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COLOMBIANA 8655-2
2014-10-27
I.C.S.: 17.060
ICONTEC es una entidad de carácter privado, sin ánimo de lucro, cuya Misión es fundamental
para brindar soporte y desarrollo al productor y protección al consumidor. Colabora con el
sector gubernamental y apoya al sector privado del país, para lograr ventajas competitivas en
los mercados interno y externo.
Esta norma está sujeta a ser actualizada permanentemente con el objeto de que responda en
todo momento a las necesidades y exigencias actuales.
ICONTEC cuenta con un Centro de Información que pone a disposición de los interesados
normas internacionales, regionales y nacionales y otros documentos relacionados.
DIRECCIÓN DE NORMALIZACIÓN
NORMA TÉCNICA COLOMBIANA NTC-ISO 8655-2
CONTENIDO
Página
INTRODUCCIÓN ......................................................................................................................1
5. DISEÑO ........................................................................................................................2
Página
8. MARCADO ...................................................................................................................9
ANEXOS
ANEXO A (Normativo)
INFORMACIÓN A PROPORCIONAR POR EL FABRICANTE/PROVEEDOR
PARA EL USUARIO DE PIPETAS TIPO PISTÓN Y SUS PUNTAS .....................................11
ANEXO B (Informativo)
POSIBLES FUENTES DE ERROR PARA LAS PIPETAS TIPO PISTÓN
CON INTERFASE DE AIRE ...................................................................................................13
ANEXO B (Informativo)
BIBLIOGRAFÍA ......................................................................................................................14
TABLAS
INTRODUCCIÓN
- Proveedores, como una base para el control de la calidad incluyendo, cuando sea
apropiado, la expedición de las declaraciones del fabricante;
Para las pipetas tipo pistón de desplazamiento de aire (Tipo A) y desplazamiento positivo (Tipo D)
de canal simple y múltiple, completas con su(s) punta(s) seleccionadas y cualquier otra parte
esencial consumible, diseñadas para dispensar su volumen nominal específico (Ex).
NOTA Los requisitos generales y las definiciones de términos de equipos volumétricos accionados mediante
pistón se dan en la NTC-ISO 8655-1. Los ensayos de conformidad (evaluación tipo) de los equipos volumétricos
accionados mediante pistón se dan en la NTC-ISO 8655-6. Los métodos de ensayo alternativos como los métodos
fotométricos y de titulación son objeto de la NTC-ISO 8655-7. Para todo el resto de ensayos (por ejemplo,
aseguramiento de la calidad por el fabricante/proveedor, aseguramiento de la calidad del equipo analítico y de
medición por el usuario) véase la NTC-ISO 8655-6 o métodos de ensayo alternativos. Para los requisitos de
seguridad de pipetas tipo pistón accionado eléctricamente, véase la IEC 61010-1.
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2. REFERENCIAS NORMATIVAS
ISO 3696, Water for Analytical Laboratory Use. Specification and Test Methods.
3. TÉRMINOS Y DEFINICIONES
Para los fines de esta norma, se aplican los términos y definiciones de la NTC-ISO 8655-1 y los
siguientes.
3.1 Volumen nominal (pipeta tipo pistón de volumen variable). Volumen más grande
seleccionado por el usuario y especificado por el fabricante.
NOTA Esto significa que una pipeta tipo pistón de volumen variable con un intervalo de volumen útil (véase la
NTC-ISO 8655-1) de 10 μl a 100 μl tiene un volumen nominal de 100 μl.
3.2 Volumen nominal (pipeta tipo pistón de canal múltiple). Volumen más grande seleccionado
por el usuario y especificado por el fabricante para cada canal.
La punta de material plástico o vidrio se adjunta a la pipeta tipo pistón. Con el pistón en el límite
de aspiración inferior, la punta se introduce en el líquido a dispensar como un volumen medido.
Cuando se mueve al límite de aspiración superior, el pistón aspira el líquido. El volumen de
líquido a dispensar se expulsa entonces pulsando o deslizando el pistón entre los límites
definidos de volumen. Algunas pipetas tipo pistón de desplazamiento de aire (véase el numeral 5.1,
Tipo A) tienen un volumen extra de aire que puede utilizarse para expulsar la última gota de
líquido.
5. DISEÑO
- volumen fijo, diseñado por el fabricante para dispensar sólo su volumen nominal, por
ejemplo 100 μl;
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El pistón puede
- estar en contacto directo con la superficie del líquido (desplazamiento positivo o directo -
Tipo D).
5.2 AJUSTE
5.2.1 Una pipeta tipo pistón debe ajustarse por su fabricante para el suministro (Ex) de su
volumen nominal (o volumen seleccionado, en el caso del modelo de volumen variable), para la
temperatura normalizada de referencia de 20 °C, una humedad relativa del aire del 50 % y una
presión barométrica de 101 kPa (1,01 bar), utilizando agua de clase 3 como se especifica en la
ISO 3696.
Cuando se requiera usar una probeta tipo pistón en un país que ha adoptado 27 °C como
temperatura normalizada de referencia (la alternativa recomendada para uso tropical), se debe
utilizar esta temperatura en lugar de 20 °C.
Tipo D Desplazamiento
Tipo A Desplazamiento de aire
positivo (directo)
a) Pipetas tipo pistón de canal simple b) Pipeta tipo pistón de canal múltiple
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5.2.2 Algunas pipetas de tipo pistón se suministran para ajuste por el usuario cuando, por
ejemplo, se encuentra en la calibración de rutina que el volumen dispensado no está dentro de
la especificación. Este ajuste del usuario debe realizarse de acuerdo a las instrucciones del
fabricante y mediante la referencia al método de ensayo gravimétrico especificado en la NTC-
ISO 8655-6).
Cualquier pipeta de tipo pistón ajustada de esta forma debe tener evidencia clara y visible de
que el ajuste inicial ha sido modificado. Esta información debe también anotarse en cualquier
certificado de conformidad y el procedimiento debería incluirse en el manual de calidad del
usuario.
5.2.3 Algunas pipetas de tipo pistón se diseñan para tener su ajuste pre-programado de
fábrica alterado por el usuario de forma que dispensen su volumen específico cuando se
utilizan con líquidos con propiedades físicas diferentes a las del agua (véase el Anexo B para
más detalles). En estos casos, el diseño debe prevenir el reajuste no intencionado. Este ajuste
del usuario debe realizarse de acuerdo con las instrucciones del fabricante y mediante la
referencia al método de ensayo gravimétrico especificado en la NTC-ISO 8655-6, pero
utilizando el líquido seleccionado en lugar de agua.
Si el usuario reajusta la pipeta tipo pistón, este debe indicarse clara e inequívocamente en el
lado externo de la pipeta tipo pistón de la cual se ha efectuado el reajuste. El usuario debe
marcar el lado externo de la pipeta tipo pistón con el nombre del líquido para el cual se aplica
ahora el volumen nominal. Esta información debe también registrarse en cualquier certificado
de conformidad. El procedimiento debería incluirse en el manual de calidad del usuario.
El diseño constructivo de las pipetas de tipo pistón y los materiales utilizados para su
fabricación deben elegirse de tal manera que cualquier calor transmitido desde la mano del
usuario al equipo durante los periodos de utilización o de ensayo de acuerdo con la NTC-ISO
8655-6 puedan ignorarse.
NOTA El calor transferido de la mano aparecerá como una desviación sistemática de los resultados durante las
series de ensayos de la ISO 8655-6.
5.4.1 Generalidades
5.4.1.1 El orificio de dispensación de la punta debe tener una forma tal que la dispensación
constante del líquido a medir se encuentre determinada. Cuando la punta toca contra la pared
de un recipiente en operaciones sucesivas, cualquier cantidad de líquido remanente en o
alrededor del orificio de dispensación de la punta debe ser constante.
NOTA Este requisito puede evaluarse por comparación de los errores de medición utilizando puntas que han
sido y que no han sido esterilizadas.
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5.4.2.1 Las puntas de pipetas de desplazamiento de aire deben ser partes desechables,
normalmente fabricadas de material plástico, que se fijan en el soporte de la punta de la pipeta
y previenen el contacto del instrumento con el líquido aspirado. Para asegurar su desempeño
metrológico, deben cumplir los numerales 5.4.1.1, 5.4.1.2, 5.4.2.2 y 5.4.2.3.
5.4.2.2 Las puntas de pipetas tipo pistón con interfase de aire deben estar de acuerdo con las
instrucciones del fabricante para conseguir una buena estanqueidad entre la punta y el cono de
la punta de la pipeta tipo pistón.
NOTA La variabilidad de la cantidad de líquido retenido externamente o una estanqueidad incompleta contribuirá
a una precisión pobre cuando se ensaye con la NTC-ISO 8655-6.
Las puntas de pipeta fabricadas de material plástico para pipetas tipo pistón con interfase de
aire, se diseñan para un solo uso. No deben ser limpiadas para su reutilización ya que no se
tendrá seguridad de sus características metrológicas.
5.4.2.3 La forma de las puntas de pipeta a utilizar con una pipeta tipo pistón de canal múltiple
deben ser tan rectas que todas las puntas fijadas se coloquen con los ejes paralelos en el
mismo plano para permitir la dispensación uniforme de líquido en el recipiente objetivo, por
ejemplo, los pozos adyacentes o placa de micro titulación. El fondo de las puntas fijadas
adecuadamente no debe variar en espacio de sus ejes nominales, o de su plano común en
más de ± 1,0 mm para un volumen nominal hasta 350 μl y en ± 1,5 mm para un volumen
nominal que excedan a 350 μl.
5.4.3.1 Las puntas para pipeta de desplazamiento positivo deben consistir en un émbolo y un
capilar que ajusten en el soporte de la punta de la pipeta. Pueden utilizarse varios materiales
para el émbolo, como metal o plástico, y para el capilar, como plástico y vidrio. Estas puntas de
pipeta pueden ser desechables o reutilizables (tanto el émbolo como el capilar se cambian en
cada muestreo).
5.4.3.2 La forma y el material del émbolo y del capilar deben garantizar una buena
estanqueidad a la punta, así como una acción suave entre el émbolo y el capilar, para
asegurar la dispensación continua del líquido.
El ensayo tipo de los requisitos de diseño especificados en los numerales 5.2 a 5.4 debe
satisfacer los requisitos de desempeño metrológico especificados en el numeral 7 cuando la
pipeta se ensaya de acuerdo con la norma NTC-ISO 8655-6.
6. TIPO, DESIGNACIÓN
La designación de una pipeta tipo pistón de canal simple (desplazamiento positivo con émbolo
reutilizable) de Tipo D1 con un volumen nominal de 100 μl:
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La designación de una pipeta tipo pistón de canal simple de volumen variable (desplazamiento
positivo con émbolo/capilar desechable) de tipo D2, con un intervalo de volumen variable de
20 μl a 200 μl:
La designación de una pipeta tipo pistón de canal simple de volumen variable con interfase de
aire de tipo A, con un intervalo de volumen variable de 10 μl a 100 μl:
La designación de una pipeta tipo pistón de 8 canales con interfase de aire (A) y con un
volumen nominal de 200 μl:
La designación de una pipeta tipo pistón de 12 canales con interfase de aire (A), con un
intervalo de volumen variable de 20 μl a 200 μl:
7.1 GENERALIDADES
El ensayo tipo debe llevarse a cabo por el fabricante / proveedor antes de la emisión de la
declaración de conformidad del fabricante / proveedor
Para los ensayos de conformidad, deben aplicarse los errores máximos permitidos de las
Tablas 1 y 2.
Los usuarios deberían establecer un ensayo de rutina regular (véase la NTC-ISO 8655-1,
numeral 7.3) para sus pipetas tipo pistón utilizando indistintamente la NTC-ISO 8655-6 o
métodos de ensayo alternativos (véase la nota del numeral 1), teniendo en cuenta:
- frecuencia de uso;
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El Anexo B enumera una lista de parámetros que influyen en el desempeño metrológico de las
pipetas tipo pistón y las recomendaciones para su manejo.
Para las pipetas tipo pistón de desplazamiento de aire (Tipo A) con volumen fijo y para las
pipetas tipo pistón de desplazamiento positivo con émbolo y capilar reutilizable (Tipo D1) y con
volumen fijo, se aplican los errores máximos permitidos de la Tabla 1.
Para los errores máximos permitidos de pipetas tipo pistón con volúmenes nominales
intermedios entre los dados en la Tabla 1, deben aplicarse los valores absolutos para el
siguiente volumen nominal mayor.
NOTA Esto significa que el error sistemático máximo permitido de una pipeta tipo pistón con un volumen nominal
de 25 μl es ± 0,5 μl y su error aleatorio máximo permitido es de ± 0,2 μl.
Volumen nominal Error sistemático máximo permitido Error aleatorio máximo permitido
a
µl ±% ± µl ±%b ± µl c
1 5,0 0,05 5,0 0,05
2 4,0 0,08 2,0 0,04
5 2,5 0,125 1,5 0,075
10 1,2 0,12 0,8 0,08
20 1,0 0,2 0,5 0,1
50 1,0 0,5 0,4 0,2
d
100 0,8 0,8 0,3 0,3 d
200 0,8 1,6 0,3 d 0,6 d
500 0,8 4,0 0,3 1,5
1 000 0,8 8,0 0,3 3,0
2 000 0,8 16 0,3 6,0
5 000 0,8 40 0,3 15,0
10 000 0,6 60 0,3 30,0
a
Expresado como la desviación de la media de diez mediciones del volumen nominal o seleccionado
(véase la NTC-ISO 8655-6, numeral 8.4).
b
Expresado como el coeficiente de variación de diez mediciones (véase la NTC-ISO 8655-6, numeral 8.5).
c
Expresado como desviación estándar de repetibilidad de diez mediciones (véase la NTC-ISO 8655-6,
numeral 8.5).
d
Para pipetas tipo pistón D1 el error máximo permitido puede ser de ± 0,4 %.
d
Para pipetas tipo pistón de Tipo D1 los errores máximos permitidos pueden ser ± 0,4%.
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Para las pipetas tipo pistón de desplazamiento positivo con émbolo y capilar desechable
(Tipo D2) y con volumen fijo, se aplican los errores máximos permitidos de la Tabla 2.
Para los errores máximos permitidos de pipetas tipo pistón con volúmenes nominales
intermedios entre los dados en la Tabla 2, deben aplicarse los valores absolutos para el
volumen nominal mayor siguiente.
En el caso de pipetas tipo pistón de volumen variable, el volumen nominal es el volumen más
grande que el usuario puede seleccionar especificado por el fabricante. Por ejemplo, una pipeta
tipo pistón con un intervalo de volumen útil de 10 μl a 100 μl tiene un volumen nominal de 100 μl.
En el ensayo de conformidad, se aplican los errores máximos permitidos para los volúmenes
nominales de las Tablas 1 y 2 a cada volumen seleccionado en todo el intervalo de volumen útil
de la pipeta tipo pistón; por ejemplo, los errores sistemáticos máximos permitidos de una pipeta
tipo pistón de volumen variable de los Tipos A y D1 con un intervalo de volumen útil de 10 μl a
100 μl son ± 0,8 μl y los errores aleatorios máximos permitidos son ± 0,3 μl para cada volumen
medido.
NOTA Se sabe que los errores de medición de los volúmenes intermedios en el intervalo de volumen útil de una
pipeta tipo pistón pueden ser considerablemente mejores que aquellos especificados para el volumen nominal de la
pipeta tipo pistón.
Volumen nominal Error sistemático máximo permitido Error aleatorio máximo permitido
a
µl ±% µl ±%b µl c
5 2,5 0,13 1,5 0,08
10 2,0 0,2 1,0 0,1
20 2,0 0,4 0,8 0,16
50 1,4 0,7 0,6 0,3
100 1,5 1,5 0,6 0,6
200 1,5 3,0 0,4 0,8
500 1,2 6,0 0,4 2,0
1 000 1,2 12,0 0,4 4,0
a
Expresado como la desviación de la media de diez mediciones del volumen nominal o seleccionado
(véase la NTC-ISO 8655-6, numeral 8.4).
b
Expresado como el coeficiente de variación de diez mediciones (véase la NTC-ISO 8655-6, numeral 8.5).
c
Expresado como desviación estándar de repetibilidad de diez mediciones (véase la NTC-ISO 8655-6,
numeral 8.5).
Las pipetas tipo pistón para dispensaciones repetitivas y continuas con un volumen
seleccionable, deben considerarse como pipetas tipo pistón de volumen variable de Tipo D2 y
deben aplicarse los errores máximos permitidos de la Tabla 2.
Los errores sistemáticos y aleatorios máximos permitidos de pipetas tipo pistón de canal
múltiple deben ser iguales a dos veces los valores especificados en la tabla 1 para las pipetas
tipo pistón de canal simple. Cada canal de la pipeta tipo pistón de canal múltiple, considerado
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En el caso de pipetas tipo pistón de canal múltiple de volumen variable, se aplican los errores
máximos permitidos para el volumen nominal a cada volumen seleccionado en todo el intervalo
de volumen útil (véase el numeral 7.4 para más detalles).
Los errores máximos permitidos siempre se aplican al sistema total de pipeta tipo pistón y
punta. Cuando se utilizan puntas de pipetas no proporcionadas por el fabricante/proveedor de
la pipeta, no se aplica la declaración del fabricante/proveedor o el certificado de conformidad.
En estos casos, la evaluación de los errores máximos permitidos debe desarrollarse utilizando
las puntas alternativas con el método de ensayo especificado en la NTC-ISO 8655-6.
Antes de la evaluación de la conformidad de la pipeta tipo pistón con las puntas alternativas,
debe establecerse que la pipeta tipo pistón en combinación con las puntas originales cumplen
con los requisitos metrológicos especificados en esta parte de la NTC-ISO 8655.
de acuerdo con la NTC-ISO 8655-6 o con los métodos de ensayo alternativos (véase la nota
del numeral 1).
8. MARCADO
Los siguientes datos deben marcarse permanentemente en cada pipeta tipo pistón:
a) volumen nominal o, para las pipetas tipo pistón de volumen variable, el intervalo de
volumen útil;
Donde sea apropiado, puede fijarse a la pipeta tipo pistón una marca de conformidad.
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ANEXO A
(Normativo)
a) Deben especificarse las bases del ajuste (Ex), la temperatura de referencia (20 °C o 27 °C),
la humedad relativa (50 %) y la presión barométrica (101 kPa).
c) Debe especificarse una lista de puntas y sus números de referencia, que recomienda el
fabricante para utilizar con el equipo.
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a) El nombre del fabricante del equipo y del suministrador para el cual son apropiadas las
puntas.
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ANEXO B
(Informativo)
La Tabla B.1 da las posibles fuentes de error para pipetas tipo pistón con una interfase de aire.
Tabla B.1 Parámetros que influyen, y errores resultantes en mediciones y medidas correctivas
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ANEXO C
(Informativo)
BIBLIOGRAFÍA
Para información detallada sobre los posibles errores de medición referirse a las referencias [1],
[3] o [4].
[2] IEC 61010-1, Safety Requirements for Electrical Equipment for Measurement, Control
and Laboratory Use. Part 1: General Requirements
[3] LOCHNER K.H., BALLWEG T., FAHRENKROG H.-H. Untersuchung der Megenauigkeit
von Kolbenhubpipetten mit Luftpolster. J. LabMed, 20 (7/8), 1996, pp. 340.440 (in
German).
[4] MICHEL F., SOMMER K., SPIEWECK F. Untersuchungen zur Ermittlung der
Meunsicherheit von Kolbenhubpipetten mit Volumina von 1 μl bis 50 μl. PTB-
Mitteilungen, 105 (6), 1995, pp. 437-444 (in German).
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