Ciclo

 de  Calvin  
•  Autótrofos  convierten  fuentes  /sicas  y  químicas  
de   energía   en   carbohidratos   sin   substratos  
orgánicos.  
 
•  Mucha  de  la  energía  se  consume  transformado  
CO2   a   un   estado   reducido   (-­‐CHOH-­‐)   compaEble  
con  las  necesidades  de  la  célula.  
 
•  200   billones   de   ton   CO2   /año   –   40%   por   el  
fitoplancton   –   reacciones   de   OXIDACIÓN   –  
REDUCCIÓN  en  la  fotosíntesis  

•  Ya   vimos   como   la   oxidación   fotoquímica   del  

H2O  a  O2  esta  asociada  a  la  generación  de  ATP  y  
la   reducción   de   NADPH   en   la   membrana   del  
Tilakoide,   mediado   por   enzimas   en   el   Stroma  
(fase  soluble  del  cloroplasto).  

Ahora  REACCIÓNES  DE  CARBONO  EN  LA  

FOTOSÍNTESIS  
 Oxidación  -­‐  reducción  

•  Una  reacción  de  oxidación-­‐reducción  (redox)  es  una  reacción  de  transferencia  de  
electrones.  La  especie  que  pierde  los  electrones  se  oxida  y  la  que  los  gana  se  
reduce.  Se  llama  reductor  a  la  especie  que  cede  los  electrones  y  oxidante  a  la  que  
los  capta.  
 Ciclo  de  Calvin  
 
Reacciones  C3  
•  Todos   los   organismos   autótrofos   desde   los   más  
primiEvos  hasta  las  angiospermas  reducen  CO2  
a  través  de  este  ciclo    
 
Melvin  Calvin    y  col  en  1950  (Nobel  1961):  
Carboxilación,  Reducción  y  Regeneración:  
•  C a r b o x i l a c i ó n :   a c e p t o r   r i b u l o s e -­‐ 1 , 5 -­‐
bisphosphate   acepta   CO2   y   forma   dos   3-­‐
phosphoglycerate   –   primer   intermediario  
estable  del  ciclo.  
•  Reducción   de     3-­‐phosphoglycerate     formar  
gyceraldehyde-­‐  3-­‐phosphate  
•  Regeneración   de     aceptor   ribulose-­‐1,5-­‐
bisphosphate   desde   glyceraldehyde-­‐3-­‐
phosphate  
 Carboxilación  

1.  Cambio  negaEvo  en  la  energía  libre  es  alto  –  la  reacción  en  senEdo  
contrario  es  fuertemente  favorecida.  
2.  La  afinidad  de  RUBISCO  por  CO2  es  alta  asegurando  la  carboxilación  a  bajas  
[CO2]  en  las  células  del  mesófilo.      
RUBISCO    muy  abundante  40%  del  total  de  proteína  soluble  en  la  hoja  

Alta  energía  libre  

 Reducción  

3-­‐phosphoglycerate      formado  en  la  carboxilación,  sufre  dos  modificaciones:  

1.  Es   fosforilado   via   3-­‐phosphoglycerate   kinase   a     1,3-­‐bisphosphoglycerate   usando   el  
ATP  generado  en  las  reacciones  de  luz.  
2.  Luego  es  reducido  a  glyceraldehyde-­‐3-­‐phosphate  usando  NADPH  generado  en  las  
reacciones   de   luz,   catalizado   por   NADP   y   glyceraldehyde-­‐3-­‐phosphate  
dehydrogenase  
 
 Regeneración  

•  La   toma   conEnua   de   CO 2  
requiere   que   su   aceptor  
ribulose-­‐1,5-­‐bisphosphate   sea  
regenerado  constantemente  
•  Para   prevenir   que   se   acaben  
los   compuestos   intermedios  
del   ciclo   de   Calvin   se   producen  
tres  moléculas  de  ribulose-­‐1,5-­‐
bisphosphate   (15   carbonos   en  
total)  
•  L o s   c a r b o n o s   s o n  
reintercambiados  a  parEr  de  5  
moléculas  de  Triosa-­‐Phosphate  
(5  X  3  =  15)  
 Ciclo  de  Calvin  es  AutocatalíKco  

•  Produce  más  sustrato  del  que  es  consumido  –  Triosa  fosfato:  

5  RuBP+  5  CO2  +  9  H2O  +  16  ATP  +  10  NADPH  →  6  RuBP  +  14  Pi  +  6  H+  +  16  ADP  +  10  NADP+  

•  Cuando  la  fotosíntesis  alcanza  el  “steady  state”,  5/6  Triosa  –fosfato  contribuyen  a  
la  regeneración  de  ribulose-­‐1,5-­‐bisphosphate    y  1/6  es  exportado  al  citosol  para  
sinteEzar  sucrosa  y  otros  metabolitos  que  son  converEdos  en  almidón  en  el  
cloroplasto.  
•  Para  sinteEzar  el  equivalente  de  una  molécula  de  hexosa,  6  moléculas  de  CO2  son  
fijadas  a  expensas  de  18  ATP  y  12  NADPH.    
•  Es  decir  el  ciclo  de  Calvin  consume  2  NADPH  y  3  ATP  por  cada  CO2  fijado.  
 
               Net:  6  CO2  +  11  H2O  +  12  NADPH  +  18  ATP  →  Fructose-­‐6-­‐phosphate  +  12  NADP+  +  6  H+  +  18  ADP  +  17  Pi  
 Regulación  del  ciclo  de  Calvin  

•  La  alta  eficiencia  del  ciclo  de  Calvin  indica  que  la  

regulación   asegura   que   todos   los   intermedios  
del  ciclo  están  en  presentes  en  el  momento  y  la  
concentración  adecuada  y  que  el  ciclo  se  apaga  
cuando  no  es  necesario  (en  oscuridad).  

•  Varios   mecanismos   opEmizan   la   concentración  

de   los   sustratos   intermedios   y   minimizan   las  
reacciones  en  direcciones  opuestas.    
 
•  La  unión  de  las  enzimas  en  la  membranas  de  los  
Klakoides,   aumenta   la   eficiencia   del   ciclo,  
alcanzando   un   alto   nivel   de   organización,   que  
favorece   la   canalización   y   protección   de   los  
sustratos  

 
 La  luz  acKva  las  enzimas  que  regulan  el  ciclo  de  Calvin    

Son  5  las  enzimas  reguladas  por  Luz:  

 
1.  Rubisco  
2.  NADP:glyceraldehyde-­‐3-­‐phosphate  
dehydrogenase  (glicerladehido  3  p)  
3.  Fructose-­‐1,6-­‐bisphosphatase  
4.  Sedoheptulose-­‐1,7-­‐bisphosphatase  
5.  Ribulose-­‐5-­‐phosphate  kinase  
 Rubisco  es  regulada  por  luz  

•  Rubisco  no  responde  a  thioredoxin.  

•  Como  otros  procesos  en  el  ciclo,  a  la  entrada  de  fotones  
los  protones  entran    del  estroma  al  Lumen.  
•  El  flujo  de  protones  es  acompañado  de  la  entrada  de  
Mg2+  al  estroma.  
•  Esto  disminuye  la  [H+]  (pH  7  →  8)    en  incrementa  la  de  
Mg2+  
•  Varias  enzimas  son  más  acEvas  a  un  pH  de  8  y  requieren  
el  Mg2+  como  cofactor  para  la  catálisis.  

 
 C2  Fotosíntesis  OxidaKva  del  ciclo  del  carbono:    
Fijación  fotosintéEca  de  CO2  y  la  fotorespiración  (O2)  son  reacciones  
compeEEvas  

•  La   habilidad   de   catalizar   la   oxigenación   de   la   ribulose-­‐   1,5-­‐

bisphosphate  es  una  propiedad  de  todas  las  Rubisco,  incluso  
en  organismos  anaeróbicos.  
 
•  CO2  y  O2  compiten  como  sustratos  alternaEvos  de  la  Rubisco,  
porque   Carboxilación   y   Oxigenación   ocurren   dentro   del  
mismo   siEo   acEvo   de   la   enzima   FOTO   DE   LA   REACCIÓN  
RUBISCO.  

•  Bajo   iguales   concentraciones   de   CO2   y   O2,   la   Rubisco   de   las  

angiospermas   fijan   CO2   80   veces   más   rápido   que   O2,   pero  
soluciones   acuosas   a   25°C     Eenen   un   radio   de   CO2:O2   de  
0.0416  
 
•  Es   decir   que   75%   del   carbono   perdido   por   oxigenación   de  
RuBP  es  recuperado  por  la  via  de  C2  fotosintesis  oxidaEva  y  
retornado  al  ciclo  de  Calvin  
 
The  C2  oxida,ve  photosynthe,c  carbon  cycle  acts  as  a  scavenger  opera,on  to  
recover  fixed  carbon  lost  during  photorespira,on  by  the  oxygenase  reac,on  of  
rubisco    
 Ciclo  OxidaKvo  
Cloroplastos  
Mitocondria  
Peroxisomas  
 
Two  molecules  of  glycolate  (four  carbons)  transported  
from  the  chloroplast  into  the  peroxisome  are  converted  to  
glycine,  which  in  turn  is  exported  to  the  mitochondrion  
and  transformed  to  serine  (three  carbons)  with  the  
concurrent  release  of  carbon  dioxide  (one  carbon).    
Serine  is  transported  
to  the  peroxisome  and  transformed  to  glycerate.  The  
laver  flows  to  the  chloroplast  where  it  is  phosphorylated  
to  3-­‐phosphoglycerate  and  incorporated  into  the  Calvin  
cycle.  
Inorganic  nitrogen  (ammonia)  released  by  the  
mitochondrion  is  captured  by  the  chloroplast  for  the  
incorporaEon  into  amino  acids  by  using  appropiate  
skeletons  (α-­‐ketoglutarate).  
 
 
The  heavy  arrow  in  red  marks  the  assimilaKon  of  
ammonia  into  glutamate  catalyzed  by  glutamine  
synthetase.  
In  addiEon,  the  uptake  of  oxygen  in  the  peroxisome  
supports  a  short  oxygen  cycle  coupled  to  oxidaEve  
reacEons.    
The  flow  of  carbon,  nitrogen  and  oxygen  are  indicated  
in  black,  red  and  blue,  respecEvely.    
 Competencia  entre  Carboxilación  y  Oxigenación  disminuye  la  eficiencia  de  
Fotosíntesis  
 

•  TeoréEcamente    ¼  del  carbono  que  entra  en  la  vía  C2  oxidaEva  es  liberado  como  
CO2  -­‐  respiración  
Carboxilación  y  Oxigenación  están  muy  relacionadas  en  las  hojas  de  la  planta    
 
El  balance  entre  los  dos  ciclos  está  determinado  por:  
1.  Propiedades  CinéEcas  de  Rubisco  
2.  Concentraciones  del  sustrato  [CO2]  y  [O2]  
3.  Temperatura  

Si  la  temperatura  incrementa  la    [CO2]    decrece  más  que  la    [O2].    La  fotorespiración  
(oxigenación)  se  ve  favorecida  en  relación  a  la  fotosíntesis  /carboxilación  
 
Pero  cual  es  el  papel  de  la  fotorespiración?:  Aparentemente  prevenir  el  daño  del  
aparato  fotosintéKco,  bajo  condiciones  de  luz  alta  y  cierre  de  estomas  y  baja  
concentración  de  CO2,  disipando  el  exceso  de  ATP  y  la  luz  
 Mecanismos  para  concentrar  CO2  

Bomba  de  CO2  en  plantas  acuáKcas  y  en  organismos  

unicelulares,  cianobacterias  y  algas:  
 
•  Organismos  marinos  y  de  agua  fresca  acumulan  
carbono  inorgánico  a  través  de  bombas  de  CO2    y  HCO3  
en  la  membrana  plasmáEca.    
 
•  Las  proteínas  que  funcionan  como  bombas  de    CO2  y  
HCO3  no  están  en  células  que  crecen  a  altas  
concentraciones  de  CO2,  pero  se  inducen  cuando  se  
exponen  a  concentraciones  bajas  de  CO2  
 
•  El  HCO3  acumulado  es  converEdo  a  CO2  por  la  enzima  
anhidrasa  carbónica  y  luego  el  CO2  entra  en  el  ciclo  de  
Calvin.  
 
•  La  consecuencia  metabólica  de  este  enriquecimiento  es  
la  supresión  de  la  oxigenación  por  la  RuBP  y  por  tanto  
de  la  fotorespiración.  
 
•  El  costo  energéEco  de  esta  adaptaciones  es  el  gasto  
adicional  de  ATP  para  concentrar  el  CO2  
El  ciclo  C4  del  Carbono  

Anatomical  differences  between  C3  and  C4  leaves.  (A)  C3  (Oryza  saEva  
L.,  rice  variety  IR64)  and  (B)  C4  (Setaria  viridis)  leaf.  Mesophyll  cell  
(MC)  of  rice  ...  
Compare  
 El  ciclo  C4  concentra  el  CO2  en  las  Bundle  Sheath  Cells  
 
             Cuatro  estados:  

1.  Fijación   de   CO2   por   carboxilación  

d e   f o s f e n o l p i r u v a t o   ( P E P  
Carboxilasa)en   las   células   del  
mesófilo  para  formar  malato  (ácido  
C4)  
2.  Transporte  del  malato  a  las  bundle  
sheet  cells    
3.  Decarboxilación   del   malato   dentro  
las   bundle   sheet   cells   y   generación  
de  CO2  que  entra  al  ciclo  de  Calvin.  
4.  Transporte   de   ácidos   C3   (piruvato)  
y   regeneración   del   CO2   aceptor   de  
fosfenolpiruvato.    
La  concentración  de  CO2  en  las  bundle  sheath  cells  Kene  un  costo  energéKco.  
 

El  costo  total  de  energía  requerida  para  fijar  CO2  entre  el  ciclo  C4  y  el  ciclo  de  
Calvin  es  5  ATP  +  2  NADPH  por  CO2  fijado.  
 En  climas  calientes  y  secos  el  ciclo  C4    
reduce  la  fotorespiración  y  la  pérdida  de  agua  
 
•  La  afinidad  de  PEP  carboxilasa  por  su  sustrato  HCO3  es  
suficientemente   alta,   de   manera   que   la   enzima   es  
saturada  por  el  HCO3.  
 
•  Entonces  el  oxígeno  no  compite  en  la  reacción.  
 
•  La   alta   acEvidad   dela   PEP   carboxilasa   permite   a   las  
plantas   C4   reducir   la   apertura   de   los   estomas   y   por  
ende  la  conservación  del  agua  mientras  se  fija  el  CO2    a  
tasas  iguales  o  mayores  que  las  de  las  plantas  C3.  
 
•  La   supresión   de   la   fotorespiración   resulta   de   la  
concentración  del  CO2  en  las  bundle  sheath  cells.  
 
•  Esas   caracterísEcas   permiten   a   las   plantas   C4    
f o t o s i n t e E z a r   m á s   e fi c i e n t e m e n t e   a   a l t a s  
temperaturas  que  las  C3  y  es  probablemente  la  razón  
de   la   alta   abundancia   de   estás   en   climas   más   secos   y  
calientes.  
 Metabolismo  Ácido  de  Crassulaceas  (CAM)  

•  Permite  a  las  plantas  mejorar  WUE  

•  Una  planta  CAM  pierde  entre  50  -­‐100  g  

de   agua   /   g   CO2   ganado.     Comparado  
con   250   –   300   g   y   400-­‐500   g   para  
plantas  C4  y  C3  respecEvamente  

•  CAM   ventaja   compeEEva   en   ambientes  

secos  

•  En   plantas   CAM   la   formación   de   ácidos  

C4   está   temporal   y   espacialmente  
separada  
•  Elevando   una   concentración   interna   de  
CO2   (C4   fotosíntesis)   que   suprime   la  
fotorespiración.  
•  En  plantas  C4  la  PEP  carboxilasa  es  acEvada  durante  el  día  y  en  CAM  durante  la  
noche.  
•  En  ambas  PEP  Carboxilasa  es  inhibida  por  malato  y  acEvada  por  glucosa  6  
fosfato  
•  LA  síntesis  de  la  kinasa  que  media  la  reacción  es  esEmulada  por  el  flujo  de  Ca2+  
de  la  vacuola  al  citosol  que  resulta  en  la  acEvación  de  Ca2+  Calmodium  protein  
kinase.  
 Resumen  

•  Procesos  
•  Enzimas  
•  Productos  
•  Que  enEendo  por  todo  esto?  
•  Para  qué  sirve  saber  todo  esto?,  en  qué  puedo  aplicarlo  como  biólogo?