COMPUESTOS AROMÁTICOS

BIBLIOGRAFÍA RECOMENDADA
Trease y Evans (1989) “Farmacognosia”, 13ª edición, Interamericana-McGraw Hill.
Deanna Marcano, Marahisa Hosegawa (1991) “Fitoquímica Orgánica”, Universidad Central de
Venezuela, Caracas.
Mabry, T.J. ; Markham, K.R.y Thomas, M.B. (1970) “The Systematic Identification of Flavonoids”,
Springer-Verlag, New York.
Harborne, J.B. ; Mabry, T.J. ; Mabry, H. (1975) “The Flavonoids”, Chapman and Hall, London.
Samuelson, Gunnar (1992) “Drugs of Natural Origin”, Swedish Pharmaceutical Press, Stockholm.
Bruneton, Jean (191993 “Pharmacognosy, Phytochemistry, Medicinal Plants”, Lavoisier, France.

Los compuestos aromáticos naturales incluyen derivados simples de benceno, anillos bencénicos
condensados, monómeros, dímeros o polímeros de alto peso molecular, como lo son la lignina y los
taninos. Generalmente presentan grupos oxigendos, mayormente fenoles. Biogeneticamente derivan
de la vía del ác. shikímico, y varios tienen origen mixto vías acetato-shikímico.
Como ejemplo en el reino animal podemos citar el p-cresol, una secreción de defensa de algunos
insectos; la luciferina, responsable de la bioluminiscencia de las luciérnagas. Es un compuesto
fenólico azufrado, que debe oxidarse enzimáticamente para su luminiscencia.
Un ejemplo de la vida real lo describe Mark J. Plotkin en su libro “Aprendiz de Chamán” (Emecé
Editores SA, 1997, Buenos Aires, traducción del inglés “Tales of a Shaman’s Aprentice”, Mark J.
Plotkin, 1993, Penguin Books USA Inc.). En él describe cómo los indios de la selva amazónica
salen de pesca. Primero salen en busca de la liana ay-ah-e-yah, un tipo de liana amarilla, la cual
cortan en tramos de treinta centímetros. Al cortarla la madera despide un olor semejante al del
pepino. Luego con dos hojas de la palmera wah-pu y tiras largas de corteza de los árboles me-de-bo-
no trenzan y arman las mochilas para transportar a la aldea los trozos de liana. En la aldea los indios
se turnan para machacarla con garrotes de madera. Cargan la pila de pulpa amarilla en las canoas y
se van a pescar lejos de la aldea. Las mujeres, paradas en las aguas frías del río, amasan la pulpa
amarilla del ay-ah-e-yeh soltando una sustancia blancuzca y espumosa que es llevada corriente
abajo por el río.
El compuesto que la madera libera se llama rotenona (un rotenoide). Es un vasoconstrictor que
penetra en las branquias de los peces y cierra los capilares responsables de la toma de oxígeno. En
otras palabras, el pez se asfixia. Los hombres esperan en las canoas con arcos y flechas río abajo.
Cuando la rotenona comienza a hacer efecto, la superficie del río comienza a hervir y se agita con
los peces que salen en busca de aire. Todos los peces son alcanzados por una certera flecha hueca
que vuelve a la superficie arrastrando con ella a la infeliz presa. Además los indios usan la pulpa
amarilla de la liana ay-ah-e-yah para tratar por ejemplo heridas profundas.
La rotenona es hoy día uno de los pesticidas biodegradables más importantes. Tiene poco efecto en
animales de sangre caliente, efectos limitados en peces, pero es devastadora para muchos insectos.
La rotenona es ingrediente de insecticidas, pulverizadores hortícolas, polvos pulguicidas y para
baños de animales.

Glicósidos fenólicos
La mayoría de los compuestos fenólicos de bajo PM se presentan en las células vivas en forma
combinada, generalmente como O-glicósidos. El azúcar unido puede ser un mono-, di-, o menos
frecuentemente un polisacárido y estar conformado por unidades de hexosas y pentosas. La
glicosidación aumenta la solubilidad de las agliconas en agua, aumentando así su movilidad y
facilidad de transporte dentro de la planta.
Ejemplos :

O glucosil OH
C
HO O

O Me
O
OH O
glucovainillina Vitexina

En el aislamiento y caracterización de los glicósidos hay que considerar la posibilidad de que el

enlace O-glicósido se hidrolice, sea por vía ácida o vía enzimática. Existen también en la naturaleza
la glicosidación sobre átomos de carbono, llamados C-glicósidos, los cuales son resistentes a la
hidrólisis ácida. Las uniones C-glicosídicas siempre se encuentran adyacentes a un OH fenólico, por
lo que se supone que en su bioformación interviene el precursor O-glicosidado.
Entre las agliconas, el grupo de los flavonoides son los más glicosidados. La glicosidación es menos
frecuente en cumarinas, chalconas, y es escasa en isoflavonoides. Ciertos derivados forman un éster
en la porción del ácido. Estos ésteres glicosídicos son llamados ácidos clorogénicos, compuestos
asociados con la resistencia de las plantas a ciertas enfermedades. Son ésteres del ác. químico y del
ác. 3,4-dihidroxicinámico.

HO OH Ej. ác. clorogénico (ác. 3,4-cafeoilquímico)

O
HO OH
O

HO CO 2H

Aislamiento e Identificación
Los métodos de detección, aislamiento e identificación de compuestos fenólicos se fundamentan en
sus propiedades ácidas y en su polaridad. La mayoría de los fenoles son sólidos y su color varía
desde incoloro hasta fuertemente coloreado, dependiendo de la conjugación del o de los cromóforos
presentes. Su solubilidad en solventes polares (metanol, butanol) permite diferenciarlos de otros
pigmentos liposolubles igualmente coloreados, los carotenoides. Su acidez los hace solubles en
bases.
Generalmente absorben en la región visible y ultravioleta, y sus espectros son afectados por
reactivos de desplazamiento de manera característica. La prueba específica para fenoles es la
producción de un intenso color verde, marrón o azul con soluciones recién preparados de cloruro
férrico 1-2 %. También se utilizan reacciones de acoplamiento con sales de diazonio recién
preparadas, así como oxidación de los fenoles por reactivos oxidantes como el reactivo de Tollens.
La extracción es precedida por el desgrasamiento del material con un solvente no polar. Se purifican
mediante precipitaciones sucesivas o mediante la distribución contracorriente (DCCC). Esta última
técnica se emplea para purificarlos y separarlos de acuerdo a su acidez, si una de las fases se ajusta
a diferentes valores de pH. Además se utiliza también ampliamente la cromatografía en columna
con sílica, alúmina, celulosa, poliamida y carboximetilcelulosa. Para las TLC (cromatografía en
capa fina) los reactivos de visualización (o reveladores) usados son una solución al 1-5 % de una sal
de aluminio (cloruro, acetato o sulfato), o una solución 0.2% de una amina diazotada estabilizada
con carbonato de sodio al 20 % (Ej: Fast Blue). Hoy día se utiliza mucho la cromatografía líquida
de alta presión, HPLC y la técnica de cromatografía a contracorriente a la gota, DCCC.
CLASIFICACIÓN DE LOS COMPUESTOS FENÓLICOS
A) Compuestos Fenólicos Simples: C6C1, C6C2, C6C3.
B) Flavonoides chalconas y auronas
flavonoles y flavonas
antocianinas
flavanonas y flavononoles
flavonoles
C) Isoflavonoides isoflavonas
isoflavanonas
rotenoides
isoflavanos e isoflavenos
D) Quinonas benzoquinona
naftoquinona
antraquinona
bis-antraquinona
E) α-Pironas cumarinas
isocumarinas
aflatoxinas
F) γ-Pironas cromanos y cromonas
canabinoides
G) Xantonas
H) Lignoides
I) Dépsidos
J) Otros policétidos aromáticos

A) COMPUESTOS FENÓLICOS SENCILLOS

Los compuestos fenólicos sencillos pueden considerarse derivados de fenoles simples (C6), del ác.
benzoico (C6C1), de la acetofenona (C6C2) y del ác. cinámico (fenilpropano) (C6C3).
Biosinteticamente derivan de la vía del ác. shikímico. Las acetofenonas (C6C2) provenientes de un
proceso de β-oxidación del precursor C6C3, aparecen como glicósidos, por ejemplo pungenina,
aislada de Picea pungens. Por repetición de las unidades C6C1 y C6C3 se forman las estructuras
poliméricas (taninos, melanina, ligninas). La formación de heterósidos es común, veamos algunos
ejemplos:

nombre ejemplos y fuentes1 Productos de hidrólisis

Salicósido Salix y Populus spp Alcohol salicílico, glucosa
Viburnum prumifolum
Propulósido Populus tremula Alcohol salicílico, ác. benzoico y
(benzoil- glucosa
xalicosido)
Arbutósido Ericaceae y Rosaceae fHidroquinona, glucosa
Florizósido Malus (Rosaceae) Floretina, glucosa
Coniferósido Coniferae Alcohol coniferílico, glucosa
Glucovanillósido Vanilla spp y algunas Vanillina, glucosa
Graminaceae
Geósido Geum spp Eugenol, vicianosa (glucosa +
arabinosa)
 R1 R2 R3 R4 R5 compuesto
COR5
R4 H H H OH OMe salicilato de metilo
H OH H H OH ác. p-
hidroxibenzóico
R1 R3 H OH OMe H OH ác. vanílico =>
R2 C6C1
OH OH OH H OH ác. gálico
OMe OH OMe H OH ác. siríngico
H OH OH H OH ác. protocateúico
H OH OMe H H vanillina
H OH OGlu H Me pungenina =>
C6C2
siendo Glu = glucosa

R1 R2
H OH Eugenol
OCH2 O Miristicina

R1 OMe
R2

R1 R2 R3 R4 R5 compuestos
R5
H OH H H CO2H ác. p-cumárico
H H H OH CO2H ác. o-cumárico
H OH OH H CO2H ác. caféico
R4 H OH OMe H CO2H ác. ferúlico
OMe OH OMe H CO2H ác. sinápico
H OGlu OMe H CH2O coniferina
R1 R3 H
H OH OMe H CH2O alcohol
R2 H coniferílico
OCH2 O OMe H CH3 isomiristicina

siendo Glu = glucosa

Biosíntesis
La biosíntesis de compuestos fenólicos sencillos comienza a través de un precursor común, el ác.
shikímico. Éste se forma por una condensación aldólica entre fosfoenolpiruvato y el azúcar 4-fosfo-
D-eritrosa, ambos metabolitos de la glucosa. Al pH presente en la planta los ácidos involucrados
están ionizados.

BIOSINTESIS DE COMPUESTOS FENÓLICOS SENCILLOS

O
O
O O
O
O O
HO
O OH
OH
O P HO
HO
OH O OH
O P
O P OH

3-dehidroquinato
4-fosfo-D-eritrosa fosfoenolpiruvato 7-fosfo-3-deoxi-D-
(PEP) arabino-heptulosato

O O
O O O O O
O
O O
PEP
O
O
O OH HO OH O
OH O OH
OH OH

3-dehidroshikimato shikimato prefenato

chorismate

COOH
H O
NH2
O demas fenilpropanos...

OH OH

Ejemplos de plantas

Vainilla y Vainillina
La vainilla (fruto de Vainilla) está constituida por los frutos inmaduros, cuidadosamente curados y
totalmente desarrollados, de Vainilla fragas (Salis.) Ames (sin. V. planifolia Andrews) (Fam.
Orchidaceae) (Vainilla mexicana o Borbón) y de la V. tahitensis (vainilla de Tahiti).
Es nativa del neotrópico donde se usaba extensivamente en América Central en la época
precolombina. Los aztecas hacían una bebida combinando vainilla, chocolate y pimientos chile. El
nombre “vainilla” viene de la palabra española “vaina” (debido a su forma), que deriva a su vez del
término en latín que designa a la vagina.
Los frutos se recolectan cuando la parte superior del mismo cambia su color del verde al amarillo.
El color y olor característico de la droga comercial se desarrollan por acción enzimática, que se
efectúa a lo largo del curado, consistente en una desecación lenta a temperatura controlada.
La vainilla verde contiene glicósidos, principalmente vanillósido (glucovanillina) y alcohol
glucovaníllico. Durante el curado estos compuestos sufren oxidaciones e hidrólisis enzimáticas. La
glucovanillina se hidroliza dando glucosa y vanillina. El alcohol glucovaníllico se hidroliza dando
glucosa y alcohol vaníllico, el cual se transforma por oxidación en vanillina (aldehido vaníllico).
O OH OH O

hidr. <O>

OMe OMe OMe OMe

O O OH OH
glu glu

alcohol alcohol vanilli na

glucovanillina
glucovaníllico vaníllico

hidrólisis

Los frutos de la vainilla son muy utilizados en confitería y perfumería, pero han sido parcialmente
desplazados por vainilla sintética. Sin embargo la esencia sintética no contiene el olor y el sabor de
los frutos complejos. La vainilla es un componente clave de la receta secreta de la Coca-Cola.

Salicina
Las cortezas de sauce, especialmente de Salix fragilis y S. purpurea (Fam. Salicaceae) son una
fuente de salicina (salicósido). Por maceración en agua caliente durante varias horas se extrae el
glicósido junto a taninos. El extracto acuoso se filtra, se concentra al vacío y se trata, después, con
acetato de plomo.
Después de filtrar, se elimina el exceso de plomo por tratamiento con sulfuro de hidrógeno. El
líquido filtrado, que carece ya de tanino, se neutraliza con amoníaco, se concentra y se deja enfriar,
con lo que se separan cristales de salicina. Estos cristales pueden purificarse disolviéndolos de
nuevo, filtrando a través de carbón activado y recristalizando.
OH OH O OH
O glu OH
OH
hidrol. <O>

salicina alcohol salicílico ác. salicílico

Cápsico (Pimiento rojo, pimiento chile)

La droga está constituida por los frutos desecados y maduros del Capsicum annum, var. minimum
(Miller) Heiser y variedades de frutos pequeños de C. frutescens L. (Fam. Solanaceae). Los
cápsicos parecen ser de origen americano, y fueron mencionados en el segundo viaje de Colón a las
Indias Occidentales.
Los componentes picantes son la capsaicina y la 6,7-dihidrocapsaicina, así como en menor
concentración la nordihidrocapsaicina, la homocapsaicina (ácido C11) y la homodihidrocapsaicina.
Los cápsicos se utilizan como condimento. La droga se administra internamente en la dispepsia
atónica y en la flatulencias. Externamente se usa como revulsivo en forma de pomada, emplasto,
etc… para aliviar el reumatismo, lumbago, etc…
O

N (CH2)4CH=CHCH(CH3)2
HO
OMe
Bálsamo de Perú
Se obtiene del tronco de Myroxylon balsamum var. pereira, el cual crece en América Central (El
Salvador, Honduras, Guatemala). La droga exuda del tronco luego de golpearlo, de arrancar la
corteza y de chamuscarlos, y es de origen puramente patológico.
El bálsamo de Perú, un líquido viscoso, pastoso y marrón, contiene 55%-66% de ésteres del ác.
cinámico y benzoico, en especial cinamato de bencilo (cinameína), cinamato de cinamoilo
(estiracina) y benzoato de bencilo, así como aprox. un 28% de resina y restos de ác. cinámico y
vanillina libre, lo que le da su aroma característico.
Usos: se emplea en cremas antisépticas, y también contra infecciones parasitarias de la piel.

Bálsamo de Tolú
Es un producto similar al del Bálsamo de Perú que se obtiene del tronco de Myroxylon balsamum
var balsamum, luego de realizarle incisiones en V en el tronco. La droga (bálsamo de Tolú,
BP1980) es una pasta viscosa que lentamente solidifica, y que contiene un 80% de resina compuesta
por ésteres de ác. cinámico y benzoico con alcoholes resínicas. El resto son ác. cinámico y ác.
benzoico libre, y una pequeña cantidad de vanillina.
Usos: es un componente de mezclas para combatir la tos, así como saborizante en dulces,
especialidades farmacéuticas y perfumes.

Cinamaldehido
El cinamaldehido es el principal constituyente del aceite esencial de cinnamon, es decir de la
corteza de Cinnamonum zeylanicum, un pequeño árbol cultivado en Sri Lanka, India, Islas
Seycheles y Brasil.
La corteza se separa y se deja secar. Durante el secado ocurre un pequeño proceso de fermentación,
el cual le da un color marrón a la droga. Por destilación con arrastre de vapor se obtiene un 0.5%-
1.5% de aceite esencial, cuyo principal constituyente es el cinamaldehido (65%-75%).

FLAVONOIDES

Los flavonoides, que se encuentran tanto en estado libre como glicosidado, constituyen el grupo
más amplio de los fenoles naturales. Son sustancias de origen vegetal y le dan los colores (rojos,
azules, amarillo) a las flores y las hojas de otoño (del latín flavus, amarillo). Son abundantes en las
Polugonaceae, Rutaceae, Leguminosae, Umbelliferae y Compositae.
Los flavonoides se encuentran sobre todo en los órganos aéreos amarillos (hojas y botones florales)
localizados en tejidos superficiales. Están disueltos como glicósidos en el jugo vacuolar,
cloroplastos y membranas. La luz no es esencial para su formación, pero incluye cuantitativamente.
La intensidad de color amarillo aumenta con el aumento de pH, es decir de ser incoloros o blancos a
pH ácido, pasan a ser fuertemente amarillos a pH básicos.
El grupo de los flavonoides es conocido por sus efectos antiinflamatorios y antialérgicos, por sus
propiedades antitrombóticas y vasoprotectoras, por la inhibición de la promoción de tumores y
como protectores de la mucosa gástrica. Estos efectos se han atribuido a su influencia sobre el
metabolismo del ác. araquidónico. Los flavonoides también poseen actividad antioxidante,
aplicaciones como colorantes naturales y poseen propiedades antibactarianas y antifúngicas. En los
vegetales intervienen en los fenómenos de oxidación-reducción, protegen a otros pigmentos de la
luz y de la radiación UV, presentan actividad fungicida y contra parásitos agresores, ayudan en la
polinización, ya que por sus colores atraen a los insectos junto con los aceites esenciales.
Estructura
La estructura general de los flavonoides comprende un anillo A, derivado de la cadena policetídica,
un anillo B, derivado del ác. shikimico, tres átomos de carbono que unen los anillos A y B,
correspondientes a la parte alquílica del fenilpropano. Por eso se los conoce como C6-C3-C6.
La estructura puede conformar un heterociclo (γ−pironas) que son los más abundantes, o una cadena
abierta, las chalconas. Las polimerizaciones son frecuentes, y ocurren principalmente por uniones
C-C. El estado de oxidación del anillo central determina varios grupos estructurales, como se ve a
continuación en ambas tablas.

B B
O O
A C A C
OH
O O
Flavonas Flavonoles

O
B
A C O
A C
B
O
O
Isoflavonas Flavanonas

O
B CH
O
A C
O
OH
O
Dihidroflavonoles Auronas

3
2 4

3'
4' 2' β 5
6
5' α
6'
O

Chalconas

La estructura base puede presentar hidroxilos, metoxilos, estar O-glicosidada o estar C-glicosidada.
En general el anillo A presenta hidroxilos, y no metoxilos, los cuales se ubican mayormente en 7 y
en 5. El anillo B en cambio presenta 1,2 o 3 hidroxilos o metoxilos, los cuales se ubican de la
siguiente manera: si hay un solo hidroxilo/metoxilo su ubica en la posición 4’, si hay dos
hidroxilos/metoxilos se ubican en las posiciones 3’ y 5’, y si hay tres hidroxilos/metoxilos se ubican
en las posiciones 3’, 4’ y 5’.

3'
2' 4'
1 B
8 1'
7 O 5'
2
A C 6'
6 3
5 4

Numeración general de flavonoides.

Sitios de hidroxilación y metoxilación.
Todos los flavonoides se numeran en sentido horario, simplemente números en el anillo Ay C, y
números con “prima” en el anillo B. La excepción son las auronas, donde la numeración se invierte.
Los azúcares forman O-glicósidos en las posiciones 3, 7, 3’ y 4’, siendo los mas comunes
diglicósidos en 3 y 7 o en 7 y 4’. Ej: Negretina.

3'
2' 4'
1 B
8 1'
7 O 5'
2
A C 6'
6 3
5 4
sitios de O-glicosidación.
Los O-glicósidos dan hidrólisis por tratamiento con ácidos. En cambio los C-glicósidos, menos
abundantes, no son hidrolizados por tratamiento con ácidos. La C-glicosidación se presenta sobre
C6 y C8. Ej. Vitexina (C-glucósido) y Negretina (O-glucósido).
glucosil OH
C OMe
OH
HO O
HO O
OMe O

O glu rha O OH
O
OH O O glu

Los azúcares que podemos encontrar pueden ser mono-, di- y polisacáridos. Dentro de los
monosacáridos tenemos D-glucosa, D-galactosa, D-xylosa, L-rhamnosa, L-arabinosa y ác. D-
glucurónico. Como ejemplos de disacáridos tenemos la Gentiobiosa (gluβ1->6glu) y la rutinosa (rha
α1 -> 6glu), y como ejemplos de trisacáridos tenemos la Gentiotriosa (glu β1 -> 6glu β1 -> 6glu) y
la sorborosa (glu β1 -> 6glu α1 -> 4glu). Hay que resaltar que la unión de los azúcares es en general
1,2 o 1,6, y son mayormente isómeros β. Además, la unión entre el azúcar y la genina es una unión
β.

Biosíntesis de Flavonoides
Los flavonoides son biosintetizados por una combinación de ambas vias biosintéticas, la del ác.
shikímico y la del malonil-CoA. El compuesto obtenido por la vía biosintética del ác. shikímico,
p.ej. ác. cinámico, es luego utilizado como compuesto de partida para la vía del malonil-CoA, en la
cual se le adicionan tres acetatos. Con la posterior ciclación se obtiene la estructura clásica de los
flavonoides, en la cual el anillo A se formó por la vía del malonil-CoA, mientras que el anillo B se
formó por la vía del ác. shikímico, y el puente de tres carbonos proviene de la adición de
fosfoenolpiruvato. Con sucesivas hidroxilaciones y reducciones se forman los diferentes
flavonoides, con la opción de una glicosidación final.
 BIOSINTESIS DE FLAVONOIDES

COOH
O O O O
H O
NH2
PEP O
O
HO OH O
OH O
OH
shikimato chorismate fenilalanina cinamato

O O
CH2CO-SCoA
R-CO-SCoA 3 R COOH
COOH

acil-CoA malonil-CoA policétidos

O O HO OH
HO 3 acetatos
HOOC
O
O OH O

B
HO O
A

OH O
Aislamiento e Identificación de Flavonoides
En las plantas los flavonoides están en general glicosidados, por lo tanto son altamente polares. Se
ubican preferentemente en las vacuolas y son hidrofilicos. Debido a eso hay que extraer y
solubilizarlos en solventes polares como ser agua, etanol. Las geninas en cambio son solubles en
éter de petróleo, diclorometano, y no en agua.
Muestra fresca
o seca
EtOH, calor
Solución alcohólica
del glicósido

Lavado con éter

Fase etérea F. alcohólica

- clorofilas - glicósidos
- carotenoides
- flavonoides apolares Separación y
purificación

Cromatografía Precipitación con Cristalización

* Columna con: * Pb(Ac)2 , redisolución con H2 S * Pptan en medio ácido, son
Sílica, alúmina, celulosa, o H2 SO4 . solubles en medio básico
poliamida, resinas de II * C activ., redisolución con soln
* HPLC fenólicas acuosas
* TLC, GC (no prep.) * PVP, pptan en medio H+/H2 O
- DCCC y son solubles en medio básico

Conviene usar la muestra previamente secada, así las enzimas no tienen actividad, evitando la
degradación de los compuestos. Asimismo conviene usar etanol y no agua, porque el etanol inactiva
las enzimas (rompe la estructura 3aria) y además se puede eliminar más fácil.
Para aislar los flavonoides del extracto etanólico tenemos 3 posibilidades, que pueden usarse por
combinación. Tradicionalmente se utilizaba la cristalización en medio ácido, redisolviéndolos luego
en medio básico. La precipitación con acetato de plomo fue muy utilizada, ya que precipitan los di-
y polihidroxifenoles de los monohidroxilados, que quedan en solución. Para recuperar los
flavonoides precipitados se trata el precipitado con ác. sulfhídrico o con ác. Sulfúrico, liberando los
flavonoides y precipitando entonces sulfuro de plomo o sulfato de plomo. Conviene usar sulfatos y
no sulfuros, ya que el sulfuro de plomo tiene un gran poder de adsorción, y eso no es conveniente.
El PVP es muy útil porque causa una buena precipitación de compuestos fenólicos hidroxilados a
pH ácido en metanol. Se hace reversible por cambio de pH. En el caso del carbón activado, éste
actúa adsorbiendo los compuestos. Se filtra y para poder liberarlos se pone en contacto con una
solución fenólica en agua. El fenol libera los flavonoides por competencia.
Actualmente en la separación y purificación se emplean columnas de resina de intercambio iónico
ácidas (fase H+) que separa a los flavonoides del material soluble. El fraccionamiento se puede
lograr por cromatografía de adsorción usando como fase estacionaria sílica gel, celulosa, poliamida,
alúmina y Sephadex (polímeros de dextranos, forman poros y separan por tamaño). Jugando con la
polaridad de los solventes podemos hacer separaciones buenas. Primero con un solvente apolar
eluímos las geninas que están bastante metoxilados, luego aumentamos la polaridad de la fase móvil
pudiendo eluir compuestos polihidroxilados y finalmente con solventes muy polares eluímos los
glicósidos. El problema es que quedan retenidas muchas cosas.
En los últimos años se han desarrollado varias técnicas cromatográficas nuevas, entre ellas PHLC
(High Performance Liquid Chromatography, Cromatografía líquida de alta presión) y DCCC
(Droplet Counter Current Chromatography, cromatografía contracorriente a la gota). Para HPLC
preparativa (es decir separar grandes cantidades) se utiliza en general una columna de fase reversa
ODS C-18 (OctaDodecilSilano). La separación se basa en interacciones hidrofóbicas y no necesita
derivados, tiene alto poder de resolución y necesita un detector UV. Se usan solventes polares como
ser mezclas de agua metanol y/o acetonitrilo.
Para usar GC (gas chromatography) se requiere de compuestos termoestables, y en general es
necesario derivatizarlos con agentes sililantes a fin de aumentar su volatilidad. No se hace GC
preparativa, GC es con fines analíticos. Se puede acoplar la GC a la espectrometria de masas, dando
GC.MS. La fragmentación principal implica la escisión del anillo.

Determinación de la estructura
Si tenemos un glicósido debemos identificar la genina y también los azúcares. Para eso se hidroliza
el glicósido, pudiendo previamente metilar los hidroxilos libres. Los azúcares los identificamos por
TLC y por RMN, y la genina la podemos identificar por RMN y por espectrofotometría UV-VIS.
Antiguamente la genina se identificaba usando una “batería” de reacciones (hidrólisis, etc...).
Espectrofotometría UV
Es ampliamente usado por requerir solo pequeñas cantidades del compuesto puro, el cual no se
destruye, al igual que para el NMR. El espectro UV de un flavonoide se relaciona con su estructura
de la siguiente manera:

8 B
O 2
7
A
6 3 200 500
4
5
O

II benzoico I cinamoilo Banda II Banda I

En general : Banda I 300 - 400 nm

Banda II 240 - 285 nm
Flavona y Flavonol Banda I 320-350 nm, intensa
Isoflavona Banda I, hombro, banda II 245-270 nm, intensa
Flavanona y Dihidroflavonol Banda I, hombro, banda II 270-295 nm, intensa
Chalcona Banda I 340-380 nm, intensa
Aurona Banda I 370-430 nm, intensa
Antocianinas Banda I 480-550 nm, intensa
El espectro en metanol de los flavonoides da información sobre el tipo de flavonoide y el estado de
oxidacion. El máximo de absorción de los flavonoides varía de acuerdo al estado de oxidación del
anillo central y según el número y posición de los grupos OR, como resultado de los diferentes
sistemas conjugados. El empleo de reactivos de desplazamientos como etóxido de sodio, cloruro
férrico, acetato de sodio y ác. bórico produce corrimientos de los máximos de absorción de acuerdo
a la localización y naturaleza de las funciones oxigenadas.

1er corrimiento
MeOH
MeOH + NaMeOH
Obtengo el espectro del flavonoide en metanol entre 200 a 500 nm. Luego agrego en la misma
cubeta metóxido de sodio y obtengo un nuevo espectro. El metóxido de sodio es una base fuerte y
arranca todos los protones de los hidroxilos libres causando un desplazamiento batocrómico (a
longitudes de onda mayores) en ambas bandas. Este es mayor en la medida que aumenta la
conjugación a través del sistema enona.
2do corriemiento
MeOH + AlCl3
MeOH + AlCl3 + HCl
Se obtiene primero el espectro en metanol, luego en metanol con tricloruro de aluminio, y
finalmente en metanol con tricloruro de aluminio con ác. clorhídrico. El corrimiento se basa en la
formación de quelatos entre el AlCl3 y dos grupos hidroxilos en posición orto, así como con el
carbonilo en C4 y un hidroxilo libre en C5 o en C3. El quelato con los hidroxilos en orto en el anillo
B no es estable en medio ácido.
Si los espectros realizados en MeOH + AlCl3 y en MeOH + AlCl3 + HCl coinciden, no tenemos
hidroxilos en el anillo B.
Si el espectro de MeOH no cambia con el agregado de MeOH + AlCl3 + HCl, no hay hidroxilos en
3 ni en 5. Si el espectro cambia mostrando un efecto batocrómico, efectivamente tenemos un
hidroxilo libre en 3 y/o en 5.
3er corrimiento
MeOH + AcONa
MeOH + AcONa + H3 BO3
El acetato de sodio es una base débil. Se usa para detectar específicamente el hidroxilo en 7,
observándose un efecto batocrómico importante en la banda II. Además también puede
desprotonarse el protón en 3 y en 4’, dando los corrimientos batocrómicos correspondientes en la
banda I.
Al agregar H3 BO3 a la cubeta, se puede observar un efecto batocrómico de la banda I si el anillo B
contiene β dihidróxidos. Esto se debe a que el ácido bórico en presencia de acetato de sodio forma
un complejo con β dihidróxidos, es decir forma diesteres con hidroxilos en orto, en gral con
dihiróxidos del anillo B. Además el ác. bórico puede protonar al OH en 7 y restablecer la banda II
Podemos resumir el uso de reactivos de desplazamiento en la siguiente tabla:

Variación en la absorción UV-VIS de los flavonoides (nm)

Esqueleto MeOH NaOH NaOAc AlCl3
Flavonas 315-350 40-60 --- 25-40
Flavonoles 350-385 40-60 --- 40-60
Flavanonas 275-295 30-40 30-40 20-30
Isoflavonas 250-270 10-15 5-15 10-20
Chalconas 370-395 40-60 --- 50-65
Auronas 385-415 40-60 --- 50-65
Antocianinas 475-545 Inest. Inest. 15-50

Analicemos cada grupo ahora por separado.

1) Chalconas y Auronas
Las chalconas se encuentran solamente en algunas familias botánicas. Estructuralmente son
isómeros de las flavanonas por apertura del núcleo central o piranósico. Cabe mencionar el
glucósido de la floretina :
florizina, ampliamente distribuído en la corteza de los
OH
frutos de varias Rosáceas. Produce la “diabetes de la
HO OH floretina” que se caracteriza por un aumento de la
glucosuria, es decir la excresión urinaria de glucosa,
causada por interferencia en la reabsorción de la glucosa
OR O por los túbulos renales.
2) Flavonas y Flavonoles
Ambos son los flavonoides naturales más abundantes. Se han aislado tanto libres como glicósidos.
Los compuestos más frecuentes son la apigenina, la quercitina (de mayor abundancia) y el kanferol.
OH OH

R1O O HO O
R2 R2

OR1
OH O
OH O

R1 R2 R1 R2
H H apigenina H OH quercitina
H OH luteolina OH rutina
apiosil-glu H apiína H H kanferol

3) Antocianinas
Constituyen los pigmentos principales de las flores y de las hojas de otoño, sus colores van desde el
rojo hasta el azul. Son glicósidos de polihidroxiflavilio, en los cuales la unión glicosídica está
principalmente en C3. Veamos algunos ejemplos :

aglicona R R1 R2 R3 R4 R5 R5
apigenidina H OH OH OH H H R3
peonidina OH OH OH OH OMe H
rosinidina OH OH OMe OH OMe H R2 O
R4
cianidina OH OH OH OH OH H
malvidina OH OH OH OH OMe OMe R
hirsutidina OH OH OMe OH OMe Ome R1

Las antocianinas de las flores se han señalado como mercadores genéticos y por ello son utilizados
en la manipulación genética para obtener nuevas variedades de petunias, rododendros, camelias,
etc... Se ha encontrado que la deficiencia de fósforo en el suelo, la baja temperatura (de 0º a 5º) y la
exposición a ozono, aumentan el contenido de antocianinas.
Debido a las resticciones sanitarias hacia el uso de colorantes sintéticos, las antocianinas presentan
interés comercial pra la industris alimentaria. Las antocianinas presentan isomerización por cambios
de pH, variando su color y estructura del anillo central.
OH

HO OH
O

OR

OR
chalcona (amarillo)

OH OR
OH

OH
HO O HO O

OR OR

OR OR
sal de flavilio (rojo) cromenol (pseudobase) (incoloro)

O
OH

O O HO O

OR OR

OR
OR
anhidrobases (azules)

Los pigmentos vegetales se pueden clasificar en cuatro grandes grupos, dos liposolubles : clorofilas
y carotenoides, y dos hidrosolubles : las betalaínas y los flavonoides, los cuales se encuentran
principalmente en flores y frutos. La coloración de las antocianinas varía con el cambio de pH, de
rojo en medio ácido, pasando por amarillo, a violeta y azul en medio alcalino.
Se ha propuesto que el mecanismo de agrupación procede :
1. Mediante puentes de hidrógeno.
Esto no es tan importante, ya que las antocianinas completamente metiladas producen las mismas
coloraciones que las no metiladas.
2. Mediante interacción entre anillos bencénicos.
La interacción puede deberse al fenómeno de copigmentación intermolecular, es decir involucra un
mezcla de flavonoides. Estos complejos se estabilizan por la presencia de metales bivalentes, así
como por la sustitución con el ác. cumárico y por la glicosidación, lo que estabiliza el pigmento
frente a la acción enzimática y a la luz. Puede haber copigmentación intramolecular, en cuyo caso la
unión tiene lugar entre dos unidades de éster del tipo cinamoílo, que se presentan como
sustituyentes de la porción del azúcar. En este caso la adición de metales bivalentes no incrementa
la estabilidad del color. La copigmentación intramolecular produce un desplazamiento batocrómico.

4) Flavanonas y Flavanonoles
La saturación del anillo heterocíclico crea en la molécula al menos dos centros quirales C2 y C3 y
un tercero : C4 en el caso de los flavanodioles. Las flavanonas de origen natural presentan casi
siempre la configuración 2S, que dispone el anillo B ecuatorial. Pueden presentarse como O- y C-
glicósidos (hesperidina y aervanona), también pueden tener O- y C-metilaciones o alquilaciones
superiores (prenilaciones). Las agliconas más representativas son hesperetina y naringenina.
 OH OMe HO O O
RO O Me O O
RO O
OH OH
2s
HO OH HO
R=H: naringenina R=H: hesperetina Rutinósilo
OH O OH
R=rutinósilo:
OH O Narirutina R=rutinósilo:hesperidina (6-[β-L-rham]-D-glu)

Los flavanonoles, llamados también 3-hidroxiflavanonas o dihidroflavonoles, presentan dos

carbonos asimétricos : 2 y 3. La mayoría tiene configuración 2R :3R. Los compuestos incluyen
polioxigenaciones en los anillos A y B, glicosidación, prenilación, y también algunas estructuras
cíclicas como en el caso del flavolignano silycristina (de Silybum marianum, Compuesta).

OH
OH
O O
OMe
HO O H HO O
CH2OH
silvlycristina sophoronol OMe
OH OH
OH O OH O OH
R1 R2 Sustancia
HO O
H H Taxifolina OH
Me H Hultenina
Glu H Glucodistylina R2 OR1
H Me Cederodarina OH O

Algunas flavanonas y flavanonoles inhiben el crecimiento larval de Heliothis zea, una plaga del
maíz, entre ellos el eriodictiol, la taxifolina (dihidroquercetina) y su 3-0-ramnósido.
5) Flavanoles
El esqueleto del flavano puede estar mono- o dihidroxilado formando los flavan-3,4-dioles, flavan-
4-oles y flavan-3-oles, o catequinas.

OH
R
R C-2 C-3 C-4
H R S R Mollisacacidina HO O
OH
H S R S Leucofisetidina
OH R R R Melacacidina OH
OH R R S isomelacacidina OH

Los flavan-3,4-dioles pueden ser facilmente convertidos en antocianinas por tratamiento con ácido
mineral, lo que provoca la deshidratación seguida de oxidación, por el oxígeno del aire, originando
la sal de flavilio. Por esta razón se conocen estos flavonoides como leucoantonianidinas.
Las catequinas o flavan-3-oles son las unidades monoméricas de los flavonoides condensados :
taninos.
ISOFLAVONOIDES

Están distribuidos en pocas familias, principalmente en las Leguminosas. Estructuralmente se los

puede dividir en varias clases, correspondientes éstas a los flavonoides respectivos : isoflavonas,
isoflavonoles, etc... Para su análisis también son de capital importancia la espectrofotometría UV y
la RMN.
1) Isoflavonas
Dentro de los isoflavonoides son las más abundantes. La O-glicosidación es más frecuente que la C-
glicosidación. Las cuatro agliconas más comunes son:
R1 O

X
RR1 O R2 XR
2

R
H OH OH H Daizdeína
H OH OMe H Formononetina
OH OH OH H Genisteína
OH OH OMe H Biochanina-A
OH OH OH Me2 C=CH-CH2 wighteona

Las alquilaciones pueden presentarse sobre C2, tal es el caso de la 7-hidroxi-2-metilisoflavona que
se encuentra en la raíz de regaliz (Glycyrrhiza glabra).

2) Isoflavanonas
Son mucho más escasas que las anteriores y contienen generalmente una o más unidades de prenilo.
Como ejemplo podemos mencionar al lespedeol presente en Neurautanenia amboensis, que está
presente en el vegetal junto al 4-isoflavanol correspondiente ambanol.

O O
OH

OH O
OH
3) Rotenoides
Son una clase de isoflavonoides que contienen un anillo heterocíclico adicional en su estructura. Se
encuentran preferencialmente en las Leguminosas. 7
6
8
9 O 5
O
A C B
10 4
11 12
A
O 1 3
2

Como ya mencionamos, Derris ellíptica (Leguminosa) rica en rotenona, es utilizada como veneno
temporal en las aguas de ríos del amazonas para facilitar la pesca.

5'
O
H E H
o o O O
o O
D C B

H A
O O
OM e O
OM e
OMe

Rotenona (rotenoide) Rotenonona (deshidrorotenoide)

Derris negrensis, D. elliptica Neorautanenia amboensis
 EJEMPLOS DE PLANTAS

Ginkgo biloba
Con excepción de Ginkgo biloba L, las plantas del orden Ginkgoaceae solo se encuentran al estado
de fósiles, originarios del terciario. El árbol, de más de 30 metros de altura, produce madera
utilizable y semillas comestibles que contienen aceite. Se cultiva en Corea, sureste de Francia y
USA para abastecer el mercado farmacéutico de hojas.
Se ha demostrado que los principios activos amargos (ginkgólidos) son potentes antagonistas
específicos del PAF (Factor Activador de Plaquetas), así como vasodilatadores arteriales y
vasoconstrictores venosos, es decir con posible acción terapéutica en la inflamación alérgica o
hiperactividad bronquial. El extracto también mejora la irrigación de los tejidos, activa el
metabolismo celular, en particular en la corteza cerebral, incrementando la absorción de glucosa y
de oxigeno.
Las hojas de Ginkgo biloba contienen aprox un 0.5%-1% de flavonoides totales, comprendiendo
una mezcla de aprox 20 compuestos. Entre ellos quercetina, kaempferol, isorhamnetina, sus
glicósidos, biflavonoides (bilobetin, ginkgetina, isoginkgetina, etc...), y 0.01%-0.04% gingkgólidos
A, B, C (diterpenos), ác. ginkgólico, ác. shikímico, ác. vaníllico, ác. chlorogénico, catequinas,
sesquiterpenos (bilobalida), etc...

OCH3
OCH3
HO O
HO
HO O
(CH2)7 CH=CH (CH2)5 CH3
OH O

ginkgol OH O

bilobetin
Usos: El extracto de las hojas de Ginkgo biloba que contiene por valoración un 24% de flavonoides
y un 6% de ginkgolidos, es indicado para el tratamiento de oclusiones arteriales, para la enfermedad
de Raynaud, así como en la insuficiencia señil cerebral y pérdida auditiva por origen isquémico.
Otras formulaciones y combinacines, p.ej. con heptaminol y trihidroxyethylrutina, son indicadas
para tratar síntomas relacionados con insuficiencia venosa y linfática.

Passiflora incarnata
La planta de Passiflora incarnata L. (flor de la pasión o passiflora), Passifloraceae, crece en forma
de arbustos en el sur de USA y en México. La droga incluye partes aereas secas conteniendo
pedazos de troncos, zarcillos, hojas y flores. La hoja tiene un pecíolo largo y es trilobulada, siendo
el lóbulo medio el más desarrollado. La droga puede verse adulterada con troncos y hojas de P.
edulis Sim., cuya fruta es comestible (la fruta de la pasión), y cuya hoja es dentada. Otro adulterante
lo presenta P. caerules L., cuyas hojas son pentalobuladas y que se cultiva por sus flores azules
ornamentales.
La droga contiene ác. Fenólicos, coumarinas, fitosteroles, 0.1% de aceite esencial, glicósidos
cianogenéticos, 0.05% maltol, menos de 0.03% de alcaloides indólicos y varios flavonoides. Los
compuestos mayoritarios son flavon-di-C-glicósidos, shaftósido e inoshaftósido, y 2’’glicósidos de
isovitexina e iso-orientina.

R4 R1 R2 R3 R4
R3
OH Vitexin H H glc H
R2 O O Isovitexin glc H H H
Orientin H H glc OH
R1 Iso-orientin glc H H OH
OH O Shaftoside glc H ara H
Isoshaftoside ara H glc H

El estudio del contenido de glicósidos flavónicos totales del extracto metanólico por TLC permite
identificar las especies oficiales y rechazar las no oficiales. La farmacopea francesa (10ª edición)
exige un contenido mayor o igual al 1.5% de flavonoides totales, expresados como vitexina,
midiendo la absorción luego de formar el complejo con AlCl3 .
Usos: en preparaciones galénicas y en fitofarmacéuticos para controlar anormalidades del ritmo
cardíaco, así como sedante.

Citroflavonoids
Citrus (Rosaceae) son árboles de origen oriental, de los que se cultivan muchas especies para
consumir los frutos, y tambien para obtener los aceites esenciales, así como fuentes de pectinas y
flanonoides. Estos abundan en el pericarpio principalmente como glicósidos (hesperidina o
hesperetin-7-O-rutinósido, neohesperidina, naringenina, eriodyctina, eriocitrina) y flavone
glycosidos (diosmina, rutina).

OMe

RO O
OH
Hesperetina
7-Rutinosil: Hesperidina
OH O

Usos: se utilizan puros (diosmina), en extractos o en combinaciones (con p.ej. ác. Ascórbico, rutina,
papaverina, etc...) en preparaciones farmacéuticas para tratar insuficiencia venosa crónica y
funcional, y para tratar dolores de piernas y calambres. La administracions de una dosis de (1 g/día)
por un período de tiempo mediano (8 semanas) hace disminuir e incluso desaparecer los síntomas.
La eficacia del tratamiento es significativamente mayor a la del placebo, pero en éste tipo de
patologías el 50% de los pacientes siente alivio solamente con el placebo...y por adoptar normas
higiénicas generales.