2º TÉCNICO SUPERIOR EN

DIETÉTICA Y NUTRICIÓN

MICROBIOLOGÍA E HIGIENE

ALIMENTARIA

PRÁCTICA

RECORDATORIO UTILIZACIÓN MICROSCOPIO: VISIONADO DE

CÉLULAS SANGUÍNEAS E IDENTIFICACIÓN DE HONGOS EN
DISTINTOS ALIMENTOS.

Profesora: Claudia Gómez Reaño

GUIÓN DE PRÁCTICAS

ALUMNO:
 PRÁCTICA 1: UTILIZACIÓN DEL
MICROSCOPIO. VISIONADO DE
CÉLULAS SANGUÍNEAS Y
HONGOS

* INTRODUCCIÓN:

Antes de la invención del microscopio ya era común la utilización de lentes de

aumento, también conocidas como lupas. Las lupas son también un tipo de microscopio
llamado microscopio simple. No obstante, cuando se habla del invento del microscopio hace
generalmente referencia a la idea del microscopio compuesto.

* PARTES:

Las partes de un microscopio se pueden clasificar entre las que pertenecen a su sistema
mecánico y las que pertenecen a su sistema óptico.
 Sistema mecánico: Dentro del sistema mecánico se incluyen todos los
elementos estructurales que dan estabilidad al microscopio y mantienen los
elementos ópticos alineados.

- Base o pie: es la pieza que se encuentra en la parte inferior del microscopio y

sobre la cual se montan el resto de los elementos. Acostumbra a ser la parte más pesante para
proporcionar suficiente equilibrio y estabilidad al microscopio.

- Brazo: el brazo constituye el esqueleto del microscopio. Es la pieza intermedia del

microscopio que conecta todas sus partes. Principalmente conecta la superficie donde se
coloca la muestra con el ocular por donde ésta se puede observar. Tanto las lentes del objetivo
como del ocular se encuentran también conectadas al brazo del telescopio.

- Platina: esta es la superficie donde se coloca la muestra que se quiere observar. Su

posición vertical con respecto a las lentes del objetivo se puede regular mediante dos tornillos
para generar una imagen enfocada. Generalmente hay dos pinzas unidas a la platina que
permiten mantener la muestra en posición fija.

- Pinzas: las pinzas tienen la función de mantener fija la preparación una vez esta se
ha colocado sobre la platina.

- Tornillo macrométrico: este tornillo permite ajustar la posición vertical de la

muestra respecto el objetivo de forma rápida. Se utiliza para obtener un primer enfoque que es
ajustado posteriormente mediante el tornillo micrométrico.

- Tornillo micrométrico: el tornillo micrométrico se utiliza para conseguir un

enfoque más preciso de la muestra. Mediante este tornillo se ajusta de forma lenta y con gran
precisión el desplazamiento vertical de la platina.

- Revólver: es una pieza giratoria donde se montan los objetivos. Cada objetivo tiene
proporciona un aumento distinto, el revólver permite seleccionar el másadecuado a cada
aplicación. Permite escoger entre tres o cuatro objetivos distintos.

- Tubo: el tubo es una pieza estructural unida al brazo del telescopio que
conecta el ocular con los objetivos. Es un elemento esencial para mantener una correcta
alineación entre los elementos ópticos.

 Sistema óptico:

El sistema óptico incluye todos los elementos necesarios para generar y desviar la luz
en las direcciones necesarias y así acabar generando una imagen aumentada de la muestra.

- Foco o fuente de luz: este es un elemento esencial que genera un haz de luz
dirigido hacia la muestra. En algunos casos el haz de luz es primero dirigido haciaun espejo
que a su vez lo desvía hacia la muestra.

- Condensador: elemento encargado de concentrar los rayos de luz

provenientes del foco a la muestra. Los rayos del foco son divergentes.

- Diafragma: pieza que permite regular la cantidad de luz incidente a la muestra.

Normalmente se encuentra situado justo debajo la platina. Regulando la luz incidente es
posible variar el contraste con el que se observa la muestra.

- Objetivo: el conjunto de lentes que se encuentran más cerca de la muestra y que

producen la primera etapa de aumento. El objetivo suele tener una distancia focal muy corta.
Este permite seleccionar el objetivo adecuado para el aumento deseado.

- Ocular: este es el elemento óptico que proporciona la segunda etapa de ampliación

de imagen. El ocular amplía la imagen que ha sido previamente aumentada mediante el
objetivo. El aumento aportado por el ocular es inferior al del objetivo. A través del ocular el
usuario observa la muestra. En función del número de oculares se puede distinguir entre
microscopios monoculares, binoculares…

- Prisma óptico: algunos microscopios incluyen también prismas en su interior para

corregir la dirección de la luz.
 PRIMERA PARTE: VISIONADO DE
CÉLULAS SANGUÍNEAS

* INTRODUCCIÓN:

Vamos a visualizar nuestras propias células de la sangre o de algún compañero y

diferenciar sus componentes y principales tipos de células.

* FUNDAMENTOS TEÓRICOS:
Las tinciones hematológicas se pueden definir como el conjunto de técnicas
necesarias para teñir y diferenciar los distintos componentes de la sangre. Estos
componentes conforman la fracción forme de la sangre, y gracias a las tinciones se pueden
diferenciar en un microscopio óptico.
* MATERIAL NECESARIO:

- Microscopio.
- Portaobjetos.
- Mechero de alcohol.
- Lanceta estéril.
- Cubeta de tinción.
- Frasco lavador.
- Alcohol absoluto.
- Hematoxilina.
- Eosina.

* PROCEDIMIENTO:

1. Con la lanceta estéril realizar una punción en un pulgar.

2. Depositar una gota de sangre en la parte central de un portaobjetos.
3. Colocar un portaobjetos como indica el dibujo y deslizarlo sobre toda la
superficie de la porta de manera que se pueda obtener una fina película de sangre.
La porta absorbe la gota y la arrastra, pero sin pasar nunca por encima de ella para
no dañar los hematíes.
4. Colocar el frotis de sangre sobre la cubeta de tinción y añadir unas gotas de
alcohol absoluto y dejar que el alcohol se evapore para fijar la preparación.
5. Cubrir con unas gotas de hematoxilina y dejar actuar durante 15 minutos. Evitar
la desecación del colorante agregando más líquido.
6. Lavar la preparación y añadir unas gotas de eosina dejándola actuar 1 minuto.
 7. Volver a lavar hasta que no queden restos de colorante.
8. Dejar secar aireando el porta o bien al calor muy lento de la llama del
mechero.
9. Observar al microscopio.

* OBSERVACION MICROSCÓPICA:
Al microscopio se verán con un dominio predominante los glóbulos rojos, hematíes
o eritrocitos teñidos de color rojo por la eosina. No tienen núcleo y son más delgados por
el centro que por los bordes.
- Los glóbulos blancos o leucocitos se identifican fácilmente por la presencia
de núcleo, teñido de morado por la hematoxilina. Hay varias clases de leucocitos:
- Linfocitos: de tamaño aproximado al de los glóbulos rojos, tienen un solo
núcleo que ocupa casi todo el glóbulo.
- Monocitos: son los leucocitos mayores, poco frecuentes normalmente,
núcleo grande, redondo, son los más móviles y su función principal es la
fagocitosis.
- Polimorfonucleares: núcleo fragmentado o arrostrado. Pueden ser
eosinófilos, con abundantes granulaciones teñidas de rojo por la eosina, neutrófilos
y basófilos.
- Las plaquetas no son visibles ya que precisan una técnica especial de
tinción.

* RESULTADOS:
 SEGUNDA PARTE: OBSERVACIÓN DE
HONGOS

* INTRODUCCIÓN:

Se van a observar los hongos que crecen sobre los alimentos. Al ser organismos
heterótrofos, necesitan alimentarse de otras formas de vida, teniendo un estilo de vida muy
ubicuo. Se podrá observar así las estructuras típicas de los hongos (hifas) y sus formas
reproductivas.

* MATERIAL NECESARIO:

 Pan con moho, fruta o alimentos en mal estado.

 Portaobjeto y Cubres.
 Pinzas y Tijeras.
 Mechero Bunsen.
 Agua destilada.
 Celo.
 Azul de metileno.
 Puente de tinción.
 Papel secante.
 Microscopio óptico y Aceite de inmersión.
 Vaso de precipitados y pipetas.

* PROCEDIMIENTO:

1. Cortar unos cuadraditos de celo de 1cm× 1cm y reservar.

2. Esterilizamos las pinzas con el mechero bunsen y dejamos enfriar
3. Colocar la porta sobre el papel secante
4. Poner sobre él una gota de azul de metileno diluido con un poco de agua destilada.
Sin proporción exacta. Sólo para que no quede de un azul tan intenso que al microscopio
no veamos nada. Necesitamos que quede más claro.
 5. Con las pinzas estériles, coger el pedazo de celo y pasar por encima del hongo
del pan, para que éste quede adherido a él
6. Colocar sobre el portaobjetos y la gota de azul de metileno
7. Presionar suavemente con el fin de no dañar las estructuras
8. Poner en un lado del porta el nombre y la muestra que es con un rotulador
indeleble.
9. Colocar la preparación en el microscopio
10. Enfocar de menos a más. Primero con aumento de 4×, luego 25×
11. Dibujar y describir lo que se ve en la preparación
12. Debatir con la clase y el profesor los resultados obtenidos

Para su identificación, ayúdate de la siguiente imagen:

* RESULTADOS