Calibración de pipetas de pistón

PC-027:2019
PROCEDIMIENTO PARA LA CALIBRACIÓN DE PIPETAS DE PISTÓN
DESCRIPCIÓN
Este procedimiento establece las reglas generales que deberá cumplir el metrólogo para efectuar
la calibración de pipetas operadas por pistón con cojín de aire, mediante el método gravimétrico.
PROCEDIMIENTO PARA LA CALIBRACIÓN DE PIPETAS DE PISTÓN
PC – 027 : 2019
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DIRECCIÓN DE METROLOGÍA
PC-027 PROCEDIMIENTO PARA LA CALIBRACIÓN DE PIPETAS DE PISTÓN
CONTENIDO
DESCRIPCIÓN ........................................................................................................................... 1
1. OBJETIVO ......................................................................................................................... 6
2. CAMPO DE APLICACIÓN .................................................................................................. 6
3. DEFINICIONES Y ABREVIATURAS .................................................................................... 6
3.1. Pipeta de pistón ....................................................................................................... 6
3.2. Rango de volumen útil ............................................................................................. 6
3.3. Volumen nominal ..................................................................................................... 7
3.3.1. Para pipetas de pistón de volumen fijo ................................................................... 7
3.3.2. Para pipetas de pistón de volumen variable............................................................ 7
3.3.3. Para pipetas de pistón multicanal............................................................................ 7
3.4. Principio de operación de una pipeta de pistón ...................................................... 7
3.5. Diseño de las pipetas de pistón ............................................................................... 7
3.5.1. Pipetas de pistón de volumen fijo ........................................................................... 7
3.5.2. Pipetas de pistón de volumen variable .................................................................... 8
3.5.3. Pipetas de pistón monocanal ................................................................................... 8
3.5.4. Pipetas de pistón multicanal .................................................................................... 8
3.6. Tipos de pipetas según la interfaz de transmisión................................................... 8
3.6.1. Tipo A o Desplazamiento de aire ............................................................................. 8
3.6.2. Tipo D o Desplazamiento directo o positivo ............................................................ 9
4. MÉTODO DE CALIBRACIÓN Y SU FUNDAMENTO ........................................................... 9
5. INSTRUMENTOS DE MEDICION Y EQUIPOS REQUERIDOS ............................................. 9
5.1. Balanza electrónica ................................................................................................ 10
5.2. Termómetro para el agua ...................................................................................... 10
5.3. Termómetro para el aire ........................................................................................ 10
5.4. Higrómetro ............................................................................................................. 11
5.5. Barómetro .............................................................................................................. 11
6. MATERIALES Y/O EQUIPOS AUXILIARES REQUERIDOS ................................................ 11
6.1. Agua como líquido de referencia ........................................................................... 11
6.2. Recipiente de pesaje .............................................................................................. 11
6.3. Reservorio de agua ................................................................................................ 12
6.4. Puntas de pipeta (tips) ........................................................................................... 12
6.5. Pinzas ..................................................................................................................... 12
7. CONDICIONES DE CALIBRACION ................................................................................... 13
Edición 1° - MARZO, 2019 Página 3 de 56

7.1. Temperatura ambiental en la zona de trabajo ...................................................... 13

7.1.1. Valor único de temperatura de referencia ............................................................ 13
7.1.2. Rango de temperatura de referencia .................................................................... 13
7.2. Humedad relativa del aire...................................................................................... 13
7.3. Presión barométrica............................................................................................... 13
7.4. Condiciones adicionales ......................................................................................... 13
8. CONSIDERACIONES GENERALES.................................................................................... 14
8.1. Visor de selección o indicación de volumen .......................................................... 14
8.2. Visor de ajuste........................................................................................................ 14
8.3. Revisión del instrumento y registro de información ............................................. 14
8.4. Elección de los puntos de calibración .................................................................... 16
8.5. Manipulación de la pipeta de pistón ..................................................................... 16
8.6. Temperatura del agua ............................................................................................ 17
8.7. Condiciones de la balanza ...................................................................................... 17
8.8. Proceso de aspiración del líquido .......................................................................... 17
8.9. Pérdida de masa por evaporación ......................................................................... 18
8.10. Condiciones de limpieza ........................................................................................ 19
8.11. Accesorios de la pipeta de pistón .......................................................................... 20
8.12. Errores máximos permisibles ................................................................................. 20
9. PROCEDIMIENTO DE CALIBRACION .............................................................................. 20
9.1. Pipeta de pistón tipo A monocanal ........................................................................ 20
9.2. Pipeta de pistón tipo A multicanal ......................................................................... 22
9.3. Determinación de la masa de agua evaporada...................................................... 22
10. OBTENCIÓN DE RESULTADOS ................................................................................... 23
10.1. Cálculo del volumen vertido .................................................................................. 23
10.1.1. Fórmula para determinar el volumen ................................................................ 24
10.1.2. Valor de la masa con carga y sin carga .............................................................. 25
10.1.3. Valor de la masa evaporada ............................................................................... 25
10.1.4. Densidad del aire ............................................................................................... 25
10.1.5. Densidad del agua .............................................................................................. 27
10.2. Cálculo de las incertidumbres ................................................................................ 29
10.2.1. Aporte debido a la medición de masa ............................................................... 31
10.2.2. Aporte debido a la densidad de las pesas .......................................................... 34
10.2.3. Aporte debido a la medición de la temperatura y la densidad del agua ........... 35
10.2.4. Aporte debido a la medición de la temperatura, humedad relativa y presión del
aire 37
10.2.5. Repetibilidad de la medición.............................................................................. 39

10.2.6. Influencias sistemáticas de la pipeta de pistón en la calibración ...................... 40

10.2.7. Influencia debida al recargo por manipulación relacionada con el método ..... 43
10.2.8. Influencia debida a la resolución del selector de volumen................................ 45
10.3. Presupuesto de incertidumbre .............................................................................. 45
11. INTERPRETACIÓN DE LOS RESULTADOS ................................................................... 45
11.1. El valor de corrección C.......................................................................................... 45
11.2. Desviación estándar ............................................................................................... 46
12. DOCUMENTOS DE REFERENCIA ................................................................................ 50
ANEXO 1: EJEMPLO TÍPICO DE APLICACIÓN DEL PROCEDIMIENTO..................................... 52

1. OBJETIVO
Este procedimiento establece las reglas generales que deberán cumplir los
especialistas en metrología para efectuar la calibración de pipetas de pistón con cojín
de aire, empleando el método gravimétrico.
2. CAMPO DE APLICACIÓN
Este procedimiento se aplica a pipetas operadas con pistón de desplazamiento de

aire o con cojín de aire (tipo A, según ISO 8655), con un volumen nominal que va
desde 1 µL hasta 10 ml. Estos instrumentos pueden ser de volumen fijo o variable,
monocanal o multicanal, diseñados para verter un volumen de líquido especificado
(Ex).
3. DEFINICIONES Y ABREVIATURAS
Las presentes definiciones deben ser interpretadas teniendo en cuenta el

Vocabulario Internacional de Metrología.
3.1. Pipeta de pistón
Es un instrumento volumétrico diseñado para aspirar y luego verter un volumen de

líquido especificado, de un recipiente a otro. Esto puede realizarse de manera
manual o automática, el control puede ser mecánico, electromecánico o electrónico.
El instrumento no está conectado a ningún reservorio. El instrumento puede
presentar un solo canal (pipeta de pistón monocanal) o múltiples canales (pipeta de
pistón multicanal) para la realización de esta operación.
3.2. Rango de volumen útil
El rango de volumen útil corresponde al intervalo de indicación del instrumento para

el cual se puede verter líquido bajo la observación de sus errores máximos
permisibles (ver 8.12).

3.3. Volumen nominal
3.3.1. Para pipetas de pistón de volumen fijo
El volumen nominal del instrumento es el valor único de volumen especificado por

el fabricante.
3.3.2. Para pipetas de pistón de volumen variable
El volumen nominal es el límite superior del rango de volumen útil del instrumento,
especificado por el fabricante. Por ejemplo, si una pipeta de pistón de volumen
variable tiene un rango de volumen útil de 10 µl a 100 µl, su volumen nominal es 100
µl.
3.3.3. Para pipetas de pistón multicanal
El volumen nominal es el límite superior del rango de volumen útil del instrumento.
3.4. Principio de operación de una pipeta de pistón
Con un volumen seleccionado en la pipeta de pistón, el pulsador de pipeteado

presionado a un nivel determinado (el pulsador mueve el pistón interior) y la punta
(o tip) de la pipeta hundida a una cierta profundidad en el líquido con el que se desea
trabajar, el pistón es elevado para que aspire el valor seleccionado de líquido. El
líquido aspirado es entonces expulsado al presionar el pulsador. Algunas pipetas de
pistón con desplazamiento de aire tienen un sistema de soplado para asegurar la
expulsión de todo el líquido aspirado.
3.5. Diseño de las pipetas de pistón
3.5.1. Pipetas de pistón de volumen fijo
Son pipetas diseñadas para verter únicamente un único volumen de líquido el cual
corresponde al volumen nominal indicado por la pipeta.

3.5.2. Pipetas de pistón de volumen variable
Son pipetas diseñadas para verter volúmenes seleccionados por el usuario los cuales
se encuentran dentro de su rango de volumen útil.
3.5.3. Pipetas de pistón monocanal
Son pipetas de pistón que poseen un único canal, que se usa para la aspiración y
expulsión de líquido (ver Figura 1). Esta puede ser de volumen fijo o variable.
3.5.4. Pipetas de pistón multicanal
Son aquellas pipetas de pistón que poseen una serie de canales independientes cuyos
pistones se desplazan de manera simultánea bajo la acción de un mecanismo común
(ver Figura 2).
Figura 1:Pipeta de pistón monocanal tipo A
3.6. Tipos de pipetas según la interfaz de transmisión
3.6.1. Tipo A o Desplazamiento de aire
En este tipo de pipetas, el pistón no se encuentra en contacto directo con el líquido

ya que existe un volumen de aire (llamado también cojín de aire, volumen de cámara
de aire o volumen de aire muerto) contenido entre ambos. El cojín de aire está
definido por el volumen de aire que existe entre el orificio de la punta y el pistón
cuando está en la posición que lo deja listo para aspirar el líquido.

3.6.2. Tipo D o Desplazamiento directo o positivo
En este tipo de pipetas, existe un contacto directo entre el pistón y el líquido aspirado
(ver Figura 3).
Figura 2: Pipeta multicanal tipo A Figura 3: Pipeta de desplazamiento

positivo
4. MÉTODO DE CALIBRACIÓN Y SU FUNDAMENTO
El método gravimétrico consiste en determinar el volumen de líquido vertido por el

instrumento volumétrico de pistón a ser calibrado. Esta determinación es indirecta
debido a que esta se basa en la medición de la masa del líquido vertido por la pipeta
de pistón y el cálculo de su densidad.
5. INSTRUMENTOS DE MEDICION Y EQUIPOS REQUERIDOS
Los instrumentos y equipos de medición deben tener las siguientes características o

mejores, además de estar calibrados:

5.1. Balanza electrónica
La balanza electrónica debe tener una resolución y exactitud de acuerdo con lo

indicado en la Tabla 1.
Tabla 1
Características de la balanza para el volumen seleccionado a calibrar
Incertidumbre
Repetibilidad y
Volumen Resolución estándar de la
linealidad
Seleccionado 𝑽 (mg) medición
(mg)
(mg)
1 μL ≤ 𝑉 ≤ 10 μL 0,001 0,002 0,002
10 μL < 𝑉 ≤ 100 μL 0,01 0,02 0,02
100 μL < 𝑉 ≤ 1 000 μL 0,1 0,2 0,2
1 ml < 𝑉 ≤ 10 ml 0,1 0,2 0,2
De manera práctica para la elección de la balanza puede usarse el volumen nominal

del instrumento.
Si la incertidumbre estándar de la medición de la balanza es conocida, como por
ejemplo del certificado de calibración esta puede ser usada en lugar de la
repetibilidad y la linealidad.
La balanza debe estar calibrada y su incertidumbre estándar indicada en su
certificado de calibración debe cumplir con lo indicado en la Tabla 1.
5.2. Termómetro para el agua
El termómetro debe estar calibrado y su incertidumbre expandida, según su

certificado de calibración, debe ser menor o igual a 0,05 °C (ver Figura 4).
5.3. Termómetro para el aire
El termómetro para la medición de la medición de la temperatura del aire debe tener

una incertidumbre expandida, según su certificado de calibración, menor o igual a
0,05 °C . El termómetro debe ser sensible a los rápidos cambios de temperatura del
aire del laboratorio. Para cumplir con este propósito, el termómetro puede ser uno

de inmersión y, la temperatura debe ser medida usando la sonda externa al cuerpo

de este.
5.4. Higrómetro
El higrómetro debe estar calibrado, y su certificado debe indicar una incertidumbre

expandida menor o igual a 3 % h. r. .
5.5. Barómetro
El barómetro debe estar calibrado, y su certificado de calibración debe mostrar una

incertidumbre expandida menor o igual a 0,5 hPa.
6. MATERIALES Y/O EQUIPOS AUXILIARES REQUERIDOS
6.1. Agua como líquido de referencia
El agua puede ser de Grado 3 de acuerdo a lo especificado en la ISO 3696, o agua

destilada con conductividad menor que 4 µS/cm. Con fines prácticos, a lo largo del
documento, a este tipo de agua se le llamará simplemente “agua” o “líquido”. El
agua no debe presentar burbujas. Entre los tipos de purificación se recomienda la
destilación porque permite eliminar el aire disuelto.
6.2. Recipiente de pesaje
El recipiente de pesaje debe ser de cuerpo de vidrio y tener forma y dimensiones que
permitan operar el instrumento de acuerdo con las instrucciones del fabricante (se
recomienda una proporción altura – diámetro de al menos 3:1). Se puede usar de
preferencia un recipiente con boca pequeña como un matraz, una probeta delgada
o un vial. La capacidad del frasco de pesaje debe ser tan pequeña como práctica. Para
volúmenes de ensayo menores que 50 µL se recomiendan usar viales con tapa (para
minimizar las pérdidas de líquido por evaporación) (ver Figura 5). La tapa no debe
estar en contacto con el líquido. El frasco y su tapa deben ser de un material no
poroso. Para volúmenes de ensayo mayores pueden utilizarse recipientes sin tapa
con capacidad no mayor a 5 veces el volumen a ser medido.

6.3. Reservorio de agua
El reservorio de agua deberá ser un vaso de vidrio con tamaño suficiente para
albergar la sonda del termómetro de inmersión y tener dimensiones apropiadas para
realizar las mediciones con comodidad. (ver Figura 4).
6.4. Puntas de pipeta (tips)
Las puntas de pipeta son diseñadas para los volúmenes a ser ensayados y
generalmente son suministradas por el cliente. Cada medición de volumen se realiza
con una punta (tip) diferente y estas se descartan después de su uso, a menos que el
fabricante especifique su reúso.
6.5. Pinzas
Las pinzas son necesarias para sujetar el recipiente de pesaje y minimizar el contacto
directo de este con la mano.
Figura 4: Termómetro y reservorio de Figura 5: Recipiente de pesaje (para

agua volúmenes menores a 1000 µl) sujetado
por unas pinzas.

7. CONDICIONES DE CALIBRACION
7.1. Temperatura ambiental en la zona de trabajo
7.1.1. Valor único de temperatura de referencia
Si el instrumento tiene un valor único de temperatura de referencia, la temperatura

media ambiental debe coincidir con dicha temperatura o ser un valor muy cercano a
ella. La diferencia entre la temperatura media ambiental y la temperatura de
referencia no debe ser mayor a 1 °C.
7.1.2. Rango de temperatura de referencia
Si el instrumento presenta un rango de temperatura de referencia, la temperatura

media ambiental en la zona de trabajo debe estar en dicho rango.
Para los casos indicados en 7.1.1 y en 7.1.2, la oscilación máxima de temperatura

ambiental debe estar dentro del límite de ± 0,5 °C .
7.2. Humedad relativa del aire
La humedad relativa debe estar por encima del 50 %, sin embargo, no debe
producirse condensación de agua. La oscilación máxima de humedad relativa debe
estar dentro del límite de ± 5 % h.r. .
7.3. Presión barométrica
La presión barométrica media puede ir desde 600 hPa hasta 1100 hPa . La oscilación
máxima de presión debe estar dentro del límite de ± 3 hPa .
7.4. Condiciones adicionales
La temperatura del ambiente, la cual influye en los equipos analíticos, el agua y el

instrumento a ser calibrado (incluyendo las partes removibles: por ejemplo, las
puntas) debe cumplir los requisitos indicados al menos desde las 3 h previas al inicio

de la calibración. Este periodo de tiempo servirá para que la pipeta de pistón alcance
el equilibrio con las condiciones ambientales.
8. CONSIDERACIONES GENERALES
8.1. Visor de selección o indicación de volumen
El visor puede ser digital o analógico. En el caso de un visor digital de una pipeta de
pistón de volumen variable, al fijar el volumen a calibrar, el visor no debe mostrar un
valor ambiguo o ilegible en ninguno de sus dígitos. Se debe verificar que la indicación
del visor se mantenga constante durante el proceso de aspirado y expulsión de
líquido con la pipeta de pistón (ver Figura 6).
En el caso de los visores analógicos, la línea correspondiente al volumen seleccionado

y la marca (flecha o línea) de fijado deben coincidir. Como ayuda, se puede observar
la alineación de ambos con un solo ojo, lo cual ayudará a evitar errores de paralaje.
8.2. Visor de ajuste
Existen pipetas de pistón que presentan un visor de ajuste en el cual se muestra el

grado de variación del volumen que el usuario del instrumento puede establecer
respecto a su ajuste de fábrica. Este valor usualmente es indicado de manera
numérica, no necesariamente expresado con unidades de medida.
Durante todo el proceso completo de calibración el valor de ajuste no debe ser
modificado.
8.3. Revisión del instrumento y registro de información
Las mediciones realizadas durante la calibración se anotarán en un registro de

medición.
Juntamente con la fecha de ejecución de la calibración, se deben registrar la
información de la pipeta de pistón, la cual puede estar indicada en la superficie del
instrumento, en su manual de instrucciones de fabricante, o en otra fuente de
información oficial del fabricante:

• Marca o nombre del fabricante.

• Modelo, en caso exista.
• Propósito de diseño (Ex).
• Volumen nominal (ver 3.3) o Rango de volumen útil (ver 3.2).
• Resolución.
• Número de canales, en caso se trate de una pipeta de pistón multicanal (ver 3.5)
• Temperatura de referencia o rango de temperatura de referencia.
• Número de serie y/o código de identificación del instrumento.
• Valor de lectura del visor de ajuste (ver 8.2), en caso exista.
• Lugar de fabricación del instrumento (país).
Figura 6: Partes de una pipeta de pistón monocanal tipo A. Imagen cortesía del
documento Gilson guide to pipetting, Second Edition.
En el caso de las pipetas multicanal, se debe identificar y registrar cada canal que se
está calibrando. Esta identificación no debe ser ambigua. En caso el instrumento no

tenga ninguna marca, indicación o señal para distinguir los canales, se le debe asignar
y grabar un número (por ejemplo: “1”) o una forma de identificación legible al menos
en uno de los dos canales que se encuentran en las zonas más extremas del
instrumento.
Se debe registrar la información de los instrumentos de medición a emplear, las

condiciones ambientales (ver 7), los puntos de calibración (ver 8.4), así como el error
sistemático máximo permisible y el error aleatorio máximo permisible del
instrumento (ver 8.12)
Con la finalidad de tener un mayor conocimiento de la condición del instrumento al

momento de su calibración y para que sea mostrado en su certificado y/o informe de
calibración, el valor mostrado en el visor de ajuste (ver 8.2), en caso exista, debe ser
registrado.
8.4. Elección de los puntos de calibración
Para pipetas de pistón de volumen fijo (ver 3.5.1), el punto de calibración es su

volumen nominal.
Para pipetas de pistón de volumen variable monocanal (ver 3.5.3) y volumen variable
multicanal (ver 3.5.4), la calibración debe realizarse en por lo menos tres volúmenes,
tomando de preferencia:
• El volumen nominal (ver 3.3);

• Aproximadamente el 50 % del volumen nominal;
• El límite más bajo del rango de volumen útil (ver 3.2) o el volumen
correspondiente al 10 % del volumen nominal, el que sea más grande.
De calibrarse más de tres puntos, es preferible que los valores se encuentren

uniformemente distribuidos en el rango de volumen útil del instrumento.
8.5. Manipulación de la pipeta de pistón

Un factor crítico que influye sobre la exactitud de las mediciones es la manipulación

del instrumento a calibrar. El instrumento debe ser manipulado de acuerdo con lo
establecido en el manual de instrucciones del fabricante. Si el manual indicara algún
detalle de la manipulación diferente de lo indicado en este procedimiento, será
prioridad realizar la manipulación tal como lo indica el manual. En el caso excepcional
que no existiese un manual de uso para la pipeta de pistón, éste podría ser
manipulado según el manual de instrucciones de un instrumento que presente
características físicas y de diseño similares.
8.6. Temperatura del agua
Otro factor crítico es la medición de la temperatura del agua, la cual debe ser
registrada cuando la lectura del termómetro en el agua permanece estable. Para ello
se debe colocar el agua en un reservorio desde el cual se extraerán las muestras con
la pipeta de pistón. En este recipiente se medirá la temperatura del agua (Figura 4).
Es deseable mantener el termómetro dentro del reservorio para la medición
permanente de la temperatura del agua durante todo el tiempo que dure la
calibración.
8.7. Condiciones de la balanza
La balanza debe estar nivelada y estable en su base. El área de ubicación de la balanza

debe estar razonablemente libre de vibraciones y corrientes de aire. La ubicación de
la balanza debe permanecer inalterable durante toda su calibración.
Al encender la balanza se debe esperar el tiempo de calentamiento que indique su
manual de fabricante, para luego realizar su respectivo ajuste.
8.8. Proceso de aspiración del líquido
Para realizar la aspiración del líquido con la pipeta de pistón (Figura 7), la punta (tip)
debe estar colocada de manera hermética en la pipeta de pistón y la indicación de
volumen debe estar claramente definida en el visor de indicación de volumen (8.1).

La siguiente serie de pasos es genérica, por lo que para mayor detalle sobre cada
etapa se sugiere revisar el manual de instrucciones del fabricante del instrumento a
calibrar.
• Presionar el pistón hasta el primer tope.

• Sumergir de manera vertical la punta en el líquido del reservorio a la profundidad
indicada en la Tabla 2. En caso esta información sea indicada en el manual de
instrucciones del fabricante, se preferirá su uso.
• Liberar lentamente el pistón hasta su posición inicial.
• Esperar el tiempo indicado en la Tabla 2, de acuerdo con el valor nominal de la
pipeta. En caso esta información sea indicada en el manual de instrucciones del
fabricante, se preferirá su uso.
• Retirar la punta del líquido. Tocar la punta de la pipeta con la superficie interna y
seca del reservorio de agua, eso es para retirar cualquier gota de agua adherida a
la superficie externa de la punta.
El líquido aspirado por el instrumento será posteriormente depositado en otro

recipiente.
8.9. Pérdida de masa por evaporación
Las mediciones de masa deben realizarse en forma cuidadosa y rápida para minimizar
las pérdidas de masa de agua por evaporación, lo cual puede constituir una fuente
de error. El tiempo requerido para completar la pesada de un volumen vertido debe
ser mantenido al mínimo, idealmente no debería exceder de 60 segundos. Ver 9.3
para determinar la cantidad de agua evaporada en un punto de calibración.

Tabla 2
Profundidad de inmersión y tiempo de espera para el volumen seleccionado 𝑉
Profundidad de
Volumen seleccionado 𝑽 Tiempo de espera (s)
inmersión (mm)
0,1 μL ≤ 𝑉 ≤ 1 μL 1-2 1
1 μL < 𝑉 ≤ 100 μL 2-3 1
100 μL < 𝑉 ≤ 1 000 μL 2-4 1
1 000 μL < 𝑉 3-6 3
8.10. Condiciones de limpieza
Al comenzar la calibración, la pipeta de pistón, el frasco de pesaje, el termómetro

para el agua y los demás instrumentos auxiliares deben estar bien limpios. La
limpieza del material de vidrio a usar debe realizarse de manera que no deje residuos
que contaminen el agua a emplear para la calibración. La limpieza de la superficie
externa de la pipeta de pistón puede hacerse con un líquido que no lo dañe o
comprometa su funcionamiento.
Figura 7: Esquema interno del proceso de aspiración de líquido en pipetas de pistón tipo A.

8.11. Accesorios de la pipeta de pistón
Las puntas (tips) deben ajustarse herméticamente a la pipeta de pistón, además

deben estar libres de suciedad, líquidos u otros elementos que afecten el correcto
proceso de medición. Las puntas no deben presentar residuos después de que se
realice la expulsión del líquido aspirado.
Se debe prestar atención a los accesorios o partes intercambiables que pueda

requerir la pipeta de pistón para su correcto funcionamiento, por ejemplo, algún
filtro en la zona de acoplamiento de los tips.
Las puntas (tips) hechas de plástico están diseñadas para un solo uso por lo que no
deben ser lavadas y/o limpiadas para su reutilización ya que sus características
metrológicas podrían no ser confiables.
Es imperativo que la calibración de la pipeta de pistón sea realizada con puntas no

usadas.
8.12. Errores máximos permisibles
Los límites máximos permisibles (para el error sistemático y el error aleatorio) a

tomar en consideración deberán ser los indicados en la norma ISO 8655-2:2002 (o en
su más reciente actualización), salvo que el receptor del servicio de calibración
solicite que se indiquen los errores máximos permisibles declarados en el manual del
fabricante.
9. PROCEDIMIENTO DE CALIBRACION
9.1. Pipeta de pistón tipo A monocanal
Habiendo registrado la información de acuerdo con lo indicado en 8.3 y teniendo

agua en el reservorio (ver 8.6), se proceden a realizar los siguientes pasos para cada
punto de calibración, empezando por el volumen más pequeño:

a) Seleccionar el valor de volumen a calibrar (ver 8.1) y colocar la punta (tip) en la

pipeta de pistón (ver 6.4)
b) Repetir 5 veces el siguiente proceso de humectación: Aspirar líquido del
reservorio y expulsar el líquido en un recipiente de residuos (ver 8.8)
c) Cambiar la punta (tip)
d) Asegurarse de que el recipiente de pesaje contenga al menos 3 mm de altura en
líquido y que el área cerca a la boca del recipiente (incluyendo la tapa, en caso se
use) se encuentren secos (ver 6.3).
e) Realizar los siguientes pasos para la medición:
• Colocar el recipiente de pesaje tapado en la balanza previamente tarada.

• Humectar la punta: Aspirar líquido del reservorio (ver 8.8) y expulsar el líquido
en un recipiente de residuos.
• Registrar la masa del recipiente.
• Retirar el recipiente de pesaje de la balanza y retirar la tapa.
• Aspirar líquido del reservorio (ver 8.8).
• Tocar la punta (tip) en la pared interior del recipiente de pesaje (formando un
ángulo de 30° a 45°), presionar el émbolo para verter el líquido. Retirar la punta
lentamente arrastrándola de 8 mm a 10 mm aproximadamente hasta que no
exista contacto con el recipiente de pesaje.
• Liberar lentamente el émbolo hasta su posición inicial.
• Colocar la tapa al recipiente de pesaje.
• Colocar el recipiente de pesaje en la balanza y registrar el valor de la masa.
• Registrar el valor de la temperatura del agua del reservorio, la temperatura del
aire, la humedad relativa y la presión del aire.
f) Repetir los pasos a) hasta e) hasta obtener tener un mínimo de 10 mediciones.

g) Determinar y registrar la masa del agua evaporada de acuerdo con lo indicado en
9.3.

9.2. Pipeta de pistón tipo A multicanal
Para una pipeta multicanal, se calibra cada canal como si se tratara de una pipeta
monocanal, para ello se deberá seguir lo indicado en 9.1, teniendo presente lo
establecido en 8.3.
9.3. Determinación de la masa de agua evaporada
La determinación de la masa de agua evaporada 𝑚𝑒𝑣𝑎𝑝 se aplicará para volúmenes

menores o iguales a 50 µL .
A pesar de usar un frasco con tapa como recipiente de pesaje es posible que la
evaporación durante el proceso de vertido del líquido no sea despreciable para
algunos volúmenes de ensayo por lo que es necesario realizar una corrección debido
a la evaporación. La determinación de la masa de agua evaporada es realizada
mediante un ensayo que consiste en simular el vertido de líquido dentro del
recipiente de pesaje. Asegurarse de que el recipiente de pesaje contenga
previamente al menos 3 mm de altura de agua. El procedimiento a seguir es el
siguiente:
a) Colocar el recipiente de pesaje tapado en la balanza y tarar.

b) Retirar el recipiente de la balanza y retirar la tapa.
c) Simular el proceso de aspiración y vertido del líquido (pero con la descarga del
líquido en un recipiente de desechos), tomándose el mismo tiempo que un
proceso de medición individual.
d) Tapar el recipiente de pesaje, colocarlo nuevamente en la balanza y anotar la
indicación en valor absoluto, el cual brindará el valor de la masa evaporada.
Realizar la prueba cuatro veces para cada punto de calibración.

El valor promedio de los resultados obtenidos para la masa de agua
evaporada 𝑚𝑒𝑣𝑎𝑝 , por punto de calibración, es sumado a cada masa registrada como
corrección. El valor de 𝑚𝑒𝑣𝑎𝑝 es usada para la corrección del volumen vertido por la
pipeta de pistón y para la determinación del aporte de incertidumbre debido a la
masa evaporada.

10. OBTENCIÓN DE RESULTADOS
10.1. Cálculo del volumen vertido
El método de cálculo siguiente se aplica para cada uno de los volúmenes

seleccionados en los que se ha calibrado el instrumento.
El volumen resultante 𝑉𝑅𝑒𝑠𝑢𝑙𝑡 en una calibración para un volumen seleccionado

𝑉𝑠𝑒𝑙𝑒𝑐 en una pipeta de pistón está dado por
𝑉𝑅𝑒𝑠𝑢𝑙𝑡 = 𝑉̅ + 𝛿𝑉𝑅𝑒𝑝 + 𝛿𝑉𝑇𝐷𝑖𝑓 + 𝛿𝑉𝜑 + 𝛿𝑉𝑝𝐿 + 𝛿𝑉𝑚𝑒𝑡 + 𝛿𝑉𝑟𝑒𝑠 , (1)
donde
𝛿𝑉𝑅𝑒𝑝 es el error debido a la variabilidad de los 𝑛 valores observados de volumen
𝑉𝑖 , donde 𝑖 = 1, 2, … , 𝑛 . Su esperanza matemática es cero, pero
contribuye a la incertidumbre.
𝛿𝑉𝑇𝐷𝑖𝑓 es el mensurando asociado a las fluctuaciones de temperatura en la punta
de la pipeta de pistón. Su esperanza matemática es cero, pero contribuye
a la incertidumbre.
𝛿𝑉𝜑 es el mensurando que indica las fluctuaciones de humedad en la pipeta
de pistón. Su esperanza matemática es cero, pero contribuye a la
incertidumbre.
𝛿𝑉𝑝𝐿 es el mensurando que indica las fluctuaciones de presión barométrica en
la pipeta de pistón. Su esperanza matemática es cero, pero contribuye a
la incertidumbre.
𝛿𝑉𝑚𝑒𝑡 es el mensurando que indica la influencia de la recarga del método. Su
esperanza matemática es cero, pero contribuye a la incertidumbre.
𝛿𝑉𝑟𝑒𝑠 Es el mensurando asociado a resolución visual en la selección del volumen
cuando el selector es de diseño analógico. Su esperanza matemática es
cero, pero contribuye a la incertidumbre.
𝑉̅ es la media del volumen de líquido vertido por el instrumento para 𝑛
mediciones en un volumen seleccionado 𝑉𝑠𝑒𝑙𝑒𝑐 . Este se calcula como

𝒏
𝟏
𝑽̅ = ∑ 𝑽𝒊 , (2)
𝒏
𝒊=𝟏
donde 𝑉𝑖 corresponde al volumen calculado en cada medida independiente del

grupo de 𝑛 mediciones. Cada 𝑉𝑖 es calculado en base al conjunto completo de
magnitudes de entrada obtenidas en la realización de la medición y es expresada
mediante la Ec. (3).
10.1.1. Fórmula para determinar el volumen
El modelo para el cálculo del volumen 𝑉 en una medición está definido por
𝜌𝑎 1
𝑉 = (𝑚𝐼 − 𝑚𝑧 + 𝑚𝑒𝑣𝑎𝑝 + 𝛿𝑚𝐷𝑒𝑟 + 𝛿𝑚 𝑇𝐷𝑖𝑓 ) (1 − )( ), (3)
𝜌𝑝𝑒𝑠𝑎 𝜌𝑤 − 𝜌𝑎
donde
𝑚𝐼 es el valor real de la masa con carga, correspondiente a la lectura de la
balanza cuando se pesa el recipiente con agua.
𝑚𝑧 es el valor real de la masa sin carga, correspondiente a la lectura de la
balanza cuando se pesa el recipiente antes de verter el líquido a medir.
𝑚𝑒𝑣𝑎𝑝 es el valor absoluto de la masa evaporada. Este valor está establecido
como un valor promedio. Ver 9.3.
𝜌𝑎 es la densidad del aire.
𝜌𝑝𝑒𝑠𝑎 es la densidad real de las pesas de la balanza cuando éstas son ajustadas
a su masa nominal, o la densidad de referencia para la cual han sido
ajustadas las pesas, o, cuando se utiliza una balanza electrónica sin pesas,
la densidad (de referencia) de las pesas con las cuales ésta ha sido
ajustada. Como generalmente para esta balanza se emplean pesas de
clase E2, se puede considerar un valor genérico que abarca todo el rango
de densidad de pesas de acero inoxidable: 7950 kg/m³.
𝜌𝑤 es la densidad del agua, la cual es determinada para cada medición.

𝛿𝑚𝐷𝑒𝑟 es el mensurando que indica la deriva del valor real asociado a la

indicación de la balanza propia del envejecimiento y/u uso. Su esperanza
matemática es cero, pero contribuye a la incertidumbre.
𝛿𝑚 𝑇𝑑𝑖𝑓 es el mensurando que indica la variación de la indicación de la balanza por
la variación de la temperatura del aire. Su esperanza matemática es cero,
pero contribuye a la incertidumbre.
La corrección encontrada, 𝐶 está dada por
𝐶 = 𝑉𝑅𝑒𝑠𝑢𝑙𝑡 − 𝑉𝑠𝑒𝑙𝑒𝑐 (4)
Nota: Como se observa en la fórmula, 𝑉𝑅𝑒𝑠𝑢𝑙𝑡 y 𝐶 se reportan a la temperatura del

aire, humedad relativa del aire y presión atmosférica registrados durante la
calibración.
10.1.2. Valor de la masa con carga y sin carga
El valor de la masa 𝑚𝑋 asociada a una lectura 𝑋 en la balanza, es obtenida del

certificado de calibración de la balanza. En el procedimiento de calibración de
balanzas PC-11 está expresada de manera similar a la siguiente fórmula:
𝑚𝑋 = 𝑋 + 𝑎1 𝑋 (5)
Se debe emplear una fórmula similar para determinar 𝑚𝐼 y 𝑚𝑍 de acuerdo con la

constante 𝑎1 que brinde el certificado de calibración.
10.1.3. Valor de la masa evaporada
La masa evaporada debe ser expresada como valor absoluto, con su respectiva
unidad de medida (ver 9.3).
10.1.4. Densidad del aire

Mediante la fórmula establecida por la ecuación CIPM-2007 en el artículo de Picard

& Davis se determina la densidad del aire en función de algunas variables cuyos
valores son medibles en el laboratorio: temperatura, humedad relativa, presión
atmosférica, entre otros. Sin embargo, según recomendación de la OIML, se puede
estimar la densidad del aire con una fórmula simplificada en su versión exponencial
y cuya incertidumbre servirá para los propósitos de este procedimiento:
0,34848 × 10−2 𝑝 − 0,009ℎ ∙ exp(0,061𝑡) (6)

𝜌𝑎 = ,
273,15 + 𝑡
donde
𝑝 = 𝑝𝑎 + 𝛿𝑝𝐷𝑒𝑟 + 𝛿𝑝𝐷𝑖𝑓
ℎ = ℎ𝑎 + 𝛿ℎ𝐷𝑒𝑟 + 𝛿ℎ𝐷𝑖𝑓
𝑡 = 𝑡𝑎 + 𝛿𝑡𝐷𝑒𝑟 + 𝛿𝑡𝐷𝑖𝑓
𝑝 presión atmosférica, el cual presenta un valor real 𝑝𝑎 ,en Pa.
ℎ humedad relativa, el cual presenta un valor real ℎ𝑎 , expresado de manera
porcentual.
𝑡 temperatura del aire, el cual presenta un valor real 𝑡𝑎 en °C.
La fórmula ofrece una buena exactitud para el siguiente rango:
600 hPa ≤ 𝑝𝑎 ≤ 1100 hPa

20 % ≤ ℎ𝑎 ≤ 80 %
15 °C ≤ 𝑡𝑎 ≤ 27 °C
Los términos 𝛿𝑝𝐷𝑒𝑟 , 𝛿ℎ𝐷𝑒𝑟 , 𝛿𝑡𝐷𝑒𝑟 corresponden a las derivas de los valores reales
asociados a la indicación de sus respectivos instrumentos de medición. Sus
esperanzas matemáticas son cero, pero contribuyen a la incertidumbre.
Los términos 𝛿𝑝𝐷𝑖𝑓 , 𝛿ℎ𝐷𝑖𝑓 , 𝛿𝑡𝐷𝑖𝑓 son los asociados con las variaciones durante la
calibración. Sus esperanzas matemáticas son cero, pero contribuyen a la
incertidumbre.

10.1.5. Densidad del agua
La densidad del agua puede ser determinada mediante la fórmula de Tanaka, la cual
es usada ampliamente por los institutos nacionales de metrología alrededor del
mundo. Se debe tener especial cuidado en cuantificar adecuadamente la abundancia
isotópica, el porcentaje de aire disuelto y la presión del aire en el laboratorio.
La determinación de la densidad del agua 𝜌𝑤 mediante la fórmula de Tanaka es

expresada como una función de la temperatura y de la presión atmosférica:
𝜌𝑤 = (𝐹𝑤 + 𝐹𝑎𝑑 ) × 𝐹𝑐𝑜𝑚𝑝 + 𝛿𝜌𝑤 , (7)
donde
(𝑡𝑤 + 𝑎1𝑤 )2 (𝑡𝑤 + 𝑎2𝑤 ) (8)
𝐹𝑤 = 𝑎5𝑤 [1 − ],
𝑎3𝑤 (𝑡𝑤 + 𝑎4𝑤 )
𝑎1𝑤 = 3,983 035 °C

𝑎2𝑤 = 301,797 °C
𝑎3𝑤 = 522 528,9 °C 2
𝑎4𝑤 = 69,348 81 °C
𝑎5𝑤 = 999,972 kg m−3
𝑡𝑤 = 𝑡𝑤0 + 𝛿𝑡𝑤𝐷𝑒𝑟 + 𝛿𝑡𝑤𝐷𝑖𝑓
𝑡𝑤0 valor real de la temperatura del agua, en °C, donde 0 °𝐶 ≤ 𝑡𝑤0 ≤ 40 °𝐶

𝛿𝑡𝑤𝐷𝑒𝑟 mensurando que indica la deriva del valor real asociado a la indicación del
termómetro propia del envejecimiento y/o uso. Su esperanza matemática
es cero, pero contribuye a la incertidumbre.
𝛿𝑡𝑤𝐷𝑖𝑓 mensurando que indica la variación de la temperatura del agua durante
la calibración. Su esperanza matemática es cero, pero contribuye a la
incertidumbre.

𝛿𝜌𝑤 mensurando que indica la variación de la densidad del agua respecto a la

fórmula de densidad del agua a emplear. Su esperanza matemática es
cero, pero contribuye a la incertidumbre.
La fórmula es aplicable cuando la temperatura del agua está en el rango 0 °C ≤ 𝑡𝑤 ≤

40 °C .
El factor de corrección por aire disuelto 𝐹𝑎𝑑 se obtiene de
𝐹𝑎𝑑 = 𝑠0 + 𝑠1 𝑡𝑤 , (9)
donde
𝑠0 = −4,612 × 10−3 kg m3
𝑠1 = 0,106 × 10−3 kg m3 °C −1
El factor de compresibilidad se establece como
𝐹𝑐𝑜𝑚𝑝 = [1 + (𝑘0 + 𝑘1 𝑡𝑤 + 𝑘2 𝑡𝑤 2 )(𝑝 − 𝑝𝑠𝑡𝑑 )], (10)
donde
𝑝 = 𝑝𝑎 + 𝛿𝑝𝐷𝑒𝑟 + 𝛿𝑝𝐷𝑖𝑓
𝑝𝑠𝑡𝑑 = 101 325 Pa
𝑘0 = 50,74 × 10−11 Pa−1
𝑘1 = −0,326 × 10−11 Pa−1 °C −1
𝑘2 = 0,004 16 × 10−11 Pa−1 °C−1
𝑝𝑎 presión atmosférica, en Pa .
𝛿𝑝𝐷𝑒𝑟 mensurando que indica la deriva del valor real asociado a la indicación del
barómetro propia del envejecimiento y/o uso. Su esperanza matemática
es cero, pero contribuye a la incertidumbre.
𝛿𝑝𝐷𝑖𝑓 mensurando que indica la variación de la presión atmosférica durante la
calibración. Su esperanza matemática es cero, pero contribuye a la
incertidumbre.

El factor de corrección por aire disuelto no afecta significativamente su densidad para

los propósitos de este procedimiento de calibración, por lo que la ecuación de
densidad del agua sería simplificada a:
𝜌𝑤 = 𝐹𝑤 × 𝐹𝑐𝑜𝑚𝑝 + 𝛿𝜌𝑤 (11)
Se puede observar que el volumen 𝑉 está en función de varias variables, es decir,
𝑉 = 𝑉(𝑚𝐼 , 𝑚0 , 𝑚𝑒𝑣𝑎𝑝 , 𝛿𝑚𝐷𝑒𝑟 , 𝛿𝑚 𝑇𝑑𝑖𝑓 , 𝑡𝑎 , 𝛿𝑡𝐷𝑒𝑟 , 𝛿𝑡𝐷𝑖𝑓 , ℎ𝑎 , 𝛿ℎ𝐷𝑒𝑟 ,

𝛿ℎ𝐷𝑖𝑓 , 𝑝𝑎 , 𝛿𝑝𝐷𝑒𝑟 , 𝛿𝑝𝐷𝑖𝑓 , 𝜌𝑝𝑒𝑠𝑎 , 𝑡𝑤0 , 𝛿𝑡𝑤𝐷𝑒𝑟 , 𝛿𝑡𝑤𝐷𝑖𝑓 , 𝛿𝜌𝑤 ) (12)
10.2. Cálculo de las incertidumbres
Los aportes de incertidumbre pueden ser del tipo A o del tipo B, y deben ser
claramente indicados cuando se establezca el presupuesto de incertidumbre y cada
uno asociado con su respectiva distribución de probabilidad.
De acuerdo a la Guía para la expresión de la Incertidumbre, para una variable 𝑌 =

𝑓(𝑋1 , 𝑋2 , … , 𝑋𝑁 ) que está en función de 𝑁 variables independientes y la no
linealidad de 𝑓 no es significativa, la incertidumbre estándar combinada 𝑢𝑐 (𝑦) es la
raíz cuadra positiva de su varianza 𝑢𝑐2 (𝑦), donde la varianza es expresada como:
𝑁 2 (13)
𝜕𝑓
𝑢𝑐2 (𝑦) = ∑( | ) 𝑢2 (𝑥𝑖 ) ,
𝜕𝑋𝑖 𝑋 =𝑥
𝑖=1 𝑖 𝑖
donde 𝑦, 𝑥1 , 𝑥2 , … , 𝑥𝑁 son las esperanzas matemáticas de 𝑌, 𝑋1 , 𝑋2 , … , 𝑋𝑁

respectivamente.
También se define el coeficiente se sensibilidad 𝑐𝑖
𝜕𝑓 𝜕𝑓 (14)
𝑐𝑥𝑖 = | = |
𝜕𝑋𝑖 𝑋 =𝑥 𝜕𝑋𝑖 𝑥
𝑖 𝑖 1 ,𝑥2 ,…,𝑥𝑁

Nota: tal como lo indica la expresión, después de que la fórmula de cada coeficiente
de sensibilidad es determinada, esta debe ser evaluada en los valores promedio de
cada variable 𝑋1 , 𝑋2 , … , 𝑋𝑁 .
Para el presente procedimiento, la incertidumbre expandida se reporta con un factor

de cobertura k = 2 (para un 95 % de cobertura del intervalo de distribución) con lo
que se obtiene:
𝑈𝑐 (𝑦) = 𝑘 ∙ 𝑢𝑐 (𝑦) (15)
Aplicando la Ec. (13) a la definición del volumen vertido 𝑉𝑅𝑒𝑠𝑢𝑙𝑡 , se obtiene su

respectiva incertidumbre estándar:
2
𝜕𝑉𝑟𝑒𝑠𝑢𝑙𝑡 2 2 𝜕𝑉𝑟𝑒𝑠𝑢𝑙𝑡
𝑢𝑐2 (𝑉𝑟𝑒𝑠𝑢𝑙𝑡 ) =( ) 𝑢 (𝑉̅ ) + ( ) 𝑢2 (𝛿𝑉𝑅𝑒𝑝 )
𝜕𝑉̅ 𝜕𝛿𝑉𝑅𝑒𝑝
2 2
𝜕𝑉𝑟𝑒𝑠𝑢𝑙𝑡 𝜕𝑉𝑟𝑒𝑠𝑢𝑙𝑡
+( ) 𝑢2 (𝛿𝑉𝑇𝐷𝑖𝑓 ) + ( ) 𝑢2 (𝛿𝑉𝜑 )
𝜕𝛿𝑉𝑇𝐷𝑖𝑓 𝜕𝛿𝑉𝜑
2
𝜕𝑉𝑟𝑒𝑠𝑢𝑙𝑡 𝜕𝑉𝑟𝑒𝑠𝑢𝑙𝑡 2 2
+( ) 𝑢2 (𝛿𝑉𝑝𝐿 ) + ( ) 𝑢 (𝛿𝑉𝑚𝑒𝑡 )
𝜕𝛿𝑉𝑝𝐿 𝜕𝛿𝑉𝑚𝑒𝑡
𝜕𝑉𝑟𝑒𝑠𝑢𝑙𝑡 2 2
+( ) 𝑢 (𝛿𝑉𝑟𝑒𝑠 )
𝜕𝛿𝑉𝑟𝑒𝑠 (16)
Teniendo en cuenta que 𝑢2 (𝑉̅ ) = 𝑢2 (𝑉) y el hecho de que todas las derivadas
parciales son iguales a uno, la Ec.
(16) se simplifica en:
𝑢𝑐2 (𝑉𝑟𝑒𝑠𝑢𝑙𝑡 ) = 𝑢2 (𝑉̅ ) + 𝑢2 (𝛿𝑉𝑅𝑒𝑝 ) + 𝑢2 (𝛿𝑉𝑇𝐷𝑖𝑓 ) + 𝑢2 (𝛿𝑉𝜑 )

+ 𝑢2 (𝛿𝑉𝑝𝐿 ) + 𝑢2 (𝛿𝑉𝑚𝑒𝑡 ) + 𝑢2 (𝛿𝑉𝑟𝑒𝑠 ) (17)
La incertidumbre expandida asociada está expresada por:

𝑈𝑐 (𝑉𝑅𝑒𝑠𝑢𝑙𝑡 ) = 2 ∙ 𝑢𝑐 (𝑉𝑅𝑒𝑠𝑢𝑙𝑡 ) (18)
Teniendo en cuenta que 𝑉 está en función de muchas variables (ver Ec. (12)), por lo
que el desarrollo del término 𝑢2 (𝑉̅) será detallado en los aportes de sus
componentes individuales, mostradas en desde el acápite 10.2.1 hasta el 10.2.4.
El término correspondiente a 𝑢2 (𝛿𝑉𝑅𝑒𝑝 ) es desarrollado en el acápite 10.2.6.
Los términos correspondientes a 𝑢2 (𝛿𝑉𝑇𝐷𝑖𝑓 ) , 𝑢2 (𝛿𝑉𝜑 ) y 𝑢2 (𝛿𝑉𝑝𝐿 ) , debido a las

diferencias sistemáticas en la pipeta de pistón serán desarrollados en el acápite
10.2.6.
El término relacionado con la incertidumbre debido a la influencia de la recarga del

método 𝑢2 (𝛿𝑉𝑚𝑒𝑡 ) es desarrollado en el acápite 10.2.7.
El término relacionado con la incertidumbre debido a la resolución del selector de

volumen de la pipeta de pistón 𝑢2 (𝛿𝑉𝑟𝑒𝑠 ) es desarrollado en el acápite 10.2.8 .
10.2.1. Aporte debido a la medición de masa
El aporte de incertidumbre debido a la medición de la masa es la resultante de los

siguientes aportes:
• La lectura de la balanza con carga: 𝑢(𝑚𝐼 )

• La lectura de la balanza sin carga: 𝑢(𝑚𝑧 )
• Deriva histórica de la balanza: 𝑢(𝛿𝑚𝐷𝑒𝑟 )
• Cambio de masa por diferencia de temperatura: 𝑢(𝛿𝑚 𝑇𝑑𝑖𝑓 )
• Pérdida de masa por evaporación: 𝑢(𝑚𝑒𝑣𝑎𝑝 )
Los coeficientes de sensibilidad asociados con 𝑚𝐼 , 𝑚𝑍 , 𝑚𝑒𝑣𝑎𝑝 , 𝛿𝑚 𝑇𝑑𝑖𝑓 y 𝛿𝑚𝐷𝑒𝑟 son:

𝑉
𝑐𝑚𝐼 = 𝑐𝑚𝑒𝑣𝑎𝑝 = 𝑐𝛿𝑚𝐷𝑒𝑟 = −𝑐𝑚𝑧 = 𝑐𝛿𝑚𝑇 = (19)
𝐷𝑖𝑓 (𝑚𝐼 − 𝑚𝑧 + 𝑚𝑒𝑣𝑎𝑝 )
Lectura de la balanza con carga y sin carga
Como la masa del volumen vertido por la pipeta de pistón es estimada como una
diferencia de masa, es decir, la diferencia de masa del recipiente de pesaje con el
líquido (con carga) y el recipiente de pesaje sin el líquido vertido (sin carga), las
contribuciones de incertidumbre en ambas condiciones son estimadas como las
incertidumbres estándar en las respectivas lecturas de la balanza a emplear para la
calibración.
Las lecturas de la balanza tienen una distribución de probabilidad normal cuya

incertidumbre estándar debe ser obtenida de su certificado de calibración.
Nota: Usualmente, cuando una balanza es calibrada, en su certificado de calibración

se contempla la influencia de la repetibilidad, resolución, excentricidad e histéresis,
por lo que no se consideraría necesario volver a colocar estas componentes en el
presupuesto de incertidumbre, salvo exista justificación técnica.
Generalmente, los certificados de calibración para balanzas tienen la siguiente

expresión para la determinación del valor de incertidumbre estándar 𝑢(𝑚𝑋 ) para
una indicación 𝑋:
𝑢(𝑚𝑋 ) = 𝑈(𝑚𝑋 )⁄2 = √𝐶1 + 𝐶2 𝑋 2 , (20)
donde 𝐶1 y 𝐶2 son las constantes propias asignadas para la balanza, producto de su

calibración.
Pérdida de masa por evaporación

En el proceso de medición, al tener el recipiente de pesaje abierto durante parte del

proceso, se produce pérdida de masa por evaporación. Esta pérdida de masa es
cuantificada y su aporte de incertidumbre 𝑢(𝑚𝑒𝑣𝑎𝑝 ) debe ser estimado. La
distribución de probabilidad para este aporte es rectangular con un ancho igual a la
máxima diferencia entre cada valor de masa evaporada 𝑚𝑒𝑣𝑎𝑝𝑖 (donde 𝑖 = 1 … 4) y
su valor medio 𝑚
̅ 𝑒𝑣𝑎𝑝 , esto para un punto de calibración dado, por lo que su
incertidumbre estándar asociada estaría expresada como
𝑚𝑎𝑥|𝑚
̅ 𝑒𝑣𝑎𝑝 − 𝑚𝑒𝑣𝑎𝑝𝑖 | (21)
𝑢(𝑚𝑒𝑣𝑎𝑝 ) =
√3
Deriva en masa por temperatura
La balanza debe estar calibrada a las mismas condiciones ambientales en las que se
calibran las pipetas de pistón. Cuando existen fluctuaciones de la temperatura del
aire, su incertidumbre y coeficiente de sensibilidad deben ser estimados. La
distribución de probabilidad asignada es rectangular.
El coeficiente de sensibilidad e incertidumbre estándar para la deriva en la masa,
𝑢 (𝛿𝑚 𝑇𝐷𝑖𝑓 ) por la variación de la temperatura del aire está dado por:
𝑐𝑇𝐷𝑖𝑓 ≅ 𝐶𝑠𝑒𝑛𝑠𝑇 × (𝑚
̅𝐼 − 𝑚
̅ 𝑍) (22)
𝑢(𝑇𝐷𝑖𝑓 ) = 𝑚𝑎𝑥{∆𝑡𝑎 }⁄2√3 (23)
𝑢 (𝛿𝑚 𝑇𝐷𝑖𝑓 ) = 𝑐𝑇𝐷𝑖𝑓 ∙ 𝑢(𝑇𝐷𝑖𝑓 ) (24)
El valor de 𝐶𝑠𝑒𝑛𝑠𝑇 representa el cambio en la sensibilidad de la balanza por cambio

de temperatura. Su valor dependerá de lo indicado en el manual del fabricante de la
balanza. Por ejemplo, una balanza de resolución de 1 μg y capacidad de 5 g de una
marca X, tiene un valor de 𝐶𝑠𝑒𝑛𝑠𝑇 de 1 ppm/°C .
El valor 𝑚𝑎𝑥{∆𝑡𝑎 } representa la variación máxima de temperatura del aire 𝑡𝑎

durante la calibración.

Nota: Similar interpretación debe aplicarse cuando se tenga el término 𝑚𝑎𝑥{∆𝑋} el

cual representará la variación máxima de la variable 𝑋 durante la calibración.
Deriva histórica de la balanza
El comportamiento histórico a largo plazo o deriva de la balanza y su respectivo

aporte de incertidumbre tiene que ser tomado en cuenta ya que, por la frecuencia
de uso, toda balanza sufre un desgaste o envejecimiento. Esto se hace analizando los
tres (03) últimos certificados de calibración de la balanza y evaluando la diferencia
máxima de los valores de masa entre certificados consecutivos. Su incertidumbre
estándar tiene una distribución de probabilidad rectangular y está expresada por
𝑢(𝛿𝑚𝐷𝑒𝑟 ) = 𝑚𝑎𝑥{𝐷𝑒𝑟𝑖𝑣𝑎(𝑚𝐼 )}⁄√3 (25)
El valor 𝑚𝑎𝑥{𝐷𝑒𝑟𝑖𝑣𝑎(𝑚𝐼 )} representa el valor máximo de la deriva de la variable 𝑚𝐼 .
Nota: Similar razonamiento debe aplicarse cuando se tenga el término

𝑚𝑎𝑥{𝐷𝑒𝑟𝑖𝑣𝑎(𝑋)}, el cual representará el valor máximo de la deriva de la variable 𝑋.
La deriva, expresada por 𝐷𝑒𝑟𝑖𝑣𝑎(𝑋) es obtenida analizando el cambio en el valor
convencionalmente verdadero entre dos certificados de calibración consecutivos.
10.2.2. Aporte debido a la densidad de las pesas
Se debe conocer la incertidumbre estándar de la densidad de las pesas empleadas

para la calibración de la balanza. Según la publicación OIML R111-1, un valor de
incertidumbre expandida (k=2) para pesas de alta exactitud hechas de acero
inoxidable es de 140 kg/m3 . La distribución de probabilidad es rectangular. El
coeficiente de sensibilidad e incertidumbre asociada son:
𝜌𝑎 𝑉 (26)
𝑐𝜌𝑝𝑒𝑠𝑎 = ( )
𝜌𝑝𝑒𝑠𝑎 𝜌𝑝𝑒𝑠𝑎 − 𝜌𝑎

(27)
𝑢(𝜌𝑝𝑒𝑠𝑎 ) = 70 kg/m3
10.2.3. Aporte debido a la medición de la temperatura y la densidad del agua
La diferencia de temperatura entre el aire y el agua debe ser muy pequeña. Para
obtener incertidumbres pequeñas, la diferencia entre la temperatura del agua y del
aire debería ser menor a 0,2 °C . Sin embargo, se podría tener una diferencia de hasta
0,5 °C , estimando apropiadamente el impacto de esta diferencia.
La incertidumbre de la temperatura del agua debe incluir las contribuciones de la

incertidumbre del certificado de calibración del termómetro, la deriva histórica del
termómetro, y la variación de la temperatura del agua durante la calibración.
Es indispensable tener en cuenta que de acuerdo con las dimensiones del recipiente
que contiene el líquido, se debe asegurar que no exista un gradiente de temperatura
significativo. En caso exista, este debe ser cuantificado.
De la fórmula de la densidad del agua, se puede obtener el coeficiente de sensibilidad

asociado a la temperatura del agua 𝑐𝑡𝑤 y la primera componente del coeficiente de
sensibilidad asociada a la presión atmosférica 𝑐𝑝1 ya que la otra componente asociada
provendrá de la fórmula para la determinación de la densidad del aire. Ver Ec. (34).
−𝑉
𝑐𝑝1 = ∙ {𝑎5𝑤 ∙ (𝑘0 + 𝑘1 𝑡𝑤 + 𝑘2 𝑡𝑤 2 )
𝜌𝑤 − 𝜌𝑎 (28)
(𝑡𝑤 + 𝑎1𝑤 )2 (𝑡𝑤 + 𝑎2𝑤 )
∙ [1 − ]}
𝑎3𝑤 (𝑡𝑤 + 𝑎4𝑤 )

𝑐𝑡𝑤0 = 𝑐𝛿𝑡𝑤 = 𝑐𝛿𝑡𝑤

𝐷𝑒𝑟 𝐷𝑖𝑓
−𝑉
= ∙ {𝐹𝑐𝑜𝑚𝑝
𝜌𝑤 − 𝜌𝑎
−𝑎5𝑤 2(𝑡𝑤 + 𝑎1𝑤 )(𝑡𝑤 + 𝑎2𝑤 )
∙( ){
𝑎3𝑤 𝑡𝑤 + 𝑎4𝑤
1 𝑡𝑤 + 𝑎2𝑤
+ (𝑡𝑤 + 𝑎1𝑤 )2 . [ − ]} + 𝐹𝑤
𝑡𝑤 + 𝑎4𝑤 (𝑡𝑤 + 𝑎4𝑤 )2
∙ (𝑘1 + 2𝑘2 𝑡𝑤 )(𝑝 − 𝑝𝑠𝑡𝑑 )}

(29)
La incertidumbre asociada a la temperatura del agua es:
𝑢(𝑡𝑤0 ) incertidumbre estándar del termómetro, obtenida de su certificado de

calibración.
Las incertidumbres asociadas a la deriva del termómetro, 𝑢(𝛿𝑡𝑤𝐷𝑒𝑟 ) y a la variación
de la temperatura del agua durante la calibración 𝑢 (𝛿𝑡𝑤𝐷𝑖𝑓 ) son:
𝑢(𝛿𝑡𝑤𝐷𝑒𝑟 ) = 𝑚𝑎𝑥{𝐷𝑒𝑟𝑖𝑣𝑎(𝑡𝑤 )}⁄√3 (30)
𝑢 (𝛿𝑡𝑤𝐷𝑖𝑓 ) = 𝑚𝑎𝑥{∆𝑡𝑤0 }⁄2√3 (31)
Las incertidumbres estándar asociadas a 𝛿𝑝𝐷𝑒𝑟 y 𝛿𝑝𝐷𝑖𝑓 se indican en el análisis de los

aportes debido a la temperatura, humedad relativa y presión del aire.
La incertidumbre de la densidad del agua puede ser determinada de manera

experimental mediante el uso de un densímetro con principio de funcionamiento de
alta exactitud, como por ejemplo un densímetro del tipo oscilatorio; o mediante el
uso de patrones sólidos de densidad de alta exactitud. En caso se use agua destilada
o ultrapura como líquido de referencia en densidad para la calibración, se debe usar
su incertidumbre estándar asociada.

Para el factor asociado a la densidad del agua, 𝛿𝜌𝑤 , se tiene una estimación de 10
ppm para la diferencia máxima esperada de la densidad de diversos lotes de agua
destilada producida, comparada con la densidad calculada por la fórmula de Tanaka.
Esto equivale a 10 × 10−3 kg/m3 y se debería a la calidad de la producción de agua
destilada y al desconocimiento de la proporción exacta de aire disuelto y la
abundancia isotópica. A falta de información, para otros tipos de agua purificada que
se use y que cumplan el requisito 6.1 se puede asumir el mismo valor.
La distribución de probabilidad es rectangular y su coeficiente de sensibilidad

𝑐𝜌𝑤 está dado por:
−𝑉 (32)
𝑐𝛿𝜌𝑤 =
(33)
𝑢(𝛿𝜌𝑤 ) = 10 × 10−3 /√3 kg/m3
10.2.4. Aporte debido a la medición de la temperatura, humedad relativa y presión del aire
La humedad relativa, la temperatura y la presión de aire del laboratorio influyen en

el volumen vertido y en la cantidad de masa evaporada en la calibración.
La presión del aire varía de acuerdo con la altitud geográfica y afecta directamente
la densidad del aire, el empuje de la balanza y el volumen vertido, por ello el
resultado de su calibración será válido para zonas geográficas de similar altitud
geográfica.
Sin embargo, se puede realizar una corrección para mostrar el resultado del volumen
para una presión atmosférica diferente, esto también implica que se cuantifique la
contribución de incertidumbre debido a esta corrección. Se debe mostrar evidencia
experimental realizada por el propio laboratorio que respalde la corrección a aplicar.
La humedad relativa del aire afecta directamente el volumen vertido. Una reducción
en la humedad relativa producirá una disminución del volumen vertido.

Una manera de reducir el error debido a la evaporación es haciendo que la humedad

relativa en el área de pesaje se incremente, pero evitando la condensación del agua,
usando una trampa de vapor. En este procedimiento no se contemplará esta opción
en los cálculos.
Los coeficientes de sensibilidad para la temperatura del aire 𝑡, la humedad relativa ℎ

y la segunda componente del coeficiente sensibilidad para la presión atmosférica 𝑐𝑝2 :
1 1 0,34848 × 10−2
𝑐𝑝2 = 𝑉 ∙ [ − ][ ] (34)
𝜌𝑤 − 𝜌𝑎 𝜌𝑝𝑒𝑠𝑎 − 𝜌𝑎 273,15 + 𝑡
𝑐ℎ𝑎 = 𝑐𝛿ℎ𝐷𝑒𝑟 = 𝑐𝛿ℎ𝐷𝑖𝑓

1 1 −0,009 ∙ exp(0,061𝑡) (35)
=𝑉∙[ − ][ ]
𝜌𝑤 − 𝜌𝑎 𝜌𝑝𝑒𝑠𝑎 − 𝜌𝑎 273,15 + 𝑡
𝑐𝑡𝑎 = 𝑐𝛿𝑡𝐷𝑒𝑟 = 𝑐𝛿𝑡𝐷𝑖𝑓
=𝑉
1
∙[
1 −𝜌𝑎 − 5,49 × 10−4 ∙ ℎ ∙ exp(0,061𝑡) (36)
− ][ ]
𝜌𝑝𝑒𝑠𝑎 − 𝜌𝑎 273,15 + 𝑡
Y el coeficiente de sensibilidad total asociado con la presión atmosférica está dado

por:
𝑐𝑝𝑎 = 𝑐𝛿𝑝𝐷𝑒𝑟 = 𝑐𝛿𝑝𝐷𝑖𝑓 = 𝑐𝑝1 + 𝑐𝑝2 (37)
Para la temperatura, humedad relativa y presión atmosférica, se pueden obtener sus

incertidumbres estándar en base a las que ofrecen los instrumentos que miden estos
mensurandos, es decir sus aportes de incertidumbre estándar por certificado de
calibración, deriva histórica y deriva durante la calibración:

𝑢(𝑝𝑎 ) incertidumbre estándar del barómetro, obtenida de su certificado de

calibración.
𝑢(ℎ𝑎 ) incertidumbre estándar del higrómetro, obtenida de su certificado de
calibración.
𝑢(𝑡𝑎 ) incertidumbre estándar del termómetro, obtenida de su certificado de
calibración.
Adicionalmente, tenemos:
𝑢(𝛿𝑝𝐷𝑒𝑟 ) = 𝑚𝑎𝑥{𝐷𝑒𝑟𝑖𝑣𝑎(𝑝𝑎 )}⁄√3 (38)
𝑢(𝛿𝑝𝐷𝑖𝑓 ) = 𝑚𝑎𝑥{∆𝑝𝑎 }⁄2√3 (39)
𝑢(𝛿ℎ𝐷𝑒𝑟 ) = 𝑚𝑎𝑥{𝐷𝑒𝑟𝑖𝑣𝑎(ℎ𝑎 )}⁄√3 (40)
𝑢(𝛿ℎ𝐷𝑖𝑓 ) = 𝑚𝑎𝑥{∆ℎ𝑎 }⁄2√3 (41)
𝑢(𝛿𝑡𝐷𝑒𝑟 ) = 𝑚𝑎𝑥{𝐷𝑒𝑟𝑖𝑣𝑎(𝑡𝑎 )}⁄√3 (42)
𝑢(𝛿𝑡𝐷𝑖𝑓 ) = 𝑚𝑎𝑥{∆𝑡𝑎 }⁄2√3 (43)
Usualmente los certificados de calibración de estos instrumentos sensores incluyen

factores como la repetibilidad, reproducibilidad y resolución como aportantes de
incertidumbre, pero si no son considerados, deben incluirse en el presupuesto de
incertidumbre final.
10.2.5. Repetibilidad de la medición
La incertidumbre de la repetibilidad puede ser estimada mediante la desviación

estándar experimental de la media y su valor dependerá del número de mediciones
que se realice. La incertidumbre estándar es expresada como:
𝜎 (44)
𝑢(𝜎) = ,
√𝑛
donde 𝜎 es la desviación estándar muestral para 𝑛 mediciones. El coeficiente de

sensibilidad asociado es:

𝑐𝜎 = 1 (45)
Por lo que la incertidumbre debida a la repetibilidad es:
𝑢(𝛿𝑉𝑅𝑒𝑝 ) = 𝑐𝜎 ∙ 𝑢(𝜎) (46)
10.2.6. Influencias sistemáticas de la pipeta de pistón en la calibración
Dentro de la cavidad de la pipeta de pistón que comprende el volumen de aire

muerto y el espacio ocupado por la punta (tip) que se sujeta al orificio del mango de
la pipeta de pistón se desarrollan procesos de intercambio de masa y energía que
deben ser tomados en cuenta para estimar de manera más realista la incertidumbre
de la calibración.
Diferencias de temperatura agua, del aire, pipeta
El nivel de temperatura absoluta tiene un impacto pequeño en el volumen, pero un

gran efecto es resultante de las diferencias de temperatura particularmente entre el
sistema pipeta - cojín de aire y el líquido a usar.
La punta (tip) de la pipeta de pistón cambia su temperatura debido al proceso de

humectación haciendo que también cambia la temperatura de la porción de aire que
el tip contiene. Al realizar el proceso de aspiración de la columna de líquido, la
porción de aire frio de la punta se elevará y adquirirá la temperatura del entorno
(mango), esto producirá cambios en el volumen del cojín de aire y por ende cambios
en el volumen del líquido aspirado.
La incertidumbre estándar asociada al cambio de volumen 𝛿𝑉𝑇𝐷𝑖𝑓 , está directamente

relacionada con la diferencia máxima entre la temperatura del aire y la del agua
durante la calibración y cuya incertidumbre es 𝑢(𝛿𝑡𝑎−𝑤 ), y puede ser estimada
como:

𝑢(𝛿𝑡𝑎−𝑤 ) = 𝑚𝑎𝑥{|𝑡𝑎 − 𝑡𝑤0 |}⁄√3 , (47)
𝑢(𝛿𝑉𝑇𝐷𝑖𝑓 ) = 𝑐𝛿𝑡𝑎−𝑤 𝑢(𝛿𝑡𝑎−𝑤 ) , (48)
donde 𝑡𝑎 es la temperatura del aire y 𝑡𝑤0 es la temperatura del agua, ambos

obtenidos en cada medición realizada. Adicionalmente, el coeficiente de sensibilidad
𝑐𝛿𝑡𝑎−𝑤 asociado está indicado por la siguiente relación:
𝑉̅
𝑐𝛿𝑡𝑎−𝑤 = , (49)
𝑡𝑎̅ + 273,15
donde 𝑡𝑎̅ es la temperatura promedio del aire.
Humedad del aire
En el proceso de aspiración del líquido se produce una transferencia de masa de la

columna de líquido hacía el volumen de aire muerto produciendo el aumento de su
saturación de vapor.
La humectación repetida del volumen de aire muerto durante la preparación para la

medición es esencial para asegurar la repetibilidad de las mediciones. Otra influencia
importante es el cambio producido en la humedad relativa del ambiente. El cambio
que se puede producir en el volumen es de aproximadamente un 0,08 % del volumen
nominal por cada 10 % de cambio en la humedad relativa, por lo tanto, su
incertidumbre y coeficiente de sensibilidad son:
𝑢(𝛿ℎ𝑠𝑖𝑠𝑡 ) = 𝑚𝑎𝑥{∆ℎ𝑎 }⁄2√3 (50)
0,08% ∙ 𝑉𝑛𝑜𝑚𝑖𝑛𝑎𝑙
𝑐𝛿ℎ𝑠𝑖𝑠𝑡 = (51)
10% ℎ. 𝑟.
𝑢(𝛿𝑉𝜑 ) = 𝑐𝛿ℎ𝑠𝑖𝑠𝑡 ∙ 𝑢(𝛿ℎ𝑠𝑖𝑠𝑡 ) (52)
Presión del aire

El cambio en la presión barométrica interna origina cambios en la compresibilidad

del cojín de aire dentro de la cavidad de la pipeta. Esto origina cambios en el volumen
de líquido aspirado. Para determinar la incertidumbre estándar se tiene que estimar
la deriva de la presión del aire del laboratorio durante la calibración. La distribución
de probabilidad para incertidumbre debido a esta diferencia de presión es triangular.
Expresado de forma termodinámica, el volumen 𝑉 de una columna de líquido de

altura ℎ𝑤 que se encuentra en la punta de la pipeta de pistón puede ser estimado
mediante la siguiente ecuación:
1 (53)
𝑉 ≈ 𝑉𝐻𝑢𝑏 − 𝑉𝑇 𝜌𝑤 𝑔ℎ𝑤 ∙ ( ),
𝑝𝐿 − 𝜌𝑤 𝑔ℎ𝑤
donde
𝑔 es la aceleración de la gravedad local
𝑉𝑇 es el volumen del cojín de aire
𝑉𝐻𝑢𝑏 es el volumen definido desde la punta del tip hasta el pistón, cuando este
está levantado
𝑝𝐿 es la presión atmosférica inmediatamente antes de la inmersión del tip
en el agua. Esta puede aproximarse a la presión atmosférica promedio
durante la calibración.
𝜌𝑤 es la densidad del agua
El coeficiente de sensibilidad aproximado para el cambio en la presión 𝑝𝐿 tiene la

siguiente forma:
𝑉𝑇 𝜌𝑤 𝑔ℎ𝑤 (54)
𝑐𝑝𝐿 ≈
𝑝𝐿2
La incertidumbre estándar asociada 𝑢(𝑝𝐿 ) se determina como un cambio en las

condiciones meteorológicas máximas locales, la cual equivale a un valor aproximado
de 20 hPa, con una distribución de probabilidad triangular.

𝑢(𝑝𝐿 ) ≈ 20 hPa⁄√6 (55)
𝑢(𝛿𝑉𝑝𝐿 ) = 𝑐𝑝𝐿 ∙ 𝑢(𝑝𝐿 ) (56)
Para determinar el coeficiente de sensibilidad, se debe conocer el valor de 𝑉𝑇 y ℎ𝑤

para cada valor de volumen establecido en la pipeta de pistón a calibrar.
En la Tabla 3 se presentan valores estimados experimentalmente según un estudio

del reporte experto DKD-E 8-2. Sin embargo, el laboratorio debe determinar valores
más exactos correspondientes al modelo del instrumento a calibrar.
10.2.7. Influencia debida al recargo por manipulación relacionada con el método
Esta componente abarca muchas influencias tales como, la histéresis del mecanismo
de movimiento del pistón de la pipeta, la reproducibilidad de la pipeta, la
manipulación relacionada con el método la cual incluye factores como el ángulo de
inclinación, uniformidad del ritmo de pipeteado, tiempo de espera; adicionalmente,
se incluye una influencia muy importante: el calor de la mano, la cual produce un
gradiente de temperatura en el cuerpo de la pipeta e impacta directamente en el
volumen de líquido medido.
Tabla 3
Valores de altura de líquido en la punta y volumen de columna de aire
experimentales.
Volumen nominal 𝑽 Altura de la columna de Volumen de la columna
líquido en la punta de aire
(mm) (𝝁L)

1 μL ≤ 𝑉 ≤ 10 μL 19 100
10 μL < 𝑉 ≤ 100 μL 30 500
100 μL < 𝑉 ≤ 300 μL 45 1000
300 μL < 𝑉 ≤ 1000 μL 55 3000
1000 μL < 𝑉 ≤ 5000 μL 130 10 000
5000 μL < 𝑉 ≤ 10 000 μL 150 20 000
Estos factores por el momento no son cuantificables de manera individual pero

experimentalmente se ha determinado un valor mínimo para su influencia total en
el volumen vertido por la pipeta.
La variación de volumen 𝑉∆ ,aproximada debido a toda esta suma de influencias, de

acuerdo con el reporte DKD-E 8-1 está en función de un porcentaje 𝛾% del volumen
nominal del instrumento, 𝑉𝑛𝑜𝑚 , y esta se calcula como:
𝑉∆ = 𝛾% ∙ 𝑉𝑛𝑜𝑚 (57)
La variable 𝑉∆ puede ser entendida como el semi ancho de una función de

distribución de probabilidad rectangular.
El factor 𝛾% se elige en base al siguiente criterio:
• Para pipetas de pistón monocanal de volumen fijo: 𝛾% = 0,07 % del

volumen nominal.
• Para pipetas de pistón monocanal de volumen variable y para pipetas de
pistón multicanal: 𝛾% = 0,1 % del volumen nominal.
La distribución de probabilidad correspondiente a esta influencia es rectangular, con

incertidumbre 𝑢(𝛿𝑉𝑚𝑒𝑡 ):
𝑢(𝛿𝑉𝑚𝑒𝑡 ) = 𝑐𝑉∆ ∙ 𝑉∆ ⁄√3 = 𝑐𝑉∆ ∙ 𝑢(𝑉∆ ) (58)
Con el coeficiente de variación 𝑐𝑉∆ :

𝑐𝑉∆ = 1 (59)
10.2.8. Influencia debida a la resolución del selector de volumen
Correspondiente solo para instrumentos con selector analógico de volumen. Para su

cálculo se debe considerar una distribución de probabilidad rectangular de ancho 𝜃
, correspondiente a la división que se le puede hacer a la resolución del instrumento
𝑑 en 𝑚 partes, es decir:
𝑑 (60)
𝜃=
𝑚
Por lo que la incertidumbre asociada a la resolución de un selector analógico es

expresada como:
𝑢(𝛿𝑉𝑟𝑒𝑠 ) = 𝜃⁄√3 (61)
10.3. Presupuesto de incertidumbre
El presupuesto de incertidumbre debe compilar el aporte de incertidumbre de todas

las magnitudes de influencia en la determinación del volumen vertido por la pipeta
de pistón.
Las aportantes de cada magnitud pueden ser descritas en un cuadro de presupuesto
de incertidumbre, en donde se resume toda la información del cálculo de
incertidumbre.
Un esquema del cuadro de incertidumbre puede observarse en la Tabla 4.
11. INTERPRETACIÓN DE LOS RESULTADOS
11.1. El valor de corrección C
El valor de la corrección obtenida C , indicada en la Ec. (4) debe ser comparado con
los errores máximos permisibles sistemáticos indicados en la norma ISO 8655-

2:2002(E), o con los errores máximos permisibles indicados en el manual del

fabricante de la pipeta de pistón.
11.2. Desviación estándar
La desviación estándar muestral σ de los volúmenes obtenidos debeser comparado

con los errores máximos permisibles aleatorios indicados en la norma ISO 8655-
2:2002(E), o con indicados en el manual del fabricante de la pipeta de pistón.

Tabla 4
Esquema del cuadro de presupuesto de incertidumbre
Incertidumbre
Mejor valor Mitad del ancho de la Distribución de Coeficiente de Aporte a la
Magnitud Divisor de medición
estimado distribución probabilidades sensibilidad incertidumbre
estándar
𝑋𝑖 𝑥𝑖 𝑃(𝑥𝑖 ) 𝑘 𝑢(𝑥𝑖 ) 𝑐𝑖 𝑐𝑖 ∙ 𝑢(𝑥𝑖 )
Masa /Balanza
Masa con líquido vertido 𝑚𝐼 𝑈(𝑚𝐼 ) Normal 2 𝑢(𝑚𝐼 ) 𝑐𝑚𝐼

Masa sin líquido vertido 𝑚𝑍
𝑈(𝑚𝑍 ) Normal 2 𝑢(𝑚𝑍 ) 𝑐𝑚𝑧
(recipiente)
Deriva histórica de la balanza 0 𝑚𝑎𝑥{𝐷𝑒𝑟𝑖𝑣𝑎(𝑚𝐼 )} Rectangular √3 𝑢(𝛿𝑚𝐷𝑒𝑟 ) 𝑐𝛿𝑚𝐷𝑒𝑟
Deriva por cambio en la 𝑐𝑇𝐷𝑖𝑓 ∙ 𝑐𝛿𝑚𝑇
0 𝑚𝑎𝑥{∆𝑡𝑎 }/2 Rectangular √3 𝑢(𝑇𝐷𝑖𝑓 ) 𝐷𝑖𝑓
temperatura
Perdida por evaporación 𝑚𝑒𝑣𝑎𝑝 𝑚𝑎𝑥|𝑚
̅ 𝑒𝑣𝑎𝑝 − 𝑚𝑒𝑣𝑎𝑝𝑖 | Rectangular √3 𝑢(𝑚𝑒𝑣𝑎𝑝 ) 𝑐𝑚𝑒𝑣𝑎𝑝
Pesas
Densidad de las pesas 𝜌𝑝𝑒𝑠𝑎 𝑈(𝜌𝑝𝑒𝑠𝑎 ) Normal 2 𝑢(𝜌𝑝𝑒𝑠𝑎 ) 𝑐𝜌𝑝𝑒𝑠𝑎
Temperatura del agua
Incertidumbre del termómetro
𝑡𝑤0 𝑈(𝑡𝑤0 ) Normal 2 𝑢(𝑡𝑤0 ) 𝑐𝑡𝑤0
(certificado)
Deriva de corrección
0 𝑚𝑎𝑥{𝐷𝑒𝑟𝑖𝑣𝑎(𝑡𝑤 )} Rectangular √3 𝑢(𝛿𝑡𝑤𝐷𝑒𝑟 ) 𝑐𝛿𝑡𝑤
termómetro 𝐷𝑒𝑟
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Cambio de la temperatura del

0 𝑚𝑎𝑥{∆𝑡𝑤0 }/2 Rectangular √3 𝑢 (𝛿𝑡𝑤𝐷𝑖𝑓 ) 𝑐𝛿𝑡𝑤
agua en calibración 𝐷𝑖𝑓
Densidad del agua
Densidad del agua 𝜌𝑤 10 𝑝𝑝𝑚 Rectangular √3 𝑢(𝛿𝜌𝑤 ) 𝑐𝛿𝜌𝑤
Temperatura del aire

𝑡𝑎 𝑈(𝑡𝑎 ) Normal 2 𝑢(𝑡𝑎 ) 𝑐𝑡𝑎
(certificado)
Deriva de corrección del
0 𝑚𝑎𝑥{𝐷𝑒𝑟𝑖𝑣𝑎(𝑡𝑎 )} Rectangular √3 𝑢(𝛿𝑡𝐷𝑒𝑟 ) 𝑐𝛿𝑡𝐷𝑒𝑟
termómetro

0 𝑚𝑎𝑥{∆𝑡𝑎 }/2 Rectangular √3 𝑢(𝛿𝑡𝐷𝑖𝑓 ) 𝑐𝛿𝑡𝐷𝑖𝑓
aire en calibración
Humedad del aire
Incertidumbre del higrómetro

ℎ𝑎 𝑈(ℎ𝑎 ) Normal 2 𝑢(ℎ𝑎 ) 𝑐ℎ𝑎
(certificado)
0 𝑚𝑎𝑥{𝐷𝑒𝑟𝑖𝑣𝑎(ℎ𝑎 )} Rectangular √3 𝑢(𝛿ℎ𝐷𝑒𝑟 ) 𝑐𝛿ℎ𝐷𝑒𝑟
higrómetro
Cambio de la humedad del aire

0 𝑚𝑎𝑥{∆ℎ𝑎 }/2 Rectangular √3 𝑢(𝛿ℎ𝐷𝑖𝑓 ) 𝑐𝛿ℎ𝐷𝑖𝑓
en calibración
Presión atmosférica
Incertidumbre del barómetro

𝑝𝑎 𝑈(𝑝𝑎 ) Normal 2 𝑢(𝑝𝑎 ) 𝑐𝑝𝑎
(certificado)
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0 𝑚𝑎𝑥{𝐷𝑒𝑟𝑖𝑣𝑎(𝑝𝑎 )} Rectangular √3 𝑢(𝛿𝑝𝐷𝑒𝑟 ) 𝑐𝛿𝑝𝐷𝑒𝑟
barómetro
Cambio de la presión del aire

0 𝑚𝑎𝑥{∆𝑝𝑎 }/2 Rectangular √3 𝑢(𝛿𝑝𝐷𝑖𝑓 ) 𝑐𝛿𝑝𝐷𝑖𝑓
en calibración
Influencia de la pipeta de
pistón
Diferen. Temp: agua-pipeta-
0 𝑚𝑎𝑥{|𝑡𝑎 − 𝑡𝑤0 |} Rectangular √3 𝑢(𝛿𝑡𝑎−𝑤 ) 𝑐𝛿𝑡𝑎−𝑤
aire
Humedad del aire ℎ𝑎 𝑚𝑎𝑥{∆ℎ𝑎 }⁄2 Rectangular √3 𝑢(𝛿ℎ𝑠𝑖𝑠𝑡 ) 𝑐𝛿ℎ𝑠𝑖𝑠𝑡
Presión atmosférica 𝑝𝑎 20 hPa Triangular √6 𝑢(𝑝𝐿 ) 𝑐𝑝𝐿
Proceso intrínseco de
medición
Repetibilidad 0 𝜎 Normal √10 𝑢(𝜎) 𝑐𝜎
Recargo por manipulación del
0 𝑉∆ Rectangular √3 𝑢(𝑉∆ ) 𝑐𝑉∆
método
𝑈𝑐 (𝑦) = 2 ∙ √∑ 𝑐𝑖2 ∙ 𝑢2 (𝑥𝑖 )

𝑖=1
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12. DOCUMENTOS DE REFERENCIA
[1] ISO, ISO TR/20461 Determination of uncertainty for volume measurements made using
the gravimetric method, 1.° ed., Ginebra, 2000.
[2] ISO, ISO 8655-1:2002(E) Piston-operated volumetric apparatus - Part 1: terminology,

general requirements and user recomendations, 1.° ed., Ginebra, 2002.
[3] ISO, ISO 8655-2:2002(E) Piston-operated volumetric apparatus - Part: Piston pipettes,
1.° ed., Ginebra, 2002.
[4] ISO, ISO 8655-6:2002(E) Piston-operated volumetric apparatus - Part 6: Gravimetric

methods for the determination of measurement error, 1.° ed., Ginebra, 2002.
[5] BIPM, IEC, IFCC, ILAC, ISO, IUPAC, IUPAP, OIML, JCGM 200:2012 International
vocabulary of metrology - Basic and general concepts and associated terms (VIM), 3.°
ed., 2012.
[6] BIPM, IEC, IFCC, ILAC, ISO, IUPAC, IUPAP, OIML, JCGM 100:2008 Evaluation of
measurement data - Guide to the expression of uncertainty in measurement, 1.° ed.,
2008.
[7] ASTM International, ASTM E 1154-89 (2008) Standard Specification for Piston or
Plunger Operated Volumetric Apparatus, ASTM, Ed., 2008.
[8] OIML, International recommendation OIML R 111-1, 2004.
[9] K. H. Lochner, R. Feldmann y J. Pfohl, Expert Report DKD-E 8-2 Analysis of influencing
parameters on calibration of piston-operated pipettes with air cushions, 2013.
[10] INACAL, PC-011 Procedimiento de Calibración de Balanzas de Funcionamiento No

Automático Clase I y Clase II, 4.° ed., INACAL, 2010.
[11] DKD-PTB, Guideline DKD-R 8-1 Calibration of piston-operated pipettes with air cushion,
2011.
[12] A. Picard, R. S. Davis, M. Gläser y K. Fujii, «Revised formula for the density of moist air
(CIPM-2007),» Metrologia, vol. 45, nº 2, pp. 149-155, Febrero 2008.
[13] M. Tanaka, G. Girard, R. Davis, A. Peuto y N. Bignell, «Recommended table for the
density of water between 0 °C and 40 °C based on recent experimental work,»
Metrologia, nº 38, pp. 301 - 309, 2001.
Página 50 de 56
[14] R. Feldmann y K. H. Lochner, «Influences on volume in piston-operated air-

displacement pipettes,» Accreditation and Quality Assurance, vol. 21, nº 1, pp. 69 - 82,
2016.
[15] K. Shirono, M. Shiro, H. Tanaka y K. Ehara, «Evaluation of "method uncertainty" in the

calibration of piston pipettes (micropipettes) using the gravimetric method in
accordance with the procedure of ISO 8655-6,» Accreditation and Quality Assurance,
vol. 19, nº 5, pp. 377-389, 2014.
[16] B. Werner, U. Breuel, N. Schiering, O. Schnell-Werner y L. Hallbauer, Expert Report DKD-

E 8-1 Experimental study on the calibration of piston-operated pipettes with air cushion,
DKD-PTB, 2013.
[17] C. Spälti, M. Polin y S. Finkbeiner, Expert Report DKD-E 8.3 The influence of the altitude
on the volumen result of a piston pipette with air cushion, DKD-PTB, 2013.
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ANEXO 1: EJEMPLO TÍPICO DE APLICACIÓN DEL PROCEDIMIENTO
Se realiza la calibración de una pipeta de pistón de volumen variable, de 100 μL de volumen

nominal, con un indicador de volumen digital.
Para esta calibración se realizaron 𝑛 = 10 mediciones, cuyos datos adquiridos son:
N° Medición 𝒎𝒛 (𝐦𝐠) 𝒎𝑰 − 𝒎𝒛 (𝐦𝐠) 𝒕𝒘𝟎 (°𝐂) 𝒕𝒂 (°𝐂) 𝒉𝒂 (% 𝐡. 𝐫. ) 𝒑𝒂 (𝐡𝐏𝐚)
1 2502,632 99,987 19,81 19,69 66,2 995,0

2 2540,812 99,954 19,82 19,73 66,0 994,7
3 2512,720 99,923 19,84 19,77 65,5 994,5
4 2623,563 99,912 19,85 19,84 65,0 994,0
5 2613,782 99,941 19,87 19,88 64,5 994,6
6 2788,910 99,905 19,90 19,91 64,0 995,8
7 2427,112 99,843 19,91 19,95 63,5 996,1
8 2901,360 99,835 19,90 19,90 62,7 995,9
9 2318,051 99,947 19,88 19,87 62,5 995,8
10 2410,028 99,928 19,86 19,84 63,2 995,5
Estos valores tienen que ser corregidos mediante sus correspondientes certificados de
calibración, de ello se obtiene el siguiente cuadro:
N° Medición 𝒎𝒛 (𝐦𝐠) 𝒎𝑰 − 𝒎𝒛 (𝐦𝐠) 𝒕𝒘𝟎 (°𝐂) 𝒕𝒂 (°𝐂) 𝒉𝒂 (% 𝐡. 𝐫. ) 𝒑𝒂 (𝐡𝐏𝐚)
1 2502,640 99,987 19,749 19,698 66,7 995,10

2 2540,820 99,954 19,759 19,738 66,5 994,80
3 2512,728 99,923 19,779 19,778 66,0 994,60
4 2623,571 99,912 19,788 19,848 65,5 994,10
5 2613,790 99,941 19,808 19,888 65,0 994,70
6 2788,918 99,905 19,838 19,918 64,5 995,90
7 2427,119 99,843 19,847 19,958 64,0 996,20
8 2901,369 99,835 19,838 19,908 63,2 996,00
9 2318,058 99,947 19,818 19,878 63,0 995,90
10 2410,035 99,928 19,798 19,848 63,7 995,60
Promedio: 2563,905 99,918 19,802 19,846 64,81 995,29
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Para el presente ejemplo, con fines didácticos, se tiene el valor de la masa del agua
evaporada:
𝑚
̅ 𝑒𝑣𝑎𝑝 = 0,024 mg
Se tiene el cuadro resumen de las condiciones ambientales:
Diferencia
Valor mínimo Valor máximo Promedio
máxima
𝒕𝒂 (°𝐂) 19,70 19,96 19,85 0,26

𝒉𝒂 (% 𝐡. 𝐫. ) 63,0 66,7 64,8 3,7
𝒑𝒂 (𝐡𝐏𝐚) 994,10 996,20 995,29 2,10
Se realiza el cálculo de la densidad del aire, densidad del agua y del volumen obtenido en
cada medición:
Densidad del aire Densidad del agua

N° Medición Volumen (µL)
(kg/m³) (kg/m³)
1 1,1773 998,2545 100,289

2 1,1768 998,2524 100,256
3 1,1764 998,2484 100,226
4 1,1756 998,2464 100,215
5 1,1762 998,2424 100,244
6 1,1775 998,2364 100,209
7 1,1778 998,2344 100,147
8 1,1778 998,2364 100,139
9 1,1779 998,2404 100,251
10 1,1776 998,2444 100,231
Promedio: 1,1771 998,2436 100,221
Por lo que el volumen resultante es: VResult = 100,22 μL

La corrección, C = 100,22 μL − 100 μL = 0,22 μL
Finalmente, usando lo señalado en la Tabla 3 y Tabla 4, el presupuesto de incertidumbre y la

incertidumbre expandida U(VResut ) se muestran en el cuadro siguiente:
Página 53 de 56
Incertidumbre de
Mejor valor Mitad del ancho Distribución de Coeficiente de Aporte a la
Magnitud Divisor medición
estimado de la distribución probabilidades sensibilidad incertidumbre
estándar
𝑋𝑖 𝑥𝑖 𝑃(𝑥𝑖 ) 𝑘 𝑢(𝑥𝑖 ) 𝑐𝑖 𝑐𝑖 ∙ 𝑢(𝑥𝑖 )
Masa /Balanza
Masa con líquido vertido 2663,823 mg 0,0053 mg Normal 2 0,0027 mg 1,0028 µL/mg 0,0027 µL
Masa sin líquido vertido

2563,905 mg 0,0057 mg Normal 2 0,0028 mg -1,0028 µL/mg -0,0028 µL
(recipiente)
Deriva histórica de la balanza 0,0 mg 0,0019 mg Rectangular √3 0,0011 mg 1,0028 µL/mg 0,0011 µL
Deriva por cambio en la
0,0 µL 0,13 °C Rectangular √3 0,08 °C 0,0001 µL/°C 7,52E-06 µL
temperatura
Perdida por evaporación 0,024 mg 0,0073 mg Rectangular √3 4,19E-03 mg 1,0028 µL/mg 0,0042 µL
Pesas
Densidad de las pesas 7,950 mg/µL 0,140 mg/µL Normal 2 0,070 mg/µL -0,0019 µL/(mg/µL) -1,31E-04 µL
Temperatura del agua

19,802 °C 0,025 °C Normal 2 0,013 °C 0,021 µL/°C 2,57E-04 µL
(certificado)
Deriva de corrección
0 °C 0,077 °C Rectangular √3 0,044 °C 0,021 µL/°C 9,13E-04 µL
termómetro
0 °C 0,049 °C Rectangular √3 0,028 °C 0,021 µL/°C 5,83E-04 µL
agua en calibración
Densidad del agua
Densidad del agua 0,998 mg/µL 1,00E-05 mg/µL Rectangular √3 5,77E-06 mg/µL -100,52 µL/(mg/µL) -5,80E-04 µL
Página 54 de 56
Temperatura del aire

19,8 °C 0,022 °C Normal 2 0,011 °C -0,00039 µL/°C -4,26E-06 µL
(certificado)
0,0 °C 0,009 °C Rectangular √3 0,005 °C -0,00039 µL/°C -2,02E-06 µL
termómetro
0,0 °C 0,13 °C Rectangular √3 0,075 °C -0,00039 µL/°C -2,92E-05 µL
aire en calibración
Humedad del aire
Incertidumbre del higrómetro
64,81 % h.r. 2,3 % h.r. Normal 2 1,2 % h.r. -9,06E-06 µL/% h.r. -1,04E-05 µL
(certificado)
0% 4,3 % h.r. Rectangular √3 2,5 % h.r. -9,06E-06 µL/% h.r. -2,27E-05 µL
higrómetro
Cambio de la humedad del aire
0% 1,9 % h.r. Rectangular √3 1,1 % h.r. -9,06E-06 µL/% h.r. -9,68E-06 µL
en calibración
Presión atmosférica
Incertidumbre del barómetro
995,3 hPa 0,1 hPa Normal 2 0,05 hPa 9,99E-05 µL/hPa 5,00E-06 µL
(certificado)
0,0 hPa 0,3 hPa Rectangular √3 0,17 hPa 9,99E-05 µL/hPa 1,73E-05 µL
barómetro
Cambio de la presión del aire
0,0 hPa 1,05 hPa Rectangular √3 0,61 hPa 9,99E-05 µL/hPa 6,06E-05 µL
en calibración
Influencia de la pipeta de
pistón
Diferen. Temp: agua-pipeta-
0,0 K 0,11 K Rectangular √3 0,064 K 0,3421 µL/K 0,0218 µL
aire
Humedad del aire 64,81 % h.r. 1,9 % h.r. Rectangular √3 1,07 % h.r. 0,0080 µL/% h.r. 0,0085 µL
Presión atmosférica 995,3 hPa 20 hPa Triangular √6 8 hPa 0,0015 µL/hPa 0,0121 µL
Página 55 de 56
Proceso intrínseco de
medición
Repetibilidad 0,0 µL 0,047 µL Normal √10 0,015 µL 1 0,015 µL
Recargo por manipulación del
0,0 µL 0,1000 µL Rectangular √3 0,058 µL 1 0,058 µL
método
𝑢𝑐 (𝑦) = 0,065 µL
𝑈𝑐 (𝑦) = 0,13 µL
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Calibración de pipetas de pistón

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PC-027:2019

PROCEDIMIENTO PARA LA CALIBRACIÓN DE PIPETAS DE PISTÓN

Dirección: Calle Las Camelias 817 - San Isidro, Lima, PERÚ

Publicación editada por la Dirección de Metrología del INACAL.

Prohibida la reproducción total o parcial de este procedimiento por cualquier medio,

Primera Edición – Marzo 2019

Las sugerencias y comentarios pueden ser remitidas a la Dirección de Metrología del

Impreso en Perú – Printed in Peru

Edición 1° - MARZO, 2019 Página 3 de 56

7.1. Temperatura ambiental en la zona de trabajo ...................................................... 13

Edición 1° - MARZO, 2019 Página 4 de 56

10.2.6. Influencias sistemáticas de la pipeta de pistón en la calibración ...................... 40

Edición 1° - MARZO, 2019 Página 5 de 56

Este procedimiento se aplica a pipetas operadas con pistón de desplazamiento de

Las presentes definiciones deben ser interpretadas teniendo en cuenta el

3.1. Pipeta de pistón

Es un instrumento volumétrico diseñado para aspirar y luego verter un volumen de

3.2. Rango de volumen útil

El rango de volumen útil corresponde al intervalo de indicación del instrumento para

Edición 1° - MARZO, 2019 Página 6 de 56

3.3. Volumen nominal

3.3.1. Para pipetas de pistón de volumen fijo

El volumen nominal del instrumento es el valor único de volumen especificado por

3.3.2. Para pipetas de pistón de volumen variable

3.3.3. Para pipetas de pistón multicanal

3.4. Principio de operación de una pipeta de pistón

Con un volumen seleccionado en la pipeta de pistón, el pulsador de pipeteado

3.5. Diseño de las pipetas de pistón

3.5.1. Pipetas de pistón de volumen fijo

Edición 1° - MARZO, 2019 Página 7 de 56

3.5.2. Pipetas de pistón de volumen variable

3.5.3. Pipetas de pistón monocanal

3.5.4. Pipetas de pistón multicanal

Figura 1:Pipeta de pistón monocanal tipo A

3.6. Tipos de pipetas según la interfaz de transmisión

3.6.1. Tipo A o Desplazamiento de aire

En este tipo de pipetas, el pistón no se encuentra en contacto directo con el líquido

Edición 1° - MARZO, 2019 Página 8 de 56

3.6.2. Tipo D o Desplazamiento directo o positivo

Figura 2: Pipeta multicanal tipo A Figura 3: Pipeta de desplazamiento

4. MÉTODO DE CALIBRACIÓN Y SU FUNDAMENTO

El método gravimétrico consiste en determinar el volumen de líquido vertido por el

5. INSTRUMENTOS DE MEDICION Y EQUIPOS REQUERIDOS

Los instrumentos y equipos de medición deben tener las siguientes características o

Edición 1° - MARZO, 2019 Página 9 de 56

5.1. Balanza electrónica

La balanza electrónica debe tener una resolución y exactitud de acuerdo con lo

De manera práctica para la elección de la balanza puede usarse el volumen nominal

5.2. Termómetro para el agua

El termómetro debe estar calibrado y su incertidumbre expandida, según su

5.3. Termómetro para el aire

El termómetro para la medición de la medición de la temperatura del aire debe tener

Edición 1° - MARZO, 2019 Página 10 de 56

de inmersión y, la temperatura debe ser medida usando la sonda externa al cuerpo

El higrómetro debe estar calibrado, y su certificado debe indicar una incertidumbre

El barómetro debe estar calibrado, y su certificado de calibración debe mostrar una

6. MATERIALES Y/O EQUIPOS AUXILIARES REQUERIDOS

6.1. Agua como líquido de referencia

El agua puede ser de Grado 3 de acuerdo a lo especificado en la ISO 3696, o agua

6.2. Recipiente de pesaje

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6.3. Reservorio de agua

6.4. Puntas de pipeta (tips)