la
solución.
6. Homogenizar las muestras y verter el contenido en las cubetas del espectrofotómetro.
7. Leer la densidad óptica en un espectrofotómetro, a una longitud de onda de 540 nm (ABSORBANCIA DESCONOCIDA).
8. Con el dato obtenido y valiéndose de la curva de calibración ó factor de calibración obtenidos a partir de soluciones
conocidas de hemoglobina (Patrón = 18 g/dL), se hace el cálculo de concentración de hemoglobina

(Hb = FACTOR * ABSOBANCIA DESCONOCIDA).


Donde: FACTOR = 18/(ABSORBANCIA), En este caso ABSORBANCIA = 0,198.
Siendo el valor del FACTOR = 90,91.
Velocidad De Sedimentación Globular (VSG)
1. Obtener 5ml.de sangre venosa con una jeringa heparinizada colóquela en un tubo de ensayo.
2. Llene un tubo de Wintrobe hasta la marca de 100 mediante una pipeta Pasteur.
3. Colocar el tubo en posición perfectamente vertical fijándolo con cinta adhesiva a la pared de una gradilla. Tomar el tiempo
de una hora a temperatura ambiente.
4. Después de transcurrida 1 hora leer la distancia a la cual han sedimentado los elementos formes sanguíneos.

RESULTADOS
1.- HEMOGLOBINA. ………………………………………………….. g/L
2.- HEMATOCRITO
Longitud de la columna de sangre ...................................

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Longitud de la columna de hematocrito ...................................


Longitud de la columna del plasma ……….......................
Valor del hematocrito (%) ...................................
Porcentaje de plasma ...................................
3.- VELOCIDAD DE SEDIMENTACIÓN GLOBULAR. ................................mm/hora.
CUESTIONARIO
1. ¿Cuáles son las Utilidades de las Constantes Corpusculares?
2. Esquematice la Eritropoyesis y receptores de eritropoyetina.
3. Explique las diferencias entre oxihemoglobina y metahemoglobina
4. Explique que es la Hemoglobina glicosilada
5. Señalar factores que aumentan y factores que disminuyen la Velocidad de Sedimentación Globular.
6. ¿Por qué se acelera la VSG en los procesos infecciosos?
COMPETENCIAS
Al finalizar el presente seminario el estudiante podrá definir que son los Factores hematopoyéticos, así como
cuales son los más importantes, sus similitudes, diferencias, así como las diferentes actividades que realizan a
fin de contribuir a la correcta formación de los elementos sanguíneos y de ser el caso, analizar sus diferentes
actividades hematopoyéticas.

REFERENCIAS
Guyton, A & Hall, J. Fisiología Médica( 13ed.) España: Elsevier.2016

PRÁCTICA N° 2

SEMINARIO: FACTORES HEMATOPOYETICOS

Al finalizar el presente seminario el estudiante podrá


definir que son los Factores hematopoyéticos, el
proceso en sí; la relación existente, sus diferencias,
Logro de aprendizaje:
así como la función-rol fisiológico que realiza a fin de
contribuir a la correcta formación de los elementos
sanguíneos.

 El grupo designado para la exposición de esa semana se encargará de la preparación de la misma.

 Toda información de la exposición debe ser extraída de fuentes bibliográficas confiables.

 La exposición se realizará durante toda la sesión y se realizarán las preguntas pertinentes a los expositores y
auditorio en general.

CASO CLÍNICO

Mujer de 32 años de edad, sometida a una cirugía de válvula mitral hace un año, consulta al médico por presentar

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astenia progresiva desde hace 3 meses, que se ha acentuado en los últimos días. Describe la aparición de hematomas
espontáneos en extremidades inferiores. No presenta epistaxis, gingivorragia ni hematuria. En los últimos meses ha
sido tratada con varios fármacos: paracetamol, clorotiacida, indometacina y digoxina.

Examen físico

Buen estado general. Intensa palidez mucocutánea. Cabeza, boca, faringe y cuello normales. Auscultación cardíaca:
ruidos cardíacos rítmicos, soplo sistólico. Hematomas múltiples en extremidades.

Laboratorio

Hemograma

Hematocrito: 20 % I. Ictérico: < 5 U

Hemoglobina: 6.8 g/dL

Glóbulos rojos: 2.400.000 /μL Leucocitos: 2.100 /μL

CHCM: 34.0 % Plaquetas: 25.000 /μL

VCM: 83.3 fl

Glóbulos rojos: Anisocitosis leve

Leucocitos: normales

Plaquetas: normales

Ferremia

Hierro sérico: 65 μg/dL (VN: 50-150 μg/dL)

TIBC: 250 μg/dL (VN: 200-400 μg/dL)

Saturación de transferrina: 26% (VN: 30 ± 15 %)

Haptoglobina: 58 mg/dL (VN: 30-80 mg/dL)

Test de Coombs directo e indirecto: Negativos

Test de Ham: Negativo

Mielograma: Marcada hipocelularidad global. Marcada hipoplasia de las series eritroblástica, granulocítica y

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megacariocítica.

Biopsia medular: Marcada hipoplasia medular. El tejido hematopoyético ha sido reemplazado por tejido adiposo en
más de un 80%. No se aprecian alteraciones morfológicas.

◆ Respecto al caso presentado, realizar un análisis fisiológico respecto a problemas. Identificar “targets” y
esquematizarlo.

◆ ¿Qué es el Test de Coombs? ¿Cuál es su utilidad?

◆ Respecto a la patología de fondo, ¿Cuál sería su análisis fisiológico?

REFERENCIAS
Guyton, A & Hall, J. Fisiología Médica( 13ed.) España: Elsevier.2016

PRÁCTICA N° 3

SEMINARIO: ANEMIAS

Al finalizar el seminario el estudiante podrá definir el


cuadro clínico de Anemia, su clasificación, así como
los cambios fisiológicos suscitados en la misma.
Logro de aprendizaje: Identificarán y analizarán las principales causas para
su presentación; así como las consecuencias de las
Anemias hemolíticas y Anemias por déficit de
Vitamina B12 y Ácido Fólico.

 El grupo designado para la exposición de esa semana se encargará de la preparación de la misma.

 Toda información de la exposición debe ser extraída de fuentes bibliográficas confiables.

 La exposición se realizará durante toda la sesión y se realizarán las preguntas pertinentes a los expositores y
auditorio en general.

CASO CLÍNICO

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Paciente de 64 años de sexo masculino. Presenta astenia moderada y anorexia progresiva. En los últimos 3 meses
ha perdido 7-8 kilos. Ocasionalmente presenta náuseas y vómitos postprandiales. No presenta debilidad muscular.
Los antecedentes familiares carecen de interés.

Examen físico

Al examen físico destaca buen estado general, marcada palidez mucocutánea; ausencia de adenopatías periféricas;
auscultación cardiopulmonar normal, abdomen blando, depresible y no doloroso; se palpa borde hepático a 2 cm del
reborde costal, sin esplenomegalia; abolición de la sensibilidad vibratoria en ambos pies.

Laboratorio

Hemograma

Hematocrito: 26 % I. Ictérico: < 5 U

Hemoglobina: 8.8 g/dL Leucocitos: 6.100 /μL

Glóbulos rojos: 2.200.000 /μL Plaquetas: 308.000 /μL

CHCM: 33.8 %

VCM: 118.2 fL

Glóbulos rojos: Anisocitosis moderada, macrocitosis marcada, poiquilocitosis moderada, macropolicitos regular
cantidad.

Leucocitos: Normales.

Plaquetas: Normales.

Glicemia: 100 mg/dL (VN: 70-110 mg/dL)


Bilirrubina total: 2.0 mg/dL (VN: hasta 1 mg/dL)
Bilirrubina directa: 0.8 mg/dL (VN: 0-0,3 mg/dL)
Bilirubina indirecta: 1.2 mg/dL (VN: 0,1-1.0 mg/dL)
Deshidrogenasa láctica: 800 UI (VN: 100-190 U/L)
Vitamina B12: 40 pg/mL (VN: 152-630 pg/mL)
Ácido fólico: 14 ng/mL (VN: 2-15 ng/mL)
Mielograma: Hipercelularidad global, sin monomorfismo. Intensa hiperplasia de elementos de la serie eritroide que

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representan un 65% de la celularidad total. Se observan signos muy marcados de megaloblastosis en las series roja
y granulocítica.

Biopsia gástrica: Volumen de jugo gástrico disminuido y aclorhidria (ausencia de HCl libre en jugo gástrico).

Test de Schilling: Eliminación de vitamina B12-Co 0,9%

Eliminación de vitamina B12-Co-FI 18,09%

◆ Respecto al caso presentado, realizar un análisis fisiológico respecto a problemas. Identificar “targets” y
esquematizarlo.

◆ ¿Qué es el Test de Schilling? ¿Cuál es su utilidad?

◆ Respecto a la patología de fondo, ¿Cuál sería su análisis fisiológico?


REFERENCIAS
Guyton, A & Hall, J. Fisiología Médica( 13ed.) España: Elsevier.2016

PRACTICA N° 4

METABOLISMO DEL HIERRO


GRUPO SANGUÍNEO – REACCIONES DE INCOMPATIBILIDAD
Al finalizar la práctica el estudiante reconocerá los
grupos sanguíneos pertenecientes al sistema ABO y el
Logro de aprendizaje: factor RH, también entenderá las reacciones antígeno-
anticuerpo y reconocerá la incompatibilidad del grupo
sanguíneo.
CONCEPTO

Los eritrocitos contienen en la membrana celular una gran cantidad de antígenos que están genéticamente
determinados en cada persona. Estos antígenos están agrupados por sistemas ó grupos, los más conocidos son están
agrupados en los llamados sistema ABO y el sistema Rh.
Cuando se transfunde sangre a una persona de un grupo sanguíneo no compatible, estas pueden desencadenar una
serie de reacciones, entre ellas la Hemólisis pudiendo en su grado más severo llevar a la muerte de la persona. Estas
reacciones son denominadas REACCIONES DE INCOMPATIBILIDAD. Cuando existe una incompatibilidad sanguínea
se produce una reacción iniciada por la unión antígeno-anticuerpo. Los anticuerpos son naturales y principalmente son
del tipo Inmunoglobulina M. Estas reacciones se pueden presentar tanto in vivo como in vitro.

REACCIONES ANTÍGENO-ANTICUERPO

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POSIBILIDADES DE DONACIÓN (Glóbulos Rojos que no sean destruidos al ser recibidas)

DONANTE RECEPTOR
0 (-) UNIVERSAL A (+), A(-), B(+), B(-), AB(+), AB(-), 0(+), 0(-)
0 (+) A (+), B(+), AB(+), 0(+)
A (-) A (+), A(-), AB(+), AB(-)
A (+) A (+), AB(+)
B (-) B(+), B(-), AB(+), AB(-)
B (+) B (+), AB (+)
AB (-) AB (+), AB (-)
AB (+) AB (+)

POSIBILIDADES DE RECEPCIÓN (Plasma no destruye glóbulos rojos)

RECEPTOR DONANTE
AB (+) UNIVERSAL A (+), A(-), B(+), B(-), AB(+), AB(-), 0(+), 0(-)
AB (-) AB (-), B(-), A(-), 0(-)
B (+) B (+), B(-), 0 (+), 0 (-)
B (-) B (-), 0 (-)
A (+) A (+), A (-), 0 (+), 0 (-)
A (-) A (-), 0 (-)
0 (+) 0 (+), 0 (-)
0 (-) 0 (-)

MATERIALES

Materiales de laboratorio Materiales del estudiante

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• Set de grupo sanguíneo (Anti-A, Anti-B, Anti-D). Por estudiante:


• Cuaderno de notas.
• 01 litro de Suero fisiológico.
• Guía de práctica.
• Centrífuga. • Pares de guantes por persona

• 01 pipeta Pasteur.

• 08 Tubos de ensayo 7 x 1 cm por mesa.

• 06 Lancetas por mesa.

• 02 Jeringas Hipodérmicas por mesa de 5cc.

• Jeringas Hipodérmicas de 1 cc.

• 01 litro de Alcohol.

• 02 pares de guantes quirúrgicos desechables por mesa.

• 01 paquete de algodón.

• 01 Frasco de heparina.

• 25 laminas porta-objeto.

• 25 palitos mondadientes.

Detalle Cantidad Detalle Cantidad

Proyector multimedia 1 Cuaderno de notas 1

Pizarra 1 Guía de práctica 1

Plumones 4 Pares de guantes 1

PROCEDIMIENTO

DETERMINACIÓN DEL GRUPO SANGUINEO


1 Proceder a desinfectar la yema del dedo anular de la mano NO dominante.
2. Punzar con una lanceta la yema del dedo desinfectado (sangre capilar).
3. Colocar tres gotas de sangre capilar en una lámina porta-objetos a un centímetro de distancia entre ellos (una al medio y otra
a cada extremo de la lámina).
4. Agregue 1 gota de anticuerpo (aglutinina) Anti-A a la primera gota de sangre; Anti-B a la segunda gota y Anti-D a la tercera
gota (en ese orden de izquierda a derecha).
5. Mézclelo con un mondadientes y observe si hay aglutinación (existe reacción antígeno-anticuerpo). Su presencia nos indicará
la presencia de antígeno.
6. Proceder a identificar el Grupo y Factor del Paciente.

REACCIONES DE INCOMPATIBILIDAD

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1. Escoja dos personas de grupo “incompatible” y obtenga de cada una de ellas 6ml de sangre en una jeringa heparinizada y
coloque en un tubo de ensayo.
2. Centrifugue las muestras a 2000 r.p.m. por 5 minutos.
3. De ambas muestras retire el plasma con una pipeta Pasteur (lo máximo posible) y colóquelo en otro tubo de ensayo (Rotular
Plasma 1 y plasma 2).
4. De ambas muestras y del fondo del tubo, extraiga una muestra del empaquetado globular (1 c.c.) y colóquela en tubos de
ensayo independientes, luego añádale 2cc de suero fisiológico, de esta manera obtendremos una solución de glóbulos rojos
(Rotular Sangre 1 y Sangre 2).
5. Coloque 0,5 cc de la solución de glóbulos rojos de un sujeto con 0,5 cc de plasma del otro sujeto en otro tubo de ensayo
(Rotular P1-S2 y P2-S1).
6. Coloque 0,5 cc de la solución de glóbulos rojos de un sujeto con 0,5 cc de plasma del mismo sujeto, en otro tubo de ensayo,
este será el tubo control (Rotular P1-S1 y P2-S2).
7. Centrifugue los 4 tubos a 1500 rpm durante 3 minutos.
8. Luego retire con una jeringa el contenido sanguíneo del fondo del tubo y extiéndalo en laminas portaobjetos diferentes.
Observar los resultados.

Observe si se presenta formación de grumos, así como el grado de turbidez del plasma. Clasificando la intensidad de la reacción
de acuerdo a la siguiente tabla:

REACCION GRADO
No grumos -
Grumos pequeños, plasma turbio +
Grumos pequeños, plasma limpio ++
Grumos grandes, plasma turbio +++
Grumos grandes, plasma limpio +++

RESULTADOS
Glóbulos Rojos Plasma sujeto 1 Plasma sujeto 2
Grupo................ Grupo.............
Sujeto 1:
Grupo...............
Sujeto 2
Grupo...............

CUESTIONARIO 1
1. Defina inmunidad y explicar las características de las diferentes clases de Inmunidad.
2. ¿Qué son los anticuerpos y que clases existen?
3. ¿Qué son los antígenos y Superantígenos?
4. ¿Cuál es la importancia de reconocer la clasificación del grupo sanguíneo según el grupo ABO y RH? ¿Por qué esta es la
más utilizada? Existe algún otro tipo de clasificación del grupo sanguíneo.
CASO CLÍNICO
Se trata de una paciente femenina de 23 años atendida en el centro de salud, sana, G2POA1, con historia de aborto
incompleto que ameritó legrado uterino en octubre del año 2006 donde no se hizo determinación de grupo y Rh ni aplicación
de inmunoprofilaxis. La paciente consulta en el mes de febrero del año 2007, con 16 5/7 semanas de gestación, por sangrado
transvaginal. Ultrasonido obstétrico demostró desprendimiento placentario menor de 5%, por lo cual se manejó de manera
ambulatoria. En su segunda cita de control laboratorios revelan Grupo O y Rh negativo, por lo que se envía Coombs indirecto,

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el cual es reportado positivo, de manera que la paciente es referida para continuar control en el segundo nivel. Posteriormente
la paciente se presenta en el centro de salud con una epicrisis del Hospital XYZ donde se describe que se le tuvo que tratar
con esquema de maduración pulmonar para realizar inducción del parto por isoinmunización Rh, obteniéndose un producto
masculino vivo pretérmino con una hemoglobina al nacer de 10 g y bilirrubina indirecta en 14 mg/dl.
CUESTIONARIO 2
1. Respecto al caso presentado, realizar un análisis fisiológico respecto a problemas. Identificar “targets” y esquematizarlo.

2. ¿Qué es la isoinmunización Rh?

3. Citar causas de Isoinmunización.

4. ¿Por qué se induce maduración pulmonar a la gestante? ¿Cuál es la importancia de la misma?

REFERENCIAS
Guyton, A & Hall, J. Fisiología Médica( 13ed.) España: Elsevier.2016

PRÁCTICA N°5

PRUEBAS DE HEMOSTASIA – PRÁCTICA SIMULADA. DISCUSIÓN CLÍNICA

Al finalizar la práctica el estudiante conocerá la


importancia de la determinación del tiempo de
sangría, tiempo de coagulación y el tiempo de
Logro de aprendizaje:
recalcificación
También entenderá la importancia clínica que
cumplen estos parámetros en la vida diaria.
HEMOSTASIA

El término HEMOSTASIA significa prevención de la pérdida sanguínea, es así que ante la ruptura vascular ocurren una serie de
eventos a fin de evitar la perpetuidad de la pérdida sanguínea, activándose los procesos de Hemostasia.
Respuesta Hemostática tiene 03 procesos:
1. Hemostasia Primaria: Fase Vascular y Plaquetaria (Adhesión, activación, agregación).
2. Hemostasia Secundaria: Fase Coagulación.
3. Fibrinólisis: Reparación del vaso dañado.

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GUÍA DE LABORATORIO HISTOLOGÍA 2021

Valores Normales

 Tiempo de sangría (Duke): Evalúa la integridad de las primeras etapas de la formación del tapón hemostático, es decir
el espasmo vascular y la formación del tapón plaquetario (cantidad y calidad de plaquetas). Mide el tiempo necesario
para que se detenga la hemorragia, en respuesta a la incisión de vasos subcutáneos pequeños. Su valor normal oscila
entre 2-6 minutos (1-4 min).

 Tiempo de coagulación (Lee-White): el tiempo de coagulación representa una medida del funcionamiento de la vía
intrínseca de la coagulación de la sangre entera. Su valor normal es de 5-15min.

 Tiempo de recalcificación del plasma: (Tiempo de Howell): Determina el tiempo que tarda en coagular el plasma
descalcificado luego de agregarle un exceso de Ca++. Su valor normal oscila entre 100” – 240” (90” – 150”). Evalúa vía
intrínseca.

El citrato de sodio se usa también como un anticoagulante en los tubos usados para tomar sangre en ciertos exámenes de
laboratorio que miden el tiempo de coagulación sanguínea, entre ellas el Tiempo de Tromboplastina Parcial Activado y el tiempo
de protrombina. La concentración de citrato de sodio utilizada como anticoagulante es una variable preanalítica importante
porque puede variar el tiempo de coagulación del plasma sanguíneo ya que la cantidad de citrato presente afecta la
concentración de calcio utilizada en estas pruebas. A mayor concentración de citrato menor concentración de calcio disponible
para promover la formación del coágulo y por lo tanto se obtienen tiempos de coagulación más largos.
MATERIALES
Materiales de laboratorio
Materiales del estudiante
Por sección:
• 04 Lancetas por mesa. Por estudiante:
• 01 paquete de Algodón. • Cuaderno de notas.
• Guía de práctica.
• 01 litro de Alcohol. • Pares de guantes por persona.
• 02 unid. De Papel filtro circular por mesa.

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• 01 Jeringa hipodérmica de 10 cc por mesa.

• 04 tubos de ensayo de 10cc por mesa.

• 01 Gradilla por mesa.

• 02 pares de guantes quirúrgicos por mesa.

• 01 Incubadora a 37º C.

• 01 cronómetro por mesa.

• Solución de Cloruro de calcio.

• Solución de citrato de sodio.


Detalle Cantidad Detalle Cantidad

Proyector multimedia 1 Cuaderno de notas 1

Pizarra 1 Guía de práctica 1

Plumones 4 Pares de guantes 1

PROCEDIMIENTO

TIEMPO DE SANGRIA (Método Duke)


1. Limpiar el lóbulo de la oreja.
2. Realizar una punción de 3mm con una lanceta en la zona desinfectada inmediatamente iniciar con la toma del tiempo.
3. Con el papel filtro secar la sangre cada 30 segundos, sin tocar la herida (Realizar pequeños toques).
4. Al momento que cese el sangrado detener el cronómetro y anotar el tiempo transcurrido.

SE OBTENDRA UNA MUESTRA DE 5cc DE SANGRE NO HEPARINIZADA LA CUAL SERA DISTRIBUIDA DE LA SIGUIENTE
MANERA:

TIEMPO DE COAGULACION (Método Lee y White)


1. Obtener 3ml de sangre venosa.
2. En cuanto se inicia la salida de la sangre iniciar tomar del tiempo.
3. Coloque 1ml. de sangre en 03 tubos de ensayo.
4. Coloque los tubos de ensayo en baño maría a 37º.
5. Cada 30 segundos observe hasta que vea el cambio de estado físico de líquido a sólido (no se mueve al inclinar el tubo de
ensayo) y anote el tiempo transcurrido en que se produzco totalmente el cambio (voltee totalmente el tubo).
6. Anote el valor y saque un promedio de los tiempos

TIEMPO DE RECALCIFICACIÓN
1. Obtenga 4ml. de sangre venosa.
2. Inmediatamente mézclelo con 0.4 ml de solución de citrato de sodio (3,8%) (PREPARACIÓN: 950mg en 25mL de agua
destilada) en un tubo de ensayo.
3. Centrifugue la muestra por 5 minutos a 2000 r.p.m. Al terminar la muestra debe tener dos fases
4. Luego tome 0.3 ml de plasma y llévelo a baño maría a 37ºC por 3 minutos.

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5. Agregue a la muestra con una pipeta, 0.2ml de una solución de cloruro de calcio (0,025M) (PREPARACIÓN: 45 mg en 16 mL
de agua destilada). En este momento prenda el cronómetro, se mezcla y lleva a baño maría.
6. Observe el tiempo en que tarda en aparecer una película de fibrina, observe la muestra cada 30 segundos.
7. Anote el valor.

RESULTADOS
Tiempo de sangría..........................................
Tiempo de Coagulación................................
Tiempo de Recalcificación.............................

CUESTIONARIO

1. Mencione las pruebas que exploran la fase vascular, así como las pruebas que exploran la fase plaquetaria de la hemostasia.
2. Mencione las pruebas que exploran la Vía intrínseca y las pruebas que exploran la vía extrínseca de la coagulación sanguínea.
3. Explique la importancia del calcio en el proceso de la coagulación sanguínea.
4. Cuáles son los anticoagulantes más usados. Explique el mecanismo de acción de cada uno de ellos.

CASO CLÍNICO
Niño de 2 años que luego de caer mientras jugaba en el patio de su casa, la madre nota que el hombro y la parte superior
de su brazo izquierdo aumentan de volumen. Es trasladado al servicio de urgencia a las pocas horas del accidente, por
dolor intenso a nivel de la extremidad superior izquierda.
En la anamnesis remota la madre relata aparición de equímosis ante traumatismos mínimos y epistaxis ocasional. No ha
sido sometido a cirugías previas y no existen antecedentes familiares de fenómenos hemorrágicos importantes. El
paciente no ha recibido ningún tipo de medicamentos.
Examen físico
El médico del servicio de urgencia encontró aumento de volumen e impotencia funcional a nivel de la extremidad superior
izquierda, especialmente a nivel del hombro. Una punción demostró la presencia de sangre fresca por lo que el niño fue
hospitalizado.
Exámenes
Hemograma
Hematocrito: 28 % I. Ictérico: <5 U
Hemoglobina: 9.0 g/dL Leucocitos: 9500 /μL
Glóbulos rojos: 3.200.000/μL Plaquetas: 240.000 /μL
CHCM: 32,1 %
VCM: 82.4 fL Velocidad de Hemosedimentación (VHS): 10 mm/Hr

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Leucocitos: Normales
Plaquetas: Normales
Tiempo de sangría (Ivy modificado): 5 min (VN: < 8 min)
TP: 12 seg (VN: 11-13 seg)
TTPA: 75 seg (VN: 30-40 seg).
TTPA con mezcla de plasma normal 1:1: 38 seg
TT: 20 seg (VN: 18-22 seg)
Factor VIII: 11% (VN: 80-150%)
Factor IX: 95% (VN: 80-150%)

CUESTIONARIO 2

 Respecto al caso presentado, realizar un análisis fisiológico respecto a problemas. Identificar “targets” y
esquematizarlo.
 Defina usted que son las hemofilias.
 ¿Qué tipo de hemofilias usted reconoce? ¿Cuál es su etiología?

REFERENCIAS
Guyton, A & Hall, J. Fisiología Médica( 13ed.) España: Elsevier.2016

PRÁCTICA Nº 06

SEMINARIO: INMUNIDAD. LEUCEMIAS

Al finalizar el presente seminario el estudiante identificará las


clases de inmunidad; así como su importancia en el proceso de
Logro de aprendizaje:
la inflamación. A su vez reconocerá los aspectos más
importantes de la serie blanca,

PROCEDIMIENTO

 El grupo designado para la exposición de esa semana se encargará de la preparación de la misma.

 Toda información de la exposición debe ser extraída de fuentes bibliográficas confiables.

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 La exposición se realizará durante toda la sesión y se realizarán las preguntas pertinentes a los expositores y
auditorio en general.

CASO CLÍNICO

Paciente varón de 27 años, fumador, sin otros antecedentes personales ni familiares de interés. Acude al servicio
médico por la aparición espontánea, una semana antes, de petequias y equimosis en ambas piernas. Además,
se asocia una baja tolerancia al ejercicio (subir escaleras). No relató fiebre.
Examen físico
Se observó múltiples petequias y equimosis en ambas extremidades inferiores. Además, presentaba palidez
mucocutánea y una leve hepatoesplenomegalia.
Laboratorio
Hemograma
Hematocrito : 23 % I. Ictérico : < 5 U
Hemoglobina : 7.7 g/dL Leucocitos : 5.200 /μL
Glóbulos rojos: 2.500.000 /μL Plaquetas : 20.000 /μL
CHCM : 33.5 %
VCM : 92 fL VHS : 64 m/Hr

Glóbulos rojos: Anisocitosis leve.


Leucocitos: 47% de blastos de tamaño grande, con núcleo regular, 1-2 nucléolos
prominentes, regular cantidad de citoplasma granular. Algunos blastos presentan bastones de Auer.
Plaquetas : Marcadamente disminuidas.
Mielograma: médula ósea hipercelular, extensamente infiltrada (90%) por blastos de aspecto mieloide. Algunos
presentan bastones de Auer. Marcada hipoplasia de las series granulocítica, eritroblástica y megacariocítica.
Inmunofenotipo (citometría de flujo): la población blástica estudiada expresó los antígenos CD13(+), CD33 (+),
CD3 (-), CD7(-), CD20 (-), CD34(+), HLA-DR (+), Mieloperoxidasa (+), TdT (-).
Estudio citogenético: 18 de 20 mitosis analizadas presentan t (8;21).

CUESTIONARIO
 Respecto al caso presentado, realizar un análisis fisiológico respecto a problemas. Identificar “targets” y

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esquematizarlo.
 Respecto a los antígenos citados detallar cada uno de ellos y explicar la importancia de estos.

REFERENCIAS
Guyton, A & Hall, J. Fisiología Médica( 13ed.) España: Elsevier.2016

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