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CLASIFICACION DE LOS PARASITOS-

METODOS DIAGNOSTICOS
Maritza Mercedes Calderón Sánchez
mcalderons@usmp.pe

PARASITOLOGIA
INDICE
1. Principales grupos de parásitos
2. Clasificación de acuerdo a su localización
3. Generalidades de los principales
grupos de parásitos
4. Métodos diagnósticos:
- Directos
- Indirectos o serológicos
- Moleculares
- Metodos especiales
PARASITOS POR SU LOCALIZACION

•1.Enteroparásitos (Del tubo


digestivo)
•2. Histoparásitos (De los
tejidos)
•3. Ectoparásitos (Artrópodos)
VÍAS DE INFECCIÓN
• Es la “puerta de entrada”, es el camino
por el cual el estadio infeccioso ingresa
al cuerpo del hospedero

• Cutánea
• vectorial
• Sanguínea
• trasplante de órganos
• transfusional
• Oral
• Nasal
MECANISMOS DE TRANSMISIÓN
• Es la forma como el parasito
llega al hospedero. Ejm Ascaris
llega al hospedero por las manos
contaminadas con estadio
infectante (Huevo larvado)
• Vectorial
• Transfusional
• Transplacentario
• Trasplante de órganos
• Carnivorismo
• Contaminación fecal
• Contaminación ambiental
PRINCIPALES GRUPOS DE PARASITOS
Clasificación morfológica de los Parásitos

Protozoarios Metazoos

Helmintos Artrópodos

Nematodos Platelmintos

Trematodos Cestodos
Parásitos humanos y su localización en los órganos humanos
Intestino delgado Intestino grueso Hemáticos y extraintestinales Artrópodos de
(tisulares) importancia médica
Protozoarios flagelados: Protozoarios: Protozoarios hemáticos: Insectos y vectores:
Giardia lamblia Amebas intestinales: Plasmodium vivax, P´. falciparum, Anopheles, Aedes,
Entamoeba coli, P. malariae, Culex, Lutzomyia,
E. histolytica, Iodamoeba, P. ovale, Triatominos.
Blastocystis sp. P. Knowlesi Miasis
Coccideos intestinales: Ciliados intestinales: Flagelados hemáticos tisulares Piojos - Pulgas
Cryptosporidium sp, Balantidium coli Leishmania sp Arañas: Loxosceles
Cyclospora cayetanensis Trypanosoma cruzi laeta, Lactrodectus
Cystoisospora belli mactans
Amebas de vida libre Ácaros:
Acantamoeba, Sarcoptes scabiei
Naegleria, Demodex folliculorum y
Balamuthia garrapatas
Protozoarios tisulares
Toxoplasma gondii
Trichomonas vaginalis
Sarcocystis
HELMITOS
Nemátodos: Nematodos Cestodos tisulares:
Ascaris lumbricoides, intestinales: Cisticercosis, Hidatidosis
Ancylostoma duodenale, Enterobius Trematodos tisulres:
Necator americanos, vermicularis Fasciola hepatica, Paragonimus
Strongyloides stercoralis Trichuris trichiura Schistosoma
Cestodos: Taenia solium, Helmintos tissulares:
Taenia saginata, Hymenolepis Toxocara sp
sp., Dipylidium caninum Trichinella spiralis
Diphylobothrium sp. Onchocerca sp.
Protozoos
-INTESTINALES:
• 1.Amebas: desarrollan seudopodos para su
locomoción

• 2.Flagelados
• tienen diferente número de flagelos

• 3.Ciliados
• poseen cilios en su superficie

• 4.Coccidios
• tienen forma de banana, poseen un cono
apical , y tienen reproducciones
complejas

-TISULARES: Amebas de vida libre (AVL)


Conceptos: formas evolutivas
• Trofozoíto:
– forma vegetativa a través de la cual, el parásito se
alimenta y se reproduce . Se multiplica por fisión
binaria.Es el estadio diagnóstico
– Quiste: Estadio de resistencia del parasito.
Generalmente es el estadio infectante y también
de diagnóstico
– Ooquiste: Estadio que contiene al cigoto
producto de la esporogonia ( Reproducción sexual
en Coccideos). Estadio diagnóstico e infectante de
coccideos
AMEBAS INTESTINALES

• Entamoeba histolytica patógena


• Entamoeba dispar no patógena
• Entamoeba coli no patógena
• Endolimax nana no patógena
• Iodamoeba bütshlii no patógena
• Blastocystis hominis patógena ?
• Entamoeba harmanni no patógena
2. Organización celular
Quiste inmaduro

Trofozoito
Quiste
tetranucleado
 Entamoeba histolytica

Estos parásitos Se localizan principalmente en el


intestino grueso y eventualmente en el hígado, pulmón
y cerebro. Las heces de las personas infectadas puede
contaminar el agua o los alimentos, transmitiendo los
parásitos a las personas que los consuma.

es el
Para diagnosticar la amebiasis, lo usual
examen de heces; a veces varias
muestras ya que la cantidad de
amebas puede ser baja para detectar
en una sola muestra.
METODOS DIAGNOSTICOS

• DIRECTOS: Son aquellos que ponen en evidencia el agente o sus


formas evolutivas, fragmentos, antígenos, ADN, etc.
• Son los que permiten visualizar directamente parásitos una muestra .
• Los parásitos pueden ser vistos estudiando el material “en fresco” o
mediante coloraciones u otros artificios.
• EXAMEN EN FRESCO: El material se coloca sobre una lámina
portaobjetos, montado en algún medio líquido o no, cubierto con una
laminilla, para su observación al microscopio.

• COLORACIONES PARA PARASITOS: Giemsa, May Grunwald,


hematoxilina eosina, otras coloraciones como: Ziehl-Neelsen
modificado o Kinyoun (ácido-alcohol resistência), Tricrómica,
hematoxilina férrica
FRASCOS PARA TOMA DE
MUESTRAS DE HECES
MÉTODO DIRECTO - HECES
Método de Sedimentación
Método de Sedimentación
Examen Parasitológico Directo Simple
Protozoarios intestinales
(Quistes)
Entamoeba coli Endolimax nana Giardia intestinalis

Blastocystis hominis
Iodamoeba butschlii Chilomastix mesnili Forma vacuolar
AMEBAS INTESTINALES
Tejido de cordón umbilical (Coloración
HE observación de amastigotes de T. cruzi))
COCCIDEOS INTESTINALES
• Cryptosporidium sp
• Cyclospora cayetanensis
• Cystoisospora belli
• Sarcocistis sp

• Presentan ciclos de vida complejos: Ciclo asexual


y luego ciclo sexual
• Estadio Infectante y diagnóstico es el OOquiste
Técnicas de coloración- Kinyoun o Ziehl-
Neelsen modificada Carbol fuscina, alcohol ácido, azul de metileno.

Cryptosporidium sp Cystoisospora belli Cyclospora cayetanensis


CULTIVO DE PARASITOS
• Sirven para el aislamiento primario de una variedad de
parasitos.
Los medios de cultivo pueden ser modificados con el
agregado o cambio de algún componente para darle mayor
especificidad existen cultivos para Amebas de vida libre ,
Giardia, T. vaginalis, T. cruzi, P. falciparum, Leishmania sp.

INOCULACION EN ANIMALES:
Excepcionalmente (Es necesario frente a determinados
agentes de difícil identificación o aislamiento por otros
medios, ej: Toxoplasma gondii en líquido amniótico).Exige
seguir rigurosas normas de bioética, bioseguridad y calidad
operacional.
Métodos Diagnóstico :
Parásitos hemáticos y tisulares

Gota gruesa
Toma de la muestra

Frotis de sangre periférica


COCCIDEOS HEMÁTICOS
Plasmodium Sp.
Trofozoíto joven Esquizonte

TROFOZOÍTO
TROFOZOÍTO JOVEN
ADULTO O
(FORMA DE ANILLO)
MADURO

Trofozoíto Adulto Gametocito MACROGAMETOCITO ESQUIZONTES

MICROGAMETOCITO
Métodos Para diagnóstico de T. cruzi
MICROHEMATOCRITO Hemocultivo Xenodignóstico

Pueden requerir meses


Estádio de
Epimastigotes en cultivo

Detección em minutos
Nematelmintos
• Gusanos redondos al corte
• de diferentes tamaños
• se reproducen por huevos o
larvas
• para crecer desarrollan mudas
(ecdisis)
• Ejm.
• Ascaris lumbricoides, Enterobius
vermicularis, Trichuris trichiura,
Trichinella spiralis, Toxocara spp
Adultos

HUEVOS
Nematodos intestinales: Ciclos evolutivo

E.vermicularis

T. trichiura

A. lumbricoides

Anquilostomideos
GEOHELMINTOS
• Nematodos transmitidos por la tierra

• Geohelmintiasis, son aquellas en las que el agente causal


requiere de la tierra, para que se forme la fase infectiva
para el hombre.
• Su transmisión es por ingestión de huevos
infectantes del suelo contaminado. El éxito de la
infección depende de: 1.Número de huevos infectantes,
2.su accesibilidad a humanos, 3. características de
sobrevivencia de huevos infectantes según condiciones
climáticas y del suelo (pueden permanecer años)
Se agudiza en zonas de alta marginalidad en donde las
condiciones de vivienda, higiene personal y educación
son precarias
Ascaris lumbricoides (Adultos y
huevos)

Huevos infértiles y fértiles


y eclosión del huevo
Helmintos intestinales
(Huevos)
Ascaris lumbricoides Trichuris trichiura Enterobius vermicularis

Diphyllobothrium sp Fasciola hepatica


Helmintos intestinales
(Huevos)
Hymenolepis nana Taenia sp

Strongyloides stercoralis
Uncinaria
larva rabditiforme
Cestodos
• Gusanos en forma de cinta
• de diferentes tamaños
• hermafroditas. se reproducen por
huevos
• tienen ciclos evolutivos complejos
• desarrollan estados intermediarios
denominados larvas
(plerocerocides, cisticercoides,
etc)
• Ejm.
• Taenia solium, Taenia saginata,
Hymenolepis nana, D. pacificum,
Echinococcus granulosus
Trematodos
• Forma de hoja
• reproducción sexuada por
huevos
• reproducción asexuada pasando
por diferentes estados larvales
• Ejm.
• Fasciola hepatica , Paragonimus
peruvianus
FASCIOLA -ADULTA Y SU HOSPEDERO INTERMEDIARIO - CARACOL
Lymnea sp
Huevo
Adulto Miracidio

Esporoquiste Redia Cercaria Metacercaria

ESTADIOS EVOLUTIVOS DE Fasciola hepatica


Huevo- Miracidio Esporoquiste Redia Cercaria Metacercaria
Adulto
METODOS INDIRECTOS O
INMUNOLOGICOS
• Son los que permiten suponer la presencia de
parásitos en el organismo, mediante el estudio
de la respuesta del hospedero (producción
de Anticuerpos específicos, producción de
linfoquinas, etc.).

• ELISA
• INMUNOFLUORESCENCIA
• WESTERN BLOT
Técnicas inmunológicas:
Mediante la fijación de
1. Anticuerpos mono o
policlonales se puede detectar
antigenos
2.Antigenos se puede detector
anticuerpos específicos

ELISA
ELISA
• Ensayo inmunoenzimático : Enzyme Linked
Immunosorbent Assay.

• Utiliza como antígenos extractos de microorganismos ó


fracciones de los mismos absorbidas a microplacas (proteínas
purificadas o recombinantes, LPS, Carbohidratos, etc). Los
cuales se unen a las placas y puede detectar anticuerpos Ig G,
M, A o E) dependiendo del conjugado

PASOS:
1. Sensibilización de la placa con el antígeno
2. Bloqueo con SFB o leche descremada al 5%
3. Adición de los sueros (Humanos o de animales)
4. Adición de la anti-IgG unida a peroxidasa (enzima)
5. Adición del sustrato (ABTS o TMB) Lectura en lector de ELISA
INMUNOFLUORESCENCIA (IFI)
Para diagnostico de anticuerpos frente a T. gondii
WESTERN BLOT
(GELES DE POLIACRILAMIDA)

1. Montaje de la cámara.
- Preparación del gel de poliacrilamida
-Se agrega el antígeno.
-Se realiza la electroforesis.
-Se transfiere a papel de Nitrocelulosa

-Se enfrenta el papel ( que contiene el antígeno) con el suero


del paciente para buscar los anticuerpos.
Diagnóstico de la Neurocisticercosis
• Tomografía Axial
Computarizada (TAC)

• Resonancia Magnética
(RM)

• Pruebas serológicas:
Western Blot (WB) se
buscan las bandas
diagnósticas (7)

WESTERN BLOT
CALIDAD DE LAS PRUEBAS
SEROLOGICAS:
Punto de vista clínico

•SENSIBILIDAD: expresa la capacidad de


la prueba para diagnosticar casos
positivos en el conjunto de personas
estudiadas.

•ESPECIFICIDAD: expresa, la capacidad


de determinar resultados verdaderos.
TECNICAS MOLECULARES:
PASOS: para Reacción en cadena de la
polimerasa (PCR)
•1. Extracción del ADN a partir de la muestra
•2. En base al reconocimiento especifico de una
secuencia de ADN se utilizan los cebadores o
“Primers”
•3. Amplificación de la secuencia especifica mediante
polimerización en cadena ( Enz. Taq polimerasa)
•4. Identificación de las secuencias amplificadas
mediante electroforesis en geles de agarosa
PROCESO DE LA REACCION EN CADENA DE LA
POLIMERASA (PCR)
El ADN extraido de la muestra se
amplifica en el
Termociclador Electroforesis en gel de agarosa

El producto final Observación con luz UV


REACCION EN CADENA DE LA POLIMERASA ( PCR)

Diferenciación de E. histolytica de la E. dispar no es posible por morfología, pero si se


diferencia por la técnica de PCR
Métodos especiales: Método de Graham

10X y 40X
RESUMEN: Diagnóstico parasitológico

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