TEMA: PRODUCCIÓN DE BIOFERTILIZANTES MICROBIANOS:

HONGOS MICORRÍCICOS ARBUSCULARES (HMA)

Ivette Carolina García López

1. ¿Qué son las micorrizas?

Es la asociación simbiótica de las raíces de plantas con hifas de hongos
especializados del suelo, y se considera el órgano principal involucrado en
la captación de nutrientes por la mayoría de las plantas terrestres.
2. Tipos de micorrizas
 Ectendomicorrizas. Son asociaciones formadas entre un número limitado de
ascomicetos y los géneros de coníferas Pinus y Larix; tienen un manto y
una estructura compleja altamente ramificada llamada red de Hartig.
Después de la formación de esta red, se desarrolla la hifa intracelular en
células de la epidermis y en la corteza
 Ericoide. Forman raíces laterales muy finas que carecen de crecimiento
secundario. Cada raíz consiste de un cilindro vascular delgado, una o dos
capas de células corticales y una capa de epidermis
 Arbutoide. Estas micorrizas tienen un manto, una red de Hartig y forman
complejos hifales intracelulares confinados a la epidermis.
 Monotropoide. Las especies de plantas que tienen esta micorriza son no
fotosintéticas. Este tipo de micorriza se asocia también a árboles vecinos
fotosintéticamente activos, y que han desarrollado un mecanismo para
obtener sus fotosintatos.
 Orquideoide. Sólo se desarrollan en la familia Orchidaceae. La principal
característica de esta micorriza es la formación de pelotones dentro de las
células de la planta
 Ectomicorriza. La formación de un manto o vaina de hifas que cubren
porciones considerables de raíces laterales, el desarrollo de hifas entre las
células de la raíz para formar la red de Hartig, y la hifa que emana del
manto y crece en el suelo
 Arbuscular. También llamada micorriza vesicular-arbuscular. Es una
asociación entre las raíces de la mayoría de plantas vasculares y un grupo
pequeño de hongos del nuevo phylum Glomeromycota.
3. ¿Qué son las micorrizas vesículo arbusculares y qué características tienen?
Esta micorriza se caracteriza por la presencia de una hifa intra o
intercelular, arbúsculos (hifas finamente ramificadas que participan en el
intercambio de nutrientes), micelio extra-radical que conecta a la raíz con el
suelo, y esporas formadas en el micelio extra-radical. Algunas especies
forman estructuras llamadas vesículas que son porciones de hifa que se
 llenan de cuerpos lipídicos, dando a este grupo el nombre de micorriza
vesicular-arbuscular.
 La capacidad de las plantas para formar MA debe estar bajo el control de
mecanismos que se han conservado en los nuevos taxones de plantas.
Esta compatibilidad también implica que en las plantas, los procesos de
reconocimiento selectivo discriminen entre los microorganismos benéficos y
perjudiciales
 Una interacción compatible con micorrizas arbusculares (MA) se ha
observado una respuesta hipersensitiva parecida a la que sucede cuando la
planta es confrontada con un patógeno

4. ¿Cómo se establece la relación hongo micorrícico y la planta, a nivel

bioquímico?

Durante los primeros momentos de formación de la micorriza arbuscular se ha

observado un incremento transitorio de la actividad de las enzimas catalasa y
peroxidasa, lo cual coincide con la formación del apresorio y la penetración del
hongo en la raíz. El aumento de la actividad de estas enzimas también coincide
con la acumulación de ácido salicílico (AS); una molécula señal involucrada en
la vía de transducción de señales activadas en las reacciones planta-patógeno
El aumento en la actividad de la
catalasa y peroxidasa se puede
deber a la función que tienen
como antioxidantes, para
cualquier molécula activa de
oxígeno que ha sido generada
durante los estados iniciales de la
penetración del hongo.
Simultáneamente al crecimiento
inter o intracelular de la hifa del
hongo micorrízico arbuscular, la
hifa terminal se diferencia en
arbúsculos dentro de ciertas
células corticales.

La diferenciación del arbúsculo está acompañada de varios cambios

fisiológicos en la célula de la planta, cuyas vacuolas se fragmentan
aumentando el volumen de citoplasma y el número de organelos. El carbono
de la planta es transportado al hongo a través de dos membranas en la
interfase simbiótica, es liberado en el espacio periarbuscular, en la forma de
sacarosa, después se fracciona en hexosas y es tomado por el hongo MA a
través del transporte por la membrana del hongo. En el citoplasma del hongo,
las hexosas son convertidas en gránulos de glucógeno y gotas de triglicéridos,
que sirven como unidades disponibles para el transporte a larga distancia a
través de la red de hifas.

Los nutrientes adquiridos por el hongo desde el suelo, cruzan la membrana

plasmática, son transportados a la hifa intra-radical incluyendo los arbúsculos,
y finalmente atraviesan la membrana periarbuscular para alcanzar el
citoplasma de la planta.

 El fosfato es movilizado por transportadores de fosfato del hongo que

están presentes en la hifa extra-radical. Posteriormente, es transportado
hacia la raíz y la hifa intra-radical, en forma de gránulos de fosfato
envueltos en vesículas de membrana
 El nitrógeno es captado en la hifa extra-radical por transportadores de
amonio, nitrato o aminoácidos, que lo transportan principalmente como
arginina. Dentro de la hifa intra-radical el nitrógeno se libera de ella en
forma de urea y puede ser transportado directamente a la planta

5. Explica cómo se aíslan los hongos micorrícicos a partir de muestra de

suelo.

Se toman 13 muestras compuestas por tres submuestras de suelo de 200 g

de la zona de la rizosfera de las plantas presentes, de 0 a 40 cm de
profundidad, que se guardan en bolsas plásticas a 4°C hasta el momento
de su uso. Las muestras de los sitios seleccionados se llevan al laboratorio,
a través de dos tamices de 400 y 40 μm respectivamente y se centrifugan
con solución de sacarosa 2 M–Tween 80, decantándose luego la fracción
líquida con los componentes fúngicos. Se realiza un conteo de las esporas
en estereomicroscopio, utilizando placas de conteo de nematodos, para
conocer la cantidad de material
micorrízico con que se contaba.

6. Describe cómo se identifican

los HMA.
 Los HMA al ponerse en contacto con la raíz forman una estructura sobre las
células epidérmicas vegetales conocida como “apresorio” y a partir de este
cuerpo se producen las hifas que son filamentos tubulares, que penetran la
epidermis radical hasta llegar a la endodermis sin atravesarla, allí comienza
su ramificación para formar los arbúsculos, que tienen un tamaño
comparable al de las mitocondrias.
Para identificarlos es necesario aisalar los micrroganismos hasta encontrar
el hongo micorrícicos, La técnica de tamizado y decantación propuesta por
Gerdemann y Nicolson sirve para su identificación

7. Describe cómo se cultivan las cepas de HMA para producir un

biofertilizante. Describe el proceso

Para la propagación de esporas, se utilizaron 50 g de cada una de las

muestras de suelos que contenían las esporas. Estas se propagaron en
macetas de 5 L de capacidad, conteniendo suelo Ferralítico Rojo lixiviado
como sustrato, con una solución de formaldehído al 5 % por cinco días, al
cabo de los cuales el sustrato fue removido y lavado con agua hasta la
eliminación del producto.
Se utilizó sorgo como cultivo trampa, debido a que los HMA son simbiontes
obligados y necesitan una planta para poder completar su ciclo de vida,
siendo el sorgo muy utilizado por los altos niveles de colonización
micorrízica que desarrolla. A las semillas se les dio un tratamiento de
esterilización, empleando una solución de hipoclorito de sodio al 10 % por
10 minutos. Una vez que se decantó la solución, estas se lavaron varias
veces con abundante agua destilada.
Cuando germinaron las semillas, se aplicó el riego a base de solución
nutritiva modificada a partir de Hewitt cada 10 días. El cultivo trampa se
mantuvo por un período de tres meses. Después de este tiempo, se
extrajeron las esporas por el método anteriormente mencionado y se
trabajó con esporas sanas, para la identificación morfológica.

8. Describe cómo se evalúa la eficacia de un biofertilizante a base de HMA y

que factores la afectan.

Eficacia:

Para comprobar la eficacia de los microorganismos (hongos formadores de

micorrizas) como biofertilizantes, es necesario llevar a cabo varios ensayos
bajo condiciones controladas, semicontroladas y en campo. Utilizando un
testigo (planta que no es biofertilizada con HMA) y otra que si lo esta, para
elvaluar aspectos como: el crecimiento y el desarrollo vegetal, la acumulación
de biomasa, los posibles beneficios nutricionales de la asociación
microorganismoplanta y sus posibles efectos sobre la producción y la calidad
del fruto y realizar la correspondiente comparación

Factores que afectan:

 Inoculación a la sombra
 Cuando la planta tiene disponible los nutrientes como fósforo o
nitrógeno en abundancia, inhibe las funciones del hongo, se debe
disminuir la dosis de fertilización química por lo menos a la mitad
 Al momento de inocular la micorriza esta necesita humedad para que
germine la espora y se concete a la planta, por lo que se recomienda
sembrar la semilla inoculada cuando comienza el temporal o con
humedad residual o punta de riego.
 Los fungicidad sistémicos utilizados en la semilla pueden afectar que el
hongo colonice.

9. ¿Cómo se inocula un biofertilizante a base de HMA en los cultivos

agrícolas?
Existen tres formas comunes de realizarlo:
Inoculación en siembra indirecta; hortalizas, que consiste en incoular al
sustrato, se humedece con agua, rerevulve perfectamente el sustrato hasta
que quede homogenea, la mezcla se divide y con una parte se llenan
algunos cuadros de la charola, a la otra parte del sustrato se le agrega el
biofertilizante a base de HMA y se llena el resto de la charola, esta listo
para sembrarse en el campo
Inoculación en siembra indirecta; plantulas, se agrega agua a una charola,
pesan la micorriza, se adhiere al agua se mezcla perfectamente y la
plantula se sumerge ya que las esporas estan en la parte de arriba,
posteriormente se siembra en el campo.
Inoculación en siembra directa a la semilla, la micorriza es mezclada con el
adherente y porteriormente se agrega a las semillas, se revuelve
perfectamente y estan listas para sembrar.

10. Enlista los beneficios que un biofertilizante, a base de HMA, aporta a los
cultivos agrícolas.
 Aumento en la nutrición de fósforo, nitrógeno, zinc, cobre y azubre a
las plantas en los cultivos esto es debido al incremento del área de
absorción de la raíz
  Mejor aprovechamiento de los fertilizantes químicos y orgánicos
 Estimula la fijación biológica de nitógeno en plantas noduladas
 Aumento en rendimiento por la acumulación de nutrientes
 Incrementa la producción de materia seca
 Produce la inmovilización de metales pesados como Zinc, Cadmio,
Manganeso si estan en concentraciones elevadas para la planta
 Protegen a las plantas de hongos, parásitos y nematodos
 Mejora el uso de agua y tolerancia a la sequía
 Disminuye el riesgo de pérdidas de cosecha en ambientes de estrés
(agua o nutricional)
 Frena la erosióny la desertificación
 Facilita la nutrición de las plantas en suelos no fértiles, erosionados y
en ambientes de riego restringido dandole al productor una opción no
contaminante para su producción

11. ¿Todas las especies de plantas forman asociación simbiótica con HMA o
hay plantas que no? Fundamenta la respuesta.
Las asociaciones micorrícicas se producen sobre casi todas las plantas
vasculares con algunas excepciones como las familias Crucíferas,
Quenopodiáceas, Ciperáceas, Cariofiláceas y Juncáceas y también se
establecen en Briofitas y Pteridofitas, aunque existe poca información sobre
estas simbiosis con plantas no vasculares. Entre las plantas vasculares
colonizadas por «micorrizas» se encuentran todas las especies leñosas de
interés forestal (Fagáceas, Betuláceas, Pináceas, etc.), todas las especies
de interés hortícola (Solanáceas, Gramíneas, etc.) y muchas familias de
importancia ornamental
Si bien las asociaciones micorrícicas se consideran en general no
específicas, es decir que cualquier hongo simbionte puede colonizar
cualquier planta receptiva, existen sin embargo «preferencias» o una mejor
afinidad-compatibilidad entre determinadas parejas hongo/planta. En
contraste existen también casos como en Eucaliptus, Malus, Arbutus en
que la total inespecificidad asociativa hace que estas y otras especies estén
colonizadas al mismo tiempo por formaciones tan distintas como
ectomicorrizas y endomicorrizas.

12. Elabora una lista de especies en los que se ha probado con éxito la
inoculación con HMA.
 Cereales: Maíz, trigo, cebada, avena
 Leguminosas: Frijol, haba, chicharo, garbanzo
  Hortalizas: tomate, jitomate, chile, papa, calabaza, pepino,
zanahoria, betabel, cebolla, ajo.
 Fruta: Piña
 Perenes: cítricos, aguacate, café
13. ¿Qué métodos moleculares se han utilizado en el estudio de los HMA y cuál
ha sido el aporte principal?
El primero, la llegada de PCR (Reacción en Cadena de la Polimerasa) que
ha permitido el análisis de pequeños grupos celulares o aun de una sola
espora, material seco de herbario o de organismos extintos.
El segundo, la selección de iniciadores (primers) específicos para hongos
que han permitido un fácil acceso a las secuencias de nucleótidos. Estos
primers amplifican en un número elevado de especies de hongos y trabajan
adecuadamente para analizar el ADN aislado de organismos individuales
Kendall y Rygiewicz publicaron recientemente un conjunto de primers para
utilizarse en amplificaciones anidadas de secuencias de ITS.
Estos métodos emergentes para el análisis molecular de las comunidades
microbianas están permitiendo el aumento de los muestreos

14. Después de haber leído el artículo, cuáles consideras que son los aportes
que un químico biotecnólogo puede hacer en materia de HMA para mejorar
la agricultura del país.

Las tecnicas moleculares para la identificación de HMA realizadas por

biotecnologos permitiran en un futuro desarrollar nuevas investigaciónes que
permitan comprender la relación hongo-planta, como mejorarla y descubrir mas
beneficios que le aporten al cultivo estos biofertilizantes a la producción y al
ambiente evitando asi perdidas economicas, aumentando la calidad del
producto y sin dañar la tierra sembrada con el abuso excesivo de otros
productos.