Escherichia coli

Es un bacilo gram negativo, anaerobio

facultativo de la familia
Enterobacteriaceae, tribu Escherichia.
Esta bacteria coloniza el intestino
humano a las pocas horas de nacer y se
considera un microorganismo con flora
normal, pero existen cepas que pueden
ser patógenas y causar daños,
produciendo diferentes cuadros clínicos,
incluida la diarrea.

Para determinar el grupo patógeno al que

pertenecen, Kauffman desarrolló un
esquema de serotipificación que varía y
actualmente cuenta con 176 antígenos
somáticos (O), 112 flagelares (H) y 60
capsulares (K). El antígeno "O" es
responsable del serogrupo; La
determinación del antígeno somático y
flagelar (O: H) indica el serotipo, que a
veces se asocia con un cuadro clínico
particular.

La serotipificación de E. coli requiere

una gran cantidad de antisueros. Como
hay pocos laboratorios que se
desempeñen, se prefiere identificar las
cepas por sus factores de virulencia
utilizando ensayos in vitro tales como
ensayos de adhesión de células Hep-2 y
ensayos de toxigenicidad celular.
También se pueden realizar pruebas in
vivo, como el lazo enlazado o la prueba
de Sereny, así como pruebas
inmunológicas y pruebas de biología
molecular, para revelar la presencia de
fragmentos de genes implicados en el
mecanismo de patogenicidad y que sirven
como marcadores moleculares.
De acuerdo con su mecanismo de
patogenicidad y cuadro clínico, las cepas
de E. coli que causan diarrea se clasifican
en seis grupos: enterotoxigénicas
(ETEC), enterohemorrágicas también
conocidas como toxina Vero o
productoras de toxinas similares a Shiga
(EHEC o VTEC o STEC),
enteroinvasivas (EIEC), enteropatógeno
(EPEC), enteroagregativo (EAEC) y
adherencia difusa (DAEC).
E. Coli enterotoxigénica
Las ETEC colonizan la mucosa del
intestino delgado mediante pilis o
fimbrias que tienen varias formas
denominadas CFA (antígenos del factor
de colonización o colonization factor
antigens), siendo su principal mecanismo
de patogenicidad la síntesis de una o
ambas enterotoxinas denominadas toxina
termolábil (LT) y toxina termoestable
(ST). Sus genes están en un plásmido que
también puede tener información
genética para los CFA, aunque se han
encontrado algunos genes ST en
transposones. Las toxinas LT y ST
atraviesan el nivel intracelular de cAMP
y cGMP respectivamente, que se
encuentran en la membrana celular
intestinal, provocando la fuga de agua e
iones. Las ETEC son importantes en
lactantes, principalmente en niños
menores de dos años, y en particular
durante los primeros seis meses de vida.
La frecuencia de aislamiento de este
grupo patógeno de E. coli en niños con
diarrea es de 10 a 30%. En los niños en
edad escolar y en adultos puede ser
asintomática y poco frecuente o producir
la diarrea del viajero. La enfermedad
tiene un periodo de incubación de 14 a 50
h. Su cuadro clínico es diarrea aguda, sin
sangre, moco o pus y es extraño que se
presente fiebre y vómito.
E. coli enterohemorrágica
Riley describió y relacionó la ECEH con
brotes caracterizados por dolor
abdominal, diarrea acuosa con sangre y
poca o ninguna fiebre, una condición
llamada colitis hemorrágica (HC), que
fue causada por comer carne cruda o
poco cocida. La bacteria aislada de todos
los casos fue E. coli del serotipo O157:
H7. Karmali en 1983, lo asoció con casos
aislados de síndrome urémico hemolítico
(SUH) caracterizado por daño renal
agudo, trombocitopenia y anemia
hemolítica microangiopática, precedida
de diarrea sanguinolenta, con presencia
en heces de E. coli productora de una
citotoxina con actividad celular en Vero.
Por eso se llama verotoxina (VT), y las
cepas capaces de producirla se
denominaron E. coli verotoxigénica
(VTEC).
La capacidad toxigénica de las cepas es
necesaria para que el paciente desarrolle
colitis hemorrágica y diarrea
sanguinolenta, ya que la citotoxina STX
es el principal mecanismo patogénico de
EHEC y su síntesis está relacionada con
la presencia del bacteriófago STX, que se
inserta en el genoma. STX actúa a nivel
de síntesis de proteínas, ya que se une a
la subunidad 60S de los ribosomas de las
células intestinales o renales del huésped.
E. coli enteroinvasiva
El grupo EIEC y Shigella spp están
relacionados genética y
bioquímicamente, ya que son
descarboxilasa negativa, inmóvil y
lactosa negativa. El mecanismo
patogénico de EIEC es la invasión del
epitelio del colon; Para ello, el primer
paso es la adherencia de la bacteria a las
vellosidades de la mucosa, requiriendo
muquinasa y adhesinas, para luego
ingresar a la célula por endocitosis, y
posterior multiplicación del EIEC dentro
de la célula y diseminación a células
sanas adyacentes. La información
genética de este mecanismo se encuentra
en loci del cromosoma y del plásmido,
además de tener la capacidad de elaborar
una o más enterotoxinas que podrían ser
importantes en la producción de diarreas.
Los síntomas característicos en las
personas infectadas por EIEC son diarrea
acuosa, con sangre y mocos, algunos,
pero los casos solo presentan diarrea, está
en ocasiones es indistinguible de la
producida por ETEC. Las cepas de EIEC
se asocian más a brotes que a casos
aislados, en los que la transmisión puede
ser de persona a persona, a través de la
ingestión de alimentos y agua
contaminados, convirtiéndose en un
patógeno importante en niños mayores de
seis meses.
El diagnóstico de EIEC se realiza
mediante una prueba in vivo como la de
Sereny, que es la inoculación de un
cultivo puro de la bacteria en un ojo de
un conejillo de indias en el que después
de 24 a 96 horas se produce una
ulceración en el ojo, pero hay también
métodos inmunológicos y moleculares.
E. Coli enteropatógeno
EPEC fue el primer grupo en ser
identificado serológicamente y se asoció
con casos de diarrea en lactantes, siendo
la adherencia su principal factor de
patogenicidad. El proceso de adherencia
íntima entre las bacterias y la membrana
de las células del epitelio intestinal,
seguido de la destrucción de las
microvellosidades, con polimerización de
actina, que conduce a la alteración del
citoesqueleto en el sitio de la unión de las
bacterias, debido a los niveles elevados
de calcio intracelular y proteína quinasa
C. La EPEC puede causar brotes o casos
aislados de diarrea. Este grupo afecta
principalmente a niños menores de seis
meses y a los de dos años. También se
puede aislar en adultos enfermos y sanos,
principalmente cuando existe un factor
predisponente como la diabetes. La forma
de transmisión de la enfermedad es fecal-
oral por manos contaminadas de
manipuladores de alimentos.
E. Coli entero agregativa
Scaletsky y Nataro encontraron cepas
aisladas de pacientes con diarrea, que por
serología no correspondían al grupo
EPEC, pero sí presentaban un patrón
característico de adherencia diferente al
EPEC y que también eran negativas a la
prueba de EAF. En estudios posteriores
se encontró el fenotipo de adherencia
agregada, caracterizado por la
autoaglutinación de las bacterias entre sí
y por ser inespecífico, debido a que las
bacterias se adhieren a la superficie de las
células Hep-2 y a la superficie de las
células Hep-2 libres. cubreobjetos.
Las bacterias y diversas moléculas que
produce están involucradas en el
mecanismo de patogenicidad de la
EAEC; También se sabe que las cepas de
EAEC tienen la capacidad de aumentar la
producción y secreción de moco en la
mucosa que atrapa las bacterias que se
autoaglutinan en una capa delgada en el
epitelio intestinal. La producción de
moco puede estar relacionada con la
capacidad de la EAEC para colonizar
persistentemente el intestino y causar
diarrea.
El sitio objetivo del daño de la EAEC
puede ser la mucosa del intestino grueso
y delgado, con un período de incubación
de menos de ocho horas y puede durar
hasta 18-20 días. Esta bacteria puede
provocar brotes o casos aislados de
diarrea persistente.
En los niños puede manifestarse con
diarrea acuosa, de color verde, con
mocos, sin sangre, y que en ocasiones
puede agravarse y requerir rehidratación
intravenosa. A veces el cuadro clínico se
presenta como diarrea con moco con o
sin sangre, vómitos y poca o ninguna
fiebre.
La prueba de referencia para el
diagnóstico de EAEC es la observación
de la adherencia agregada en células
Hep-2 de cultivos bacterianos,
previamente inoculados en medio Luria e
incubados en condiciones estacionarias y
a 37 ° C.
E. Coli de adherencia difusa
Las cepas de E. coli de adherencia difusa
no forman microcolonias cuando se
adhieren a las células Hep-2. Se sabe
poco sobre su mecanismo de
patogenicidad, pero se ha caracterizado
una fimbria de superficie, conocida como
F1845, implicada en el fenómeno de
adherencia difusa.
El grupo DAEC puede aislarse tanto de
personas sanas como de personas con
diarrea, siendo más importante en niños
de 4 a 5 años. Los principales síntomas
de presentación son diarrea acuosa sin
sangre y sin glóbulos blancos.
La hibridación con sondas derivadas de
un fragmento del gen daaC, que codifica
la fimbria F-1845, también se ha
utilizado para el diagnóstico, pero puede
presentar falsos positivos, y aún no se ha
desarrollado el diagnóstico mediante
PCR.
Aislamiento, identificación y diagnóstico más recientes, tal es el caso
caracterización de E. Coli patógena
Para el aislamiento, identificación y
caracterización de cepas de E. Coli se
aplican métodos tradicionales, métodos
in vivo e in vitro y métodos de biología
molecular; luego se mencionarán los
métodos tradicionales y los de biología
molecular. El método tradicional es el
aislamiento de la bacteria, extraída
directamente de la materia fecal o con un
hisopo rectal. Luego se siembra con la
punta del hisopo sobre una placa de agar
Mac Conkey u otro medio selectivo y,
con un asa redonda de nicromo, se
prosigue el aislamiento, sembrando por
rayado cruzado, luego se incuba a 37 ° C
durante 18 - 24 h. Posteriormente, se
seleccionan de 5 a 10 colonias típicas de
E. coli lactosa positiva.
En laboratorios y hospitales que cuentan
con antisuero polivalente A, B o C de
EPEC, la prueba de aglutinación se
realiza en niños con diarrea con moco y
sangre, especialmente los menores de un
año. Cuando se sospecha la presencia de
ECEH, en muestras de diarrea con
sangre, el diagnóstico se realiza
utilizando agar Mac Conkey con 1% de
sorbitol (SMAC) en lugar de lactosa, se
seleccionan de tres a 10 colonias
negativas a sorbitol que son incoloras y
sospechosas de ser O157: H7. Este agar
debe considerarse solo como un medio de
selección y nunca como una forma
definitiva de diagnóstico, ya que no todas
las cepas negativas al sorbitol son E. coli
O157: H7 y hay imágenes de HUS
producidas por cepas no O157: H7 que
son positivas al sorbitol.
La caracterización y clasificación de
cepas patógenas de E. coli se puede
realizar con métodos de biología
molecular, una de las herramientas de
del uso de sondas para hibridación en
fase sólida como el "colony blot". Las
sondas son pequeños fragmentos de ADN
que contienen parte de los genes que
codifican algún factor de virulencia y
pueden marcarse radiactivamente con P o
no radiactivamente con biotina o
digoxigenina y pueden utilizarse en
ensayos sensibles y específicos para
detectar cepas patógenas.
La bacteria Escherichia coli (E. coli)
generalmente vive en los intestinos de
personas y animales sanos. La mayoría
de las variedades de Escherichia coli son
inofensivas o causan una diarrea
relativamente breve. Sin embargo,
algunas cepas particularmente peligrosas,
como Escherichia coli O157: H7, pueden
causar calambres abdominales severos,
diarrea con sangre y vómitos.
Puede estar expuesto a Escherichia coli
por alimentos o agua contaminados,
especialmente verduras crudas y carne
picada poco cocida. Los adultos sanos se
recuperan de la infección por Escherichia
coli O157: H7 en una semana, pero los
niños pequeños y otros adultos tienen un
mayor riesgo de desarrollar una forma de
insuficiencia renal potencialmente mortal
llamada síndrome urémico hemolítico.
Las vías de transmisión contempladas por
la Organización Mundial de la Salud
(OMS) para que la bacteria E. coli pase
de persona a persona son las heces o la
vía oral.