Documentos de Académico
Documentos de Profesional
Documentos de Cultura
________________________________________________________________
La parte diagnóstica, parte del conocimiento teórico que tengamos para poder entender
esas ayudas diagnosticas que se tienen a la mano, que pueden servir en el momento de
mandarle un examen al paciente.
Tanto los staphylococcus como los streptococcus hacen parte de la microbiota del ser
humano, el staphylococcus lo podemos encontrar en la piel y en las mucosas y los
streptococcus en el intestino, normalmente no generan enfermedades al menos que se
dé la oportunidad.
Ambos son cocos gram positivos, anaerobios facultativos, pueden ser también estrictos,
los streptococcus son catalasas negativos. Los streptococcus se clasifican de acuerdo
al patrón de hemólisis que tienen, pueden ser alfa, beta o gama y se van a ver de forma
diferente en el cultivo macroscópicamente.
Dos géneros más de importancia clínica son el streptococcus agalactiae, el cual causa
infección urinaria y el streptococcus bovis que causa endocarditis.
→ Los cocos gram positivos son una población microbiana muy importante, puesto que
son bacterias, unas pertenecen a nuestra flora normal y otras son constituidas
patógenos. Se supone que lo que está en mi cuerpo no debe ser dañino para mí, sino al
contrario formar parte de ese sistema inmunológico que tenemos, es decir, es un
mecanismo de protección que nosotros vamos a utilizar.
Entonces tenemos los cocos gram positivos, que según la tinción de gram se observan
en su forma morfológica como redondeados, color violeta, de tinción positiva. En ese
momento solamente se puede decir que son cocos gram positivos, pero no se sabe la
diferenciación entre los streptococcus y los staphylococcus.
No, no podemos decir si son strepto o staphylos. Ya después que uno correlaciona todo
y se puede decir si tal bacteria (de acuerdo a su compotamiento, o a como se agrupa),
está en forma de cadena o de racimo → Pero porque ya todo se analizó previamente.
Si yo hago una tinción de gram y todavía no sé, ni siquiera he hecho una prueba que me
diga son streptos o staphylos, entonces yo no puedo decir si son streptos o staphylos
debemos tener mucho cuidado con eso.
Nos damos cuenta que nosotros desde nuestro organismo producimos peróxido de
hidrogeno que son sustancias de desecho de ciertos procesos metabólicos, que para
nosotros es tóxico pero que a nivel sintético ya se han fabricado en diferentes
concentraciones. En la clínica ya tenemos el agua oxigenada es más ya la venden en la
farmacia. Esta agua oxigenada se puede utilizar para hacer una prueba de catalasa, en
ponerla en interacción con una colonia bacteriana donde estamos sospechando que sean
streptos o staphilos.
Esta es la prueba que me va decir, lo que creció en ese cultivo. Los medios de cultivos
que se utilizan por lo general son Agar sangre, ¿y por qué Agar sangre? Porque si son
streptos, ellos tienden a formar hemólisis, destrucción de los glóbulos rojos de forma
parcial o de forma total, o puede que no se produzca hemólisis.
La bacteria
→ Lo que se hace es: En una lámina porta-objetos se agrega una colonia, que la podemos
tomar como una Asa previamente esterilizada y le agregamos una gotica de peróxido de
hidrógeno. Si se produce efervescencia, es decir, burbujeo desprendimiento, ahí lo que
está pasando es que se está descomponiendo el peróxido de hidrogeno en dos
componentes: Oxígeno y agua.
Entonces ese burbujeo que uno observa es el desprendimiento de oxígeno y luego ve
que se vuelve más liquido ahí es cuando se puede decir que los que son catalasas
positivos son staphylococos.
No lo sabemos.
¿Por qué es que nos preguntan sobre las características generales de los
microorganismos y las enfermedades?
Porque hay que saber, que es lo que se le debe tomar al paciente, si es una secreción
respiratoria, si es una secreción de herida.
→Para saber cuáles van a ser esas muestras biológicas, si es una orina, si hay infecciones
urinarias → O si es gastrointestinal que es lo que voy a tomar de muestra.
→Para Saber, cuál es la muestra que se le va a tomar al paciente → que va ser la muestra
que va a llegar al laboratorio y a la cual el bacteriólogo le va realizar un gram de forma
directa una vez que llegue la muestra o en su defecto, sembrarla en los medios indicados
y luego si poder hacer un gram.
Por lo general lo que se hace es tomar la muestra, sembrarla, ponerla a cultivar y luego
si ya poder tomar una colonia y hacer todo ese proceso ya mencionado.
Entonces ya con un simple gram yo puedo saber si son cocos y saber cuál va ser mi paso
siguiente → hacerle una catalasa (ese es el protocolo). ¿Por qué? Porque yo necesito
saber si son streptos o son staphylos.
Como se observa en el manual, hay pruebas para streptos y hay pruebas para staphylos.
→ ¿Entonces, si son catalasas positivas cual va ser la ruta de identificación, las pruebas
direccionadas a quienes?
A los staphylococos.
Las pruebas van a ser enfocadas hacia esos tres (aureus, epidermidis, Saprophyticus).
El primero que queremos descartar es el aureus, a pesar de que este sea de nuestra
flora normal,
Las infecciones que uno tenga en la piel tiene que tratar de protegerlas, controlarlas,
que se curen rápidamente, porque las mismas bacterias que tenemos nos pueden atacar
dependiendo de nuestro estado inmunológico.
Uno es según la hemolisis, dos, los azucares que se encontraban a nivel de la pared
celular.
Rebecca C. Lancefield
→ Lancefield se encargó de estudiar esas propiedades y las clasificó por los azucares
que iba encontrando.
¿De los staphilococos que se conocen cuales son considerados patógenos, o
todos son de nuestra flora?
Los patógenos son microorganismo que yo no tengo son los que vienen de afuera y me
infectan, son ajenos a mí, en cambio los que si tengo en mi cuerpo y me producen
infección ellos se llaman oportunistas.
Como ya se ha dicho hay que saber diferenciar entre cuales son catalasas positiva y
catalasa negativa, para mirar la ruta de identificación.
Ahí tenemos la coagulasa y la DNAsa que son enzimas que pueden causar complicaciones
en el huésped.
Una vez que identificamos que es una catalasa positiva, ahora vamos a mirar esa muestra
que llegó al laboratorio (porque puede ser una secreción de una herida, de pronto una
herida mal curada o algún raspón o alguna quemadura…).
En la parte de los staphylococos todas las directrices van enfocadas hacia el aureus y
el epidermidis y en cuanto a los streptococos una de las formas en cómo se clasificaban
era de acuerdo a la hemólisis, que es llamada hemolisis Gama.
¿A que le llamamos hemolisis?
A esa destrucción parcial o total, o ausencia de la lisis que se produce de los glóbulos
rojos, y eso lo podemos evidenciar en un medio de cultivo que es el agar sangre.
Se ven unos claros alrededor de las colonias y dependiendo del color que tengan, si es
traslucido, se ve verdoso, uno podría decir que es una hemolisis beta si es incolora, una
hemólisis alfa se ve verdoso y ausencia de hemólisis cuando no se observan esos
claros.
Entonces los streptococos, tienen diferentes rutas para poder seguir la secuencia del
posible agente causal.
Estas diferentes pruebas se hacen para saber cuál es la especie relacionada con el
microorganismo que está produciendo la enfermedad.
→Entonces cuando llega la muestra si me dice que sospecha del uno del otro, lo que se
tiene que hacer, los medios de cultivos donde se va a sembrar es Agar sangre y Agar
nutritivo y Punto.
Entonces ahí nos habla de la técnica, que, si nosotros el día de hoy tuviéramos en villa
del rosario, montaríamos de esa manera:
Colocamos una lámina portaobjetos, la auxiliar nos daría las cepas de streptos y
staphylos, para nosotros hacer el montaje con la colonia, el peróxido y podamos
visualizar quienes producen efervescencia y quiénes no.
LA PRUEBA DE LA COAGULASA:
→ Porque el único que puede evidenciar una coagulasa positiva, es el staphyloco Aureus.
¿Cómo se hace el montaje?
Se necesita una muestra de plasma, no puede ser suero, porque no tiene fibrinógeno,
entonces yo lo que necesito es tomar una muestra de plasma, que eso en el laboratorio
se tiene y ahí lo puedo hacer de dos maneras:
Entonces eso es lo que se hace básicamente, necesito utilizar el plasma, porque ahí se
encuentra el fibrinógeno el cual se va a convertir en fibrina por acción de la coagulasa
presente en el staphilococo aureus.
Entonces hay dos técnicas para poder hacerlos, está una técnica en la cual vamos hacer
una suspensión en el plasma. Entonces tomamos en un tubito de ensayo una plasma que
nos dan en el laboratorio, y lo que se hace es inocular una colonia, es decir, los que ya
obtuvimos en el crecimiento microbiano, inoculamos ahí la bacteria dentro del plasma
dentro de ese tuvo y se lleva a encubar a 35-37 °C de 2 a 24 hrs o 4 hrs. A las 4 hrs ya
podemos evidenciar esa presencia de ese coagulo ahí presente.
Pasadas las 4 hrs, si se ve en el tubo que se formó ese coagulo, es una coagulasa de tipo
positivo, esa es la coagulasa que se hace en tubo, pero lo podemos también hacer en una
lámina que es lo que se mueve en el laboratorio porque es rápido.
En el laboratorio en la lámina colocamos una gota de solución salina, que es una solución
esteril que no afecta para nada la calidad de la muestra, le agregamos la colonia,
hacemos como especie de una dilución, entre la bacteria y la solución salina y luego le
agregamos una gotica de plasma sanguíneo, en el cual se sangra un estudiante en tubo
con anticoagulante y se obtiene esa prueba.
Entonces lo que hacemos es mover la laminilla para empezar a observar; son como
grumitos, literal, son punticos blanquitos que se van formando, evidenciamos una
coagulasa de tipo positivo.
Ejemplo en el evento 1, que nos dé una coagulasa negativa, en tubo nosotros tenemos
que confirmar la coagulasa en lámina. Hay que recordar que solamente hay dos tipos de
coagulasa que maneja el microorganismo que tenemos que descartar ya sea por una o
por la otra.
PRODUCCIÓN DE LA DNASA
No Solo está la coagulasa hay otras pruebas adicionales que se pueden dar y se pueden
hacer en el laboratorio, ahí está la DNAasa, que es evidenciar la presencia de esta
enzima en la bacteria y ahí lo que hacemos es una siembra en estría en una placa agar
de DNAasa. Como su nombre lo dice, es como el sustrato que va a utilizar la bacteria
para poder hacer algún efecto en el medio de cultivo, se hace una siembra de forma
lineal y lo que vamos a observar es el claro (el que se ve alrededor de la imagen, un claro
medio transparente).
Entonces lo que hace el bacteriólogo es la siembra, igual se lleva a 24°C por 24 hrs y al
día siguiente, lo vamos a revelar arreglándole a esa placa de donde se hizo la siembra,
le vamos agregar ácido clorhídrico al 10 % y el resultado positivo va ser la formación
de ese halo transparente, sino se forma ese halo transparente entonces es un
resultado negativo.
Se hace una siembra masiva en Mueller Hinton, que es un medio de cultivo muy utilizado
para hacer pruebas de susceptibilidad, lo que son los famosos antibiogramas, aquí lo que
estamos haciendo es un antibiograma, pero específicamente con un solo antibiótico, la
novobiocina.
Entonces, una vez hacemos la siembra, con el microrganismo, con la cepa que nosotros
tenemos sospechosa de staphylococo, porque ya sabemos que son estafilococos, le
colocamos el sencidisco y lo llevamos a encubar a 37°C por 24 hrs y lo que vamos a mirar
es, si el Halo que se forma de inhibición es mayor o igual a 16, quiere decir que es
sensible a la novobiocina, y si es menor ese Halo, entonces decimos que es resistente.
Esos son los resultados que le llegan a los médicos, porque ahí va a botar los resultados
de la novobiocina.
También está en el manual, aquí nos habla que esta prueba es para streptococo
pneumaniae. Es un antibiograma, es una prueba de susceptibilidad, en este caso se va
hacer en un agar sangre.
Cuando son infecciones bacterianas los primeros exámenes que el médico le manda al
paciente es un cuadro hemático. El cuadro hemático me va a decir si la infección es viral
o bacteriano.
Lo que hace el médico correlacionado con la clínica que el paciente refiera, si está en un
proceso de tipo respiratorio, en las cuales está viendo que es una infección bacteriana,
el médico de una ya sabe cuáles son los antibióticos con los cuales se va a empezar a
tratar. Porque el médico No puede dejar que eso siga subiendo porque termina
convirtiéndose en una sepsis.
Ya después cuando el médico quiera ser más específico, lo que va hacer es mandarle un
cultivo a ese paciente dependiendo de la complicación que él está refiriendo.
Si se le manda un cultivo al paciente, se supone que, en ese cultivo, para poder hacer la
ruta de identificación tengo que poner a cultivar la muestra, hacerle un gram y a su vez
las pruebas de identificación. Todo es un combo completo, el médico no lo va hacer por
separado a menos, que él quiera hacerle un gram especifico de la muestra.
Es importante que saber, cuales son las enfermedades que causan los microorganismos,
cual es esa manifestación clínica que está sucediendo, cuáles son esos parámetros, esas
pruebas que se van alterar y ya sabemos que bacteriano aumenta los blancos, viral
disminuye los blancos.
un bebé,
si es un niño,
un adulto
una mujer embarazada.
Ese es el otro conocimiento que se va adquiriendo, para luego ya en la clínica poder tener
criterio y decir que es lo que se puede o no se puede recetar al paciente.
→ Pero obviamente hay que hacerle tratamiento al paciente mientras salen los
resultados. Pero no vamos a darle un tratamiento con antibiótico a un paciente cuando
vemos que está en un proceso viral, porque lo vamos a empeorar.
Cada una de las pruebas vistas, son pruebas que están ahí para la identificación. Cada
prueba es específica, la prueba de sensibilidad a la optoquina, es una prueba de
identificación microbiana de los streptococos, que en el laboratorio se hacen y se
montan para hacer una identificación dependiendo de lo que va arrojando las otras
pruebas, pero se le debe dar un resultado si o si, al paciente después de los 3/4 días.
PRUEBA DE SENSIBILIDAD A LA OPTOQUINA
En el caso del estreptococo pneumoniae, esta prueba se hace para mirar la sensibilidad
que tiene este microrganismo frente al antibiótico, lo que va ser una prueba positiva
dependiendo el Halo que se forme.
Se confirma en el caso que nos dé una prueba sensible de la optoquina, vamos a confirmar
con la prueba de solubilidad de la bilis, que es otra de las pruebas de laboratorio para
confirmar este tipo de microorganismo.
LA PRUEBA DE CAMP
Es una prueba en donde vamos a mirar la actividad hemolítica de la beta-lisina de los
estafilococos. Se hace en un medio de cultivo de agar sangre porque ahí vamos a mirar
la interacción que tiene ellos con los eritrocitos, los glóbulos rojos y el factor
extracelular que producen los estreptococos del grupo B llamado factor de CAMP.
→ Entonces, cuando esto se observa miramos esas flechitas y esa interacción que se
dan en esos microrganismos.
→ Cuando es positivo decimos que está la estriada del estreptococo y la estriada del
estafilococo aureus.
!! Todas estas pruebas que hemos visto, son pruebas que se realizan en el laboratorio
para poder hacer identificaciones específicas, para decir si es enterococo, si es
pneumonieae, si es agalactiea, aureus !!
Nosotros vamos mirando dependiendo lo que nos van arrojando las pruebas, saber si
seguimos, paramos o ya dejamos hasta ahí.
El resultado final que debe dar el bacteriólogo es decirle al médico cual es el agente
causal de la infección que se está dando en ese momento con el paciente.
Si hay turbidez hay crecimiento, es decir, que ese microorganismo tiene la capacidad
de crecer en esas concentraciones de sal.
LINK:
https://es.slideshare.net/Albamarina7/cocos-gram-positivos-
31650030?qid=b07d2e59-ffb7-4067-ad67-b6f6f44db322&v=&b=&from_search=3