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PREINFORME DEL LABORATORIO DE BIOQUIMICA

PRESENTADO POR:
PAOLA ANDREA VALDERRAMA CAPERA.
CODIGO: 1117527357
GRUPO: 151030_28

PRESENTADO A:

HERNAN CAMILO CASTILLO ROMERO.

TUTOR LABORATORIO PRÁCTICO

UNIVERSIDAD NACIONAL ABIERTA Y A DISTANCIA UNAD


ESCUELA DE CIENCIAS DE LA SALUD (ECISA)
ADMINICTRACION EN SALUD
BIOQUIMICA
2016
INDICE GENERAL

INTRODUCCION ......................................................................................................................................3
MATERIALES Y REACTIVOS .................................................................................................................4
PLAN DE TRABAJO ...............................................................................................................................10
REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS ........................................................................................................19
INTRODUCCION

En el presente Trabajo podemos encontrar la realización del Preinforme para asistir al


Laboratorio Presencial de Bioquímica para el cual nuestra Tutora será Martha Adriana Peña, el
Laboratorio será el día sábado 22 de octubre del 2016 en SENA (Tecno Parque agroecológico
Yamboro).

El presente contiene Portada, Índice General, Introducción, Materiales y reactivos


clasificados en tablas, Plan de Trabajo y por ultimo Referencias Bibliográficas. En el Plan de
Trabajo podemos encontrar la información más importante y relevante de cada una de las Prácticas
a realizar.

En objetivo de cada una de las Practicas es aplicar y realizar de forma excelente lo


establecido en la Guía de Laboratorio para Bioquímica, trabajando en equipo.
MATERIALES Y REACTIVOS

MATERIALES QUE ENCONTRAMOS EN EL LABORATORIO

NOMBRE IMAGEN DESCRIPCION

Se usa en el laboratorio para


mezclar o revolver algunas
AGITADOR DE VIDRIO sustancias químicas, Su uso
está destinado para los líquidos
de baja densidad y sólidos de
baja densidad.

El mechero bunsen es un
instrumento utilizado en
MECHERO BUNSEN laboratorios para calentar
muestras y sustancias
químicas. El mechero deberá
ser manipulado por una sola
persona.

Está diseñado para agitar de


modo intenso células de
AGITADOR VÓRTEX bacterias y levaduras, para el
MULTIPLE PARA TUBOS lavado del medio de cultivo y
para la extracción de
metabolitos y enzimas de
células y cultivo celulares.
Es un recinto que emplea un
CAMARA DE FLUJO ventilador para forzar el paso
LAMINAS de aire a través de un filtro
HEPA o ULPA y proporcionar
aire limpio a la zona de trabajo.

Se utilizan para manejar y


PINZA PARA TUBOS DE poner a fuego los tubos de
ENSAYO ensayo como módulo de
seguridad.

Este instrumento permite la


TUBOS DE ENSAYO preparación de soluciones.

Una gradilla es un utensilio


utilizado para dar soporte a los
GRADILLA tubos de ensayos o tubos de
muestras.
Almacenar las puntas para
CAJA PARA Micro pipetas de manera
MICROPIPETAS compacta y ordenada, con tapa
da seguridad. Autoclavable.

La micro pipeta es un de
laboratorio empleado para
succionar y transferir pequeños
MICROPIPETAS volúmenes de líquidos y
permitir su manejo en las
distintas técnicas analíticas.

Se utiliza para preparar


BALÓN AFORADO disoluciones, y hacer
reacciones ya que su cuello
largo es ideal para ello. Suele
tener una marca que indica el
volumen de líquido máximo.
ESPECTROFOTÓMETRO Es un instrumento usado en el
análisis químico que sirve para
medir, en función de la
longitud de onda, la relación
entre valores de una misma
magnitud fotométrica relativos
a dos haces de radiaciones y la
concentración o reacciones
químicas que se miden en una
muestra.

Se usa en los laboratorios para


PROBETA medir líquidos o gases.

Es un aparato basado en
métodos mecánicos tiene una
BALANZA ANALITICA sensibilidad de una décima de
gramo.

PERA DE GOMA PARA


PIPETAS Se utiliza para el mejor
rendimiento en el pipeteo.
Son utensilios que permiten
medir volúmenes. Las hay en
PIPETA DE VIDRIO dos presentaciones: Pipetas
graduadas y Pipeta
volumétrica.

Es un vidrio redondo convexo


que permite contener las
VIDRIO DE RELOJ sustancias para luego mazarlas
o pesarlas en la balanza. Se
denomina vidrio de reloj ya
que es muy similar a uno de
ellos.

Son utensilios que permiten


calentar sustancias hasta
VASO DE PRECIPITADOS obtener precipitados.

Son unos tubos de vidrio que


por uno de sus extremos son
PIPETAS PAUSTEUR CON muy estrechos y en el otro
BULBO extremo se suele colocar un
chupete de un cuentagotas.

MATERIALES REQUERIDOS PARA LLEVAR A LAS PRACTICAS.


NOMBBRE IMAGEN

CINTA DE
ENMASCARAR

GUANTES

TAPABOCAS

BATA

PAPEL
ABSORBENTE

MARCADOR
SHARPIE

REACTIVOS QUE UTILIZAMOS EN EL LABORATORIO


PLAN DE TRABAJO
Tutora de la práctica presencial: Martha Adriana Peña

Correo electrónico: martha.pena@unad.edu.co

Teléfono: 3113093450

Fecha de la práctica: 22 de Octubre del 2016.

Lugar de la práctica: SENA Yamboro (Tecno Parque agroecológico Yamboro).

PRACTICA 1. SEGURIDAD Y NORMAS DE LABORATORIO

En el laboratorio de bioquímica se realizan prácticas experimentales en donde aprenderemos a


manipular equipos, reactivos químicos y conformáremos pequeños grupos de trabajo para el
desarrollo de la actividad. Para poder llevar a cabo las prácticas de laboratorio excelentemente es
requerido que tengamos un conocimiento teórico básico sobre el tema y leamos detenidamente la
guía de laboratorio.

NORMAS PERSONALES

 Debemos usar vestimenta apropiada y cómoda, que cubra áreas de la piel como pantalones
(jeans), blusas con mangas, la bata y guantes. Calzado cerrado que cubra completamente
el pie.
 No podemos ingerir ninguna clase de alimentos dentro del laboratorio y evitar tocar el rostro
y llevar las manos a la boca.
 Debemos asistir puntualmente en la fecha y hora programada, podremos entrar al
laboratorio cuando el Docente este presente y no ausentarnos antes de terminar la práctica.
 No debemos charlar en la práctica de Laboratorio.
NORMAS PARA LA UTILIZACIÓN DE PRODUCTOS QUÍMICOS
 Cuando tengamos que hacer una reacción química debemos escoger el recipiente adecuado
a la cantidad que se va a usar. Los ensayos se hacen en tubos de ensayo o en placas de gotas,
nunca en vasos, matraces, etc.
 No podemos usar recipientes alimenticios para contener productos químicos.
 No debemos utilizar vidrio agrietado pues aumenta el riesgo de accidente. Debemos
comprobar la temperatura de los materiales antes de cogerlos directamente con las manos.
 Los frascos deben cerrarse inmediatamente después de su uso.
 Al momento de trabajar con ácido, para diluirlos debemos verter el ácido sobre el agua,
nunca al contrario.
 No devolver nunca a los frascos de origen los sobrantes de los productos utilizados.
 Nunca debe sacar sustancias químicas del laboratorio sin autorización.

NORMAS PARA LA UTILIZACIÓN DE INSTRUMENTACIÓN


 Cuando determinemos masas de productos químicos con balanza utilizaremos un recipiente
adecuado.
 Debemos mantener perfectamente limpio y seco el lugar dónde se encuentre situado
cualquier instrumento con contactos eléctricos. Leer las instrucciones de uso de los
instrumentos.
 Debemos revisar el material de vidrio para comprobar posibles fisuras, especialmente antes
de su uso a vacío o presión.

NORMAS DE EMERGENCIA
 En caso de tener que evacuar el laboratorio, debemos cerrar la llave del gas y salir de forma
ordenada siguiendo en todo momento las instrucciones que haya impartido el Profesor.
 Debemos localizar al iniciar la sesión de prácticas los diferentes equipos de emergencia en
el correspondiente laboratorio: Duchas y lavaojos, Botiquín, Absorbente para derrames,
Alarma de emergencia, Salida de emergencia y Recipiente para el vidrio roto.
 Al finalizar la práctica, debemos limpiar el área de trabajo y entregar los materiales
utilizados limpios y en buenas condiciones.
 Esperar las indicaciones para retirarnos de las instalaciones del laboratorio.
PRACTICA 2: PROPIEDADES BIOQUÍMICAS DE LOS AMINOÁCIDOS.

Los aminoácidos se denominan así por tener un grupo amino (-NH2) y un grupo carboxilo (-
COOH). Es posible agrupar los aminoácidos en clases principales basadas en las propiedades de
sus grupos R, en especial de su polaridad, o tendencia a interaccionar como el agua a pH biológico
(cerca del pH 7.0). La polaridad de los grupos R varía enormemente desde totalmente apolar o
hidrofóbico (insoluble en agua) hasta altamente polar o hidrofílico (soluble en agua).

PRUEBAS A REALIZAR:
 Clasificación de los aminoácidos: polares alifáticos, aromáticos, polares sin carga,
cargados.
 Aminoácidos proteicos con nomenclatura clásica, sistema de tres letras y sistema de una
sola letra, impuesto en genética molecular.
 Reacciones bioquímicas para identificar aminoácidos.

MATERIALES:
Reactivos M Cantidad
Reactivo ninhidrina Tubos de ensayo (140a mm*14mm) 1
NaOH Gradilla 52
Sulfato cúprico (CuSO) Pinza para tubos 2
Ácido Pipetas Pauster con bulbo 4
Claocréutricoo(CH3C de Beaker o vasos de precipitados de 500 mL 5
sodioOO (NaH)C l)
albúmina Estufa 1
Ácido nítrico (HNO3) Cámara de flujo laminas 1
Hidróxido de Pipetas de vidrio: 0.5 ml, 1 ml, 5 ml y 10 4
sodio (NaOH) ml.
Acetato de Plomo Pera de goma para pipetas 4
α Naftol
Hipoclorito de sodio
Reactivo de Hopkins-Cole
Ácido sulfúrico (H2SO)
PROCEDIMIENTO

 REACCIÓN CON LA NINHIDRINA.


 REACCIÓN DE BIURET.
 REACCION XANTOPROTEICA.
 REACCION DE MILLON.
 REACCION DE SAKAGUCHI.

DEFINICIÓN DE TÉRMINOS:
Aminoácidos: Son compuestos orgánicos que se combinan para formar proteínas. Los
aminoácidos y las proteínas son los pilares fundamentales de la vida.

Proteínas: Las proteínas son macromoléculas compuestas por carbono, hidrógeno, oxígeno y
nitrógeno. La mayoría también contienen azufre y fósforo. Las mismas están formadas por la unión
de varios aminoácidos, unidos mediante enlaces peptídicos. Las proteínas constituyen alrededor
del 50% del peso seco de los tejidos y no existe proceso biológico alguno que no dependa de la
participación de este tipo de sustancias.

Análisis Cualitativo: Es el Conjunto de procedimientos que buscan identificar el tipo de


componentes presentes en una muestra de materia. Éste no determina cantidades si no cualidades.
Este busca información sobre la identidad o forma de la sustancia presente. Por ejemplo, a un
químico se le podría dar una muestra sólida desconocida. Por ejemplo, se han desarrollado
procedimientos cuidadosos para reconocer la presencia de diferentes iones metálicos; estas técnicas
integran colectivamente el análisis cualitativo inorgánico.

Análisis Cuantitativo: Es la determinación de la abundancia (muchas veces expresada como


concentración) de una, varias o todas las sustancias químicas presentes en una muestra. Cuando se
conoce la presencia de cierta sustancia en una muestra, la cuantificación o medida de su abundancia
absoluta o relativa puede ayudar en la determinación de sus propiedades específicas. Por ejemplo,
el análisis cuantitativo realizado por espectrometría de masas sobre muestras biológicas puede
aportar, por la proporción de abundancia relativa de ciertas proteínas específicas, indicaciones de
ciertas enfermedades, como el cáncer.
PRACTICA 3. BIOQUÍMICAS DE LAS PROTEÍNAS

Las proteínas son uno de los principales componentes de todas nuestras células. Los
aminoácidos (compuestos orgánicos) son los ladrillos de construcción de la proteínas. Los
aminoácidos se agrupan de acuerdo con su comportamiento químico. La síntesis de las proteínas
ocurre mediante la unión entre sí de las cadenas de aminoácidos. Los distintos aminoácidos
imparten diferentes comportamientos químicos en la estructura de las proteínas. Debido a
la presencia de diferentes aminoácidos en las uniones peptídicas las proteínas reaccionan con una
variedad de compuestos formando productos coloreados.
Los aminoácidos tiene tres tipos de reacciones químicas importantes: (1) reacciones debido a la
presencia del grupo carboxilo (COO- ), (2) reacciones debidas al grupo amino (NH), y (3)
reacciones debido al grupo R.
Las reacciones debidas al grupo carboxilo y al grupo amino son generales y se dan para todos los
aminoácidos. Las reacciones del radical R son reacciones específicas; por ejemplo, cisteína da
una reacción para azufre, triptófano da ciertas reacciones de color debido a que su molécula
contiene el grupo indol, tirosina da otras reacciones de color debido a su grupo fenólico, etc.
Existen reacciones de coloración que son específicas para aminoácidos de esas proteínas y son
importantes tanto para la detección como para el dopaje de aminoácidos y proteínas. Existen
también reacciones generales porque sirven para caracterizar grupos comunes a todas las proteínas
como grupos amino o uniones.

PROCEDIMIENTO

 Reacción de Biuret.

 Reacción De Aminoácidos Azufrados.


 Determinación de la Concentración de Proteínas: Método de BRADFORD.

MATERIALES Y REACTIVOS:

Reactivos Materiales Cantidad


Reactivo ninhidrina Tubos de ensayo (140 mm*14mm) 1
5
NaO H Gradilla 2
Sulfato cúprico (CuSO) Pinza para tubos 2
Ácido acético(CH3COOH) Pipetas Pauster con bulbo 4
Cloruro de sodio (NaCl) Beaker o vasos de precipitados de 500 mL 5
albúmina Estufa 1
Ácido nítrico (HNO3) Cámara de flujo laminas 1
Hidróxido de sodio Pipetas de vidrio: 0.5 ml, 1 ml, 5 ml y 10 ml. 4
(NaOH)
Acetato de Plomo Pera de goma para pipetas 4
α Naftol Vidrios reloj grandes
Hipoclorito de sodio Probeta 100 ml
Reactivo de Hopkins- Cole Balón aforado de 25 ml
Ácido sulfúrico (H2SO) Agitador de vidrio
Reactivo de Millón Balanza analítica
Aminoácidos: Glicina, Espectrofotómetro
tirosina, triptófano,
fenilalanina y arginina
Fenol Micropipeta 10 μL
Albumina de huevo Micropipeta 20- 200 μL
Agua destilada Micropipeta 20- 200 μL
Ácido fosfórico Micropipeta 2001000
μL L
Etanol 1 caja con puntas de 200 μL (amarillas) para
micropipeta
1 caja con puntas de 200 μL (amarillas) para
micropipeta
1 caja con puntas de 1000 μL (azules) para
micropipeta.
Agitador vórtex múltiple para tubos

PRÁCTICA 4: IDENTIFICACIÓN DE CARBOHIDRATOS

Los hidratos de carbono constituyen el grupo de biomoléculas más abundante sobre la superficie
terrestre, representando aproximadamente el 75 % de la materia orgánica existente. En ocasiones,
se denominan también carbohidratos, azúcares, sacáridos o glúcidos. Todos son términos que
hacen referencia a su sabor dulce, o a que poseen la composición Cn(H2O)n. Estas moléculas
usualmente contienen carbono, hidrógeno y oxígeno en una proporción de 1:2:1. Los carbohidratos
se clasifican como monosacáridos, disacáridos o polisacáridos, dependiendo del tamaño y la
complejidad de la molécula. Los monosacáridos se componen de una sola molécula de azúcar.
Cuando dos monosacáridos se unen se produce un disacárido, y cuando dos o más se unen se
produce un polisacárido.

En los animales los carbohidratos son esenciales desde el punto de vista energético, ya que muchos
órganos y células del cuerpo humano, como el cerebro y los glóbulos rojos, obtienen su energía
principalmente de la glucosa. Pero sus funciones no se restringen a ser únicamente fuente
de energía, sino que también pueden desarrollar funciones estructurales, de reconocimiento celular
y adhesión. Estructuralmente, un hidrato de carbono típico es una cadena hidrocarbonada con
varios grupos alcohol y un carbono más oxidado, en forma de grupo carbonilo. Este grupo oxidado
puede situarse en el extremo de la cadena (aldehído), o adyacente, en posición 2 (cetonas).

MATERIALES Y REACTIVOS.
Reactivos Materiale Cantida
Reactivo de Benedict Tubos de ensayo (140 mms *14mm) d1
Reactivo Fehling A y reactivo Gradilla 52
FehlLugoinlg B Pinza para tubos 2
Glucosa Pipetas Pauster con bulbo 4
sacarosa Beaker o vasos de precipitados de 500 mL 5
almidón Estufa 1
Fructosa Cámara de flujo laminas 1
Reactivo Fehling A y B Pipetas de vidrio: 0.5 ml, 1 ml, 5 ml y 10 ml. 4
α-naftol Pera de goma para pipetas 4
Vidrios reloj grandes
Probeta 100 ml
Balón aforado de 25 ml
Agitador de vidrio
Balanza analítica

PROCEDIMIENTO
 PRUEBA DE BENEDICT.
 REACCIÓN DE FEHLING.
 REACCIÓN DE MOLISCH.
 PRUEBA DE TOLLENS.
 REACCIÓN DE LUGOL (YODO).

PRACTICA 5. CARACTERÍSTICAS DE LOS ÁCIDOS GRASOS

Los lípidos (del griego lypos, grasa) son biomoléculas orgánicas formadas básicamente por
C, H y O, aunque este último elemento se encuentra en proporciones mucho más bajas que los dos
primeros. Además, pueden contener P, N y S. Constituyen un grupo de sustancias muy
heterogéneas con características químicas diversas, pero con algunas propiedades físicas
comunes, que podrían resumirse en estas dos: Son mayoritariamente insolubles en agua Y son
solubles en disolventes orgánicos, tales como éter, cloroformo, alcanos (ej: hexano), benceno,
acetona y alcoholes.

MATERIALES
Reactivos Materiale Cantida
Aceite de girasol Tubos de ensayo (140 mm*s14 mm) d1
Agua destilada Gradilla 52
Hexano Pinza para tubos 2
Acetato de etilo Pipetas Pauster con bulbo 4
Etanol Beaker o vasos de precipitados de 500 mL 5
NaOH Estufa 1
KOH Cámara de flujo laminas 1
Reactivo Sudán III Pipetas de vidrio: 0.5 ml, 1 ml, 5 ml y 10 ml. 4
Pera de goma para pipetas 4
Vidrios reloj grandes
Probeta 100 ml
Balón aforado de 25 ml
Agitador de vidrio
Balanza analítica

PROCEDIMIENTO
 SOLUBILIDAD EN LÍPIDOS.
 REACCIÓN CON EL SUDÁN III.
REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS

Universidad de Bogotá, & Jorge Tadeo Lozano. (2014). GUÍA no 9: ENSAYOS PARA
RECONOCIMIENTO DE AMINOACIDOS. Retrieved from
http://avalon.utadeo.edu.co/comunidades/estudiantes/ciencias_basicas/organica/guia_7_carbohidr
atos.pdf

Universidad de la frontera, Temuco Chile. (2014). Aminoácidos.


Retrieved from http://cmcc.ufro.cl/wiki/doku.php?id=molecular:aas

Universidad Complutense de Madrid. (Marzo de 2007). UCM- Manual de Gestión de Residuos


Peligroso. Recuperado el 15 de Enero de 2012, de
http://www.ucm.es/info/ucmp/cont/descargas/documento28113.pdf
Lineamientos para el desecho de productos químicos (s.f.). Disponible 17 de
enero de 2013, en
http://xml.cie.unam.mx/xml/dir/seguridad/Lineamientos_para_el_Desechos.pdf

Stoscheck, C.M. (1990): Quantitation of protein. Methods in Enzymology, 182: 50-69


http://www.uco.es/dptos/bioquimica-biol-mol/practicasgenerales.htm

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